CN102038004A - 一种杀灭线虫的复合微生物活菌制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种杀灭土壤线虫的复合微生物活菌制剂。它是将枯草芽孢杆菌与地衣芽孢杆菌按照常规方法分别进行培养，然后按照菌数比为4∶1～3∶2的比例将分别培养后的枯草芽孢杆菌与地衣芽孢杆菌进行混合而成。本发明的两种菌协同作用，不仅杀虫，而且能够促进、修复土壤的生态系统的平衡。本发明通过实验证明其对多种植物的寄生线虫有良好的杀灭效果，对白菜线虫的杀灭效果接近100％。说明其对线虫具有很强的杀灭活性，有很广的杀线虫谱，有很好的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种复合微生物活菌制剂，具体是一种杀灭线虫的复合微生物活菌制剂，属于微生物农药技术领域。
背景技术
线虫，亦称圆虫(roundworm)，系动物界中数量最丰者之一，寄生於动、植物，或自由生活於土壤、淡水和海水环境中，甚至在醋和啤酒这样稀罕的地方亦可见到。目前已知为害蔬菜的线虫主要有高弓根结线虫、花生根结线虫、北方根结线虫及南方根结线虫。线虫寄主范围广泛，常为害瓜类、茄果类、豆类及萝卜、葫萝卜、莴苣、白菜等30多种蔬菜，还能传播一些真菌和细菌性病害。根结线虫主要为害各种蔬菜的根部，表现为侧根和须根较正常增多，并在幼根的须根上形成球形或圆锥形大小不等的白色根瘤，有的呈念珠状。被害株地上部生长矮小、缓慢、叶色异常，结果少，产量低，甚至造成植株提早死亡。
控制线虫的方法主要为：使用杀线虫剂(例如涤灭威)和熏剂(例如溴化甲烷)等，该化学杀虫剂易产生耐药性，且对环境造成严重危害。所以研究微生物制剂杀灭线虫势在必行。
发明内容
为了克服上述现有技术存在的缺点，本发明的目的在于提供一种高效、无污染的、用于杀灭线虫的复合微生物活菌制剂。
本发明的技术方案是：一种杀灭线虫的复合微生物活菌制剂，其特征是，它是将枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn)与地衣芽孢杆菌(Baclicus lincheniformisPWD-1)按照常规方法分别进行培养，然后按照菌数比为4∶1～3∶2的比例将分别培养后的枯草芽孢杆菌与地衣芽孢杆菌进行混合而成。
本发明的两种芽孢杆菌按照本领域的常规方法分别进行培养。本发明的复合微生物活菌制剂的两种芽孢杆菌可采用分级培养的方式。摇瓶培养的培养基可以选用可溶性淀粉培养基培养，培养基PH7.0-7.5，115-121高温灭菌20-30分钟，枯草芽孢杆菌30-40℃培养32-40小时，地衣芽孢杆菌28-35℃培养32-40小时；二级培养，20L，接种量均为5-10％；三级培养，200L，接种量均为5-10％。三级培养的菌液的活菌数10亿/ml以上。两种菌的培养液按照相应的比例混合，即得产品。复合微生物活菌制剂的总菌数10亿/ml以上。
复合微生物活菌制剂的杀灭线虫的机理：农作物施用复合微生物活菌制剂后，枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn)与地衣芽孢杆菌(Baclicus lincheniformisPWD-1)在土壤中迅速范围，形成大量有益均群，改善土壤的微生态环境，形成局部的缺氧环境，使线虫存活在缺氧环境中，抑制线虫的生长，直至杀灭线虫。更主要的是芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对线虫等病虫害及其他致病菌有强烈的杀灭作用，可以很好得杀灭线虫等病虫害。
本发明的复合微生物活菌制剂的使用方法：
①灌根：已受线虫危害的作物，可用300-400倍灌根，一棵灌一斤稀释液，间隔7-15天连用2-3次，可杀死线虫；
②冲施：轻度危害的可冲施，每亩每次5瓶，间隔7天连续两次，即可杀死线虫；
③对根腐病、枯萎病、蔓枯病、生理死颗等多种病害有预防作用，可稀释500-600倍喷施植株、灌根或冲施，每隔10-15天一次，连用2-3次，即可见效。
本发明的有益效果是：本发明的两种菌协同作用，不仅杀虫，而且能够促进、修复土壤的生态系统的平衡。
①本发明杀灭线虫的生物菌剂能够固化虫卵，破除线虫的细胞壁，使其幼虫期死亡，不能形成后代；
②线虫生长繁殖需要营养和氧气，它能够抑制卵粒周围氧气产生，使线虫死亡；
③输送活化土壤，增强肥力，提高肥料利用率，植株生长旺盛，提高抗菌、抗线虫的能力，减轻线虫危害和土传病害；
④它能有效预防根腐病、青枯病、黄萎病、茎基腐病和蔓枯病等。
以下结合实验数据来进一步说明其有益效果。
试验例：本发明的发明人采用试验方法来验证本发明的复合微生物活菌制剂的杀灭线虫的效果。见表1、表2。
表1不同浓度的活菌制剂对韭菜线虫的杀灭效果
| 活菌制剂浓度 | 24h死亡率％ | 24h虫体消解率％ |
| 原液 | 100 | 100 |
| 2倍稀释液 | 100 | 100 |
| 10倍稀释液 | 100 | 98.5 |
| 50倍稀释液 | 99.2 | 98.0 |
| 100倍稀释液 | 98.3 | 97.0 |
结果表明：本发明的复合微生物活菌制剂的原液及2倍、10倍、50、100倍稀释液均有良好的杀虫效果。
表2不同浓度的活菌制剂对不同植物寄生线虫的杀灭效果
结果表明：本发明的复合微生物活菌制剂对表中所列植物的寄生线虫有良好的杀灭效果，对白菜线虫的杀灭效果接近100％。说明其对线虫具有很强的杀灭活性，有很广的杀线虫谱，有很好的应用前景。
具体实施方式
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明的上述主题的范围仅限于以下的实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1
①将4℃保存的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn)与地衣芽孢杆菌(Baclicus lincheniformis PWD-1)两种菌种斜面活化，分别摇瓶培养。以可溶性淀粉培养基扩大培养，具体配方如下：可溶性淀粉20g，硝酸钾1g，氯化钠0.5g，磷酸二氢钾0.5g，硫酸镁0.5g，硫酸亚铁0.01g，蒸馏水1000ml，PH7.0，121℃高压灭菌30分钟，35℃培养35小时。
②二级液体扩大培养(20L)，以玉米面代替上述培养基中的可溶性淀粉，并加入0.1％的腐殖酸，接种量5％，35℃培养35小时。
③三级液体扩大培养(200L)，培养基同上，接种量10％，35℃培养35小时。检测：活菌数10亿/ml以上。
④按照7∶3的菌数比，混合枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn)与地衣芽孢杆菌(Baclicus lincheniformis PWD-1)培养液。检测：活菌数10亿/ml以上。
实施例2
①枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn)与地衣芽孢杆菌(Baclicuslincheniformis PWD-1)的培养同实施例1。
②按照6∶4的体积比，混合枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn)与地衣芽孢杆菌(Baclicus lincheniformis PWD-1)培养液。检测：活菌数10亿/ml以上。
实施例3
①枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn)与地衣芽孢杆菌(Baclicuslincheniformis PWD-1)的培养同实施例1。
②按照8∶2的菌数比，混合枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn)与地衣芽孢杆菌(Baclicus lincheniformis PWD-1)培养液。检测：活菌数10亿/ml以上。
实施例4
①枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn)与地衣芽孢杆菌(Baclicuslincheniformis PWD-1)的培养同实施例1。
②按照3∶1的菌数比，混合枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn)与地衣芽孢杆菌(Baclicus lincheniformis PWD-1)培养液。检测：活菌数10亿/ml以上。
Claims (1)
1.一种杀灭线虫的复合微生物活菌制剂，其特征是，它是将枯草芽孢杆菌与地衣芽孢杆菌按照常规方法分别进行培养，然后按照菌数比为4∶1～3∶2的比例。
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|---|---|
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