CN109769750B - 增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育方法，包括以下步骤：步骤一、选取M只公鸡作为父本，nM只母鸡作为母本，建立M个家系，其中，n为4～10，且n为整数；步骤二、采用人工受精的方法对建立的家系进行下一个世代的选育，统计各家系的黑色素蓄积量，并由多至少为各家系进行排序；步骤三、取黑色素蓄积量排名在设定范围内的家系成员，从中选取公鸡和母鸡，并建立M个家系；步骤四、重复步骤二、步骤三，直至同一世代乌鸡的黑色素蓄积量高于设定阈值；其中，每个家系包括1只公鸡和n只母鸡，每个家系中的父本和母本无血亲关系。本发明通过选育有效提高了乌鸡的黑色素蓄积量。
Description
技术领域
本发明涉及养殖技术领域。更具体地说，本发明涉及一种增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育方法。
背景技术
凌云乌鸡因原产于广西凌云县而得名，其喙、冠、胫趾、皮、肉及内脏均为乌黑，当地群众俗称为“五乌鸡”。该品种具有耐粗饲、觅食能力和羽毛漂亮、肉质细嫩、味美香浓、食用药用价值高等特点，是餐桌上的佳肴和滋补佳品。乌骨鸡是我国重要的特色药食资源，与非乌骨鸡相比，最显著的特点是其体内富含黑色素，黑色素是乌骨鸡发挥其药用功效的重要物质基础。长期以来，人们把乌骨鸡作为传统的中药和滋补的佳品，现代研究发现，乌骨鸡黑色素具有抗疲劳、抗氧化、抗诱变、防辐射、延缓衰老、提高机体免疫力、排铅解毒、消除自由基等功能，黑色素是机体内重要的活性成分，是活性功能的物质基础，黑色素决定了乌骨鸡的药用价值。乌鸡黑色素沉积，在遗传方面除了一些主效基因能够决定鸡是否是乌鸡这个质量性状外，还有许多微效基因调控乌鸡颜色的深浅度，而如何通过遗传育种手段有效提高乌鸡体内黑色素蓄积量的方法鲜有报道。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育方法，其通过选育有效增强了凌云乌鸡黑色素的沉积。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一、选取M只公鸡作为父本，nM只母鸡作为母本，建立M个家系，其中，n为4～10，且n为整数；
步骤二、采用人工受精的方法对建立的家系进行下一个世代的选育，统计各家系的黑色素蓄积量，并由多至少为各家系进行排序；
步骤三、取黑色素蓄积量排名在设定范围内的家系成员，从中选取公鸡和母鸡，并建立M个家系；
步骤四、重复步骤二、步骤三，直至同一世代乌鸡的黑色素蓄积量高于设定阈值；
其中，每个家系包括1只公鸡和n只母鸡，每个家系中的父本和母本无血亲关系。
优选的是，公鸡和母鸡的选取条件为：皮肤黑色素含量遗传力为0.15～0.22，骨膜肌膜黑色素含量遗传力为0.12～0.19，肌间结缔组织黑色素含量遗传力为0.17～0.20，肌纤维组织黑色素含量遗传力为0.11～0.15。
优选的是，黑色蓄积量包括皮肤黑色素含量、肝脏黑色素含量、肾脏黑色素含量、鸡胸肉黑色素含量。
优选的是，步骤四中，重复步骤二、步骤三，直至同一世代乌鸡的皮肤黑色素含量、肝脏黑色素含量、肾脏黑色素含量和鸡胸肉黑色素含量分别不低于第一阈值、第二阈值、第三阈值、第四阈值。
优选的是，M为60。
优选的是，步骤二中，设定范围为前30％。
优选的是，下一世代的选育包括：收集各家系的种蛋，然后孵化，再培养至成鸡，其中，每只母鸡收集10枚种蛋进行孵化，黑色素蓄积量统计的乌鸡为成鸡。
优选的是，各家系黑色素蓄积量的统计方法为：在同一家系中，随机选取该家系中种蛋总个数10％的成鸡进行统计黑色素蓄积量，并计算每个家系黑色素蓄积量的平均值，即为该家系的黑色素蓄积量。
优选的是，在培养至成鸡时，饲料中添加饲料总质量0.15倍量的添加剂，添加剂包括以下重量份数的原料：赤芍3份、刺蒺藜提取物2.5份、预处理菟丝子3份、沙苑子2份、石榴籽粉10份、红薯叶提取物5份、小肽0.1份、以及米糠30份；
其中，刺蒺藜提取物的制备方法为：将刺蒺藜粉碎，得到粉碎料，向粉碎料中加入其总质量2倍量的质量分数为78％的乙醇溶液、10倍量的水、0.01倍量的食盐混合，置于40℃条件下超声波提取40min，过滤并浓缩，得到刺蒺藜粗提取物，将刺蒺藜粗提取滴加至其总质量10倍量的石油醚中，过滤，得到固体，向固体中加入其总质量0.5倍量的质量分数为78％的乙醇溶液、3倍量的水混合并溶解，采用大孔吸附树脂进行吸附富集，洗脱剂为体积比为1:4的水和质量分数为78％的乙醇溶液，浓缩，得到浓缩物，将浓缩物以冰醋酸为溶剂进行重结晶，得到刺蒺藜提取物；
预处理菟丝子的制备方法为：将菟丝子粉碎，并加入菟丝子总质量10倍量的乙酸乙酯，置于70℃条件下加热30min，过滤，除去乙酸乙酯，冷冻干燥，粉碎，过筛，即得到粉末状菟丝子；
红薯叶提取物的制备方法为：将红薯叶打浆，得到浆液，向浆液中加入其总质量1倍量的乙酸缓冲溶液、0.1倍量的白糖、0.1倍量的纤维素酶、以及0.5倍量的果胶酶混合并进行酶解，过滤，得到酶解液，向酶解液中加其总质量5倍量的莲藕粉，冷冻干燥，并粉碎，得到红薯叶提取物。
优选的是，石榴籽粉的制备方法为：将石榴籽在质量分数为1％的柠檬酸水溶液中浸泡，沥干，然后加入石榴籽总质量5倍量的水混合，在50℃条件研磨，得到浆液，向浆液中加入其总质量2％的纤维素酶水解2h，加热在100℃灭酶，再加入浆液总质量2倍量的明胶，干燥并粉碎，得到石榴籽粉。
本发明至少包括以下有益效果：
第一、本发明的选育方法在较短的时间提高了凌云乌鸡的黑色素含量，提高了凌云乌鸡的食用价值和药用价值，进而提高了凌云乌鸡的经济效益。
第二、本发明经过2个世代的选育，乌鸡皮肤、肝脏、肾脏、以及鸡胸肉处的黑色素含量明显增加。
第三、通过在饲料中添加添加剂，能够明显提高每个世代中乌鸡的黑色素蓄积量；刺蒺藜提取物的制备方法能够提高提取物中刺蒺藜皂苷、β-谷甾醇、蒺藜酰胺成份的含量，进而提高乌鸡体内黑色素的含量；添加石榴籽粉，石榴籽粉一方面能够促进乌鸡对刺蒺藜提取物的消化吸收，提高络氨酸酶的活性，进而乌鸡体内黑色素的沉积，另一方面石榴籽粉能够促进肠道的蠕动，进而促进乌鸡对饲料的消化吸收；红薯叶提取物与刺蒺藜提取物的联合作用能够促进乌鸡对微量元素的吸收，进而提高络氨酸酶的活性。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
<实施例1>
在广西凌云县瑞东农牧有限公司凌云乌鸡保护场开展增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育，增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育方法包括以下步骤：
步骤一、选取60只公鸡作为父本，240只母鸡作为母本，建立60个家系，公鸡和母鸡的选取条件为：皮肤黑色素含量遗传力为0.15～0.22范围内，骨膜肌膜黑色素含量遗传力为0.12～0.19范围内，肌间结缔组织黑色素含量遗传力为0.17～0.20范围内，肌纤维组织黑色素含量遗传力为0.11～0.15范围内，其中，公鸡和母鸡分开养殖；
步骤二、采用人工受精的方法对建立的60个家系进行下一个世代的选育，统计各家系的黑色素蓄积量，并由多至少为各家系进行排序，其中，下一世代的选育包括：收集各家系的种蛋，然后孵化，再培养至成鸡，每只母鸡收集10枚种蛋进行孵化，黑色素蓄积量统计的乌鸡为成鸡；
步骤三、取黑色素蓄积量排名在前18名的家系成员，并按照步骤一从前18名的家系成员中选取公鸡和母鸡，并建立60个家系(同一家系中的公鸡和所配的母鸡在3个世代内无血亲关系)，其中，公鸡和母鸡分开养殖；
步骤四、重复步骤二、步骤三，直至同一世代的乌鸡皮肤、肝脏、肾脏、鸡胸肉的黑色素含量不低于第一阈值、第二阈值、第三阈值、第四阈值，第一阈值、第二阈值、第三阈值、第四阈值根据企业的需求确定，如分别为0.305、0.203、0.191和0.188；
各家系黑色素蓄积量的统计方法为：在同一家系中，随机选取该家系中4只成鸡进行统计黑色素蓄积量，并计算每个家系黑色素蓄积量的平均值，即为该家系的黑色素蓄积量。
<实施例2>
在广西凌云县瑞东农牧有限公司凌云乌鸡保护场开展增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育，增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育方法包括以下步骤：
步骤一、选取60只公鸡作为父本，360只母鸡作为母本，建立60个家系，公鸡和母鸡的选取条件为：皮肤黑色素含量遗传力为0.15～0.22范围内，骨膜肌膜黑色含量量遗传力为0.12～0.19范围内，肌间结缔组织黑色素含量遗传力为0.17～0.20范围内，肌纤维组织黑色素含量遗传力为0.11～0.15范围内，其中，公鸡和母鸡分开养殖；
步骤二、采用人工受精的方法对建立的60个家系进行下一个世代的选育，统计各家系的黑色素蓄积量，并由多至少为各家系进行排序，其中，下一世代的选育包括：收集各家系的种蛋，然后孵化，再培养至成鸡，每只母鸡收集10枚种蛋进行孵化，黑色素蓄积量统计的乌鸡为成鸡；
步骤三、取黑色素蓄积量排名在前18名的家系成员，并按照步骤一从前18名的家系成员中选取公鸡和母鸡，并建立60个家系(同一家系中的公鸡和所配的母鸡在3个世代内无血亲关系)，其中，公鸡和母鸡分开养殖；
步骤四、重复步骤二、步骤三，直至同一世代的乌鸡皮肤、肝脏、肾脏、鸡胸肉的黑色素含量不低于第一阈值、第二阈值、第三阈值、第四阈值，第一阈值、第二阈值、第三阈值、第四阈值根据企业的需求确定，如分别为0.305、0.203、0.191和0.188；
各家系黑色素蓄积量的统计方法为：在同一家系中，随机选取该家系中6只成鸡进行统计黑色素蓄积量，并计算每个家系黑色素蓄积量的平均值，即为该家系的黑色素蓄积量。
<实施例3>
在广西凌云县瑞东农牧有限公司凌云乌鸡保护场开展增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育，增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育方法包括以下步骤：
步骤一、选取60只公鸡作为父本，600只母鸡作为母本，建立60个家系，公鸡和母鸡的选取条件为：皮肤黑色素含量遗传力为0.15～0.22范围内，骨膜肌膜黑色素含量遗传力为0.12～0.19范围内，肌间结缔组织黑色素含量遗传力为0.17～0.20范围内，肌纤维组织黑色素含量遗传力为0.11～0.15范围内，其中，公鸡和母鸡分开养殖；
步骤二、采用人工受精的方法对建立的60个家系进行下一个世代的选育，统计各家系的黑色素蓄积量，并由多至少为各家系进行排序，其中，下一世代的选育包括：收集各家系的种蛋，然后孵化，再培养至成鸡，每只母鸡收集10枚种蛋进行孵化，黑色素蓄积量统计的乌鸡为成鸡；
步骤三、取黑色素蓄积量排名在前18名的家系成员，并按照步骤一从前18名的家系成员中选取公鸡和母鸡，并建立60个家系(同一家系中的公鸡和所配的母鸡在3个世代内无血亲关系)，其中，公鸡和母鸡分开养殖；
步骤四、重复步骤二、步骤三，直至同一世代的乌鸡皮肤、肝脏、肾脏、鸡胸肉的黑色素含量不低于第一阈值、第二阈值、第三阈值、第四阈值，第一阈值、第二阈值、第三阈值、第四阈值根据企业的需求确定，如分别为0.305、0.203、0.191和0.188；
各家系黑色素蓄积量的统计方法为：在同一家系中，随机选取该家系中10只成鸡进行统计黑色素蓄积量，并计算每个家系黑色素蓄积量的平均值，即为该家系的黑色素蓄积量。
<实施例4>
在广西凌云县瑞东农牧有限公司凌云乌鸡保护场开展增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育，增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育方法包括以下步骤：
步骤一、选取60只公鸡作为父本，600只母鸡作为母本，建立60个家系，公鸡和母鸡的选取条件为：皮肤黑色素含量遗传力为0.15～0.22范围内，骨膜肌膜黑色素含量遗传力为0.12～0.19范围内，肌间结缔组织黑色素含量遗传力为0.17～0.20范围内，肌纤维组织黑色素含量遗传力为0.11～0.15范围内，其中，公鸡和母鸡分开养殖；
步骤二、采用人工受精的方法对建立的60个家系进行下一个世代的选育，统计各家系的黑色素蓄积量，并由多至少为各家系进行排序，其中，下一世代的选育包括：收集各家系的种蛋，然后孵化，再培养至成鸡，每只母鸡收集10枚种蛋进行孵化，黑色素蓄积量统计的乌鸡为成鸡；
步骤三、取黑色素蓄积量排名在前18名的家系成员，并按照步骤一从前18名的家系成员中选取公鸡和母鸡，并建立60个家系(同一家系中的公鸡和所配的母鸡在3个世代内无血亲关系)，其中，公鸡和母鸡分开养殖；
步骤四、重复步骤二、步骤三，直至同一世代的乌鸡皮肤、肝脏、肾脏、鸡胸肉的黑色素含量不低于第一阈值、第二阈值、第三阈值、第四阈值，第一阈值、第二阈值、第三阈值、第四阈值根据企业的需求确定，如分别为0.305、0.203、0.191和0.188；
各家系黑色素蓄积量的统计方法为：在同一家系中，随机选取该家系中10只成鸡进行统计黑色素蓄积量，并计算每个家系黑色素蓄积量的平均值，即为该家系的黑色素蓄积量。
在培养至成鸡时，饲料中添加饲料总质量0.15倍量的添加剂，添加剂包括以下重量份数的原料：赤芍3份、刺蒺藜提取物2.5份、预处理菟丝子3份、沙苑子2份、石榴籽粉10份、红薯叶提取物5份、小肽0.1份、以及米糠30份；
其中，刺蒺藜提取物的制备方法为：将刺蒺藜粉碎，得到粉碎料，向粉碎料中加入其总质量2倍量的质量分数为78％的乙醇溶液、10倍量的水、0.01倍量的食盐混合，置于40℃条件下超声波提取40min，过滤并浓缩，得到刺蒺藜粗提取物，将刺蒺藜粗提取滴加至其总质量10倍量的石油醚中，过滤，得到固体，向固体中加入其总质量0.5倍量的质量分数为78％的乙醇溶液、3倍量的水混合并溶解，采用大孔吸附树脂进行吸附富集，洗脱剂为体积比为1:4的水和质量分数为78％的乙醇溶液，浓缩，得到浓缩物，将浓缩物以冰醋酸为溶剂进行重结晶，得到刺蒺藜提取物；
预处理菟丝子的制备方法为：将菟丝子粉碎，并加入菟丝子总质量10倍量的乙酸乙酯，置于70℃条件下加热30min，过滤，除去乙酸乙酯，冷冻干燥，粉碎，过筛，即得到粉末状菟丝子；
红薯叶提取物的制备方法为：将红薯叶打浆，得到浆液，向浆液中加入其总质量1倍量的乙酸缓冲溶液、0.1倍量的白糖、0.1倍量的纤维素酶、以及0.5倍量的果胶酶混合并进行酶解，过滤，得到酶解液，向酶解液中加其总质量5倍量的莲藕粉，冷冻干燥，并粉碎，得到红薯叶提取物。
石榴籽粉的制备方法为：将石榴籽在质量分数为1％的柠檬酸水溶液中浸泡，沥干，然后加入石榴籽总质量5倍量的水混合，在50℃条件研磨，得到浆液，向浆液中加入其总质量2％的纤维素酶水解2h，加热在100℃灭酶，再加入浆液总质量2倍量的明胶，干燥并粉碎，得到石榴籽粉。
<对比例1>
在实施例4的基础上进行选育，其中，不同的是刺蒺藜的提取方法具体为：向刺蒺藜中加入其总质量10倍量的水，置于80℃条件下加入5h，过滤，得到刺蒺藜提取物。
<对比例2>
在实施例4的基础上进行选育，其中，不同的是不添加红薯叶提取物。
<对比例3>
在实施例4的基础上进行选育，其中，不同的是不添加石榴籽粉。
<试验表征>
取120日龄的乌鸡测定肝脏、肾脏、鸡胸肉和皮肤中的黑色素含量，测定方法具体为：称取10mg组织样品加入到1mL溶液中(溶液由体积比为9:1的soluene-350和水制成)，100℃水浴加热溶解后，立即置于分光光度计中测定500nm条件下的吸光度值(A500)，根据吸光度值比较组织样品中的黑色素含量，其中，同一世代中，每个家系选取相应只数的乌鸡进行测定黑色素蓄积量，得到家系平均黑色素蓄积量，并计算同一世代的平均黑色素蓄积量，即为同一世代的黑色素蓄积量，如同一世代肝脏黑色素含量＝所有家系皮肤黑色素含量之和/家系个数，实施例3测定结果如表1所示，实施例4测定结果如表2所示，对比例1、对比例2、对比例3的测定结构如表3所示：
表1
| 肝脏 | 肾脏 | 鸡胸肉 | 皮肤 | |
| 0世代 | 0.107 | 0.089 | 0.075 | 0.139 |
| 1世代 | 0.145 | 0.131 | 0.134 | 0.208 |
| 2世代 | 0.195 | 0.182 | 0.175 | 0.293 |
| 3世代 | 0.213 | 0.201 | 0.198 | 0.325 |
表2
| 肝脏 | 肾脏 | 鸡胸肉 | 皮肤 | |
| 0世代 | 0.107 | 0.089 | 0.075 | 0.139 |
| 1世代 | 0.167 | 0.156 | 0.473 | 0.223 |
| 2世代 | 0.212 | 0.199 | 0.203 | 0.308 |
| 3世代 | 0.256 | 0.247 | 0.211 | 0.372 |
表3
对比分析实施例3和实施例4可知，实施例4中2世代肝脏、皮肤、肾脏、鸡胸肉黑色素含量接近于实施例3中3世代的黑色素含量，结果表明在饲料中添加添加剂能够有效促进黑色素的沉积，缩短乌鸡选育的时间；
对比分析实施例4、对比例1、对比例2、对比例3可知，实施例4中3世代肝脏、皮肤黑色素含量均大于对比例1、对比例2、对比例3中3世代的黑色素含量，结果表明本发明制备刺蒺藜提取物的方法、及添加红薯叶提取物和石榴籽粉均有利于促进黑色素的沉积。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。
Claims (6)
1.增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一、选取M只公鸡作为父本，nM只母鸡作为母本，建立M个家系，其中，n为4～10，且n为整数，公鸡和母鸡的选取条件为：皮肤黑色素含量遗传力为0.15～0.22，骨膜肌膜黑色素含量遗传力为0.12～0.19，肌间结缔组织黑色素含量遗传力为0.17～0.20，肌纤维组织黑色素含量遗传力为0.11～0.15；
步骤二、采用人工受精的方法对建立的家系进行下一个世代的选育，统计各家系的黑色素蓄积量，并由多至少为各家系进行排序，其中，黑色蓄积量包括皮肤黑色素含量、肝脏黑色素含量、肾脏黑色素含量、鸡胸肉黑色素含量；
步骤三、取黑色素蓄积量排名在设定范围内的家系成员，从中选取公鸡和母鸡，并建立M个家系；
步骤四、重复步骤二、步骤三，直至同一世代乌鸡的黑色素蓄积量高于设定阈值；
其中，每个家系包括1只公鸡和n只母鸡，每个家系中的父本和母本无血亲关系；
在培养至成鸡时，饲料中添加饲料总质量0.15倍量的添加剂，添加剂包括以下重量份数的原料：赤芍3份、刺蒺藜提取物2.5份、预处理菟丝子3份、沙苑子2份、石榴籽粉10份、红薯叶提取物5份、小肽0.1份、以及米糠30份；
其中，刺蒺藜提取物的制备方法为：将刺蒺藜粉碎，得到粉碎料，向粉碎料中加入其总质量2倍量的质量分数为78％的乙醇溶液、10倍量的水、0.01倍量的食盐混合，置于40℃条件下超声波提取40min，过滤并浓缩，得到刺蒺藜粗提取物，将刺蒺藜粗提取滴加至其总质量10倍量的石油醚中，过滤，得到固体，向固体中加入其总质量0.5倍量的质量分数为78％的乙醇溶液、3倍量的水混合并溶解，采用大孔吸附树脂进行吸附富集，洗脱剂为体积比为1:4的水和质量分数为78％的乙醇溶液，浓缩，得到浓缩物，将浓缩物以冰醋酸为溶剂进行重结晶，得到刺蒺藜提取物；
预处理菟丝子的制备方法为：将菟丝子粉碎，并加入菟丝子总质量10倍量的乙酸乙酯，置于70℃条件下加热30min，过滤，除去乙酸乙酯，冷冻干燥，粉碎，过筛，即得到粉末状菟丝子；
红薯叶提取物的制备方法为：将红薯叶打浆，得到浆液，向浆液中加入其总质量1倍量的乙酸缓冲溶液、0.1倍量的白糖、0.1倍量的纤维素酶、以及0.5倍量的果胶酶混合并进行酶解，过滤，得到酶解液，向酶解液中加其总质量5倍量的莲藕粉，冷冻干燥，并粉碎，得到红薯叶提取物；
石榴籽粉的制备方法为：将石榴籽在质量分数为1％的柠檬酸水溶液中浸泡，沥干，然后加入石榴籽总质量5倍量的水混合，在50℃条件研磨，得到浆液，向浆液中加入其总质量2％的纤维素酶水解2h，加热在100℃灭酶，再加入浆液总质量2倍量的明胶，干燥并粉碎，得到石榴籽粉。
2.如权利要求1所述的增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育方法，其特征在于，步骤四中，重复步骤二、步骤三，直至同一世代乌鸡的皮肤黑色素含量、肝脏黑色素含量、肾脏黑色素含量和鸡胸肉黑色素含量分别不低于第一阈值、第二阈值、第三阈值、第四阈值。
3.如权利要求2所述的增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育方法，其特征在于，M为60。
4.如权利要求3所述的增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育方法，其特征在于，步骤二中，设定范围为前30％。
5.如权利要求4所述的增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育方法，其特征在于，下一世代的选育包括：收集各家系的种蛋，然后孵化，再培养至成鸡，其中，每只母鸡收集10枚种蛋进行孵化，黑色素蓄积量统计的乌鸡为成鸡。
6.如权利要求1所述的增强凌云乌鸡黑色素沉积的选育方法，其特征在于，各家系黑色素蓄积量的统计方法为：在同一家系中，随机选取该家系中种蛋总个数10％的成鸡进行统计黑色素蓄积量，并计算每个家系黑色素蓄积量的平均值，即为该家系的黑色素蓄积量。
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| 凌云乌鸡0世代和1世代肉用生产性能及肉品质的比较分析;罗贵标等;《饲料博览》;20170425(第4期);第5-7,15页 * |
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| 赤芍等5种上调酪氨酸酶活性中药乙醇提取液对棕黄色豚鼠背部皮肤的增色作用;李洪武等;《临床皮肤科杂志》;20010430;第30卷(第2期);第69-71页 * |
| 酪氨酸影响泰和乌骨鸡黑色素生成的细胞学机理;肖红;《中国优秀硕士学位论文全文数据库电子期刊 农业科技辑》;20140228;第D050-4页 * |
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