CN104544363A - 一种石斛酸汤组合物及制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于保健食品技术领域，具体涉及一种石斛酸汤组合物及制备方法，所述组合物包括1～90重量份石斛、0.01～90重量份苗族酸汤。发明提供了一种石斛酸汤组合物，药理实验表明，发明组合物，具有较低的胃刺激性，且有助于免疫力增强。

Description

一种石斛酸汤组合物及制备方法

技术领域

本发明属于食品技术领域，具体涉及一种石斛酸汤组合物。

背景技术

随着人们生活水平的提高，日常饮食中摄入大量的脂肪、淀粉等营养物质，造成了大量的超重、肥胖人群，进而出现了高血糖、高血脂、高血压等“三高”类疾病，给人们的生活和经济状况带来了较为不利的影响。我国目前“三高”人群比例处于高位，需要通过饮食等方法进行控制。具有降低血糖、调节血脂的复方保健食品显示了良好的降“三高”效果。

用中草药制作茶叶，在我国有着悠久的历史，饮用方便，效果明显，被人们普遍接受。近几年，各种保健茶如雨后春笋，层出不穷。石斛(学名：Dendrobiumnobile Lindl)，又名万丈须、吊兰、林兰、金钗华等。药用植物，性味甘淡微咸，寒，归胃、肾，肺经。益胃生津，滋阴清热。用于阴伤津亏，口干烦渴，食少干呕，病后虚热，目暗不明。现代药理研究表明，铁皮石斛对肾上腺素性高血糖小鼠具有明显的降血糖作用(吴昊姝，徐建华，陈立钻，孙继军，铁皮石斛降血糖作用及其机制的研究，中国中药杂志，2004，29(2)：160-163)，铁皮石斛膏具有降低血糖和增强免疫的功能(陈爱君，李钦，张信岳，倪崖，铁皮石斛膏降糖作用的研究，中国中医药科技，2009，16(6)：457-458)。

发明内容

基于上述原因，本发明人在多年研究的基础上，得到一种石斛酸汤组合物及其制备方法，药理实验表明，本发明组合物具有辅助降血糖的作用。

本发明通过下述技术方案实现的。

一种石斛酸汤组合物，包括1～90重量份石斛、0.01～90重量份苗族酸汤。

所述的石斛为新鲜石斛全草、石斛超微粉、石斛组培苗、石斛内生菌发酵产物、发酵石斛粉中的一种或几种。

所述的苗家酸汤为苗族的毛米酸、番茄酸、虾酸、鱼类酸、肉类酸、菜类酸、泡菜酸、白霞酸、糟辣酸、盐酸中的一种或几种。

一种制备所述的组合物的方法，包括以下步骤：

步骤1：将石斛加入其重量1～5倍水、0.01～5％的茶多酚和/或植酸进行破碎匀浆，再加入加水后总重量0.001～10％的酶制剂、，于30～65℃条件下处理1～5小时，灭酶后制得石斛酶解料液；所述酶制剂为纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、细胞壁溶解酶、内生青霉菌纤维素酶、糖化酶、蛋白酶中的一种或几种；

步骤2：在苗族酸汤中加入其重量1～50％的石斛酶解料液，混合均匀后在有氧或厌氧条件下于10～85℃条件下发酵1～180小时，过滤取上清液，澄清、灭菌后得到石斛酸汤组合物。

实施例

以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。

石斛购自贵州茅味生物科技有限公司。

药效试验1：辅助降血糖功能测定

石斛：将购得新鲜石斛烘干后制成石斛超微粉备用；

测定方法：

(1)材料的预处理

样品1：将5g石斛用研钵研碎，再按照果肉∶50mM磷酸缓冲液＝1∶2的体积比加入缓冲液，混匀后，10000rpm离心10min，取上清液备用。

样品2：将1g石斛、1g苗族酸汤按如下方法制备后，再按照产物∶50mM磷酸缓冲液＝1∶2的体积比加入缓冲液，混匀后，10000rpm离心10min，取上清液备用。

制备方法：

步骤1：将石斛加入其重量1倍水、0.01％的茶多酚中进行破碎，再加入加水后总重量0.001％的淀粉酶，于30℃条件下处理1小时，灭酶后制得石斛酶解料液；

步骤2：在苗族酸汤中加入其重量1％的石斛酶解料液，混合均匀后在有氧条件下于10℃条件下发酵180小时，过滤取上清液，澄清、灭菌后得到石斛酸汤组合物。

样品3：将1g石斛、1g苗族酸汤按如下方法制备后，再按照产物∶50mM磷酸缓冲液＝1∶2的体积比加入缓冲液，混匀后，10000rpm离心10min，取上清液备用。

制备方法：

步骤1：将石斛加入到其重量5倍水、5％的茶多酚中进行破碎，再加入加水后总重量10％的淀粉酶，于65℃条件下处理5小时，灭酶后制得石斛酶解料液；

步骤2：在苗族酸汤中加入其重量50％的石斛酶解料液，混合均匀后在有氧条件下于85℃条件下发酵1小时，过滤取上清液，澄清、灭菌后得到石斛酸汤组合物。

样品4：将1g石斛、1g苗族酸汤按如下方法制备后，再按照产物∶50mM磷酸缓冲液＝1∶2的体积比加入缓冲液，混匀后，10000rpm离心10min，取上清液备用。

制备方法：

步骤1：将石斛加入到其重量3倍水中进行破碎，再加入加水后总重量2.8％的淀粉酶，于55℃条件下处理3小时，灭酶后制得石斛酶解料液；

步骤2：在苗族酸汤中加入其重量30％的石斛酶解料液，混合均匀后在有氧条件下于45℃条件下发酵80小时，过滤取上清液，澄清、灭菌后得到石斛酸汤组合物。

(2)辅助降血糖实验

实验动物：选用成年动物，选用小鼠(26±2g)，雄性，每组10-15只。

高热能饲料：猪油10％、蔗糖15％、蛋黄粉15％、酪蛋白5％、胆固醇1.2％、胆酸钠0.2％、碳酸氢钙0.6％、石粉0.4％、鼠维持料52.6％

对正常小鼠血糖的影响：选健康成年动物按禁食3小时的血糖水平分组，随机选1个对照组和4个样品组。对照组给等体积生理盐水，样品组给予上述样品，连续30天，测空腹血糖值，结果见表1。

表1本发明样品正常小鼠血糖的影响

组别	动物数(只)	剂量(g/kg·d，ig)	血糖含量(mmol/1)
				对照组	10		7.44±1.11
样品1组	10	1.5×4	7.17±0.87
				样品2组	10	1.5×4	5.73±0.56**
样品3组	10	1.5×4	5.67±1.31**

样品4组

10

1.5×4

5.45±0.89**

注：与对照组比较**P＜0.05。

结论：样品2～4对正常小鼠血糖水平均有显著降低作用(P＜0.05)，说明本发明样品具有降血糖作用。

对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响：取正常小鼠60只，随机取10只作为正常对照组，其余尾静脉注射四氧嘧啶生理盐水100，g/kg，造成糖尿病模型，72h后(禁食12h)，取血预测血糖后等分5组，按表2灌胃给药，正常对照组给等体积生理盐水，每天一次，连续4天，于末次给药前禁食16小时，末次给药1小时眼眶后静脉丛采血测血糖含量。结果见表2。

表2本发明对四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖的影响

注：与正常对照组比较，^ΔP＜0.001；与模型组比较，*P＜0.01

结论：治疗前各给药组与模型组小鼠血糖含量无明显差异(P＞0.05)，它们与正常对照组相比，则有极显著差异(P＜0.001)。治疗后，样品2～3治疗组小鼠血糖含量明显低于治疗前(P＜0.01)，同时亦明显低于模型对照组(P＜0.01)。模型组和正常对照组小鼠血糖含量治疗前后均无显著性差异(P＞0.05)。实验结构表明，本实验用100mg/kg四氧嘧啶尾静脉iv所造成小鼠高血糖模型是可靠的，本发明样品对实验性小鼠高血糖具有一定降低作用。

药效试验2：提高免疫力试验

在体外细胞培养试验中使用巨噬细胞的活化评估组合物的免疫学效力

方法：

A.细胞培养

在具有10％FCS(胎牛血清)的DMEM中连续维持Raw264.7细胞系。它们每2-3天传代一次，在5％二氧化碳的气氛中在37℃下培育。

B.巨噬细胞吞噬试验

以105细胞/玻璃盖片的密度在盖玻片上涂覆Raw264.7细胞，并使其粘附。用不同原料的组合培育细胞2小时。培育后，用106乳胶珠/105细胞(细胞∶珠＝1∶10)培育细胞2小时。风干盖玻片上的细胞，并用甲醇固定细胞。细胞经Giemsa染色10分钟，并用显微镜计数。

巨噬细胞吞噬试验的结果表示为吞噬作用指数，即，每100个细胞的细胞内的总数。

使用实施例1～5所制备的产品进行实验(每实验4个样本)。平均吞噬作用指数的数据连同标准差也总结于表2。使用统计方法分析的数据表明t检验中置信度大于95％。

表3吞噬作用结果比较

实施例	吞噬作用指数
		石斛	3.12±0.63
1	6.31±0.63*
		2	6.43±0.23**
3	6.65±0.84**

4	6.53±0.32**
		5	6.56±0.41**

注：与单独使用牛樟芝比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

表3的数据表明，单独应用石斛产生一定数值的吞噬作用指数，然而，本发明组合提供了比石斛可获得的明显较高的吞噬作用指数(P＜0.05或P＜0.01)。

因此，本发明提供了组合物通过相互协同作用以提供增强的免疫力益处。

实施例1

步骤1：将90g牛樟芝加入到其重量1倍水1.3％茶多酚、0.5％的植酸中进行破碎，再加入加水后总重量1％的酶制剂，于35℃条件下处理5小时，制得牛樟芝酶解料液，所述酶制剂为纤维素酶、果胶酶；

步骤2：在1000ml苗族酸汤中加入其重量0.9％的石斛酶解料液，混合均匀后在有氧条件下于15℃条件下发酵12小时，过滤得到的上清液，澄清、灭菌后得到石斛酸汤组合物。

实施例2

步骤1：将30g石斛加入到其重量3倍水、0.8％茶多酚、1.5％的植酸进行破碎，再加入加水后总重量3.5％的酶制剂，于48℃条件下处理4.6小时，制得茶槲寄生酶解料液，所述酶制剂为内生青霉菌纤维素酶、糖化酶；

步骤2：在1000ml苗族酸汤中加入其重量3.9％的石斛酶解料液，混合均匀后在厌氧条件下于55℃条件下发酵80小时，过滤得到的上清液，澄清、灭菌后得到石斛酸汤组合物。

实施例3

步骤1：将60g石斛加入到其重量2倍水、1.5％的植酸进行破碎，再加入加水后总重量7.6％的酶制剂，于55℃条件下处理2.5小时，制得牛樟芝酶解料液，所述酶制剂为果胶酶、细胞壁溶解酶、内生青霉菌纤维素酶、糖化酶、单宁酶；

步骤2：在1000ml苗族酸汤中加入其重量6.5％的石斛酶解料液，混合均匀后在有氧条件下于65℃条件下发酵140小时，过滤得到的上清液，澄清、灭菌后得到石斛酸汤组合物。

实施例4

步骤1：将30g石斛加入到其重量4.8倍水、3.5％的茶多酚进行破碎，再加入加水后总重量5.8％的酶制剂，于65℃条件下处理2.3小时，制得牛樟芝酶解料液，所述酶制剂为纤维素酶、果胶酶、细胞壁溶解酶、内生青霉菌纤维素酶、糖化酶、单宁酶、蛋白酶；

步骤2：在1000ml苗族酸汤中加入其重量9％的石斛酶解料液，混合均匀后在厌氧条件下于25℃条件下发酵10小时，过滤得到的上清液，澄清、灭菌后得到石斛酸汤组合物。

实施例5

步骤1：将80g石斛加入到其重量3倍水、0.5％的茶多酚中进行破碎，再加入加水后总重量4.5％的酶制剂，于45℃条件下处理3小时，制得牛樟芝酶解料液，所述酶制剂为、果胶酶、淀粉酶、糖化酶、蛋白酶；

步骤2：在1000ml苗族酸汤中加入其重量10％的石斛酶解料液，混合均匀后在有氧条件下于45℃条件下发酵180小时，过滤得到的上清液，澄清、灭菌后得到石斛酸汤组合物。

Claims (4)

1.一种石斛酸汤组合物，其特征在于，所述组合物包括1～90重量份石斛、0.01～90重量份苗族酸汤。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的石斛为新鲜石斛全草、石斛超微粉、石斛组培苗、石斛内生菌发酵产物、发酵石斛粉中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述的苗家酸汤为苗族的毛米酸、番茄酸、虾酸、鱼类酸、肉类酸、菜类酸、泡菜酸、白霞酸、糟辣酸、盐酸中的一种或几种。

4.一种制备权利要求1所述的组合物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1：将石斛加入其重量1～5倍水、0.01～5％的茶多酚和/或植酸进行破碎匀浆，再加入加水后总重量0.001～10％的酶制剂，于30～65℃条件下处理1～5小时，灭酶后制得石斛酶解料液；所述酶制剂为纤维素酶、果胶酶、淀粉酶、细胞壁溶解酶、内生青霉菌纤维素酶、糖化酶、蛋白酶中的一种或几种；

步骤2：在苗族酸汤中加入其重量1～50％的石斛酶解料液，混合均匀后在有氧或厌氧条件下于10～85℃条件下发酵1～180小时，过滤取上清液，澄清、灭菌后得到石斛酸汤组合物。