CN109691670A - 一种铁皮石斛酵素液的制备方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种铁皮石斛酵素液的制备方法及其应用，包括以下步骤：选取生长2～3年的铁皮石斛；去叶，取茎段，切碎，烘干，打粉；加水煮沸冷却后，接种复合菌进行发酵；发酵液加复合酶酶解，过滤后收集滤液制得铁皮石斛酵素。本发明所述方法周期短，生产过程中原料无损失，零废弃物排放，是一种产品产出率高、生产工艺简单、绿色环保的生产方法。本发明获得的发酵液可以添加于食品工业生产过程制作保健型功能食品。此外，该发酵液还可以作为原料液添加到护肤品中，增强肌肤新陈代谢，帮助肌肤排出毒素和自由基，延缓肌肤衰老，促进皮肤血液循环，修复皮肤损伤，增加皮肤对紫外线抵抗力的作用。
Description
技术领域
本发明涉及发酵液技术领域，特别是涉及一种铁皮石斛酵素液的制备方 法，并应用于保健食品和护肤品原料中。
背景技术
铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)为兰科石斛属多年 生附生型草本植物。铁皮石斛是我国名贵中药材，2015版《中华人民共和国 药典》中规定铁皮石斛的茎作为药用部位。铁皮石斛含有多糖、黄酮类物质、 氨基酸、甘露糖和生物碱等有效成分，具有滋阴清热、润肺益肾、生津养胃、 抗衰老、抗氧化和免疫调节作用，在药品、保健食品和化妆品的功效原料方面 有着广泛的应用价值和市场前景。
酵素液是蔬菜、菇类、水果、中药等在特定的条件下，经过一段时间的发 酵而得到的液体。酵素液由于工艺比较简单，是酵素产品中最安全的一类。酵 素产品起源于日本，始于二十世纪初，迄今已有长达80多年的历史，风靡于 欧美地区。“酵素”可增强人体新陈代谢，清除体内不全代谢产物，迅速活化 生理机能，制造新的细胞，是肠道健康的最佳保障。酵素也是美容催化剂，能 抑制皮肤老化，参与角质层新陈代谢，修复皱纹，延缓皮肤老化速度。
近年来，将中药作为益生菌发酵基质的研究与应用越来越多，具有活性成 分的药性基质被益生菌发酵，既能提供益生菌所需营养大量生长菌体，同时又 能因益生菌的代谢对基质中的纤维、糖类和蛋白质等物质加以利用，改变其原 来的组织成分，促进中药中的某些成分进行转化，提高其效用。
发明内容
本发明的目的是提供一种复合益生菌发酵铁皮石斛制得酵素液的方法，该 方法周期短，生产过程中原料无损失，零废弃物排放，是一种产品产出率高、 生产工艺简单、绿色环保的生产方法。
本发明的另一目的是提供铁皮石斛酵素液在保健型功能食品，作为原料液 添加到护肤品中的应用。
为实现上述目的，本发明提供了如下方案：
本发明提供一种铁皮石斛酵素液的制备方法，包括以下步骤：
(1)选取生长2～3年的铁皮石斛；去叶，取茎段，切碎，烘干，打粉， 备用；
(2)将步骤(1)中处理后的铁皮石斛干粉，按照质量比为1:50～100 加水煮沸，得到铁皮石斛溶液，冷却备用；
(3)将复合菌培养液接种到步骤(2)的溶液中，得到混合液，使得混合 液中复合菌培养液的体积分数为10～20％，将混合液装入锥形瓶，密封锥形瓶， 静置发酵，得到发酵液；
(4)将步骤(3)中制得的发酵液煮沸，冷却后200目尼龙布过滤，得到 滤液；
(5)将步骤(4)所得滤液保温至50℃，加入复合酶液处理2～3小时， 处理温度为50℃，过滤，得到铁皮石斛酵素液。
优选的，所述酿酒酵母菌培养液的有效活菌数为1.80×107cfu,所述嗜酸 乳杆菌培养液的有效活菌数为1.44×108cfu。
优选的，步骤(3)中，所述复合菌液为酿酒酵母菌培养液和嗜酸乳杆菌 培养液的混合液，混合体积比为1:1。
优选的，步骤(3)中，所述发酵的时间为24小时，所述发酵的温度为 30℃。
优选的，所述复合酶液为食品级果胶酶和胰蛋白酶，复合比例为1:1，添 加量按体积比为0.1％，所述果胶酶的酶活力为1万单位/g，所述胰蛋白酶的 酶活力为1万单位/g。
优选的，步骤(3)中，所述的酿酒酵母菌培养液和嗜酸乳杆菌培养液制 备方法为：将酿酒酵母菌和嗜酸乳杆菌用接种环画斜线分别接种于平板培养基 上，在30℃下培养18小时至菌落出现，从平板培养基上挑取菌落分别接种于 摇瓶种子培养基中，在30℃下，酿酒酵母菌振荡培养20小时，振荡速度为200 r/min，得到酿酒酵母菌培养液；嗜酸乳杆菌静置培养20小时，得到嗜酸乳杆 菌培养液。
优选的，所述平板培养基为PDA琼脂培养基，含2.0％琼脂，pH为6.0； 所述摇瓶种子培养基为PDA液体培养基，pH为6.0。
本发明还提供了一种铁皮石斛酵素液的应用：所述铁皮石斛酵素液可以添 加于食品工业生产过程，制作保健型功能食品。
本发明还提供了一种铁皮石斛酵素液的应用：所述铁皮石斛酵素液作为原 料液在护肤品中的应用。
优选的，在所述铁皮石斛酵素液中按体积比7:3添加丙二醇，混合均匀， 除菌处理后获得原料液，添加进护肤品中。
本发明具有以下技术效果：
本发明通过精选铁皮石斛的茎段，改进发酵工艺，接种好氧的酵母菌和厌 氧的乳酸菌进行共同发酵，所获得的酵素液可以作为添加于食品工业生产过程 制作保健型功能食品，还可以作为原料液添加到护肤品中，拓宽了铁皮石斛的 应用领域。而且，制备铁皮石斛酵素液的原料来源安全，生产周期短，生产工 艺简单，生产过程中原料无损失，零废弃物排放。
附图说明
图1为本发明的工艺流程图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所 描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明 中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有 其他实施例，都属于本发明保护的范围。
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合具体实 施方式对本发明作进一步详细的说明。
本发明实施例中的菌种：酿酒酵母菌、嗜酸乳杆菌由华南农业大学植物种 质保护与利用研究中心保存，购自中国普通微生物菌种保藏管理中心编号为2.3854的酿酒酵母菌和编号为1.1854的嗜酸乳杆菌。
本发明实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得 到。
实施例1
(1)铁皮石斛酵素液的原料
制备铁皮石斛酵素液的原料由以下组分组成：新鲜两年生铁皮石斛300g， 凉开水3000g。
(2)复合菌液的制备
平板培养基为PDA琼脂培养基，含2.0％琼脂，pH为6.0；
摇瓶种子培养基为PDA液体培养基，pH为6.0。
酿酒酵母菌培养液的制备：将酿酒酵母菌用接种环画斜线接种于平板培养 基上，在30℃下培养18小时至菌落出现，从平板培养基上挑取单菌落接种于 300毫升培养基中，在30℃下，振荡培养20小时，振荡速度为200r/min， 得到酿酒酵母菌培养液，所述酿酒酵母菌培养液的有效菌落数为1.80×107 cfu；
嗜酸乳杆菌培养液的制备：将嗜酸乳杆菌用接种环画斜线接种于平板培养 基上，在30℃下培养18小时至菌落出现，从平板培养基上挑取单菌落接种于 300毫升的培养基中，在30℃下，嗜酸乳杆菌静置培养20小时，得到嗜酸乳 杆菌培养液，所述嗜酸乳杆菌培养液的有效菌落数为1.44×108cfu。
复合菌液的制备：将上述酿酒酵母菌培养液和嗜酸乳杆菌培养液按1:1 比例混合。
(3)铁皮石斛酵素液的制备
a、准确称量步骤(1)中的原料，将铁皮石斛洗干净，去掉叶子和部分叶 鞘，晾干，切成1cm左右的小段，50℃烘干至恒重，用中药打粉机打磨成粉， 备用；
b、将步骤a的铁皮石斛粉加入3000g饮用水，煮沸冷却，备用；
c、将步骤(2)中制备的复合菌培养液接种到步骤b制得的溶液中，单一 菌接种量分别占发酵总体积的10％，分装入1L锥形瓶内，密封锥形瓶，在30℃ 下静置发酵24小时，得到发酵液；
d、将步骤c中制得的发酵液经煮沸冷却至50℃后，静置，200目尼龙布 过滤除渣，然后加入复合酶液，复合体积比为1:1，添加量为30mL，果胶酶的 酶活力为1万单位/g，胰蛋白酶的酶活力为1万单位/g，50℃下静置恒温酶解 3小时，过滤后即得到铁皮石斛酵素液。
(4)用于保健食品原料的制备
将步骤(3)制得的铁皮石斛酵素液分装入灌，在105℃下除菌处理20min， 获得用于保健食品的原料液。
实施例2
(1)铁皮石斛酵素液的原料
制备铁皮石斛酵素液的原料由以下组分组成：新鲜三年生铁皮石斛500g， 凉开水5000g。
(2)复合菌液的制备
平板培养基为PDA琼脂培养基，含2.0％琼脂，pH为6.0；
摇瓶种子培养基为PDA液体培养基，pH为6.0。
酿酒酵母菌培养液的制备：将酿酒酵母菌用接种环画斜线接种于平板培养 基上，在30℃下培养18小时至菌落出现，从平板培养基上挑取单菌落接种于 500毫升培养基中，在30℃下，振荡培养20小时，振荡速度为200r/min， 得到酿酒酵母菌培养液；
嗜酸乳杆菌培养液的制备：将嗜酸乳杆菌用接种环画斜线接种于平板培养 基上，在30℃下培养18小时至菌落出现，从平板培养基上挑取单菌落接种于 500毫升的培养基中，在30℃下，嗜酸乳杆菌静置培养20小时，得到嗜酸乳 杆菌培养液。
复合菌液的制备方法为：将上述酿酒酵母菌培养液和嗜酸乳杆菌培养液按 1:1比例混合。
(3)铁皮石斛酵素液的制备
a、准确称量步骤(1)中的原料，将铁皮石斛洗干净，去掉叶子和部分叶 鞘，晾干，切成1cm左右的小段，50℃烘干至恒重，用中药打粉机打磨成粉， 备用；
b、将步骤a的铁皮石斛粉加入5000g凉开水，煮沸冷却后用，备用；
c、将步骤(2)中制备的复合菌培养液接种到步骤b制得的溶液中，单一 菌接种量分别占发酵总体积的10％，分装入1L锥形瓶内，密封锥形瓶，在30℃ 下静置发酵24小时，得到发酵液；
d、将步骤c中制得的发酵液经煮沸冷却至50℃后，静置，200目尼龙布 过滤除渣，然后加入复合酶液，复合体积比为1:1，添加量为0.1％，果胶酶的 酶活力为1万单位/g，胰蛋白酶的酶活力为1万单位/g，50℃下静置恒温酶解 3小时，过滤后即得到铁皮石斛酵素液。
(4)用于护肤品原料的制备
将步骤(3)制得的铁皮石斛酵素液按体积比7:3添加食品级丙二醇，充 分混匀后，灌装，在105℃下除菌处理20min，获得用于护肤品的原料液。
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范 围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发 明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护 范围内。
Claims (9)
1.一种铁皮石斛酵素液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)选取生长2～3年的铁皮石斛，去叶，取茎段，切碎，烘干，打粉，备用；
(2)将步骤(1)中处理后的铁皮石斛干粉，按照质量比1:50～100加水煮沸，得到铁皮石斛溶液，冷却备用；
(3)将复合菌培养液接种到步骤(2)的铁皮石斛溶液中，得到混合液，使得混合液中复合菌培养液的体积分数为10～20％，将混合液装入锥形瓶，密封锥形瓶，静置发酵，得到发酵液；
(4)将步骤(3)中制得的发酵液煮沸，冷却后200目尼龙布过滤，得到滤液；
(5)将步骤(4)所得滤液保温至50℃，加入复合酶液处理2～3小时，处理温度为50℃，过滤，得到铁皮石斛酵素液。
2.根据权利要求1所述的铁皮石斛酵素液的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，所述复合菌培养液为酿酒酵母菌培养液和嗜酸乳杆菌培养液的混合液，混合比例为1:1。
3.根据权利要求2所述的铁皮石斛酵素液的制备方法，其特征在于：所述酿酒酵母菌培养液的有效活菌数为1.80×107cfu,所述嗜酸乳杆菌培养液的有效活菌数为1.44×108cfu。
4.根据权利要求1所述的铁皮石斛酵素液的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，所述发酵的时间为24小时，所述发酵的温度为30℃。
5.根据权利要求1所述的铁皮石斛酵素液的制备方法，其特征在于：步骤(5)中，所述复合酶液为食品级果胶酶和胰蛋白酶，按照体积比1:1混合得到，添加量按体积比为0.1％，所述果胶酶的酶活力为1万单位/g，所述胰蛋白酶的酶活力为1万单位/g。
6.根据权利要求2所述的铁皮石斛酵素液的制备方法，其特征在于：酿酒酵母菌培养液和嗜酸乳杆菌培养液制备方法为：将酿酒酵母菌和嗜酸乳杆菌用接种环画斜线分别接种于平板培养基上，在30℃下培养18小时至菌落出现，从平板培养基上挑取菌落分别接种于摇瓶种子培养基中，在30℃下，酿酒酵母菌振荡培养20小时，振荡速度为200r/min，得到酿酒酵母菌培养液；嗜酸乳杆菌静置培养20小时，得到嗜酸乳杆菌培养液。
7.根据权利要求6所述的铁皮石斛酵素液的制备方法，其特征在于：所述平板培养基为PDA琼脂培养基，含2.0％琼脂，pH为6.0；所述摇瓶种子培养基为PDA液体培养基，pH为6.0。
8.如权利要求1～7任一项所述的铁皮石斛酵素液的制备方法制备的铁皮石斛酵素液在制作保健型功能食品的应用，其特征在于：所述铁皮石斛酵素液直接添加于食品工业生产过程。
9.如权利要求1～7任一项所述的铁皮石斛酵素液的制备方法制备的铁皮石斛酵素液在护肤品中的应用，其特征在于：在所述铁皮石斛酵素液中按体积比7:3添加丙二醇，混合均匀，除菌处理后获得原料液，添加进护肤品中。
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