CN105061098A - 一种防控柑橘黄龙病的微生物肥料及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种防控柑橘黄龙病的微生物肥料及其制备方法。本发明所提供的微生物肥料包括以下组分：淡紫拟青霉、地衣芽胞杆菌、木霉菌和有机质；所述微生物肥料中，所述淡紫拟青霉的活菌含量不低于0.2亿/克，所述地衣芽孢杆菌的活菌含量不低于0.1亿/克，所述木霉菌的活菌含量不低于0.05亿/克。本发明中，淡紫拟青霉、地衣芽孢杆菌、木霉菌三种菌种共同作用，抑制或破坏线虫卵的发育过程，从而减少线虫成虫率，减少果园线虫基础发生量，切断黄龙病的传播媒介，达到防控柑橘黄龙病的作用。此外，本发明还提供了一种所述微生物肥料的制备方法。
Description
技术领域
本发明涉及柑橘黄龙病技术领域，具体而言，涉及一种防控柑橘黄龙病的微生物肥料及其制备方法。
背景技术
黄龙病又名黄梢病、黄枯病、青果病，是柑橘的重要病害，为国际、国内检疫对象。我国的17个柑橘产区中有11个产区收到黄龙病的胁迫，且作为柑橘主要产区的广东、广西、福建、云南、海南等地尤为严重。发病柑橘植株的典型症状是“黄梢”、叶片斑驳黄化、果实变小、形成无价值的“青果”或“红鼻子果”，发病后期根系坏死，树势衰退，导致落叶、落果、植株死亡等。当病害严重流行时，往往使大片橘园在几年内全部毁灭，对柑橘生产威胁极大。
黄龙病的病原是寄生于韧皮部的革兰氏阴性细菌，能够在树皮组织、叶、花、根和果实中检测到。革兰氏阴性细菌传播途径广，非常难以被杀死。果树一旦感染这一病菌，为了避免其他果树被感染，控制黄龙病的传播和蔓延，人们只能挖除或砍除病树，损失巨大。因此，在果树的日常管理中，做好柑橘黄龙病的防控工作成为重中之重。
目前，针对柑橘黄龙病的防控手段主要是有两方面：一是从根源上切断病菌的输入，主要是在苗木上把关，加强苗木繁育管理，及时排除病苗，选用无病苗木种植和接穗。二从切断病菌的传播媒介，主要采用化学、物理的方法防治木虱。可见，现有技术中对于柑橘黄龙病的传播媒介关注的比较少，主要还是在防治木虱上，而未见对其它传播媒介的防控手段。
有鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种防控柑橘黄龙病的微生物肥料。在所述微生物肥料中，淡紫拟青霉、地衣芽孢杆菌和木霉菌三种菌种共同作用，抑制或破坏线虫卵的发育过程，从而减少线虫成虫率，减少果园线虫基础发生量，切断黄龙病的传播媒介，达到防控柑橘黄龙病的作用。
本发明的第二目的在于提供一种所述的微生物肥料的制备方法，该方法步骤简单，确保微生物肥料的药效突出。
为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：
一种防控柑橘黄龙病的微生物肥料，包括以下组分：淡紫拟青霉、地衣芽胞杆菌、木霉菌和有机质；
所述微生物肥料中，所述淡紫拟青霉的活菌含量不低于0.2亿/克，所述地衣芽孢杆菌的活菌含量不低于0.1亿/克，所述木霉菌的活菌含量不低于0.05亿/克。
本发明中，淡紫拟青霉、地衣芽孢杆菌、木霉菌三种菌种共同作用，抑制或破坏线虫卵的发育过程，从而减少线虫成虫率，减少果园线虫基础发生量，切断黄龙病的传播媒介，达到防控柑橘黄龙病的作用。
配方中的有机质不但可以作为三种菌种的培养基质，同时还可为柑橘的生产提供有机养分。
配方中的淡紫拟青霉的活菌含量控制在不低于0.2亿/克，地衣芽孢杆菌的活菌含量不低于0.1亿/克，木霉菌的活菌含量不低于0.05亿/克，保证三种菌种能够发挥显著的协同作用，抑制线虫的生长繁殖。
优选地，所述微生物肥料中，淡紫拟青霉、地衣芽胞杆菌和木霉菌的活菌含量之比为(4～5)：(2～3)：1。通过控制三种菌种的含量在这一配比范围内，保证微生物菌肥的肥效显著，减少果园线虫基础发生量。
进一步优选地，所述微生物肥料中，所述淡紫拟青霉的活菌含量为0.2～0.5亿/克，所述地衣芽孢杆菌的活菌含量为0.1～0.3亿/克，所述木霉菌的活菌含量为0.05～0.1亿/克。
在本发明提供的微生物肥料中，有机质作为培养三种菌的基质，同时还提供有机养分。因此，有机质的组成影响着三种菌的繁殖。优选地，所述有机质的组成为发酵黄腐酸残渣干粉、糖蜜发酵液干粉、草炭中的一种或多种。进一步优选地，所述有机质的pH为6～8。通过控制有机质的组成和pH，保证微生物肥料中的淡紫拟青霉、地衣芽胞杆菌、木霉菌能够快速生长繁殖，其活菌含量能够达到有效标准。
优选地，其特征在于，所述微生物肥料中还包括无机养分，且所述无机养分的质量占所述微生物肥料质量的8％～12％。
优选地，所述无机养分包括尿素、硝酸铵磷、氯化钾、硫酸镁、硼肥、硫酸锌和硫酸铜中的一种或多种。
一种本发明提供的微生物肥料的制备方法，包括如下步骤：
(1)、将淡紫拟青霉、木霉菌混合于有机质中，在25～30℃下培养3～8小时；
(2)、加入地衣芽孢杆菌，调整温度，在35～40℃培养2～10小时，即得微生物肥料。
本发明提供的微生物肥料的制备方法中，先在25～30℃下培养淡紫拟青霉和木霉菌，待两种微生物快速生长繁殖后，此时升高温度为35～40℃，再培养地衣芽孢杆菌。通过分批次培养，使得每种微生物都能快速生长繁殖，保证微生物肥料中的活菌含量。
优选地，所述步骤(1)中，具体包括：
调整有机质的含水量为20％～30％，将淡紫拟青霉、木霉菌混合于有机质中，在25～30℃下培养3～8小时。
优选地，其特征在于，当所述微生物肥料中还包括无机养分时，则所述步骤(2)中具体包括如下步骤：
加入地衣芽孢杆菌，调整温度，在35～40℃培养2～10小时，；培养结束后，加入所述无机养分混合均匀，即得微生物肥料。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
(1)提供了一种防控柑橘黄龙病的微生物肥料，通过利用淡紫拟青霉、地衣芽孢杆菌、木霉菌三种菌种共同作用，抑制或破坏线虫卵的发育过程，从而减少线虫成虫率，减少果园线虫基础发生量，切断黄龙病的传播媒介，达到防控柑橘黄龙病的作用。
(2)通过控制微生物肥料中淡紫拟青霉、地衣芽胞杆菌和木霉菌的活菌含量之比在(4～5)：(2～3)：1这一范围内，保证微生物菌肥的肥效显著，减少果园线虫基础发生量。
(3)本发明提供了一种所述微生物肥料的制备方法。先将淡紫拟青霉、木霉菌混合于有机质中，在25～30℃下培养3～8小时；加入地衣芽孢杆菌，调整温度，在35～40℃培养2～10小时，即得微生物肥料。通过分批次培养，使得每种微生物都能快速生长繁殖，得到活菌含量符合要求的微生物肥料。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
实施例1
一种防控柑橘黄龙病的微生物肥料，包括如下组分：淡紫拟青霉，地衣芽孢杆菌、木霉菌和有机质，且在本实施例提供的微生物肥料中，淡紫拟青霉的活菌含量为1亿/克，地衣芽孢杆菌的活菌含量为1亿/克，木霉菌的活菌含量为1亿/克。
实施例2
一种防控柑橘黄龙病的微生物肥料，包括如下组分：淡紫拟青霉，地衣芽孢杆菌、木霉菌和有机质，且在本实施例提供的微生物肥料中，淡紫拟青霉的活菌含量为0.4亿/克，地衣芽孢杆菌的活菌含量为0.2亿/克，木霉菌的活菌含量为0.1亿/克，使得淡紫拟青霉、地衣芽孢杆菌和木霉菌的活菌含量之比为4：2：1。
实施例3
一种防控柑橘黄龙病的微生物肥料，包括如下组分：淡紫拟青霉，地衣芽孢杆菌、木霉菌和有机质，且在本实施例提供的微生物肥料中，淡紫拟青霉的活菌含量为0.5亿/克，地衣芽孢杆菌的活菌含量为0.3亿/克，木霉菌的活菌含量为0.1亿/克，并且，淡紫拟青霉、地衣芽孢杆菌和木霉菌的活菌含量之比为5：3：1。
实施例4
一种防控柑橘黄龙病的微生物肥料，包括如下组分：淡紫拟青霉，地衣芽孢杆菌、木霉菌和有机质，且在本实施例提供的微生物肥料中，淡紫拟青霉的活菌含量为2亿/克，地衣芽孢杆菌的活菌含量为1亿/克，木霉菌的活菌含量为0.5亿/克。
实施例5
一种防控柑橘黄龙病的微生物肥料，包括如下组分：淡紫拟青霉，地衣芽孢杆菌、木霉菌、由发酵黄腐酸残渣干粉和草炭组成的有机质、由尿素、硝酸铵磷、氯化钾、硫酸镁、硼肥、硫酸锌和硫酸铜组成的无机养分。
其中，在本实施例提供的微生物肥料中，淡紫拟青霉的活菌含量为0.5亿/克，地衣芽孢杆菌的活菌含量为0.3亿/克，木霉菌的活菌含量为0.1亿/克。并且，无机养分的总质量占微生物肥料总质量的8％。
实施例6
一种防控柑橘黄龙病的微生物肥料，包括如下组分：淡紫拟青霉，地衣芽孢杆菌、木霉菌、由发酵黄腐酸残渣干粉、糖蜜发酵液干粉和草炭组成的pH为6的有机质、由尿素、硝酸铵磷、氯化钾、硫酸镁、硼肥、硫酸锌和硫酸铜组成的无机养分。
其中，在本实施例提供的微生物肥料中，淡紫拟青霉的活菌含量不低于0.2亿/克，地衣芽孢杆菌的活菌含量不低于0.1亿/克，木霉菌的活菌含量不低于0.05亿/克。并且，无机养分的总质量占微生物肥料总质量的12％。
实施例7
本实施例提供了一种防控柑橘黄龙病的微生物肥料的制备方法，该方法可用以制备上述实施例所提供的微生物肥料，包括如下步骤：
步骤11：将淡紫拟青霉、木霉菌均按照5％的接种量接种于有机质中，在25℃下培养8小时；
步骤12：按照15％的接种量接种地衣芽孢杆菌，调整温度，在35℃培养2小时，即得微生物肥料。
实施例8
步骤21：调整有机质的含水量为20％，将淡紫拟青霉、木霉菌均按照10％的接种量接种于有机质中，在30℃下培养3小时；
步骤22：按照8％的接种量接种地衣芽孢杆菌，调整温度，在40℃培养10小时，即得微生物肥料。
实施例9
本实施例提供了一种微生物肥料的制备方法，包括如下步骤：
将有效活菌数均大于10亿/克的淡紫拟青霉菌剂100g、地衣芽孢杆菌菌剂100g和木霉菌菌剂100g溶于900g水中，制得混合菌液。然后将所制得的混合菌液与10kg有机质混合均匀，即得微生物肥料。
说明：在本发明所提供的实施例7～9的制备方法中，所用的淡紫拟青霉购于郑州基业生物工程有限公司，所用的地衣芽孢杆菌购于沧州市益宏动物保健品有限公司，所用的木霉菌购于山东泰诺药业有限责任公司。
对比例
为了证实本发明提供的微生物肥料的效果，设置了如下对比例：
对比例1：微生物肥料由淡紫拟青霉组成，其活菌含量不低于0.2亿/克。
对比例2：微生物肥料由淡紫拟青霉、地衣芽胞杆菌组成，其中，淡紫拟青霉的活菌含量不低于0.2亿/克，地衣芽孢杆菌的活菌含量不低于0.1亿/克。
对比例3：微生物肥料由淡紫拟青霉、地衣芽孢杆菌、木霉菌组成，其中淡紫拟青霉的活菌含量为0.1亿/克，地衣芽孢杆菌的活菌含量为0.05亿/克，木霉菌的活菌含量为0.05亿/克。
实验例
试验在广西省灵川县兰田瑶族乡高段村村民的柑橘园中进行，柑橘园中有近三分之一的果树感染了黄龙病。将病树砍掉后，选取20棵未感染黄龙病的果树，分成10组，每组两棵。标记后分别施用本发明实施例1～6以及对比例1～3所提供的微生物肥料。10天后，观察果树的树叶、果实情况。其情况如表1所示。
表1果树的情况记录
对比实施例和对比例的记录情况可知，本发明实施例提供的微生物肥料对柑橘黄龙病的控制效果均远远优于对比例。
三个对比例的检测结果之间存在一定的差异，其中，对比例2的结果最优。虽然与实施例1～6之间存在差距，但已明显优于对比例1和对比例3。通过对比三组对比例的微生物肥料组成可以看出，影响微生物肥料防控黄龙病效果的因素既包括微生物菌种的组成，也包括菌种的活菌含量。只有淡紫拟青霉、地衣芽孢杆菌和木霉菌三种菌种共同作用，并且其活菌含量需在所设定的范围内才能达到防控柑橘黄龙病的优异效果。
虽然实施例1～6的微生物肥料能够达到防控柑橘黄龙病的效果，但是不同实施例之间的防控效果还是存在一定的优劣差异。对比实施例2、3、4和实施例1的果树树叶和果实情况可以看出，实施例2、3、4的防控效果由于实施例1。可见，控制微生物肥料中淡紫拟青霉、地衣芽胞杆菌和木霉菌活菌含量的配比关系，可以进一步提高防控效果。
实施例5和实施例6所提供的微生物肥料防控柑橘黄龙病的效果最优，达到了全面防控的效果。与实施例1和实施例3对比可以看出，通过将有机质限定为发酵黄腐酸残渣干粉、糖蜜发酵液干粉、草炭中的一种或多种，限定其pH在6～8范围内，并添加8％～12％的无机养分，可以显著提高微生物肥料的防控效果。
施用本发明实施例1～6以及对比例1～3所提供的微生物肥料。10天后，还检测了果树根部土壤中线虫含量对比结果。其检测结果如表2所示。
表2施用前和施用后土壤中线虫含量对比结果
| 每千克干性土壤中的线虫数目 |
| 施用前 | 施用后 | 前后对比 | |
| 实施例1 | 2360 | 240 | 减少90％ |
| 实施例2 | 2320 | 160 | 减少93％ |
| 实施例3 | 2450 | 170 | 减少93％ |
| 实施例4 | 2400 | 150 | 减少94％ |
| 实施例5 | 2700 | 30 | 减少98％ |
| 实施例6 | 2570 | 30 | 减少98％ |
| 对比例1 | 2680 | 2140 | 减少20％ |
| 对比例2 | 2300 | 1150 | 减少50％ |
| 对比例3 | 2500 | 2000 | 减少20％ |
由表2的检测结果可以看出，果树根部土壤中线虫的前后对比情况与表1的结果相一致。
综上所述，本发明提供的防控柑橘黄龙病的微生物肥料，通过利用淡紫拟青霉、地衣芽孢杆菌、木霉菌三种菌种共同作用，抑制或破坏线虫卵的发育过程，从而减少线虫成虫率，减少果园线虫基础发生量，切断黄龙病的传播媒介，达到防控柑橘黄龙病的作用。
尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。
Claims (10)
1.一种防控柑橘黄龙病的微生物肥料，其特征在于，包括以下组分：淡紫拟青霉、地衣芽胞杆菌、木霉菌和有机质；
所述微生物肥料中，所述淡紫拟青霉的活菌含量不低于0.2亿/克，所述地衣芽孢杆菌的活菌含量不低于0.1亿/克，所述木霉菌的活菌含量不低于0.05亿/克。
2.根据权利要求1所述的微生物肥料，其特征在于，所述微生物肥料中，淡紫拟青霉、地衣芽胞杆菌和木霉菌的活菌含量之比为(4～5)：(2～3)：1。
3.根据权利要求1所述的微生物肥料，其特征在于，所述微生物肥料中，所述淡紫拟青霉的活菌含量为0.2～0.5亿/克，所述地衣芽孢杆菌的活菌含量为0.1～0.3亿/克，所述木霉菌的活菌含量为0.05～0.1亿/克。
4.根据权利要求3所述的微生物肥料，其特征在于，所述微生物肥料中，所述有机质包括发酵黄腐酸残渣干粉、糖蜜发酵液干粉、草炭中的一种或多种。
5.根据权利要求1～4任一项所述的微生物肥料，其特征在于，所述有机质的pH为6～8。
6.根据权利要求1～4任一项所述的微生物肥料，其特征在于，所述微生物肥料中还包括无机养分，且所述无机养分的质量占所述微生物肥料质量的8％～12％。
7.根据权利要求6所述的微生物肥料，其特征在于，所述无机养分包括尿素、硝酸铵磷、氯化钾、硫酸镁、硼肥、硫酸锌和硫酸铜中的一种或多种。
8.一种权利要求1～7任一项所述微生物肥料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)、将淡紫拟青霉、木霉菌混合于有机质中，在25～30℃下培养3～8小时；
(2)、加入地衣芽孢杆菌，调整温度，在35～40℃培养2～10小时，即得微生物肥料。
9.根据权利要求8所述的微生物肥料的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，具体包括：
调整有机质的含水量为20％～30％，将淡紫拟青霉、木霉菌混合于有机质中，在25～30℃下培养3～8小时。
10.根据权利要求8所述的微生物肥料的制备方法，其特征在于，当所述微生物肥料中还包括无机养分时，则所述步骤(2)中具体包括如下步骤：
加入地衣芽孢杆菌，调整温度，在35～40℃培养2～10小时，；培养结束后，加入所述无机养分混合均匀，即得微生物肥料。
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