CN109769859A - 金龟子绿僵菌ippmhbhc-7复合菌剂及其应用 - Google Patents

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王广君
李贝贝
农向群
涂雄兵
张泽华
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Abstract

本发明属于生物技术领域,具体涉及一种绿僵菌IPPMHBHC‑7复合菌剂及其应用。金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)IPPMHBHC‑7,保藏编号为CGMCC No.15999,其对于亚洲小车蝗、毛足棒角蝗具有良好的半数致死时间和僵虫率。本发明将金龟子绿僵菌IPPMHBHC‑7与氯虫苯甲酰胺联合施用,能够显著提高杀虫的速效性和杀虫率。

Description

金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7复合菌剂及其应用
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7复合菌剂和应用。
背景技术
蝗虫为直翅目蝗科灾害性昆虫,蝗灾频繁的在我国发生,给我国农业造成了巨大的伤害。目前,我国控制草原蝗虫危害的手段主要是采用化学防治法,其具有快速、高效、使用灵活等优点,但是,随着人们越来越重视环境经济的可持续发展,生物治蝗方法被研发出来并运用到实际工作中去。生物灭蝗法,特别是绿僵菌、白僵菌等,具有一定的专一性,对人畜无害,同时还具有不污染环境、无残留、害虫不会产生抗药性等优点。
虽然杀虫真菌防治蝗虫具有一定的防治效果,但是真菌击倒、杀死害虫作用缓慢,需要经过一段时间才能起作用,适合一般发生年份防治应用,而在蝗虫大发生年份,或局部地区严重发生时,杀虫真菌不能短时间内快速降低虫口密度。因此,如何利用杀虫真菌在短时间内控制蝗虫的数量是农业上亟待解决的问题。
菌株与农药复配是一条提高蝗虫防治效果的可探索途径,但是目前菌株与农药的复配效果不稳定,复配不当反而未能提高甚至降低蝗虫防治效果。
发明内容
为了获得有效的菌株与农药复配配方,本发明提供一种金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7复合菌剂及其应用。
本发明的再一目的是提供包含金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7的复合菌剂。
本发明的再一目的在于提供金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7复合菌剂的应用。
本发明的再一目的在于提供使用金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7复合菌剂进行防治蝗虫的方法。
根据本发明具体实施方式的金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)IPPMHBHC-7,其保藏编号为CGMCC No.15999,该菌株于2018年8月2日保存于中国普通微生物菌种保藏中心,保藏中心地址:北京市朝阳区北辰西路1号院中国科学院微生物研究所。
根据本发明具体实施方式的金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7的复合菌剂,其包含上述金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7和氯虫苯甲酰胺。
根据本发明具体实施方式的金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7的复合菌剂,氯虫苯甲酰胺和金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7的质量比为1:1000~2000。
根据本发明具体实施方式的金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7的复合菌剂,氯虫苯甲酰胺的浓度为0.004~0.1ppm,金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7的质量浓度为0.0064~0.16%。配制菌剂时,氯虫苯甲酰胺用丙酮稀释成规定浓度,绿僵菌IPPMHBHC-7孢子粉与麦麸按照质量比混合配制成规定浓度。
本发明的金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7对毛足棒角蝗致死时间分别为3.59d,僵虫率为96.67%,对亚洲小车蝗的半致死时间为3.55d,僵虫率为93.33%,因此,本发明的绿僵菌IPPMHBHC-7具有较好的应用前景。
本发明将金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7与氯虫苯甲酰胺联用能够大大提杀灭蝗虫的速效性和杀虫率,不但解决了真菌杀虫剂致死缓慢的问题,而且很大程度上减少污染,缓解害虫对化学农药产生抗药性问题。
附图说明
图1显示9种绿僵菌对毛足棒角蝗15d的校正累计死亡率曲线;
图2显示9种绿僵菌对亚洲小车蝗15d的校正累计死亡率曲线;
图3显示经处理后亚洲小车蝗的累计死亡率,A:只施用氯虫苯甲酰胺;D:只施用绿僵菌IPPMHBHC-7;E:混合氯虫苯甲酰胺和绿僵菌IPPMHBHC-7。
金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)IPPMHBHC-7,其保藏编号CGMCCNo.15999,该菌株于2018年8月2日保存于中国普通微生物菌种保藏中心,保藏中心地址:北京市朝阳区北辰西路1号院中国科学院微生物研究所。
具体实施方式
本发明试虫的来源:
①毛足棒角蝗(Dasyhippus barbipes Fischer-Waldheim):2~3龄蝗蝻,扫网法采集于内蒙古锡林郭勒盟白云库伦蝗区。
②亚洲小车蝗(Oedaleus decorus asiaticus B.Bienko):2~3龄蝗蝻,扫网法采集于内蒙古锡林郭勒盟西乌旗巴彦高勒北7公里处蝗区。
采集的蝗虫饲养于试验站内专门用于养蝗虫的大框中,每天饲喂适量的新鲜羊草叶片。为保证试验效果,试验前一天饥饿处理。
实施例1金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7对毛足棒角蝗蝻致病力的生物测定
金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7分离自土壤,其保藏编号为CGMCC No.15999。
采用胃毒法测定9种绿僵菌菌株对蝗虫的毒力效果。
首先秤取0.2g绿僵菌孢子粉加入2.0g麦麸中,再加入0.1ml食用油,充分搅拌均匀。然后秤取0.2g配好的绿僵菌麦麸饵剂放入培养皿中,连同培养皿一起放入盖玻璃板的养虫筐,编号,再在养虫筐中放入20头大小一致的3龄毛足棒角蝗蝻。空白对照组麦麸饵剂中不加绿僵菌孢子粉。本发明选用9株绿僵菌孢子粉以及一个对照CK,每种孢子粉设置3次重复,即共33个处理,于养虫室内饲养。第二天将饵剂取出,之后每天饲喂适量的新鲜羊草,并调查每筐蝗蝻的死亡情况,分别做好记录。
将死亡的蝗蝻拣出分别放入对应编号的垫有滤纸的培养皿中,保持一定湿度,使之长出僵虫。待试验蝗蝻全部死亡后调查每种菌处理后的蝗蝻的僵虫率,结合处理后15日内每日的累积死亡率和半致死时间(LT50)挑选出对蝗虫致死作用较好的菌种。
9株绿僵菌菌株对3龄毛足棒角蝗蝻致病力的生物测定结果见图l、表1。
表1 9株绿僵菌对毛足棒角蝗致病力的比较
由表1分析可知,上述9种供试菌株对蝗蝻均有致病性,半致死时间在3.59d~8.83d之间,僵虫率在43.33%~96.67%之间。其中绿僵菌菌株IPPMHBHC-7的半致死时间分别为3.59d,僵虫率为96.67%,而803、200614、2010-10等菌株半致死时间稍长、僵虫率较低。因此,与803、200614等菌株相比,绿僵菌菌株IPPMHBHC-7存在显著差异,其对毛足棒角蝗有较高的致病力。
实施例2.金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7对亚洲小车蝗致病力的生物测定
测定9株菌株对亚洲小车蝗的治病力,测定方法同实施例1的方法。
9株绿僵菌菌株对亚洲小车蝗致病力的生物测定结果见图2、表2。
表2 9株绿僵菌对亚洲小车蝗致病力的比较
由表2分析可知,供试菌株对蝗蝻均有致病性,半致死时间在4.05d~10.67d之间,僵虫率在38.33%~85.00%之间。其中绿僵菌菌株IPPMHBHC-7的半致死时间为4.05d,僵虫率为85%。与菌株200614等相比,绿僵菌菌株IPPMHBHC-7具有显著差异,表明其对亚洲小车蝗有较高的致病力。
实施例3测定金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7与化学农药复配对亚洲小车蝗致病力
试验设3个处理,每处理包含3龄蝗蝻3组,每组3个重复。第1个处理用低质量浓度的95.5%氯虫苯甲酰胺(0.004、0.02、0.1ppm),第2个处理用绿僵菌IPPMHBHC-7处理(0.0064%、0.032%、0.16%),第3个处理用低浓度95.5%氯虫苯甲酰胺和绿僵菌IPPMHBHC-7的混合液(0.004ppm+0.0064%、0.02ppm+0.032%、0.1ppm+0.16%)。
处理方法:第一处理组将95.5%氯虫苯甲酰胺用丙酮稀释,得到0.004、0.02、0.1ppm;第二处理组将绿僵菌IPPMHBHC-7孢子粉用麦麸稀释,得到0.0064%、0.032%、0.16%三个浓度;第三处理组将第一处理处理组与第二处理组复配,得到。
试验采用胃毒法。取配好的饵剂0.2g放入培养皿,连同培养皿一起分别放入每个养虫筐中,编号。每个处理放15头供试3龄蝗蝻,置于一个养虫筐内,每天饲喂新鲜的羊草。每处理重复3次。每日观察1次,并做观察记录。
单独施用氯虫苯甲酰胺、绿僵菌IPPMHBHC-7及菌药混合施用时亚洲小车蝗的累计死亡率如图3、表3所示。
表3绿僵菌菌剂对亚洲小车蝗致病力的比较
结果如表3、图3所示,绿僵菌IPPMHBHC-7与氯虫苯甲酰胺混合使用后,在速效性和杀虫率方面都有较大提高,不但在一定程度上降低绿僵菌的孢子萌发率,而且大大降低了害虫的免疫力,使之更容易被绿僵菌寄生。因此,绿僵菌IPPMHBHC-7与氯虫苯甲酰胺混合施用可以结合双方的优点,一方面可以解决真菌杀虫剂致死缓慢问题,另一方面还可以很大程度上减少污染,缓解害虫对化学农药产生抗药性问题,从而起到协同增效的目的。
将本发明的绿僵菌IPPMHBHC-7与除氯虫苯甲酰胺外的其它化学农药复配后,蝗虫防治效果不并显著,甚至出现不升反降的情况。。

Claims (4)

1.金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7复合菌剂,其特征在于,所述复合菌剂包含氯虫苯甲酰胺和金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7,所述金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7的保藏编号为CGMCCNo.15999。
2.根据权利要求1所述的金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7复合菌剂,其特征在于,所述复合菌剂中氯虫苯甲酰胺和金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7的质量比为1:1000~2000。
3.权利要求1所述的金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7复合菌剂在防治蝗虫方面的应用。
4.一种防治蝗虫的方法,其特征在于,所述方法包含使用权利要求1所述的金龟子绿僵菌IPPMHBHC-7复合菌剂防治蝗虫的步骤。
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