CN109715075B - 微针贴片、制造微针贴片的方法和使用微针贴片诊断过敏性疾病的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用于诊断和治疗过敏性疾病的微针贴片，所述微针贴片可以容易且有效地将过敏原注射入个体的真皮层中；一种用于制造微针贴片的方法；以及一种用于使用所述微针贴片诊断过敏性疾病的方法。本发明所述的微针贴片包括构造成将过敏原注射入实体中的多个微针；以及用于支撑所述多个微针的垫。根据本发明的微针贴片可以容易且有效地将过敏原注射入个体的真皮层中，从而允许容易且有效地诊断或治疗过敏性疾病，而不会对患者造成很大的疼痛。此外，由于可以控制所述微针贴片中包含的过敏原的类型和含量，因此可以允许准确地诊断或治疗过敏性疾病。

Description

微针贴片、制造微针贴片的方法和使用微针贴片诊断过敏性 疾病的方法

技术领域

本公开涉及微针贴片、用于制造微针贴片的方法，以及用于使用微针贴片诊断过敏性疾病的方法。更具体地，本公开涉及用于诊断和治疗过敏性疾病的微针贴片，其可以容易且有效地将过敏原注射到实体(entity)的真皮层中；用于制造微针贴片的方法；以及用于使用微针贴片诊断过敏性疾病的方法。

背景技术

生物体产生与作为异源物质的抗原发生特异性反应的抗体和淋巴细胞。然后，当生物体再次接触该异源物质时，所述抗体和淋巴细胞与该抗原反应以引起各种免疫反应。这种免疫反应是生物体自我保护的重要防御机制。

然而，免疫反应可能由许多对生物体无害的物质(例如花粉、药物、食物、动物毛发、尘螨(house dust mite)、食物添加剂)和可能对生物体有害的物质引起。这种免疫超敏反应称为过敏症。过敏症可能导致诸如支气管哮喘、过敏性鼻炎、荨麻疹、水肿、特应性皮炎、药物过敏和过敏性休克之类的疾病。

为了鉴定怀疑患有过敏症的患者的过敏诱导物质(通常是过敏原)，执行皮肤点刺试验和多样过敏原同时检测试验(MAST)。在皮肤点刺试验中，选择可疑的过敏原并注入皮肤组织以评估皮肤反应，例如肿胀和皮疹。MAST可以从患者采集血液并对几十种过敏原进行同时测试。

然而，当针穿过皮肤时，皮肤点刺测试对患者造成显著的疼痛。此外，在皮肤点刺试验中，诊断结果可能根据诊断医生等的注射动作而变化，并且可能是不准确的。在MAST中，从患者抽取血液并在实验室中单独测试血液。诊断结果的准确性可能很高，但测试成本很高，并且从测试那刻开始到检查结果需要很长时间。

为了克服这些限制，引入贴片试验以通过将具有选定过敏原的贴片直接贴到皮肤来评估皮肤反应(参见现有专利文献1)。然而，根据贴片试验，过敏原通过表皮层注入真皮层，然后发生过敏反应需要约48至96小时。因此，产生的问题是，当患者身上贴有这样的贴片时，他/她在日常生活中会经历像洗澡那样的不便。

因此，越来越需要一种过敏原注射方法或装置，其能够有效地将过敏原注射到真皮层中而不会引起患者的疼痛或不适。

[现有技术文献]

[专利文献]

1.韩国专利号10-0849757(发明标题：用于筛选受试者对过敏原的敏感性的贴片及其用途)

发明内容

[技术问题]

为了解决所述常见的问题，本公开的目的是提供一种用于简单诊断或治疗过敏性疾病的微针贴片，其中所述贴片可以容易且有效地将过敏原注射到实体的真皮中，并且可以有简单的结构。

此外，本公开的另一个目的是提供一种用于制造这种微针贴片的方法和一种用于使用这种微针贴片诊断过敏性疾病的方法。

本公开的目的不限于上述目的。本领域技术人员从以下描述中可以清楚地理解未提及的其他目的。

[技术方案]

在本公开的一个方面，微针贴片可以包括多个微针，其被构造成将过敏原注射到实体中；以及用于支撑所述多个微针的垫。

根据本公开的一个特征，每个微针是可体内溶解的，其中所述过敏原包含在所述微针中，然后在所述微针在体内溶解时被注射到所述实体中。

根据本公开的一个特征，每个微针包含透明质酸。

根据本公开的一个特征，每个微针是中空微针，其中所述过敏原包含在所述垫中，然后通过所述中空微针注射到所述实体中。

根据本公开的一个特征，所述过敏原包括选自由以下项组成的组的一种或至少两种的组合：尘螨、真菌、花粉、动物毛发、金属、塑料、橡胶、药物、微生物和食物。

根据本公开的一个特征，所述过敏原包括尘螨。

根据本公开的一个特征，所述尘螨是粉尘螨种(D.farinae species)。

根据本公开的一个特征，所述过敏原的含量为每个贴片至少5μg。

根据本公开的一个特征，所述过敏原的含量为每个贴片至少10μg。

根据本公开的一个特征，初始过敏原含量的60％或更高的过敏原在所述贴片生产后的4周内保持不变。

根据本公开的一个特征，所述微针的至少90％在所述针插入所述实体后3小时内溶解。

根据本公开的一个特征，所述贴片还包含含过敏原的层，其含有与所述微针中包含的过敏原相同类型的过敏原。

根据本公开的一个特征，所述含过敏原的层设置在所述微针和所述垫之间并覆盖所述垫。

根据本公开的一个特征，所述含过敏原的层覆盖所述微针的外表面。

根据本公开的一个特征，所述微针中的每一个的长度在从200μm到350μm的范围内，包括端值。

在本公开的另一方面，一种用于制造微针贴片的方法可以包括在第一基底上的多个间隔点处点制上(spotting)含有过敏原的粘性组合物的点；使第二基底与在所述第一基底上的多个粘性组合物的点(spot)接触；通过在所述第一基底和所述第二基底之间的竖直间隔来拉伸所述粘性组合物；固化已拉伸的所述粘性组合物；并且通过切割已固化的所述组合物来形成多个微针。

在本公开的又一方面，一种用于制造微针贴片的方法可以包括在第一基底上的多个第一间隔点处点制上含有过敏原的粘性组合物的点；在第二基底上的多个第二间隔点处点制上含有过敏原的粘性组合物的点；使所述第一基底和所述第二基底对准，使得所述多个第一间隔点分别对应于所述多个第二间隔点；使所述第一基底上的多个粘性组合物的点分别与所述第二基底上的多个粘性组合物的点接触；通过在所述第一基底和所述第二基底之间的竖直间隔来拉伸所述粘性组合物；固化已拉伸的所述粘性组合物；并且通过切割已固化的所述组合物来形成多个微针。

在本公开的另一个方面，所述方法还包括在所形成的微针上施加组合物，所述组合物含有与所述点上包含的过敏原相同种类的过敏原。

在本公开的另一方面，使用如上定义的所述微针贴片诊断过敏性疾病的方法可以包括将所述微针贴片贴到活体的预定部位；经过预定时间后，移除所贴的微针贴片；并且通过比较所述预定部位和与其相邻的部位来检查过敏反应。

在本公开的另一方面，该方法还包括所述检查所述过敏反应，其包括：分别获得所述预定部位的图像和所述相邻的部位的图像；处理所获得的图像；并且使用已处理的图像检查所述过敏反应。

[技术效果]

根据本公开的微针贴片可以容易且有效地将过敏原注射到所述实体的真皮中，从而允许容易且有效地诊断或治疗过敏性疾病，而不会对患者造成很大的疼痛。此外，控制微针贴片中包含的过敏原的类型和含量可以允许准确地诊断或治疗过敏性疾病。此外，使用含有高浓度过敏原的微针贴片可以帮助更有效地诊断或治疗过敏性疾病。

附图说明

图1是根据本公开的各种实施方式的每种微针贴片及其每个过敏原注射机构的俯视图。

图2是示出本公开的各种形式的可生物降解的微针贴片中的每一种的俯视图。

图3是示出用于制造图2(a)和2(b)中所示的微针贴片的方法的流程图。

图4是示出用于制造图2(c)中所示的微针贴片的方法的流程图。

图5是示出用于制造图2(d)中所示的微针贴片的方法的流程图。

图6是含有10μg的尘螨的粉尘螨种过敏原的微针的照片。

图7是示出基于过敏原含量的增加，在血清中IgE(免疫球蛋白E)浓度的变化和450nm波长处吸光度的变化的图。

图8是示出微针贴片经过基于辐射的灭菌处理后贴片中含有的过敏原浓度变化的图。

图9是示出过敏原浓度随时间的变化的图。

图10示出了在将根据本公开的微针贴片贴到实体的皮肤之后微针随时间生物降解程序的照片。

图11示出了关于真皮中MHC2标记和粉尘螨过敏原的活性的照片。

图12示出了将本公开的微针贴片和传统贴片分别贴到实体的皮肤的比较效果的照片。

图13是示出用于使用本公开的微针贴片诊断过敏性疾病的方法的流程图。

图14是详细说明检查图13中的过敏反应的操作的流程图。

具体实施方式

参考如下面参考附图详细描述的实施方式，本公开的其他优点和特征以及实现其他优点和特征的方法将变得显而易见。然而，本公开不限于下面公开的实施方式，而是可以以许多不同的形式实施。那些实施方式仅允许完成本公开。这些实施方式允许本领域技术人员完全理解本公开。本公开的范围不由实施方式限定，而是由所附权利要求限定。

附图中公开的用于示出本公开的实施例的形状、尺寸、比率、角度、数量等是说明性的，因此本公开不限于所示的形状、尺寸、比率、角度、数量等。此外，为了描述的简单起见，省略了对公知操作和元件的描述和细节，并且不会不必要地模糊本公开的各方面。

当在本说明书中使用术语“包括”、“包含”、“含有”和“含”时，除非使用“仅”，否则可以添加其他部分。除非上下文另有明确规定，否则这些元素的单数形式包括复数形式。在解释组成元件时，即使没有单独的描述，也可以解释为包括误差范围。

在整个说明书中，相同的附图标记指代相同的元件。为了便于解释，示出了附图中所示的各个部件的尺寸和厚度，并且本公开不必限于所示部件的尺寸和厚度。本公开的各种实施例的特征可以部分地或完全地彼此组合或耦合。如本领域技术人员将理解的，本公开的各种实施例的特征可以以各种方案彼此相关联。实施例可以彼此独立地实现或者彼此结合使用。

如本文所用，术语“过敏”是指对特定过敏原的所有形式的免疫超敏反应，所述特定过敏原可能对表现出所述反应，由此产生现象的宿主有害。最近，对于实体的外部环境中存在的过敏原的IgE抗体介导的I型速发型超敏反应被狭义地称为过敏反应。如本文所用，过敏反应不限于此。如本文所用，过敏反应应解释为广泛的过敏反应，其包括对实体内部和外部存在的所有过敏原的过敏反应类型I至IV。

因此，如本文所用，术语“过敏原”是指可在实体中引起免疫超敏反应的所有种类的物质。过敏原可以不限于外源性过敏原和内源性过敏原(自含过敏原)中的一种，但也可以指在实体中诱导免疫过敏反应的物质。因此，如本文所用，过敏原可以是选自由以下项组成的组的任何一种：尘螨、真菌、花粉、动物毛发、金属、塑料、橡胶、药物、微生物、食物、基于蛋白质或基于胆碱的物质(如自含蛋白质)或其组合。在下文中，为了便于说明，假设过敏原是尘螨(house dust mite)的粉尘螨物种(D.farinae species)。然而，应注意，本公开中的过敏原不限于此。

在下文中，将参考图1和图2描述根据本公开的各种实施方式的微针贴片。

图1是根据本公开各种实施方式的每种微针贴片及其每个过敏原注射机构的俯视图。图2是示出本公开的各种形式的可生物降解的微针贴片中的每一种的俯视图。

参见图1，根据本公开的每种微针贴片100a、100b、100c和100d包括多个微针110a、110b、110c和110d中的每一种，所述微针被配置为将过敏原10注入到实体中，并且多个垫120a、120b、120c和120d的每一个用于支撑多个微针110a、110b、110c和110d中的每一个。

此外，根据各种实施方式的每个微针贴片还可以包括设置在每个垫120a、120b、120c和120d上的每个织物编织或非编织片。在每个垫120a、120b、120c和120d上可以形成每个粘合剂层，以在每个贴片贴到实体的皮肤时防止每个微针贴片移动。

图1(a)示出了实心型微针贴片100a和使用实心型微针110a将过敏原10注射到实体的皮肤1中的方法。实心型微针110a在皮肤1中形成通道以限定过敏原10的通路。通过将包含过敏原10的单独贴片贴在通道上，可以将过敏原10注射到实体的皮肤1中。

图1(b)示出了涂覆型微针贴片100b和用于使用这种类型的微针110b将过敏原10注射到实体的皮肤1中的方法。涂覆型微针110b可以配置有含有在上述实心型微针110a上的过敏原10的组合物。因此，当所述贴片贴到实体时，可以将配置的过敏原10注射到皮肤1中。

图1(c)示出了可生物降解型或可溶解型微针贴片100c以及用于使用这种类型的微针110c将过敏原10注射到实体的皮肤1中的方法。可生物降解或可溶解型微针110c被生物降解或溶解在实体的皮肤1中并且允许过敏原10被注射到皮肤1中。可生物降解或可溶解型微针贴片100c将在下面参考图2更详细地描述。

图1(d)示出了中空型微针贴片100d和用于使用这种类型的微针110d将过敏原10注射到实体的皮肤1中的方法。中空型微针110d可以提供包含在垫120d中的过敏原10通过的通道。过敏原10可以通过该通道注入皮肤1中。

实心型微针贴片100a、涂覆型微针贴片100b、可溶解型微针贴片100c和中空型微针贴片100d具有不同的过敏原10注射方案。但是，实心型微针贴片100a、涂覆型微针贴片100b、可溶解型微针贴片100c和中空型微针贴片100d可同样能够将过敏原10注入实体的皮肤1中以在其中引起过敏反应。因此，根据本公开的微针贴片可以包括如上所述的图1(a)至图1(b)中的所有类型。

参见图2，如图1(c)所示的可溶解型微针贴片100c可以根据各种变化示例形成。

可溶解型微针贴片20、20'和20”中的每一个包括多个可溶解型微针21、21'和21”中的每一个，以及多个垫22、22'和22”中的每一个，多个垫22、22'和22”中的每一个支撑多个可溶解型微针21、21'和21”中的每一个。此外，根据本公开的每个可溶解型微针贴片20、20'和20”还可以包括含过敏原的层23'和23”中的每一个。

多个可溶解型微针21、21'和21”中的每一个都含有过敏原10，并且由可以通过体液、酶或微生物在体内溶解的材料组成。就此而言，生物降解或者溶解可以解释为包括体液对过敏原10的体内溶解和酶对过敏原10的体内生物降解。

在这方面，优选的是，每个微针21、21'和21”由溶解的物质制成，其将副作用最小化并在插入实体时有效地转移药物。这种物质可以优选为透明质酸(HA)。

然而，本公开不限于此。可溶解型微针21、21'和21”中的每一个由生物衍生的可溶性物质组成，所述生物衍生的可溶性物质为例如壳聚糖、胶原、明胶、肉豆蔻酸、山嵛酸、纤维素或其衍生物、麦芽糖、糊精、葡糖胺、肝素、聚赖氨酸、其他动物蜡等。在另一示例中，可溶解型微针21、21'和21”中的每一个由生物相容性物质组成，所述生物相容性物质为例如聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙二醇(PEG)、聚乙烯醇(PVA)、羟丙基纤维素(HPC)、羟乙基纤维素(HEC)、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、聚乳酸、聚乙醇酸等。此外，不用说，可溶解型微针21、21'和21”中的每一个由本领域已知的任何可生物降解的物质组成。

垫22、22'和22”中的每一个具有连接到微针21、21'和21”中的每一个的板状结构，以支撑多个微针21、21'和21”中的每一个。垫22、22'和22”的每一个优选地与多个微针21、21'和21'中的每一个集成成整体。然而，本公开不限于此。垫22、22'和22”中的每一个可以形成为与多个微针21、21'和21'中的每一个分开的每个单独构件。

垫22、22'和22”中的每一个可以由不可生物降解的单独的已知物质制成。替代地，垫22、22'和22”中的每一个可以由与微针21、21'和21'中的每一个相同的溶解物质(如上所述)制成。垫22、22'和22”中的每一个的结构和组成可以不限于特定的结构和组成，只要垫22、22'和22”中的每一个提供可以支撑多个微针21、21'和21”中的每一个的支撑力，并且当根据本发明的微针贴片20、20'和20”中的每一个被贴到实体的皮肤上时允许微针21、21'和21'中的每一个将过敏原10注射到实体中即可。

含过敏原的层23'和23”中的每一个包含与微针21'和21”中的每一个中包含的过敏原10种类相同的过敏原10。含过敏原的层23'和23”中的每一个具有增加每个贴片的过敏原含量的技术意义。

如图2(b)所示，含过敏原的层23'可以形成为设置在微针21'和垫22'之间并覆盖垫22'。替代地，含过敏原的层23'可以仅施加在多个微针21'之间，并且可以不设置在微针21'的下方，使得微针21'和垫22'可以直接彼此接触。

在各种实施方式中，含过敏原的层23”可以形成为覆盖多个微针21”上的微针21”，如图2(c)所示。

根据本公开的微针贴片20、20'和20”的微针21、21'和21”中的每一个优选地具有从200μm(包含端值)到350μm(包含端值)的长度，使得过敏原10可以在约250μm的深度注射入人体皮肤。然而，上面定义的长度范围是一个示例。本公开不必限于此。不用说，微针21、21'和21”中的每一个的长度可以基于过敏原10的预定注射点来确定。

在下文中，将参考图3至图5描述如上所述的用于制造图2的各种可溶解型微针贴片20、20'和20”的方法。

图3是示出用于制造图2(a))中所示的微针贴片20的方法的流程图。图4是示出用于制造图2(b)中所示的微针贴片20'的方法的流程图。图5是示出用于制造图2(c)中所示的微针贴片20”的方法的流程图。

参见图3，根据本公开的用于制造微针贴片20的方法包括形成垫22，点制含有过敏原10的粘性组合物30的点，拉伸和固化所述粘性组合物30的点，以及通过切割已固化的组合物30来形成微针21。

形成垫22可以通过在第一基底3上施加组合物，然后干燥组合物来进行，如图3(a)所示。此时，可以进行吹气以促进干燥。

就此而言，第一基底3为如图所示的平板形式，并且其材料没有特别限制。然而，由于第一基底3用于制造用于医疗目的的微针贴片，所以优选的是，第一基底3由对人体无害的材料制成。

组合物是指具有允许在第一基底3上形成垫结构的粘度的物质。组合物可以包括如上所述限定垫的物质，并且可以优选地包括透明质酸。此外，形成垫的组合物可以含有过敏原。就此而言，过敏原优选地与形成微针21的粘性组合物30(稍后将描述)中包含的过敏原10相同。

接下来，点制上含有过敏原10的粘性组合物30的点。就此而言，含有过敏原10的粘性组合物30可以包括注射入实体并在体内生物降解的上述溶解物质。

可以使用已知的分配器以预定的间隔执行所述点制步骤。

当点制含有过敏原10的粘性组合物30的点时，使第二基质4与多个粘性组合物30接触，如图3(c)所示。

第二基底4可以是与第一基底3类似的平板形式。在替代方案中，第二基底4可以具有预定的突出部分(对应于所述点的部分)以允许形成微针21。

在第二基底4和粘性组合物的点30的一部分彼此接触之后，在第一基底3和第二基底4之间相对地间隔一定的竖直距离(vertical distance)可以允许粘性组合物的点30被拉伸，如图3(d)和图3(e)所示。然后，拉伸的粘性组合物30固化。尽管拉伸通常在固化之前进行，但拉伸和固化的起始可以同时进行。拉伸和固化的起始顺序可以不限于特定顺序。

在拉伸和固化工序中，可以对已拉伸的粘性组合物30进行吹气。

最后，如图3(f)所示，切割已固化的粘性组合物30以形成多个微针21。

就此而言，刚形成的微针21的长度、其上端和下端的直径以及其高宽比可以根据制造参数而变化，例如含有过敏原的粘性组合物30的粘度、第一基底3和第二基底4之间的相对移动速度和吹气强度。可以根据微针21的目标规格适当地设计和改变上述每个操作。此外，在控制微针21的强度和形状的情况下制造微针贴片20的方法不限于上述定义的方法，但可以通过参考韩国专利申请公开号10-2014-0051648中公开的技术来执行。

尽管可以如图3所示，通过仅在第一基底上点制粘性组合物的点来制造微针，然而本公开可以不限于此。可以将粘性组合物点制或施加在第一基底和第二基底两者上。然后，可以使点制在第一基底上的粘性组合物与第二基底的粘性组合物接触，从而形成微针。就此而言，点制或施加在第二基底上的粘性组合物可以优选地含有与点制在或施加在第一基底上的粘性组合物相同的组分。

在一个示例中，粘性组合物可以被点制在第一基底上的多个间隔点处。粘性组合物可以被点制在第二基底上的相应点处。然后，可以对准第一和第二基底，使得第一基底和第二基底上的粘性组合物点制点相互对应并彼此接触。可以拉伸粘性组合物以形成微针。

此外，在另一示例中，粘性组合物可以被点制在第一基底上的多个间隔点处。然后，可以将粘性组合物均匀地施加到第二基底上。然后，可以通过使第一和第二基底接触并拉伸粘性组合物来制备微针。

在制造图4和图5的微针贴片20'和20”的方法中，形成每个含过敏原的层23'和23”的操作被加到制造图3的微针贴片20的方法中。

形成图4(b)中的含过敏原的层23'的操作在形成垫22'的操作之后立即执行，使得形成含过敏原的层23'以覆盖垫22'。此外，形成图5(g)中的含过敏原的层23”的操作在切割已固化的微针21”的操作之后执行，使得形成含过敏原的层23”以覆盖多个微针21”。尽管未示出，但是在各种实施方式中，在形成微针21'之后，可以将含过敏原的层23'施加在图4中的微针21'之间。

图4和图5中的其他操作对应于如上所述的图3中的微针贴片20的制造方法的操作。因此，可以省略其间的冗余描述。

图6示出了根据上述方法之一制备的微针贴片的放大视图(图6(a))和微针贴片的一个微针的放大视图(图6(b))。

具体地，图6(a)中的微针贴片制备为含有10μg过敏原，其含有尘螨的粉尘螨物种和透明质酸。参考图6(b)，可以检查到，微针具有274.37μm的总长度并具有28.88μm的顶部直径。

在下文中，将参考图7到12的实验结果或照片描述根据本公开的微针贴片。

在图7中，为了检查过敏原介导的免疫反应的活性，测量基于每个贴片增加的过敏原含量，血清中IgE浓度的变化和450nm波长处吸光度的变化，并且测量结果在图中示出。

具体地，图7(a)显示了将制备成每个贴片具有增加的过敏原含量(即0.2、2和10μg)的微针贴片贴到实体之后4周内实体的血清中IgE抗体浓度的测量。实验中使用的过敏原是尘螨(house dust mite)的粉尘螨物种(D.farinae species)。已知这种过敏原会引起典型的IgE抗体介导的速发型过敏反应。

当对照物、含有0.2μg过敏原的贴片和含有2μg过敏原的贴片贴到实体上时，受试者的血清中的IgE抗体浓度从约500ng/ml略微增加至约700ng/ml。相反，当将每个贴片的过敏原含量增加至10μg时，血清中的IgE抗体浓度显著增加至约1200ng/ml。当每个贴片的过敏原含量从0.2μg增加到2μg(即变为10倍)时，血清中的IgE抗体浓度增加约200ng/ml。当每个贴片的过敏原含量从2μg增加到10μg(即变为5倍)时，血清中IgE抗体的浓度增加约500ng/ml。该值表明血清中IgE抗体的浓度增加是每个贴片的过敏原含量为0.2μg时的至少两倍。可以证实，将每个贴片的过敏原含量增加至10μg或更大对于通过过敏原递送引起免疫反应是重要的。

此外，图7(b)显示了将制备成每个贴片具有增加的过敏原含量(分别为0.2μg、2μg和10μg)的微针贴片贴到实体之后4周之后实体的血清中的D.farinae尘螨过敏原特异性IgE抗体的浓度变化(作为450nm波长处吸光度的测量结果)。

当对照物、含有0.2μg过敏原的贴片和含有2μg过敏原的贴片贴到实体上时，受试者的血清中的D.farinae尘螨过敏原特异性IgE抗体的浓度变化轻微。相反，当将每个贴片的过敏原含量增加至10μg时，实体的血清中的D.farinae尘螨过敏原特异性IgE抗体浓度变化较大。就此而言，450nm波长处的吸光度大大增加。每个贴片的过敏原含量设定为10μg时的450nm波长处的吸光度，与每个贴片的过敏原含量设定为2μg时的450nm波长处的吸光度相比，增加至少5倍。因此，可以证实，将每个贴片的过敏原含量增加至10μg或更大对于通过过敏原递送引起免疫反应是重要的。使用含有10μg或更高浓度的高浓度过敏原的微针贴片来诊断或治疗过敏性疾病，与传统的过敏诊断和治疗方法相比，可以允许在更短的时间内更有效地诊断和治疗过敏性疾病。

图8是示出将辐射灭菌工序应用于制备好的微针贴片后贴片中所含过敏原的浓度变化的图。

为了防止当根据本发明的微针贴片贴于人体并且用于诊断或治疗过敏性疾病时可能发生的细菌感染等问题，上述制造的微针贴片进行辐射灭菌工序。

我们证实，即使微针贴片在将辐射强度增加到2.5kgy、5kgy和10kgy的同时进行灭菌，无论辐射强度如何，在本贴片中每个贴片中的尘螨过敏原的D.farinae物种的浓度几乎没有变化，而在对照贴片中情况并非如此。

图9是示出尘螨过敏原的D.farinae物种随时间的浓度变化的图。具体地，测量置于室温的过敏原的浓度变化、置于4℃的过敏原的浓度变化，以及根据本发明的微针贴片中包含的过敏原的浓度变化。在图中比较测量值。

我们证实，当过敏原被包含在根据本公开的微针贴片中时过敏原含量随时间降低的速率低于当过敏原被包含在传统的贴片中时过敏原含量随时间降低的速率。就此而言，在贴片生产后的4周内，初始过敏原含量的高于60％过敏原含量保留在贴片中。

图10是在将根据本公开的微针贴片贴到实体的皮肤之后微针随时间生物降解或溶解程序的照片。

通过使用断层摄影术基于皮肤深度来检查当根据本公开的微针贴片贴到人体皮肤时是否将微针插入到皮肤中。然后，随着时间推移，在1小时、1小时30分钟和2小时时检查微针生物降解程序。可以证实，在微针贴片贴到皮肤上后，微针可以插入到构成皮肤表皮的颗粒层和棘层中，并且插入到表皮和真皮之间的边界下方的乳头层中。

此外，我们检查到，插入的微针的生物降解随时间推移逐渐进行。我们检查到，在贴片贴附后2小时，生物降解已经完成，并且所述针消失了。因此，当使用根据本公开的可溶解型微针贴片将过敏原注射到实体中时，插入皮肤内的大约至少90％的可溶解型微针在贴附后大约2或3小时内溶解。因此，过敏原可以在短时间内容易且有效地注射到实体的真皮中。

微针的生物降解允许微针中包含的过敏原被注射到表皮和真皮中。就此而言，为了检查过敏原是否实际注射入体内并引起人体的过敏反应，将在下文参考图11和图12。

图11示出了关于真皮中MHC2标记和D.farinae过敏原的活性的照片。

使用MHC2标记检查皮肤真皮中树突细胞的分布。在将微针贴片贴到皮肤上之后，在皮肤中检测到尘螨过敏原的D.farinae物种。根据将贴片贴到皮肤上后4小时内拍摄的照片，我们检查到过敏原已经实际递送到皮肤。此外，当考虑通过MHC2标记检测的树突细胞活性的测量结果和尘螨过敏原的D.farinae物种的活性的测量结果的组合时，我们证实了，过敏原注射点和树突状细胞激活点彼此对应，使得刚注射的过敏原引起过敏原反应。

图12示出了将本公开的微针贴片和传统贴片分别贴到实体的皮肤的比较效果的照片。

受试者是那些在常规贴型过敏诊断贴片(芬兰斑试器(finn chamber))中未显示过敏反应的受试者。当将根据本公开的微针贴片贴到受试者时观察到过敏反应。当将常规过敏诊断贴片(芬兰斑试器)贴到受试者时，在皮肤表面没有观察到皮肤颜色的变化。相反，当将根据本发明的微针贴片贴到受试者时，我们通过皮肤颜色变红而证实已发生过敏反应。

结果，根据本公开的微针贴片可以容易且有效地将过敏原注射到实体的真皮中。我们证实，本贴片可以简单有效地诊断或治疗过敏性疾病，而不会给患者带来很大的痛苦。

在下文中，参考图13和图14，将描述使用根据本公开的微针贴片诊断过敏性疾病的方法。

图13是示出用于使用根据本公开的微针贴片诊断过敏性疾病的方法的流程图。图14是详细说明图13中的检查过敏反应的操作的流程图。

根据本公开的诊断过敏性疾病的方法可以包括在步骤S10中将微针贴片贴到活体的预定部位；在经过预定时间量之后，在步骤S20中移除所贴的微针贴片；并且通过比较预定部位和与预定部位相邻的部位来检查过敏反应。

在贴附微针贴片的步骤S10中，贴附所述贴片的位点可以选择成贴片容易贴附并且容易诊断的位点。所述位点的示例可以是手臂上的位点。

在步骤S20中，在经过预定时间量之后，移除所贴附的微针贴片，可以根据微针贴片的类型调整所述预定时间量。例如，当根据本公开的可溶解型微针贴片用于诊断过敏性疾病时，可以在将微针插入皮肤后2小时移除所述贴片。此时，所述针可能几乎生物降解。

在步骤30中，通过比较预定部位和与其相邻的部位来检查过敏反应，其可以包括在步骤S31中分别获得预定部位和与预定部位相邻的部位的图像，在步骤S32中处理所获得的图像，并在步骤S33中通过处理后的图像检查过敏反应。

通常，在微针贴片贴附的位置和发生过敏反应的位置，由于肿胀和皮疹，皮肤颜色变红。在S31可以分别获得预定部位及与其相邻的部位的图像，以通过比较发生过敏反应的位点的红色和没有发生过敏反应的位点的颜色来检查实体是否对注射的过敏原具有过敏反应。

该步骤S31可以，例如通过拍摄每个位点来执行。

处理所获得的图像的步骤S32可以包括将预定部位的图像和与其相邻的部位的图像重叠，并且使在重叠图像中彼此共同部分抵消，以仅检查两个图像之间的差异。

然而，处理图像的方法可以不限于该方法，而是可以通过应用各种传统图像处理方法来执行。

最后，所述方法通过在步骤S33中通过处理过的图像检查过敏反应来确定实体是否对注射的过敏原具有过敏性疾病。

尽管已经参考附图详细描述了本公开的实施方式，但是本公开可以不必限于这些实施方式，并且在不脱离本公开的技术构思的情况下可以进行各种修改。因此，本公开中公开的实施方式旨在是说明性的而非限制性的。这些实施方式不限制根据本公开的技术构思的范围。因此，应该理解，上述实施方式在所有方面都是说明性的而非限制性的。本公开的保护范围应根据以下权利要求来解释。此外，在该范围内的所有技术构思应当被解释为包括在根据本公开的权利的范围内。

Claims (8)

1.一种微针贴片，其包括：

构造成将过敏原注射入实体的多个微针；

用于支撑所述多个微针的垫, 以及

含过敏原的层，所述层含有与所述微针中包含的过敏原相同类型的过敏原，

其中所述含过敏原的层设置于所述微针与所述垫之间并覆盖所述垫，

其中所述过敏原的含量为每个贴片至少10 μg，并且其中初始过敏原含量的60％或更高的过敏原在所述贴片生产后的4-8周内保持不变，

其中每根微针为可溶解型，插入皮肤后3小时内溶解至少90%。

2.根据权利要求1所述的微针贴片，其中每个微针是可生物降解的，其中所述过敏原包含在所述微针中，然后在所述微针能生物降解时被注射入所述实体中。

3.根据权利要求2所述的微针贴片，其中每个微针包含透明质酸。

4.根据权利要求1所述的微针贴片，其中所述过敏原包括选自由以下项组成的组的一种或至少两种的组合：尘螨、花粉、动物毛发、金属、塑料、橡胶、药物、微生物和食物。

5.根据权利要求4所述的微针贴片，其中所述尘螨是粉尘螨物种。

6.根据权利要求4所述的微针贴片，其中所述微生物是真菌。

7.根据权利要求1所述的微针贴片，其中所述微针中的每一个的长度在从200 μm到350μm的范围内，包括端值。

8.一种用于制造根据权利要求1-7中任一项所述的微针贴片的方法，该方法包括：

在第一基底上的多个间隔点处点制含有过敏原的粘性组合物的点；

使第二基底与所述第一基底上的多个粘性组合物的点接触；

通过在所述第一基底和所述第二基底之间竖直间隔来拉伸所述粘性组合物；

固化已拉伸的所述粘性组合物；以及

通过切割已固化的所述粘性组合物来形成多个微针。

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