CN109694838B - 一株链霉菌及其应用 - Google Patents

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Abstract

一株链霉菌及其应用，属于微生物农药技术领域。为了解决抑制植物病原菌，促进植物生长的技术问题，本发明提供了一株链霉菌(Streptomyces sp.)NEAU6，于2018年08月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC 16338，该菌株具有广谱的植物抗病和促生能力，为研究开发环境友好型的放线菌菌剂提供优质的材料。

Description

一株链霉菌及其应用
技术领域
本发明属于微生物农药技术领域，具体涉及一株链霉菌及其应用。
背景技术
化学防治植物病害在农业生产中发挥着重要的作用，然而化学农药的大量使用带来了一系列的环境问题，包括土壤板结、酸化、农药残留毒性、病虫抗(耐)药性上升、次要害虫大发生、环境污染和生态平衡破坏等，严重威胁着农产品质量安全和农业生态环境安全。生物防治因其成本低、环境友好和无药物残留等特点已成为当前国内外防治植物土传病害的研究热点，并将逐步取代传统的化学防治手段，具有广阔的应用前景。
生物防治植物病害的常见机制：改善土壤理化性质及营养状况，提高植物健康水平，从而增强植物抗病能力；利用生防菌的寄生、拮抗作用，及其与病原菌竞争营养物质和生态位等效应机制抑制病原菌生长；诱导植物对病原菌的系统抗性。
因此筛选具有抗病促生活性的菌种资源，开发可逐步替代化学农药的新型微生物产品对实现农产品产量与质量安全、农业生态环境保护相协调的可持续发展具有重要意义。
发明内容
为了解决抑制植物病原菌，促进植物生长的技术问题，本发明提供了一株链霉菌NEAU6，其保藏编号为CGMCC 16338。
进一步地限定，所述链霉菌NEAU6的16S rDNA在Genbank的登录号为KX679573。
进一步地限定，所述链霉菌NEAU6产生的次级代谢产物为吲哚乙酸和五谷丰素。
本发明还提供了上述链霉菌NEAU6在促进植物胚根和胚芽生长中的应用。
本发明还提供了上述链霉菌NEAU6在抑制引起植物病害的病原真菌活性中的应用。
进一步地限定，所述引起植物病害的病原真菌包括水稻纹枯病菌(Rhizoctoniasolani)、玉米小斑病菌(Helminthosporium maydis)、玉米大斑病菌(Setosphaeriaturcica turcicaf)、玉米黑穗病菌(Sphacelotheca reiliana)、玉米弯孢病菌(Curvularia lunata)、大豆根腐病菌 (Fusarium oxysporum)、大豆菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)、大豆疫霉病菌(Phytophthora sojae)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum(Schl.)F.sp cucumerinum Owen)、黄瓜褐斑病菌 (Corynesporacassiicola)、黄瓜炭疽病菌(Colletotrichum orbiculare)、番茄早疫病菌(Alernariasolani)、番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、番茄黄萎病菌(Verticillium dahliaeKleb)和辣椒疫霉病菌(Phytophthora capsici)。
进一步地限定，所述的植物包括水稻、小麦和玉米。
本发明还提供了上述链霉菌NEAU6在提高农作物大田产量中的应用。
进一步地限定，所述的农作物包括水稻、玉米、小麦、生菜、结球生菜、白菜、油菜、辣椒、茄子、黄瓜及番茄。
本发明的链霉菌(Streptomyces sp)，菌株号为NEAU6，已于2018年08月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC 16338。
有益效果
本发明提供了一种具有防病促生功能的链霉菌(Streptomyces sp.)NEAU6，该菌株具有如下有益的效果：
(1)对农业生产上发生严重的15种植物病原真菌有显著的拮抗作用，抑菌普广；
(2)可产生植物生长刺激物质吲哚乙酸和五谷丰素；
(3)具有解磷、解钾能力；
(4)将该菌株的孢子水悬浮液作用于小麦、水稻及玉米种子，可明显促进种子的胚根和胚芽生长；
(5)将该菌株的孢子水悬浮液浸种或灌根，可显著提高多种农作物的大田产量。
综上，本发明获得的链霉菌NEAU6具有广谱的植物抗病和促生能力，可为研究开发环境友好型的放线菌菌剂提供优质的材料。
附图说明
图1为菌株NEAU6在ISP3琼脂培养基上的菌落形态；
图2为菌株在扫描电镜下的菌丝和孢子形态；
图3为基于菌株NEAU6 16S rDNA序列构建的系统发育树；
图4为菌株NEAU6对病原真菌的平皿拮抗效果，其中A：水稻纹枯病菌，B：玉米小斑病菌，C：玉米大斑病菌，D：玉米黑穗病菌，E：玉米弯孢病菌，F：大豆根腐病菌，G:大豆菌核病菌，H：大豆疫霉病菌，I：黄瓜枯萎病菌，J：黄瓜褐斑病菌，K：黄瓜炭疽病菌，L：番茄早疫病菌，M：番茄灰霉病菌，N：番茄黄萎病菌，O：辣椒疫霉病菌；
图5为菌株NEAU6产吲哚乙酸检测结果；
图6为五谷丰素结构；
图7为五谷丰素溶于甲醇的质谱谱图，横坐标为质荷比(m/z)，纵坐标为离子流相对强度；
图8为五谷丰素溶于甲醇的1H-NMR谱图，横坐标为化学位移值；
图9为五谷丰素溶于甲醇的13C-NMR谱图，横坐标为化学位移值；
图10为菌株NEAU6解磷、解钾作用检测结果；
图11为菌株NEAU6的孢子水悬浮液对农作物种子胚根和胚芽的促生作用，其中A：水稻，B：小麦，C：玉米。
具体实施方式
下面将结合实施实例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域的技术人员将会理解，下列实施实例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。
本发明提供一株链霉菌(Streptomyces sp.)，菌株号为NEAU6，已于2018年08月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC 16338
本发明所用的培养基、试剂等如无特殊说明，均可由市场购得。
下述实施实例中涉及的培养基及其配方如下：
高氏一号琼脂培养基：可溶性淀粉20g，NaCl 0.5g，KNO3 1g，FeSO4.7H2O 0.01g，K2HPO4 0.5g，MgSO4.7H2O 0.5g，琼脂20g，蒸馏水1000mL，pH 7.2-7.4。
燕麦琼脂培养基(ISP3)：燕麦20g，煮沸30min后用四层纱布过滤，滤液用自来水补足至1000mL，加KNO3 0.2g，MgSO4.7H2O 0.2g，K2HPO4 0.5g，琼脂20g。
马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)：马铃薯200g，洗净切成小块煮沸约30min后用四层纱布过滤，滤液用自来水补足至1000mL，加葡萄糖20g，琼脂20g。
胡萝卜琼脂培养基(CA)：胡萝卜200g，榨汁后用四层纱布过滤，滤液用蒸馏水补足至 1000mL，加20g琼脂。
种子培养基：胰蛋白胨17g，大豆蛋白胨3g，NaCl 5g，K2HPO4 2.5g，葡萄糖2.5g，蒸馏水1000mL，pH 7.2-7.4。
发酵培养基：可溶性淀粉10g，葡萄糖10g，甘油10g，胰蛋白胨5g，酵母粉5g，CaCO33g，自来水1000mL，pH 7.2-7.4。
解磷测定-液体培养基：葡萄糖10g，(NH4)2SO4 0.5g,NaCl 0.3g，KCl 0.3g，FeSO4·7H2O 0.3g，MgSO4·7H2O 0.3g，MnSO4·4H2O 0.03g，酵母膏0.4g，Ca3(PO4)2 10g，蒸馏水1000mL， pH 7.0-7.5。
解钾测定-液体培养基：葡萄糖10g，NH4NO3 3g，NaH2PO4 1g，FeSO4·7H2O 1g，MgSO4·7H2O 1g，钾矿粉1.5g，蒸馏水1000mL，pH 7.0-7.4。
实施例1.链霉菌NEAU6的筛选及鉴定
1.菌株的筛选：将采自黑龙江省五常市凤凰山的重楼根部样品室温干燥24h，然后超声波(160W，KH-160TDV，禾创)处理15min，用以去除表面泥土及附着细菌。样品切成5mm左右的小段，然后进行以下七步的表面消毒:(1)用含放线菌酮(100mg/L)和萘啶酮酸(20mg/L) 的水溶液冲洗1min；(2)用无菌水冲洗3遍；(3)用5％NaOCl冲洗5min；(4)用2.5％Na2S2O3冲洗10min；(5)用75％乙醇冲洗5min；(6)无菌水冲洗3遍；(7)10％NaHCO3冲洗10min。将表面消毒后的样品放入烘箱100℃干燥15min。每100mg样品与1ml水混合，用研钵研磨成水溶液，4℃冰箱沉降10-20min，将上清液涂布于含有放线菌酮(50mg/L)和萘啶酮酸(20 mg/L)的高氏一号培养基上，28℃培养2-3周，对长出的放线菌转移到ISP3培养基上。
2.菌株鉴定：
(1)形态特征：通过牙签点接法将菌株点接到ISP3培养基上，培养两周，观察菌落形态。可见气生菌丝颜色为灰色，基内菌丝颜色为棕黑色，如图1。
(2)菌丝及孢子形态：扫描电镜下观察可见链霉菌NEAU6气生菌丝呈螺旋状，孢子成链，椭圆形，表面呈疣状，如图2。
(3)分子鉴定：PCR获取16S rDNA序列，如SEQ ID NO：1所示，Genbank的登录号为KX679573，在NCBI数据库中Blast相似序列，采用Mega 7.0软件中的Neighbor-joining 法将同源性较高的菌株序列构建系统发育树。经系统发育树分析可见菌株NEAU6与生暗灰链霉菌(Streptomyces caniferus)NBRC 15389聚在同一分支上，且相似性为100％，如图3。
综上，通过16S rDNA序列分析及菌株形态观察结果，将菌株NEAU6鉴定为生暗灰链霉菌(Streptomyces caniferus)。
实施例2.链霉菌NEAU6拮抗活性筛选。
本实施例考察链霉菌NEAU6在抑制引起植物病害的病原真菌活性的作用。
1.本实施所用的植物病原菌为农业生产上常见的15种植物病原真菌，各菌种及来源如下：水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)，黄瓜褐斑病菌(Corynespora cassiicola)，黄瓜炭疽病菌(Colletotrichum orbiculare)，番茄早疫病菌(Alernaria solani)和辣椒疫霉病菌 (Phytophthora capsici)，由中国农科院蔬菜花卉研究所提供；玉米小斑病菌(Helminthosporium maydis)，玉米大斑病菌(Setosphaeriaturcica turcicaf)，玉米黑穗病菌(Sphacelotheca reiliana) 和玉米弯孢病菌(Curvularia lunata)，大豆根腐病菌(Fusarium oxysporum)，大豆菌核病菌 (Sclerotinia sclerotiorum)，大豆疫霉病菌(Phytophthora sojae)，黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum(Schl.)F.sp cucumerinumOwen)，番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)和番茄黄萎病菌 (Verticillium dahliaeKleb)，由东北农业大学提供。
2.病原菌培养方法：水稻纹枯病菌、玉米小斑病菌、玉米大斑病菌、玉米黑穗病菌、玉米弯孢病菌、大豆根腐病菌、大豆菌核病菌、黄瓜枯萎病菌、黄瓜褐斑病菌、黄瓜炭疽病菌、番茄早疫病菌、番茄灰霉病菌和番茄黄萎病菌在PDA培养基上培养；辣椒疫霉病菌和大豆疫霉病菌在CA培养基上培养；水稻纹枯病菌、玉米小斑病菌、玉米大斑病菌、玉米黑穗病菌、玉米弯孢病菌、大豆根腐病菌、黄瓜枯萎病菌、黄瓜褐斑病菌、黄瓜炭疽病菌、番茄早疫病菌、番茄灰霉病菌、番茄黄萎病菌和大豆疫霉病菌在28℃恒温下培养；大豆菌核病菌和辣椒疫霉病菌在20℃恒温下培养。
3.病原菌拮抗活性测定：采用平板对峙法。
具体步骤如下：将链霉菌NEAU6点接到PDA或CA培养基平板的一端，28℃培养3天后，在平板的另一端接病原菌菌饼，分别放在28℃或20℃培养，以仅接病原菌的平板做对照。待对照板中病原菌长满全板，此时用十字交叉法测抑菌直径，计算抑菌率。
抑制率％＝(对照菌落直径-处理菌落直径)/对照菌落直径×100。
抑菌活性测定结果表明(见表1和图4)，该菌对所有检测植物病原菌都有明显抑制作用，抑制效果最好的为黄瓜炭疽病菌，抑制率达到80％，对水稻纹枯病菌、玉米小斑病菌、黄瓜褐斑病菌、番茄早疫病菌、番茄灰霉病菌、番茄黄萎病菌及辣椒疫霉病菌也有显著的抑制效果，抑制率都在60％以上。
表1链霉菌NEAU6的抑制结果
Figure BDA0001993969560000051
实施例3.链霉菌NEAU6的植物促生特性测定。
本实施例考察链霉菌NEAU6产吲哚乙酸、五谷丰素的能力、解磷、解钾的能力、促进植物胚根和胚芽生长的能力以及对农作物大田产量提高的作用。具体如下：
1.产吲哚乙酸能力
向菌种斜面上加入10ml无菌水，用已灭菌的接种环刮下孢子制成孢子悬液，使其浓度为 107c.f.u.ml-1。然后取2ml孢子悬液接种于种子培养摇瓶中，种子摇瓶装液量为25ml/250ml，置于200rpm旋转式摇床，30℃培养2天。将种子液按6％(v/v)接种量接种于发酵培养基， 30℃，200rpm培养5天。离心去除菌体，上清液用等体积乙酸乙酯萃取两遍，浓缩得到链霉菌NEAU6的次级代谢产物。采用Salkowski比色法测定链霉菌NEAU6产吲哚乙酸能力。
结果显示，链霉菌NEAU6发酵液与Salkowski试剂反应显粉红色，说明该菌能产吲哚乙酸(见图5)。
2.产五谷丰素能力
向菌种斜面上加入10ml无菌水，用已灭菌的接种环刮下孢子制成孢子悬液，使其浓度为 107c.f.u.ml-1。然后取2ml孢子悬液接种于种子培养摇瓶中，种子摇瓶装液量为25ml/250ml，置于200rpm旋转式摇床，30℃培养2天。将种子液按6％(v/v)接种量接种于发酵培养基，30℃，200rpm培养5天。离心去除菌体，上清液用等体积乙酸乙酯萃取3-4次，将萃取液浓缩后依次进行硅胶柱层析、凝胶层析、C-18柱层析，层析后得到该化合物。
通过1H-NMR，13C-NMR，MS波谱分析确定该化合物结构，结构式如图6所示，1H-NMR，13C-NMR，MS谱图如图7、图8和图9所示。
3.解磷、解钾能力
无菌条件下，刮取适量链霉菌NEAU6孢子，分别接种于含有磷酸钙的解磷培养基和含有钾矿粉的解钾培养基中，每个实验做三组重复，28℃，150r/min摇床培养7天后，取培养液6000rpm离心10min，釆用紫外分光光度计法测定上清液中的可溶性磷含量，釆用火焰分光光度计法测定上清液中的可溶性钾含量。
结果显示，链霉菌NEAU6具有一定的解磷、解钾能力(见图10)，解磷为556.75mg/L，解钾为486.81mg/L
4.种子发芽试验
向每个垫有滤纸的培养皿内均匀摆放10粒种子(提前进行表面消毒和8h浸种处理)，再在种子上面平铺一张滤纸，将2mL各梯度(1×103-1×109CFU/mL)链霉菌NEAU6孢子悬浮液加入到培养皿中，空白对照CK为无菌水处理。共8个处理，每个处理3次重复。培养5 天后，对种子的胚根和胚芽进行测量。
试验结果显示(见表2、表3、表4和图11)，该菌对检测的三种农作物种子(水稻、小麦和玉米)的胚根和胚芽都有促生活性，尤其在菌株孢子浓度为1ⅹ106和1ⅹ107CFU/mL时，促生效果显著。
表2链霉菌NEAU6对水稻种子的促生结果
Figure BDA0001993969560000061
Figure BDA0001993969560000071
表3链霉菌NEAU6对小麦种子的促生结果
Figure BDA0001993969560000072
表4链霉菌NEAU6对玉米种子的促生结果
Figure BDA0001993969560000073
5.大田试验
(1)链霉菌NEAU6对水稻的促生作用。
选取一块土地评价链霉菌NEAU6在大田条件下对水稻生长的影响，土壤为黑土，肥力适中。在播种前，用链霉菌NEAU6的孢子悬浮液(浓度为1×107CFU/mL)将水稻种子浸种处理48小时，对照组为清水处理。将种子取出后均匀平铺在育苗盘(40cm*60cm)中，进行常规播种育苗。35天后将生长势一致的水稻幼苗移栽到水田中，每个处理5个小区，每个小区10行，行长5m，幼苗间行距为30cm，株距为15cm，常规施肥和田间管理。收获时，每处理随机选取30株水稻典型株，测量株高、剑叶长、穗数、穗长、穗粒数、穗粒重、千粒重和结实率，并计算每亩籽粒产量。结果如表5。
表5链霉菌NEAU6对水稻的促生作用
Figure BDA0001993969560000081
(2)链霉菌NEAU6对玉米的促生作用。
选取一块土地评价链霉菌NEAU6在大田条件下对玉米生长的影响，土壤为黑土，肥力适中。在播种前，用链霉菌NEAU6的孢子悬浮液(浓度为1×107CFU/mL)将玉米种子浸种处理24小时，对照组为清水处理。将种子取出并晾干，进行常规播种，每个处理5个小区，每个小区10行，行长5m，幼苗间行距为65cm，株距为25cm，常规施肥和田间管理。收获时，每处理随机选取30株玉米，测量株高、穗位高、穗粗、有效穗长、穗行数、行粒数和百粒重，并计算每亩籽粒产量。结果如表6。
表6链霉菌NEAU6对玉米的促生作用
Figure BDA0001993969560000082
Figure BDA0001993969560000091
(3)链霉菌NEAU6对小麦的促生作用。
选取一块土地评价链霉菌NEAU6在大田条件下对小麦生长的影响，土壤为黑土，肥力适中。在播种前，用链霉菌NEAU6的孢子悬浮液(浓度为1×107CFU/mL)将小麦种子浸种处理8小时，对照组为清水处理。将种子取出并晾干，进行常规播种，每个处理5个小区，每个小区10行，行长5m，幼苗间行距为20cm，常规施肥和田间管理。收获时，每处理随机选取30株小麦，测量株高，根长，穗长，穗粒数，穗粒重，千粒数，并计算每亩籽粒产量。结果如表7。
表7链霉菌NEAU6对小麦的促生作用
Figure BDA0001993969560000092
(4)链霉菌NEAU6对蔬菜的促生作用。
分别对包括番茄、黄瓜、辣椒、茄子、生菜结球生菜、白菜等蔬菜以灌根的方式施用链霉菌NEAU6孢子悬浮液(浓度为1×107CFU/mL)。分别测定施用菌株NEAU6孢子悬浮液后蔬菜的增产率。
表8 链霉菌NEAU6对蔬菜的促生作用
Figure BDA0001993969560000093
Figure BDA0001993969560000101
由此可见，本发明提供的链霉菌NEAU6对农业生产上发生严重的15种植物病原真菌有显著的拮抗作用，抑菌普广；还可产生植物生长刺激物质吲哚乙酸和五谷丰素，且该菌株具有解磷、解钾能力。将该菌株的孢子水悬浮液作用于小麦、水稻及玉米种子，可明显促进种子的胚根和胚芽生长。将该菌株的孢子水悬浮液浸种或灌根，可显著提高多种农作物的大田产量。
综上，本发明获得的链霉菌NEAU6具有广谱的植物抗病和促生能力，可为研究开发环境友好型的放线菌菌剂提供优质的材料。
核苷酸序列表
<110> 东北农业大学
<120> 一株链霉菌及其应用
<130>
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 1521
<212> DNA
<213> 链霉菌NEAU6的16S rDNA序列
<400> 1
agagtttgat cctggctcag gacgaacgct ggcggcgtgc ttaacacatg caagtcgaac 60
gatgaacctc cttcgggagg ggattagtgg cgaacgggtg agtaacacgt gggcaatctg 120
cccttcactc tgggacaagc cctggaaacg gggtctaata ccggatacga ccaccgaccg 180
catggtctgg tggtggaaag ctccggcggt gaaggatgag cccgcggcct atcagcttgt 240
tggtggggtg atggcctacc aaggcgacga cgggtagccg gcctgagagg gcgaccggcc 300
acactgggac tgagacacgg cccagactcc tacgggaggc agcagtgggg aatattgcac 360
aatgggcgaa agcctgatgc agcgacgccg cgtgagggat gacggccttc gggttgtaaa 420
cctctttcag cagggaagaa gcgagagtga cggtacctgc agaagaagcg ccggctaact 480
acgtgccagc agccgcggta atacgtaggg cgcaagcgtt gtccggaatt attgggcgta 540
aagagctcgt aggcggcttg tcacgtcgga tgtgaaagcc cggggcttaa ccccgggtct 600
gcattcgata cgggcaggct agagttcggt aggggagatc ggaattcctg gtgtagcggt 660
gaaatgcgca gatatcagga ggaacaccgg tggcgaaggc ggatctctgg gccgatactg 720
acgctgagga gcgaaagcgt ggggagcgaa caggattaga taccctggta gtccacgccg 780
taaacgttgg gaactaggtg tgggcgacat tccacgtcgt ccgtgccgca gctaacgcat 840
taagttcccc gcctggggag tacggccgca aggctaaaac tcaaaggaat tgacgggggc 900
ccgcacaagc agcggagcat gtggcttaat tcgacgcaac gcgaagaacc ttaccaaggc 960
ttgacataca ccggaaacgt ctggagacag gcgccccctt gtggtcggtg tacaggtggt 1020
gcatggctgt cgtcagctcg tgtcgtgaga tgttgggtta agtcccgcaa cgagcgcaac 1080
ccttgttctg tgttgccagc atgcccttcg gggtgatggg gactcacagg agactgccgg 1140
ggtcaactcg gaggaaggtg gggacgacgt caagtcatca tgccccttat gtcttgggct 1200
gcacacgtgc tacaatggcc ggtacaatga gctgcgatac cgcgaggtgg agcgaatctc 1260
aaaaagccgg tctcagttcg gattggggtc tgcaactcga ccccatgaag tcggagttgc 1320
tagtaatcgc agatcagcat tgctgcggtg aatacgttcc cgggccttgt acacaccgcc 1380
cgtcacgtca cgaaagtcgg taacacccga agccggtggc ccaacccctt gtgggaggga 1440
atcgtcgaag gtgggactgg cgattgggac gaagtcgtaa caaggtagcc gtaccggaag 1500
gtgcggctgg atcacctcct t 1521

Claims (7)

1.一株生暗灰链霉菌（Streptomyces caniferus）NEAU6，其特征在于，所述生暗灰链霉菌NEAU6保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC16338。
2.权利要求1所述的生暗灰链霉菌NEAU6在促进植物胚根和胚芽生长中的应用。
3.权利要求1所述的生暗灰链霉菌NEAU6在抑制引起植物病害的病原真菌活性中的应用。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述引起植物病害的病原真菌包括水稻纹枯病菌（Rhizoctonia solani）、玉米小斑病菌（Helminthosporium maydis）、玉米大斑病菌（Setosphaeriaturcica turcicaf）、玉米黑穗病菌（Sphacelotheca reiliana）、玉米弯孢病菌（Curvularia lunata）、大豆根腐病菌（Fusarium oxysporum）、大豆菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）、大豆疫霉病菌（Phytophthora sojae）、黄瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum (Schl.) F.sp cucumerinum Owen）、黄瓜褐斑病菌（Corynespora cassiicola）、黄瓜炭疽病菌（Colletotrichum orbiculare）、番茄早疫病菌（Alernaria solani）、番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea）、番茄黄萎病菌（Verticillium dahliaeKleb）和辣椒疫霉病菌（Phytophthora capsici）。
5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的植物包括水稻、小麦和玉米。
6.权利要求1所述的生暗灰链霉菌NEAU6在提高农作物大田产量中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的农作物包括水稻、玉米、小麦、生菜、结球生菜、白菜、油菜、辣椒、茄子、黄瓜及番茄。
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