CN109689663B

CN109689663B - Menin-mll相互作用的螺二环抑制剂

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Publication number: CN109689663B
Application number: CN201780056188.3A
Authority: CN
Inventors: P.R.安吉博; V.潘德; B.赫克特; D.J.科罗斯基; O.A.G.克洛勒; I.N.C.皮拉特; A.N.帕特里克
Original assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Current assignee: Janssen Pharmaceutica NV
Priority date: 2016-09-14
Filing date: 2017-09-13
Publication date: 2023-04-14
Anticipated expiration: 2037-09-13
Also published as: US11220517B2; US20190211036A1; AU2017326487A1; IL265233A; HRP20210514T1; KR102493644B1; KR20190045242A; HUE053907T2; DK3512857T3; SI3512857T1; CN109689663A; AU2017326487B2; JP2019532100A; EP3512857B1; BR112019004691A2; JP6975791B2; LT3512857T; IL265233B; EP3512857A1; ES2872003T3

Abstract

本发明涉及用于在哺乳动物中进行治疗和/或预防的药物试剂，并且具体来说涉及螺二环化合物，包含此类化合物的药物组合物，以及它们作为menin/MLL蛋白/蛋白相互作用抑制剂用于治疗如下疾病：例如，癌症、骨髓增生异常综合症(MDS)和糖尿病的用途。

Description

MENIN-MLL相互作用的螺二环抑制剂

发明领域

本发明涉及用于在哺乳动物中进行治疗和/或预防的药物试剂，并且具体来说涉及螺二环化合物，包含这样的化合物的药物组合物，以及它们作为menin/MLL蛋白/蛋白相互作用抑制剂用于治疗如下疾病：例如，癌症、骨髓增生异常综合症(MDS)和糖尿病的用途。

发明背景

影响混合谱系白血病基因(MLL；MLL1；KMT2A)的染色体重排导致所有年龄组的侵袭性急性白血病，并且仍然主要表现为强调迫切需要新型治疗方法的不治之症。携带这些MLL染色体易位的急性白血病代表淋巴、骨髓或双表型疾病，并且在成人急性白血病中占5％至10％，并且在婴儿中占大约70％(Marschalek，BrJHaematol 2011，152(2)，141-54；Tomizawa等人，PediatrBlood Cancer[儿科血液与癌症]2007.49(2)，127-32)。

MLL是在赖氨酸4(H3K4)上甲基化组蛋白H3并在多蛋白复合物中起作用的组蛋白甲基转移酶。使用Mll1的可诱导的功能丧失功能等位基因表明，Mll1在维持造血干细胞(HSC)和发育B细胞中起重要作用，尽管其组蛋白甲基转移酶活性对于造血是非必要的(Mishra等人，Cell Rep[细胞报告]2011.7(4)，1239-47)。

迄今已报道MLL与多于60种不同配偶体进行融合，并与白血病的形成/进展有关(Meyer等人，Leukemia[白血病]2013.27，2165-2176)。有趣的是，MLL的SET(Su(var)3-9，zeste的增强子和trithorax)结构域不保留在嵌合蛋白中，而是被融合配偶体替换(Thiel等人，Bioessays[生物学分析]2012，34，771-80)。通过融合配偶体募集染色质修饰酶如Dot1L和/或pTEFb复合物导致包括作为最突出的HOXA基因(例如HOXA9)和HOX辅因子MEIS1的MLL靶基因的增强的转录和转录延伸。这些基因的异常表达反过来又阻断造血分化并增强增殖。

由多发性内分泌肿瘤1型(MEN1)基因编码的Menin被普遍表达，并且主要位于细胞核中。已经显示与许多蛋白质相互作用，并且因此涉及多种细胞过程。对menin最佳理解的功能是其作为MLL融合蛋白的致癌辅因子的作用。Menin与保留在所有融合蛋白、MBM1(menin结合基序1)和MBM2中的MLL的N端片段内的两种基序相互作用(Thiel等人，Bioessays[生物测定]2012，34，771-80)。Menin/MLL相互作用导致了用于晶状体上皮衍生的生长因子(LEDGF)的新的相互作用表面的形成。尽管MLL直接与LEDGF结合，但是menin对于MLL和LEDGF之间的稳定相互作用以及通过LEDGF的PWWP结构域的MLL复合物的基因特异性染色质募集是必须的(Cermakova等人，Cancer Res[癌症研究]2014.15,5139-51；Yokoyama&Cleary，Cancer Cell[癌症细胞]2008.8，36-46)。此外，许多遗传学研究已经表明，menin是严格要求通过MLL融合蛋白进行致癌性转化，表明menin/MLL相互作用是有吸引力的治疗靶。例如，Men1的条件性缺失预防异位表达MLL融合的骨髓祖细胞中的白血病发生(Chen等人，Proc Natl Acad Sci[美国国家科学院院刊]2006.103，1018-23)。类似地，通过功能缺失突变的menin/MLL融合相互作用的遗传破坏消除了MLL融合蛋白的致癌特性，阻断了体内白血病的发展，并释放了MLL转化的白血病母细胞的分化阻滞。这些研究还表明，要求menin通过MLL融合蛋白维持HOX基因表达是必需的(Yokoyama等人，Cell[细胞]2005，123，207-18)。另外，已经开发了表明这种蛋白/蛋白相互作用的药物性的menin/MLL相互作用的小分子抑制剂，并且还证明了在AML的临床前模型中的功效(Borkin等人，Cancer Cell[癌症细胞]2015.27,589-602；Cierpicki和Grembecka，Future Med Chem[未来医药化学]2014.6，447-462)。连同在正常造血期间，menin不是MLL1的必需辅因子(Li等人，Blood[血液]2013.122，2039-2046)的观察结果一起，这些数据证实了menin/MLL相互作用的破坏用于治疗MLL重排的白血病和其他具有活性HOX/MEIS1基因标记的癌症是有希望的新治疗方法。例如，在MLL基因的5'区域内的内部部分串联重复(PTD)表示主要发生在从头性和继发性AML以及骨髓发育不良综合症中的另一个主要畸变。尽管MLL-PTD的分子机制和生物学功能尚未得到充分的了解，但影响menin/MLL相互作用的新治疗靶向策略也可以在MLL-PTD相关的白血病治疗中有效。此外，已经显示去势抗性前列腺癌依赖于menin/MLL相互作用(Malik等人，Nat Med[自然医学杂志]2015.21，344-52)。

若干参考文献描述了靶向menin-MLL相互作用的抑制剂：WO2011029054，J MedChem[医药化学杂志]2016，59，892-913描述了噻吩并嘧啶和苯二氮卓衍生物的制备；WO2014164543描述了噻吩并嘧啶和噻吩并吡啶衍生物；Nature ChemicalBiology[自然化学生物学]2012年3月，8，277-284和Ren,J.等人Bioorg Med Chem Lett[生物有机和药物化学通讯](2016)，http://dx.doi.org/10.1016/j.bmcl.2016.07.074描述了噻吩并嘧啶衍生物；J Med Chem[医药化学杂志]2014，57，1543-1556描述了羟基-和氨甲基哌啶衍生物；以及FutureMed Chem[未来医药化学]2014，6，447-462综述了小分子和模拟肽化合物。在WO2017112768中描述了menin-MLL相互作用的抑制剂。

发明说明

本发明涉及新颖的具有式(I)的化合物

以及其互变异构体和立体异构体形式，其中

R¹选自下组，该组由以下各项组成：CH₃、CH₂F、CHF₂，和CF₃；

R²选自下组，该组由以下各项组成：氢和CH₃；

L¹表示含有一个或两个N原子的7元至10元饱和螺杂二环系统，前提是它是N-连接至噻吩并嘧啶基杂环；并且

--L²-R³选自(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)，或(g)，其中

(a)L²选自下组，该组由以下各项组成：>SO₂、>CR^4aR^4b，和-CHR^4aCHR⁵-；其中

(i)当L²连接至L¹的碳原子时，那么R^4a和R⁵各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；-OR⁶；-NR^7aR^7b；-C(＝O)NR^7aR^7b；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR⁸、和-NR^9aR^9b；以及含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；

(ii)当L²连接至L¹的氮原子时，那么R^4a选自下组，该组由以下各项组成：氢；-C(＝O)NR^7aR^7b；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR⁸、和-NR^9aR^9b；以及含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；

R⁵选自下组，该组由以下各项组成：氢；-OR⁶；-NR^7aR^7b；-C(＝O)NR^7aR^7b；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR⁸、和-NR^9aR^9b；以及含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；

R^4b选自下组，该组由以下各项组成：氢和甲基；或R^4a和R^4b连同它们所附接的碳原子一起形成C_3-5环烷基或含有氧原子的C-连接的4元至6元杂环基；其中

R⁶、R^7a、R^7b、R⁸、R^9a和R^9b各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN，和-C(＝O)NR^10aR^10b；以及被选自下组的取代基取代的C_2-4烷基，该组由以下各项组成：

-OR¹¹和-NR^10aR^10b；其中

R^10a、R^10b和R¹¹各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；C_1-4烷基；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；并且

R³选自下组，该组由以下各项组成：Ar、Het¹、Het²，和7元至10元饱和螺碳二环系统；或

(b)L²选自下组，该组由以下各项组成：>CR^4cR^4d和-CHR^4cCHR^5a-，其中R^4c、R^4d，和R^5a各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢和C_1-4烷基；并且

R³选自下组，该组由以下各项组成：

其中R^12a、R^12b，和R^12c各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：任选地被-OH或-NH₂取代基取代的C_1-6烷基；以及-OC_1-6烷基；或

(c)--L²-R³是任选地被一个、两个或三个氟取代基取代的C_1-6烷基；或

(d)L²是O，并且R³选自下组，该组由以下各项组成：任选地被一个、两个或三个氟取代基取代的C_3-6烷基；Ar；Het¹；Het²；7元至10元饱和螺碳二环系统；-CH₂-Ar；-CH₂-Het¹；-CH₂-Het²；以及-CH₂-(7元至10元饱和螺碳二环系统)；当L²连接至L¹的碳原子时；或

(e)--L²-R³是-O-CHR⁵-R³，当L²连接至L¹的碳原子时，其中

R⁵选自下组，该组由以下各项组成：-C(＝O)NR^13aR^13b；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-OR¹⁴、和-NR^15aR^15b；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；其中

R^13a、R^13b、R¹⁴、R^15a和R^15b各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟和-C(＝O)NR^16aR^16b；以及被选自下组的取代基取代的C_2-4烷基，该组由以下各项组成：-OR¹⁷和-NR^16aR^16b；其中

R^16a、R^16b和R¹⁷各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；C_1-4烷基；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；并且

R³选自下组，该组由以下各项组成：氢；任选地被一个、两个或三个氟取代基取代的C_1-4烷基；-CN；Ar；Het¹；Het²；和7元至10元饱和螺碳二环系统；或

(f)--L²-R³是

其中

R¹⁸选自下组，该组由以下各项组成：氢；任选地被氟或-CN取代基取代的C_1-4烷基；和被选自下组的取代基取代的C_2-4烷基，该组由以下各项组成：-OR¹⁹和-NR^20aR^20b；其中

R¹⁹、R^20a和R^20b各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN和-C(＝O)NR^21aR^21b；被选自下组的取代基取代的C_2-4烷基，该组由以下各项组成：-OR²²和NR^21aR^21b；以及含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；其中

R^21a、R^21b和R²²各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢和C_1-4烷基；并且

R^18a选自下组，该组由以下各项组成：氢、氟和C_1-4烷基；

R^18b选自下组，该组由以下各项组成：氟、-OC_1-4烷基和任选地被1、2或3个氟取代基取代的C_1-4烷基；或

R^18a和R^18b与相同的碳原子结合并且一起形成C_3-5环烷基或含有氧原子的C-连接的4元至6元杂环基；或

(g)--L²-R³是

并且其中

Ar是苯基或萘基，其各自可以任选地被一个、两个或三个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素，-CN，-OR²⁴，-NR^25aR^25b，以及任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR²⁶、-NR^27aR^27b、和-C(＝O)NR^27aR^27b；

Het¹是选自下组的单环杂芳基，该组由以下各项组成：吡啶基、4-、5-或6-嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、4-或5-噻唑基、异噻唑基、噻二唑基，和异噁唑基；或选自下组的二环杂芳基，该组由以下各项组成：咪唑并噻唑基、咪唑并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、异苯并噁唑基、苯并异噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、异苯并呋喃基、吲哚基、异吲哚基、吲嗪基、二氢吲哚基、异二氢吲哚基、吲唑基、吡唑并吡啶基、吡唑并嘧啶基、咪唑并吡啶基、咪唑并吡嗪基、咪唑并哒嗪基；其各自可以任选地被一个、两个或三个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素，-CN，-OR²⁴，-NR^25aR^25b，以及任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR²⁶、-NR^27aR^27b、和-C(＝O)NR^27aR^27b；并且

Het²是任选地被一个、两个或三个取代基取代的非芳香族杂环基，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素，-CN，-OR²⁴，-NR^25aR^25b，和任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR²⁶、-NR^27aR^27b、和-C(＝O)NR^27aR^27b；

其中

R²⁴、R^25a、R^25b、R²⁶、R^27a、和R^27b各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟和-C(＝O)NR^28aR^28b；和被选自下组的取代基取代的C_2-4烷基，该组由以下各项组成：-OR²⁹和-NR^28aR^28b；其中

R^28a、R^28b和R²⁹各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；C_1-4烷基；以及含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物；

其前提是以下化合物，及其药学上可接受的加成盐和溶剂化物被排除在外：

应当理解，上述条件适用于下文所述的本发明的所有实施例。

本发明还涉及一种药物组合物，包含治疗有效量的式(I)化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，和药学上可接受的载体或赋形剂。

另外，本发明涉及具有式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，用作药物，并且涉及具有式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，用于在治疗或预防癌症、骨髓增生异常综合症(MDS)和糖尿病中使用。

在特定的实施例中，本发明涉及具有式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物，用于在治疗或预防癌症中使用。

在具体的实施例中，所述癌症选自以下各项：白血病，骨髓瘤或实体瘤癌症(例如，前列腺癌、肺癌、乳癌、胰腺癌、结肠癌、肝癌、黑色素瘤和胶质母细胞瘤等)。在一些实施例中，白血病包括急性白血病、慢性白血病、骨髓白血病、髓性白血病、成淋巴细胞白血病、淋巴细胞白血病,急性髓性白血病(AML)、慢性髓性白血病(CML)、急性成淋巴细胞白血病(ALL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、T细胞前淋巴细胞白血病(T-PLL)、大颗粒淋巴细胞白血病、毛细胞白血病(HCL)、MLL-重排白血病、MLL-PTD白血病、MLL增加的白血病、MLL-阳性白血病，展示HOX/MEIS1基因表达标记等的白血病。

本发明还涉及具有式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物与另外的药物试剂的组合的用途，该用途用于治疗或预防癌症、骨髓增生异常综合症(MDS)和糖尿病。

此外，本发明涉及一种用于制备根据本发明的药物组合物的方法，其特征在于药学上可接受的载体与治疗有效量的式(I)化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物紧密地混合。

本发明还涉及包含具有式(I)的化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物以及另外的药物试剂的产品，作为用于同时、单独或连续用于治疗或预防癌症、骨髓增生异常综合症(MDS)和糖尿病的组合制剂。

另外，本发明涉及一种治疗或预防温血动物的细胞增殖疾病的方法，该方法包括向该所述动物给予有效量的如在此定义的式(I)化合物、其药学上可接受的盐或溶剂化物或如在此定义的药物组合物或组合。

发明详细说明

如在此所用的术语‘卤基’或‘卤素’表示氟、氯、溴以及碘。

如在此所用的前缀‘C_x-y’(其中x和y是整数)是指一个给定基团中碳原子的数目。因此，C_1-6烷基含有从1到6个碳原子，C_3-6环烷基含有从3到6个碳原子，等等。

如在此用作基团或基团的一部分的术语‘C_1-4烷基’表示具有从1到4个碳原子的直链或支链饱和烃基，如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基等。

如在此用作基团或基团的一部分的术语‘C_2-4烷基’表示具有从2个至4个碳原子的直链或支链饱和烃基，如乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基等。

如在此用作基团或基团的一部分的术语‘C_1-6烷基’表示具有从1个至6个碳原子的直链或支链饱和烃基，如关于C_1-4烷基定义的基团以及正戊基、正己基，2-甲基丁基等。

如在此用作基团或基团的一部分的术语‘C_3-6烷基’表示具有从3个至6个碳原子的直链或支链饱和烃基，如正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、正己基，2-甲基丁基等。

如在此用作基团或基团的一部分的术语‘C_3-5环烷基’定义了具有从3个至5个碳原子的饱和的环状烃基，如环丙基、环丁基和环戊基。

如在此用作基团或基团的一部分的术语‘螺二环’表示环系统，其中两个环在单个原子处连接。这些系统的实例是含有一个或两个N原子的7元至10元饱和螺杂二环系统，其中这些氮原子中的其中一个通常连接至如在此定义的具有式(I)的化合物中的噻吩并嘧啶基杂环。这样的螺环系统包括，但不限于来自例如，哌啶、吡咯烷、氮杂环丁烷，和环丁烷环的组合的系统。这样的系统的实例包括，但不限于以下(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)和(g)等

其中a表示连接至噻吩并嘧啶基杂环的位置。技术人员将理解，在这些具体的实例中，当L²连接至L¹的氮原子时，用于在此定义的--L²-R³的选项适用于实例(a)-(f)；然而当L²连接至L¹的碳原子时，用于在此定义的--L²-R³的选项适用于实例(g)。

7元至10元饱和螺碳二环系统的实例包括，但不限于

等。

通常，每当术语‘取代的’用于本发明时，除非另外指明或从上下文是清楚的，它意为指明在使用‘取代的’的表述中指示的原子或基团上的一个或多个氢(特别是从1至4个氢、更特别是从1至3个氢、优选是1或2个氢、更优选是1个氢)被选自所指示组的选择项替代，其前提是未超过正常的化合价，并且该取代导致了化学稳定的化合物(即足够稳健以承受从反应混合物分离至有用的纯度的化合物)。

取代基和/或变量的组合是可容许的，只要这样的组合产生化学上稳定化合物即可。“稳定化合物”意欲指示足够稳健以经受住从反应混合物分离到适用纯度程度的化合物。

技术人员将理解，当原子或基团被‘取代基’取代时，是指所提及的原子或基团被选自指定基团的一个取代基取代。

技术人员将理解术语‘任选地取代的’是指使用‘任选地取代的’表示的原子或基团可以是或可以不是取代的(这分别表示取代的或未取代的)。

当一个部分上存在两个或更多个取代基时，在可能的情况下并且除非另外指明或上下文中是明确的，这些取代基可以取代相同原子上的氢，或者这些取代基可以取代在该部分不同原子上的氢原子。

技术人员将清楚，除非另外指明或从上下文是清楚的，杂环基上的取代基可以取代环碳原子上或环杂原子上的任何氢原子。

在本发明的上下文中，如果没有另外说明‘饱和’意指‘完全饱和’。

‘非芳香族基团’包含无芳香族性质的不饱和环系统，部分饱和和完全饱和的碳环和杂环系统。术语‘部分饱和’意指其中一种或多种环结构包含至少一个多重键(例如C＝C，N＝C键)的环。术语‘完全饱和’意指其中环原子之间不存在多重键的环。因此，除非另有说明，‘非芳香族杂环基’是具有例如，3个至12个环成员，更通常是5个至10个环成员的非芳香族单环或二环系统。单环基团的实例是含有4个至7个环成员，更通常是5个或6个环成员的基团。二环基团的实例是含有8个至12个，更通常是9个或10个环成员的那些。

含有选自氮、氧或硫(N、O、S)的至少一个杂原子的单环杂环基系统的非限制性实例包括，但不限于4元至7元杂环基系统，如氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、吡咯烷基、四氢呋喃基、哌啶基、哌嗪基、吡喃基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基，和四氢-2H-硫代吡喃基1,1-二氧化物，特别是氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、吡咯烷基、四氢呋喃基、哌啶基、哌嗪基、吡喃基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、吗啉基，以及硫代吗啉基。含有选自氮、氧或硫(N、O、S)的至少一个杂原子的二环杂环基系统的非限制性实例包括，但不限于八氢-1H-吲哚基，二氢吲哚基，

除非另外说明，每个可以通过任何可用的环碳原子(C-连接的)或氮原子(N-连接的)结合至具有式(I)的分子的剩余部分，并且在可能的情况下在根据实施例的碳原子和/或氮原子上可以任选地被取代。

含有至少一个氮原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基的实例包括，但不限于，氮杂环丁烷基、吡咯烷基和哌啶基，通过可用的碳原子结合至分子的剩余部分。

如在此单独使用或作为另一个基团的一部分使用的术语‘含有氧原子的C-连接的4元至6元杂环基’定义了含有氧原子的饱和环烃基，该环烃基具有从4个至6个环成员，如氧杂环丁烷基、四氢呋喃基，和四氢吡喃基。

每当取代基由化学结构表示时，‘---’代表连接到式(I)分子的剩余部分的键。

画在环系统中的线(例如‘---’)指示该键可以附接至任何适合的环原子。

如果没有另外说明，Het¹和Het²可以通过任何可用的环碳或氮原子适当地附接至具有式(I)分子的剩余部分。

将清楚的是，在可能的情况下饱和的环部分可以在碳原子和N-原子上都具有取代基，除非另有说明或者从上下文中清楚。

将清楚的是，当L²是>SO₂时，这相当于L²是-SO₂-。将清楚的是，当L²是>CR^4aR^4b，这相当于L是

例如，在化合物1中，L²是>CR^4aR^4b，其中R^4a和R^4b二者是氢。

类似地，将清楚的是，当L²是>CR^4cR^4d时，这相当于L是

当任何变量在任何成分中出现多于一次时，每条定义是独立的。

当任何变量在任何式(例如式(I))中出现多于一次时，每条定义是独立的。

如在此所用，术语‘受试者’是指是或已经是治疗、观察或实验的对象的动物，优选是哺乳动物(例如猫、狗、灵长类动物或人类)，更优选是人类。

如在此所用，术语‘治疗有效量’意指活性化合物或药物试剂的引发组织系统(动物或人类)的生物或医药应答的量，该生物或医药应答正为研究者、兽医、医药医生或其他临床医生所寻求，包括所治疗的疾病或障碍的症状的减轻或逆转。

术语‘组合物’旨在涵盖包含指定量的指定成分的产品，以及任何直接或间接由指定量的指定成分的组合产生的产品。

如在此所用，术语‘治疗’旨在是指其中可能减缓、中断、遏制或阻止疾病的进展的所有过程，但未必指示所有症状都全部消除。

如在此所用，术语‘(本)发明的一种或多种化合物’或‘根据(本)发明的一种或多种化合物’意指包括具有式(I)的化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

如在此所用，任何具有仅仅显示为实线并且不显示为实楔形键或虚楔形键的键的化学式，或者另外表示为围绕一个或多个原子具有特殊构型(例如R，S)的化学式，考虑每种可能的立体异构体，或者两种或更多种立体异构体的混合物。

在上文和下文中，术语‘一种或多种具有式(I)的化合物’意指包括其互变异构体和其立体异构体形式。

在上文或下文中，术语‘立体异构体’、‘立体异构形式’或‘立体化学异构形式’可互换使用。

本发明包括本发明的化合物呈纯立体异构体形式或呈两种或更多种立体异构体的混合物形式的所有立体异构体。

对映异构体是作为彼此的不可重叠镜像的立体异构体。对映异构体对的1：1混合物是外消旋体或外消旋混合物。

阻转异构体(atropisomer)(或限制构型异构体(atropoisomer))是具有特定空间构型的立体异构体，该特定空间构型由大位阻所致的围绕单键受限制的旋转所产生。具有式(I)的化合物的所有阻转异构形式意欲包括在本发明的范围内。

非对映体(或非对映异构体)是不为对映体的立体异构体，即它们不以镜像形式相关。如果化合物含有双键，那么取代基可以呈E或Z构型。

在二价环饱和的或部分饱和的基团上的取代基可以具有顺式-(cis-)或反式-(trans-)构型，例如，如果化合物包含双取代的环烷基，则取代基可以处于顺式或反式构型。

因此，本发明包括对映异构体、阻转异构体、非对映异构体、外消旋体、E异构体、Z异构体、顺式异构体、反式异构体以及其混合物，只要化学上可能即可。

所有那些术语(即对映异构体、阻转异构体、非对映异构体、外消旋体、E异构体、Z异构体、顺式异构体、反式异构体以及其混合物)的含义为熟练的人员所已知。

绝对构型是根据卡恩-英戈尔德-普雷洛格(Cahn-Ingold-Prelog)系统指定的。不对称原子处的构型由R或S规定。绝对构型未知的已拆分的立体异构体可以根据它们旋转平面偏振光的方向而由(+)或(-)指定。例如，绝对构型未知的已拆分的对映异构体可以根据它们旋转平面偏振光的方向而由(+)或(-)指定。

当鉴别特定立体异构体时，这意指所述立体异构体基本上不含其他立体异构体，即与少于50％、优选地少于20％、更优选地少于10％、甚至更优选地少于5％、特别是少于2％并且最优选地少于1％的其他立体异构体相关。因此，当式(I)化合物例如规定为(R)时，这意指该化合物实质上不含(S)异构体；当式(I)化合物例如规定为E时，这意指该化合物实质上不含Z异构体；当式(I)化合物例如规定为顺式时，这意指该化合物实质上不含反式异构体。

一些根据式(I)的化合物还能以其互变异构形式存在。尽管在以上式(I)中未明确指示，但是此类形式在它们可能存在的情况下旨在包括在本发明的范围内。由此得出，单一化合物可以按立体异构和互变异构形式存在。

药学上可接受的盐包括酸加成盐和碱加成盐。可以通过常规手段，例如通过使一种游离酸或一种游离碱形式与一个或多个当量的一种适当的碱或酸、任选地在一种溶剂中或在其中该盐不可溶的一种介质中进行反应，接着使用标准技术(例如，在真空中，通过冷冻干燥或通过过滤)去除所述溶剂或所述介质来形成此类盐。还可以通过将处于盐形式的本发明的化合物的一种反离子与另一种反离子进行交换，例如使用一种适合的离子交换树脂，来制备多种盐。

如在上文或下文提及的药学上可接受的盐意在包括具有式(I)的化合物及其溶剂化物能够形成的有治疗活性的无毒的酸加成盐和碱盐形式。

适当的酸包括例如无机酸，诸如氢卤酸(例如氢氯酸或氢溴酸)、硫酸、硝酸、磷酸以及类似酸；或有机酸，诸如例如乙酸、丙酸、羟基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸(即乙二酸)、丙二酸、琥珀酸(即丁二酸)、马来酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对-甲苯磺酸、环己氨基磺酸、水杨酸、对氨基水杨酸、扑酸以及类似酸。相反地，可以通过用适当的碱处理将所述盐形式转化为游离碱形式。

还可以通过用适当的有机和无机碱处理将包含酸性质子的具有式(I)的化合物及其溶剂化物转化为它们的无毒金属或胺盐形式。

适当的碱盐形式包括，例如铵盐、碱金属及碱土金属盐，例如锂、钠、钾、铯、镁、钙盐及类似物，以下有机碱的盐类：例如伯、仲及叔脂肪族与芳香族胺类例如甲胺、乙胺、丙胺、异丙胺、四种丁胺异构体、二甲胺、二乙胺、二乙醇胺、二丙胺、二异丙胺、二正丁胺、吡咯烷、哌啶、吗啉、三甲胺、三乙胺、三丙胺、奎宁环、吡啶、喹啉及异喹啉；苄星青霉素(benzathine)、N-甲基-D-葡糖胺、海巴胺盐(hydrabamine salt)、及以下氨基酸的盐类：例如像精氨酸、赖氨酸等。相反地，该盐形式可以通过用酸处理而转化成游离酸形式。

术语溶剂化物包括具有式(I)的化合物能够形成的其溶剂加成形式以及其盐。这样的溶剂加成形式的实例是例如水合物、醇化物等。

如在以下描述的方法中制备的本发明的化合物可以合成为对映异构体的混合物形式，特别是对映异构体的外消旋混合物，这些对映异构体可以根据本领域中已知的拆分程序相互分离。一种分离具有式(I)的化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物的对映异构形式的方式涉及使用手性固定相的液相层析。所述纯的立体化学异构形式还可以衍生自适当起始材料的相对应的纯的立体化学异构形式，其前提是反应立体特异性地发生。优选地，如果一种特定立体异构体是所希望的，所述化合物将通过制备的立体定向方法合成。这些方法将有利地使用对映异构体纯的起始材料。

本发明还包括本发明的同位素标记的化合物，这些同位素标记的化合物与在此列举的那些相同，但是事实上一个或多个原子由具有原子质量或质量数不同于自然中通常发现(或自然中发现的最多的那一个)的原子质量或质量数的原子所代替。

在此所指定的任何具体的原子或元素的所有同位素和同位素混合物都被认为是在本发明化合物的范围之内，不论是天然存在的或是合成地产生的，具有天然丰度或呈同位素富集的形式。可以包含在本发明化合物中的示例性同位素包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素，诸如²H、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹³N、¹⁵O、¹⁷O、¹⁸O、³²P、³³P、³⁵S、¹⁸F、³⁶Cl、¹²²I、¹²³I、¹²⁵I、¹³¹I、⁷⁵Br、⁷⁶Br、⁷⁷Br，以及⁸²Br。优选地，放射性同位素选自下组：²H、³H、¹¹C和¹⁸F。更优选地，该放射性同位素是²H。具体地说，氘化的化合物旨在包括在本发明的范围内。

本发明的某些同位素标记的化合物(例如，用³H和¹⁴C标记的那些)例如在底物组织分布测定中可以是用用的。氚化(³H)和碳-14(¹⁴C)同位素是有用的，因为它们使得制备和可检测性变得容易。此外，用更重同位素(诸如氘)(即，²H)取代可以提供由于更大的代谢稳定性而产生的某些治疗优点(例如，增加的体内半衰期或降低的剂量需求)并且因此在一些环境下可以是优选的。因此，在本发明的具体实施例中，R²选自氢或或氘，特别是氘。在另一个实施例中，L²可以是>C(²H)₂。正电子发射同位素(比如¹⁵O、¹³N、¹¹C和¹⁸F)对于正电子发射断层术(PET)研究是有用的。癌症中的PET成像在帮助定位和鉴别肿瘤，疾病的阶段并确定合适的治疗方法中有效用。人类癌细胞过量表达许多潜在的疾病特异性分子靶的受体或蛋白质。以高亲和力和特异性结合肿瘤细胞上的这种受体或蛋白质的放射标记的示踪剂具有诊断成像和靶向放射性核素治疗的巨大潜力(Charron，Carlie L.等人，Tetrahedron Lett.[四面体通讯]2016，57(37)，4119-4127)。另外，靶特异性PET放射性示踪剂可以用作生物标志物来检查和评估病理学，例如通过测量靶标表达和治疗反应(Austin R.等人，CancerLetters[癌症通讯](2016)，doi：10.1016/j.canlet.2016.05.008)。

本发明特别涉及如在实施例中任一项所提及的具有式(I)的化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中也排除以下化合物以及其药学上可接受的加成盐和溶剂化物：

本发明特别涉及如在实施例中任一项所提及的具有式(I)的化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中排除了在WO2017/112768中描述的中间体和化合物(在它们被本发明所覆盖的范围内)。

本发明特别涉及如在此定义的具有式(I)的化合物，及其互变异构体以及立体异构形式，其中

R¹是CF₃；

R²选自下组，该组由以下各项组成：氢和CH₃；

--L²-R³选自(a)、(b)、(c)、(d)、(f)或(g)，其中

(a)L²选自下组，该组由以下各项组成：>CR^4aR^4b和-CHR^4aCHR⁵-；其中

L²连接至L¹的氮原子；R^4a选自下组，该组由以下各项组成：氢；-C(＝O)NR^7aR^7b；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：-OR⁸、和-NR^9aR^9b；和含有至少一个氮原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；

R⁵选自下组，该组由以下各项组成：氢；-OR⁶；和C_1-4烷基；

R^4b选自下组，该组由以下各项组成：氢和甲基；或

R^4a和R^4b连同它们所附接的碳原子一起形成C_3-5环烷基或含有氧原子的C-连接的4元至6元杂环基；其中

R⁶、R^7a、R^7b、R⁸、R^9a和R^9b各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；和被选自下组的取代基取代的C_2-4烷基，该组由以下各项组成：-OR¹¹和-NR^10aR^10b；其中

R^10a、R^10b和R¹¹各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；和C_1-4烷基；并且

(b)L²是>CR^4cR^4d，其中R^4c和R^4d是氢；并且

R³是

其中R^12a、R^12b，和R^12c是C_1-6烷基；或

(d)L²是O，并且R³是-CH₂-Ar；或

(f)--L²-R³是

其中

R¹⁸选自下组，该组由以下各项组成：氢；和C_1-4烷基；

R^18a选自下组，该组由以下各项组成：氢，和氟；

R^18a和R^18b与相同的碳原子结合并且一起形成

C_3-5环烷基；或

(g)--L²-R³是

并且其中

Ar是可以任选地被一个、两个或三个取代基取代的苯基，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素、-OR²⁴、和任选地被-OR²⁶取代的C_1-4烷基；

Het¹是选自下组的单环杂芳基，该组由以下各项组成：吡啶基、4-、5-或6-嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、4-或5-噻唑基、异噻唑基，和异噁唑基；或选自下组的二环杂芳基，该组由以下各项组成：吲哚基、咪唑并吡啶基；其各自可以任选地被一个、两个或三个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素，-CN，-OR²⁴，以及任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：-CN、-OR²⁶、和-NR^27aR^27b；并且

Het²是任选地被一个、两个或三个取代基取代的非芳香族杂环基，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素、-CN、和任选地被-OR²⁶取代的C_1-4烷基；

其中

R²⁴、R²⁶、R^27a，和R^27b各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；C_1-4烷基；和被-NR^28aR^28b取代的C_2-4烷基；其中

R^28a和R^28b是氢；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R⁵选自下组，该组由以下各项组成：氢；-OR⁶；-NR^7aR^7b；-C(＝O)NR^7aR^7b；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR⁸、和-NR^9aR^9b；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；

R^4b选自下组，该组由以下各项组成：氢和甲基；或>CR^4aR^4b形成>C_3-5环烷烃二基或含有氧原子的>C-连接的4元至6元杂环二基；其中

R⁶、R^7a、R^7b、R⁸、R^9a和R^9b各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、和-C(＝O)NR^10aR^10b；以及被选自下组的取代基取代的C_2-4烷基，该组由以下各项组成：-OR¹¹和-NR^10aR^10b；其中

R³选自下组，该组由以下各项组成：

其中R^12a、R^12b，和R^12c各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：任选地被-OH或-NH₂取代基取代的C_1-6烷基；或

(d)L²是O，并且R³选自下组，该组由以下各项组成：Ar，Het¹；-CH₂-Ar、-CH₂-Het¹、和-CH₂-(7元至10元饱和螺碳二环系统)；当L²连接至L¹的碳原子时；或

(e)--L²-R³选自下组，该组由以下各项组成：

其中

R¹⁸是氢；或

(f)--L²-R³是

并且其中

Ar是任选地被一个、两个或三个取代基取代的苯基，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素，-CN，和任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR²⁶、-NR^27aR^27b、和-C(＝O)NR^27aR^27b；

Het¹是选自下组的单环杂芳基，该组由以下各项组成：吡啶基、4-、5-或6-嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、4-或5-噻唑基、异噻唑基、噻二唑基，和异噁唑基；或二环杂芳基，该二环杂芳基选自咪唑并吡啶基，特别是咪唑并[1,2-a]吡啶基；其各自可以任选地被一个、两个或三个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素，-CN和任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR²⁶、-NR^27aR^27b、和-C(＝O)NR^27aR^27b；并且

Het²是选自氮杂环丁烷基、吡咯烷基和哌啶基的非芳香族杂环基；

其中

R²⁶、R^27a，和R^27b各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢和C_1-4烷基；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R²选自下组，该组由以下各项组成：氢和CH₃；

--L²-R³选自(a)、(b)、(d)、(e)，或(f)，其中

(ii)当L²连接至L¹的氮原子时，那么R^4a选自下组，该组由以下各项组成：-C(＝O)NR^7aR^7b；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR⁸、和-NR^9aR^9b；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；

R⁶、R^7a、R^7b、R⁸、R^9a和R^9b各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN，和-C(＝O)NR^10aR^10b；以及被选自下组的取代基取代的C_2-4烷基，该组由以下各项组成：-OR¹¹和-NR^10aR^10b；其中

R³选自下组，该组由以下各项组成：

(e)--L²-R³是-O-CHR⁵-R³，当L²连接至L¹的碳原子时，其中

(f)--L²-R³是

其中

R^18a选自下组，该组由以下各项组成：氢、氟和C_1-4烷基；

R^18a和R^18b与相同的碳原子结合并且一起形成

C_3-5环烷基或含有氧原子的C-连接的4元至6元杂环基；

并且其中

Het²是任选地被一个、两个或三个取代基取代的非芳香族杂环基，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素，-CN，-OR²⁴，-NR^25aR^25b，以及任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR²⁶、-NR^27aR^27b、和-C(＝O)NR^27aR^27b；

其中

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹是CF₃；

(a)L²是>CR^4aR^4b；其中

R^4a选自下组，该组由以下各项组成：氢；-C(＝O)NR^7aR^7b；

C_1-4烷基；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；并且

R^4b选自下组，该组由以下各项组成：氢和甲基；其中

R^7a和R^7b各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；C_1-4烷基；和被选自下组的取代基取代的C_2-4烷基，该组由以下各项组成：-OR¹¹和-NR^10aR^10b；其中

R^10a、R^10b和R¹¹各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢和C_1-4烷基；并且

(b)L²是>CR^4cR^4d，其中R^4c和R^4d各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢和C_1-4烷基；并且

R³选自下组，该组由以下各项组成：

其中R^12a、R^12b，和R^12c各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：任选地被-NH₂取代基取代的C_1-6烷基；或

(d)L²是O，并且R³选自下组，该组由以下各项组成：Ar、Het¹、-CH₂-Ar、-CH₂-Het¹、和-CH₂-(7元至10元饱和螺碳二环系统)；当L²连接至L¹的碳原子时；或

(e)--L²-R³选自下组，该组由以下各项组成：

其中

R¹⁸是氢；或

(f)--L²-R³是

并且其中

Ar是任选地被卤素取代基取代的苯基；

Het¹是选自下组的单环杂芳基，该组由以下各项组成：吡啶基、4-、5-或6-嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基，和4-或5-噻唑基；或二环杂芳基，该二环杂芳基选自咪唑并吡啶基，特别是咪唑并[1,2-a]吡啶基；其各自可以任选地被一个、两个或三个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素和任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR²⁶、-NR^27aR^27b、和-C(＝O)NR^27aR^27b；并且

其中

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹是CF₃；

L¹表示含有一个或两个N原子的N-连接的7元至10元饱和螺杂二环系统，该N原子选自下组，该组由以下各项组成：(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)和(g)

其中a表示连接至噻吩并嘧啶基杂环的位置；

(a)L²是>CH₂；并且R³选自下组，该组由以下各项组成：Ar、Het¹，和7元至10元饱和螺碳二环系统；或

(b)--L²-R³是任选地被一个、两个或三个氟取代基取代的C_1-6烷基；并且其中

Ar是任选地被卤素取代基取代的苯基；并且

Het¹是选自下组的单环杂芳基，该组由以下各项组成：4-、5-或6-嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基，和4-或5-噻唑基；或二环杂芳基，该二环杂芳基选自咪唑并吡啶基，特别是咪唑并[1,2-a]吡啶基；其各自可以任选地被一个或两个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素和C_1-4烷基；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

R¹是CF₃；

R²是氢；

其中a表示连接至噻吩并嘧啶基杂环的位置；

Ar是任选地被卤素取代基取代的苯基；并且

Het¹是选自下组的单环杂芳基，该组由以下各项组成：4-、5-或6-嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡咯基、吡唑基，和咪唑基；或二环杂芳基，该二环杂芳基选自咪唑并吡啶基，特别是咪唑并[1,2-a]吡啶基；其各自可以任选地被一个或两个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素和C_1-4烷基；

及其药学上可接受的盐和溶剂化物。

本发明的另一个实施例涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中以下限制中的一者或多者适用：

(a)R¹是CF₃；

(b)R²是氢；

(c)L¹是含有一个或两个N原子的N-连接的7元至10元饱和螺杂二环系统，该N原子选自下组，该组由以下各项组成：如在此定义的(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)和(g)；

(d)L¹是含有一个或两个N原子的N-连接的7元至10元饱和螺杂二环系统，该N原子选自下组，该组由以下各项组成：如在此定义的(a)、(b)、(c)、(d)、(e)，和(f)；

(e)L¹是含有一个或两个N原子的N-连接的7元至10元饱和螺杂二环系统，该N原子选自下组，该组由以下各项组成：(c)和(e)；

(f)L²是>CH₂；

(g)L²是>CH₂；并且R³选自下组，该组由以下各项组成：Ar、Het¹，和7元至10元饱和螺碳二环系统；

(h)--L²-R³选自下组，该组由以下各项组成：

其中

R^21a、R^21b和R²²各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢和C_1-4烷基；

(i)Ar是任选地被一个或两个独立选择的卤素取代基取代的苯基；

(j)Ar是任选地被一个卤素取代基取代的苯基；

(k)Ar是苯基；

(l)Het¹是选自下组的单环杂芳基，该组由以下各项组成：吡唑基、咪唑基、吡咯基、4-或5-噻唑基、吡啶基、哒嗪基、4-、5-或6-嘧啶基，和吡嗪基；或是二环杂芳基，该二环杂芳基选自咪唑并吡啶基，特别是咪唑并[1,2-a]吡啶基；其各自可以任选地被一个或两个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素和任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR²⁵、-NR^26aR^26b，和-C(＝O)NR^26aR^26b；其中R²⁵、R^26a，和R^26b各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢和C_1-4烷基；

(m)Het¹是选自下组的单环杂芳基，该组由以下各项组成：吡唑基、咪唑基、吡咯基、4-或5-噻唑基、吡啶基、哒嗪基、4-、5-或6-嘧啶基，和吡嗪基；或是二环杂芳基，该二环杂芳基选自咪唑并吡啶基，特别是咪唑并[1,2-a]吡啶基；其各自可以任选地被一个或两个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素和任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：-CN、-OR²⁵、-NR^26aR^26b，和-C(＝O)NR^26aR^26b；其中R²⁵、R^26a，和R^26b各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢和C_1-4烷基；

(n)Het¹是选自下组的单环杂芳基，该组由以下各项组成：吡唑基、咪唑基、吡咯基、哒嗪基、4-、5-或6-嘧啶基，和吡嗪基；或是二环杂芳基，该二环杂芳基选自咪唑并吡啶基，特别是咪唑并[1,2-a]吡啶基；其各自可以任选地被一个或两个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素和C_1-4烷基；

(o)Het¹是选自下组的单环杂芳基，该组由以下各项组成：哒嗪基、4-、5-或6-嘧啶基，和吡嗪基，其各自可以任选地被卤素取代基取代；

(p)Het¹是二环杂芳基，该二环杂芳基选自咪唑并吡啶基，特别是咪唑并[1,2-a]吡啶基-6-基或咪唑并[1,2-a]吡啶基-2-基；

(q)7元至10元饱和螺碳二环系统是处于特定的

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中R¹是CF₃。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中R¹是CF₃，并且其中R²是氢。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中Ar是根据其他实施例中任一项任选地被取代的苯基。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中L²连接至L¹的碳原子。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L²-R³是(a)。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L²-R³是(b)。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L²-R³是(c)。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L²-R³是(d)。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L²-R³是(e)。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L²-R³是(f)。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L²-R³是(g)。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L²-R³是(a)、(b)、(d)、(e)或(f)；并且R^4a不是氢。在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L²-R³是(a)或(f)；并且R^4a不是氢。在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L²-R³是(a)；并且R^4a不是氢。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L²-R³是(a)；并且当L²连接至L¹的氮原子时，则R^4a不是氢。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L²-R³是(a)或(f)；并且当L²连接至L¹的氮原子时，则R^4a不是氢。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L²-R³是(a)、(b)、(d)、(e)或(f)；并且当L²连接至L¹的氮原子时，则R^4a不是氢。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中L¹表示

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L²-R³是(a)；R³是Het¹或Het²。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L²-R³是(a)；R³是Het¹。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L²-R³是(a)；R³是Het¹；并且Het¹是如在其他实施例中任一项所定义的被任选地取代的氮杂环丁烷基。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中--L²-R³是(a)；R³是Het¹或Het²；Het¹是选自下组的单环杂芳基，该组由以下各项组成：吡啶基、4-、5-或6-嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡咯基、吡唑基，和咪唑基；其各自可以任选地被一个、两个或三个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素，-CN，-OR²⁴，-NR^25aR^25b、和任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR²⁶、-NR^27aR^27b、和-C(＝O)NR^27aR^27b；并且

Het²是选自下组的非芳香族杂环基，该组由以下各项组成氮杂环丁烷基、吡咯烷基，和哌啶基；其各自可以任选地被一个、两个或三个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素，-CN，-OR²⁴，-NR^25aR^25b，和任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR²⁶、-NR^27aR^27b、和-C(＝O)NR^27aR^27b。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中Ar是苯基，该苯基可以任选地被一个、两个或三个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素，-CN，-OR²⁴，-NR^25aR^25b，以及任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR²⁶、-NR^27aR^27b、和-C(＝O)NR^27aR^27b；

Het¹是选自下组的单环杂芳基，该组由以下各项组成：吡啶基、4-、5-或6-嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、4-或5-噻唑基、异噻唑基、噻二唑基，和异噁唑基；其各自可以任选地被一个、两个或三个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素、-CN、-OR²⁴、-NR^25aR^25b、和任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR²⁶、-NR^27aR^27b、和-C(＝O)NR^27aR^27b；并且

Het²是任选地被一个、两个或三个取代基取代的单环非芳香族杂环基，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素，-CN，-OR²⁴，-NR^25aR^25b，和任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR²⁶、-NR^27aR^27b、和-C(＝O)NR^27aR^27b。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中

--L²-R³是(a)，其中

L²选自下组，该组由以下各项组成：>CR^4aR^4b，和-CHR^4aCHR⁵-；其中

L²连接至L¹的氮原子；

R^4a选自下组，该组由以下各项组成：-C(＝O)NR^7aR^7b；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；

R⁵选自下组，该组由以下各项组成：氢；-OR⁶；-NR^7aR^7b；-C(＝O)NR^7aR^7b；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR⁸、和-NR^9aR^9b；

R^4b选自下组，该组由以下各项组成：氢和甲基；并且

R³选自下组，该组由以下各项组成：Ar、Het¹、Het²，和7元至10元饱和螺碳二环系统。

--L²-R³是(a)，其中

L²是>CR^4aR^4b；其中

L²连接至L¹的氮原子；

R^4b是氢；并且

--L²-R³是(a)，其中

L²是>CR^4aR^4b；其中

L²连接至L¹的氮原子；

R^4b是氢；并且

R³选自下组，该组由以下各项组成：Ar和Het²。

--L²-R³是(a)，其中

L²连接至L¹的氮原子；

R^4a是-C(＝O)NR^7aR^7b；

R^4b选自下组，该组由以下各项组成：氢和甲基；并且

--L²-R³是(a)，其中

L²是>CR^4aR^4b；其中

L²连接至L¹的氮原子；

R^4a是-C(＝O)NR^7aR^7b；

R^4b是氢；并且

--L²-R³是(a)，其中

L²是>CR^4aR^4b；其中

L²连接至L¹的氮原子；

R^4a是-C(＝O)NR^7aR^7b；

R^4b是氢；并且

R³选自下组，该组由以下各项组成：Ar和Het²。

--L²-R³是(a)，其中

L²连接至L¹的氮原子；

R^4a是含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；

R^4b选自下组，该组由以下各项组成：氢和甲基；并且

--L²-R³是(a)，其中

L²是>CR^4aR^4b；其中

L²连接至L¹的氮原子；

R^4b是氢；并且

--L²-R³是(a)，其中

L²是>CR^4aR^4b；其中

L²连接至L¹的氮原子；

R^4b是氢；并且

R³选自下组，该组由以下各项组成：Ar和Het²。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中L²连接至L¹的氮原子。

--L²-R³选自下组，该组由以下各项组成：

--L²-R³选自下组，该组由以下各项组成：

其中R¹⁸是氢或甲基。

L¹表示含有一个或两个N原子的N-连接的7元至10元饱和螺杂二环系统，该N原子选自下组，该组由以下各项组成：(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)，和(i)

其中a表示连接至噻吩并嘧啶基杂环的位置。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中Het²是如在其他实施例中描述的任选地被一个、两个或三个取代基取代的单环杂环基。

在一个实施例中，本发明涉及任何其他实施例中所提及的具有式(I)的那些化合物及其药学上可接受的盐和溶剂化物，或其任何子组，其中Het²是非芳香族杂环基，该杂环基选自以下各项：氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、哌啶基、四氢吡喃基、四氢-2H-硫代吡喃基1,1-二氧化物，

其各自如在其他实施例中描述的任选地被一个、两个或三个取代基取代。

Het²是非芳香族杂环基，选自以下各项：

具有式(I)的具体化合物是化合物82、84、273，和274，包括其立体异构形式，药学上可接受的盐，特别是其盐酸盐，及其溶剂化物。

具有式(I)的具体的化合物是化合物82、84、273，和274。

在一个实施例中，具有式(I)的化合物选自下组，该组由以下各项组成：示例性化合物中的任一者、

及其游离碱、药学上可接受的加成盐以及溶剂化物。

以上指示的实施例的所有可能组合都视为包涵在本发明的范围内。

用于制备具有式(I)的化合物的方法

在这一部分中，如在所有其他部分中，除非上下文另有说明，否则提及式(I)还包括所有其他的子组和其实例，如在此所定义的。

具有式(I)的化合物的一些典型实例的一般制备在下文以及在具体实例中进行了描述，并且通常制备自可商购的或通过本领域的普通技术人员常用的标准合成工艺制备的起始材料。以下方案仅意在表示本发明的实例并且决不意在是本发明的限制。

可替代地，还可以通过将如在下面的通用方案中所描述的类似反应试验方案与有机化学领域的普通技术人员常用的标准合成工艺组合来制备本发明的化合物。

技术人员将认识到，在方案中描述的反应中，尽管并不总是明确地显示，但是保护在终产物中所希望的反应性官能团(例如羟基、氨基、或羧基基团)可能是必要的，以避免它们参与所不希望的反应。例如在方案1中，可以用叔丁氧基羰基保护基团保护在含有一个或两个N原子的L¹N-连接的7元至10元饱和螺杂二环系统上的NH部分。通常，可根据标准实践使用常规保护基团。可使用本领域已知的方法在方便的后续阶段除去保护基团。这在具体的实例中进行说明。

技术人员将认识到，在方案里所描述的反应中，在惰性气氛(例如像在N₂气氛下)下进行反应或许是可取的或必要的。

技术人员将清楚的是，可能需要在反应处理(指的是分离和纯化化学反应的一种或多种产物所必须的一系列操作，例如像淬灭、柱层析、萃取)前，冷却反应混合物。

技术人员将认识到，在搅拌下加热该反应混合物可增加反应产出。在一些反应中，可使用微波加热替代常规的加热以缩短整个反应时间。

熟练人员将认识到在以下方案中示出的另一序列的化学反应也可能导致所希望的式(I)的化合物。

熟练人员将认识到，在以下方案中示出的中间体和最终化合物可以根据本领域的普通技术人员众所周知的方法进一步功能化。在此描述的中间体和化合物可以按游离形式或呈盐形式进行分离。

方案1

通常，具有式(I)的化合物(其中所有的变量根据本发明的范围进行定义)可以根据以下反应方案1进行制备。在方案1中，

表示L¹作为含有两个N原子的7元至10元饱和螺杂二环系统，并且该二环系统是N连接的噻吩并嘧啶基杂环，LG¹和LG²各自表示适当的离去基团，例如像卤素或甲磺酰基；PG¹表示适当的保护基团,例如像叔丁氧基羰基；R^3a-PG²表示如在式(I)中定义的具有合适的保护基团的R³，例如像叔丁氧基羰基(当R³取代基带有氨基基团时)。在式(XI)中X表示CH或N(在式(XI)中，L²可以连接至碳原子或N原子)。在方案1中所有的其他变量都根据本发明的范围进行定义。

在方案1中，以下反应条件适用：

1：在合适的温度下(如在从室温至90℃的范围内)，在适当的碱(例如像二异丙基乙胺)的存在下，在适当的溶剂(例如像乙腈或异丙醇或乙醇)中；

2：在合适的温度范围(例如像从0℃至室温)下，在适当的裂解条件(例如像酸，如HCl或三氟乙酸)的存在下，在适当的溶剂(如乙腈或二氯甲烷)中(当PG¹是叔丁氧基羰基时)；

可替代地，在合适的温度下(例如像室温)在适当的溶剂(如乙酸)中；

3：在合适的温度(例如像室温或回流)下，在适当的碱(例如像碳酸钾或1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯)的存在下，在适当的溶剂(例如像乙腈或DMSO)中；

4：在合适的温度(例如像室温或90℃)下，在适当的碱(例如像碳酸钾或1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一-7-烯)的存在下，在适当的溶剂(例如像乙腈或DMSO)中；

5：在适当的反应温度范围(例如像从0℃至室温)下，在适当的裂解条件(例如像酸，如HCl或三氟乳酸)的存在下，在适当的溶剂(如乙腈或二氯甲烷)中，当PG²是叔丁氧基羰基时。

6：在合适的温度(例如像在室温)下，最终在适当的碱(例如像三甲胺)或适当的酸(例如像乙酸)的存在下，在适当的溶剂(例如像无水二氯甲烷、二氯乙烷或四氢吡喃)中；

7：在合适的温度(例如室温)下，在适当的还原剂(例如像NaBH(OAc)₃)的存在下，在适当的溶剂(如二氯甲烷、二氯乙烷或四氢吡喃)中；产出具有式(I)的化合物，其中L¹是含有两个N原子的N-连接的7元至10元饱和螺杂二环系统，并且L²是CH₂。

步骤6和7可以方便地如一锅法进行。

可替代地，步骤6和7可以在适当的酸(例如像乙酸)，适当的催化剂(如氧化铂)的存在下，在适当的溶剂(例如像乙醇)，在合适的温度(例如像60℃)下进行；

8：在合适的温度(例如像在90℃下)下，在适当的碱(例如像二异丙基乙胺)的存在下，在适当的溶剂(例如像乙腈或异丙醇)中。在步骤8中，具有式(XI)的试剂中，X表示CH或N，并且L²和R³是如根据本发明的范围进行定义。具有式(XI)的试剂是可商购的或还可以通过技术人员已知的方法从可商购的起始材料进行制备，例如通过合适的保护/去保护步骤和官能团互换，从起始材料(如2-氮杂螺[3.3]庚-6-醇(CAS[1256352-97-2]))。

方案2

具有式(II)的中间体(其中R²是甲基)可以根据以下反应方案2制备，其中LG¹表示适当的离去基团(例如像卤素或甲磺酰基)。在方案2中所有的其他变量都根据本发明的范围进行定义。

在方案2中，以下反应条件适用：

1：在合适的温度(例如像在回流温度下)下，在乙酸酐和适当的碱(例如像三甲胺)的存在下，在适当的溶剂(例如像甲苯)中；

2：在合适的温度(例如像在回流温度下)下，在适当的碱(如氢氧化钾)的存在下，在适当的溶剂(例如像乙醇)中；

3：在适当的反应条件下以形成离去基团(例如像氯)，例如通过在合适的温度(如110℃)下用三氯磷酰进行反应。

方案3

通常，具有式(I-a)的化合物(其中的变量根据本发明的范围进行定义，但其中L²限于L^2a(通过此方案可以获得的选项))可以根据以下反应方案3进行制备。方案3中的所有其他变量都根据本发明的范围进行定义或如之前的定义。

在方案3中，以下反应条件适用：

1：在合适的温度(例如像室温或45℃)下，在乙醇钛(IV)或异丙醇钛(IV)的存在下，在适当的溶剂(例如像四氢吡喃、二氯乙烷或二氯乙烷和甲醇的混合物)中；

可替代地，在合适的温度(例如像室温)下，在具有或不具有适当的酸(例如像三氟乙酸)的情况下，在适当的溶剂(例如像四氢吡喃)中；

2：在合适的温度(例如像室温)下，在适当的还原剂(例如像硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠或氰基硼氢化钠)的存在下，在适当的溶剂(例如像四氢吡喃、二氯乙烷或二氯乙烷和甲醇的混合物)中；

步骤1和2可以作为一锅法进行。

方案4

通常，具有式(I-b)的化合物(其中R^4a限制为R^4a1为C_1-4烷基或含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基)可以根据以下反应方案4进行制备。在方案4中，卤素表示氯、溴或碘。方案4中的所有其他变量都根据本发明的范围进行定义或如之前的定义。

在方案4中，以下反应条件适用：

1：在合适的温度(例如像室温或45℃)下，在乙醇钛(IV)或异丙醇钛(IV)的存在下，在适当的溶剂(例如像四氢吡喃)中；

2：在从0℃至室温的合适的温度范围下，在适当的溶剂(例如像四氢呋喃)中。

步骤1和2可以作为一锅法进行。

方案5

通常，具有式(Ic)的化合物(其中R³限制为R^3c为

)

可以根据以下反应方案5进行制备。方案5中的所有其他变量都根据本发明的范围进行定义或如之前的定义。在方案5中，L²连接至L¹的N原子。

在方案5中，以下反应条件适用：

1：在合适的温度(例如像室温)下，在适当的酸偶联剂,例如像1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-苯并三唑鎓六氟磷酸盐(1-)3-氧化物(HBTU)或1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐(HATU)的存在下，在适当的碱(例如像N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺(DIPEA))的存在下，在适当的溶剂(如N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中；

方案6

通常，具有式(Id)的化合物(其中L²限制为SO₂)可以根据以下反应方案6进行制备。方案6中的所有其他变量都根据本发明的范围进行定义或如之前的定义。在方案6中，L²(在方案6中>SO₂)连接至L¹的N原子。

在方案6中，以下反应条件适用：

1：在合适的温度(例如室温)下，在适当的碱(例如像碳酸钾)的存在下，在适当的溶剂(例如像乙腈)中。

方案7

通常，具有式(Ie)和(If)的化合物可以根据以下反应方案7进行制备。在(Ie)和(If)二者中，分子的L²部分连接至L¹的氮原子。所有其他变量都根据本发明的范围进行定义或如之前的定义。

在方案7中，以下反应条件适用：

1：在合适的温度(例如像60℃)下，在适当的溶剂(例如像乙醇)中。

将理解的是，在存在适当官能团时，具有不同式的化合物或用于其制备的任何中间体可以通过一种或多种标准合成方法采用缩合、取代、氧化、还原或裂解反应来进一步衍生。具体取代方法包括常规烷基化、芳基化、杂芳基化、酰化、磺酰化、卤化、硝化、甲酰化以及偶合程序。

具有式(I)的化合物能以对映异构体的可以遵循领域已知的拆分程序与彼此分离的外消旋混合物形式合成。具有式(I)的外消旋化合物(含有基础氮原子)可通过与合适的手性酸反应而转化成相应的非对映异构盐形式。所述非对映异构盐形式随后例如通过选择性或分步结晶法分离，且通过碱使对映异构体从其中释出。分离具有式(I)的化合物的对映异构形式的替代性方式涉及使用一种手性固定相的液相色谱法。所述纯的立体化学异构形式还可以衍生自适当起始材料的相对应的纯的立体化学异构形式，其前提是反应立体特异性地发生。

在本发明的化合物的制备中，中间体的远端官能团(例如伯或仲胺)的保护可能是必需的。这样的保护的需要将取决于远端官能团的性质和制备方法的条件而不同。适合的氨基保护基(NH-Pg)包括乙酰基、三氟乙酰基、叔丁氧基羰基(Boc)、苯甲氧基羰基(CBz)以及9-芴基亚甲基氧基羰基(Fmoc)。这样的保护的需要容易由本领域普通技术人员确定。关于保护基和其用途的一般说明，参见T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Groups inOrganic Synthesis[有机合成中的保护基]，第4版，威利出版社，霍博肯(Hoboken)，新泽西(New Jersey)，2007。

药理

已经发现，本发明的化合物阻断了menin与MLL蛋白质和致癌MLL融合蛋白的相互作用。因此，根据本发明的化合物和包含这样的化合物的药物组合物可用于治疗或预防，特别是治疗如癌症、骨髓增生异常综合症(MDS)和糖尿病等疾病。

特别地，根据本发明的化合物及其药物组合物可用于治疗或预防癌症。根据一个实施例，可以受益于用本发明的menin/MLL抑制剂治疗的癌症包括白血病、骨髓瘤或实体瘤癌症(例如，前列腺癌、肺癌、乳癌、胰腺癌、结肠癌、肝癌、黑色素瘤和胶质母细胞瘤等)。在一些实施例中，白血病包括急性白血病、慢性白血病、骨髓白血病、髓性白血病、成淋巴细胞白血病、淋巴细胞白血病,急性髓性白血病(AML)、慢性髓性白血病(CML)、急性成淋巴细胞白血病(ALL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、T细胞前淋巴细胞白血病(T-PLL)、大颗粒淋巴细胞白血病、毛细胞白血病(HCL)、MLL-重排白血病、MLL-PTD白血病、MLL增加的白血病、MLL-阳性白血病，展示HOX/MEIS1基因表达标记等的白血病。

因此，本发明涉及具有式(I)的化合物、其互变异构体和立体异构形式以及其药学上可接受的盐和溶剂化物，用作药物。

本发明还涉及一种式(I)化合物、其互变异构体或立体异构形式或其药学上可接受的盐或溶剂化物或根据本发明的药物组合物的用途，用于制造药物。

本发明该涉及根据本发明的具有式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或药物组合物，用于治疗、预防、改善、控制或降低哺乳动物(包括人类)的与menin和MLL蛋白质以及致癌MLL融合蛋白的相互作用相关的病症的风险，这些病症的治疗或预防通过阻断menin和MLL蛋白质以及致癌MLL融合蛋白的相互作用来影响或促进。

同样，本发明涉及根据本发明的具有(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或药物组合物，用于生产用于治疗、预防、改善、控制或降低哺乳动物(包括人类)的与menin和MLL蛋白质以及致癌MLL融合蛋白的相互作用相关的病症的风险的药物的用途，这些病症的治疗或预防通过阻断menin和MLL蛋白质以及致癌MLL融合蛋白的相互作用来影响或促进。

本发明还涉及一种具有式(I)化合物、其互变异构体或立体异构形式或其药学上可接受的盐或溶剂化物，用于治疗或预防上文中提及的疾病中任一者。

本发明还涉及一种具有式(I)化合物、其互变异构体或立体异构形式或其药学上可接受的盐或溶剂化物的用途，用于制造用于治疗或预防上文中提及的疾病病状中任一者的药物。

可以将本发明的化合物给予哺乳动物、优选地人类以便治疗或预防上文中提及的疾病中任一者。

鉴于具有式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式，和其药学上可接受的盐和溶剂化物的效用，提供了一种治疗罹患上文中提及的疾病中任一者的温血动物(包括人类)的方法。

所述方法包括将治疗有效量的具有式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式、或其药学上可接受的盐或溶剂化物给予(即全身性或局部给予)、优选地经口给予到温血动物(包括人类)。

因此，本发明还涉及一种用于治疗或预防上文中提及的疾病中任一者的方法，包括将治疗有效量的根据本发明的化合物给予到对其有需要的患者。

本领域普通技术人员将认识到，本发明的化合物的治疗有效量是足以具有治疗活性的量，并且这个量取决于疾病类型、治疗性配制品中化合物的浓度以及患者的病状而特别不同。一般来说，本发明的化合物以治疗剂形式给予用于治疗在此提及的病症的量将由主治医生根据情况来确定。

在此类疾病的治疗中，普通技术人员可以从下文提供的测试结果确定有效治疗日用量。有效治疗日用量应是从约0.005mg/kg至100mg/kg体重，特别是0.005mg/kg至50mg/kg体重，特别是0.01mg/kg至50mg/kg体重，更特别是从0.01mg/kg至25mg/kg体重，优选地从约0.01mg/kg至约15mg/kg，更优选地从约0.01mg/kg至约10mg/kg，甚至更优选地从约0.01mg/kg至约1mg/kg，最优选地从约0.05mg/kg至约1mg/kg体重。特别的有效治疗日用量应是1mg/kg体重、2mg/kg体重、4mg/kg体重或8mg/kg体重。根据本发明的化合物(此处也称为活性成分)的达到治疗作用所需的量可以根据情况随例如具体化合物、给药途径、接受者的年龄和病状以及所治疗的具体病症或疾病而不同。治疗方法还包括以每天一到四次摄入之间的方案给予活性成分。在这些治疗方法中，根据本发明的化合物优选地在给予之前进行配制。如在此下文中所述的，适合的药物配制品通过已知程序使用熟知并且容易可得的成分来制备。

本发明还提供了用于预防或治疗在此提及的病症的组合物。所述组合物包含治疗有效量的具有式(I)的化合物、其互变异构体或立体异构形式、或其药学上可接受的盐或溶剂化物，以及药学上可接受的载体或稀释剂。

虽然活性成分可以单独给予，但其优选地是作为药物组合物存在。因此，本发明进一步提供了药物组合物，该药物组合物包含根据本发明的化合物连同药学上可接受的载体或稀释剂。该载体或稀释剂在与该组合物的其他成分相容的意义上必须是“可接受的”并且对于其接受者是无害的。

可以通过制药领域所熟知的任何方法来制备本发明的药物组合物，例如使用像在那罗(Gennaro)等人中所描述的那些方法。Remington’s Pharmaceutical Sciences[雷明顿药学大全](第18版，麦克出版公司(Mack Publishing Company)，1990，参见尤其是Part8：Pharmaceutical preparations andtheir Manufacture[部分8：药物制剂及其制造])。治疗有效量的呈碱形式或盐形式的作为活性成分的具体化合物与药学上可接受的载体组合成紧密混合物，该载体可以取决于给药所希望的制剂形式而采用多种多样的形式。这些药物组合物合意地呈整体剂型，优选地适用于全身性给予，如经口、经皮或肠胃外给予；或局部给予，如经由吸入、鼻用喷雾、滴眼剂或经由乳膏、凝胶、香波等。例如，在制备呈经口剂型的组合物时，可以使用任何常见药物介质，例如像在经口液体制剂(如悬浮液、糖浆、酏剂以及溶液)的情况下，是水、二醇、油、醇等；或在散剂、丸剂、胶囊以及片剂的情况下，是固体载体，如淀粉、糖、高岭土、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。片剂和胶囊由于其给药简易性而表示了最有利的经口单位剂型，在该情况下，显然使用固体药物载体。对于肠胃外组合物来说，载体通常将包括至少呈大部分的无菌水，但也可以包括其他成分例如以辅助溶解性。例如可制备注射溶液，其中该载体包括盐溶液、葡萄糖溶液或盐水和葡萄糖溶液的混合物。也可以制备可注射悬浮液，在该情况下可以采用适当的液体载体、助悬剂以及类似物。在适合于经皮给予的组合物中，载体任选地包括渗透增强剂和/或适合的可湿润剂，任选地与小比例的具有任何性质的适合添加剂组合，这些添加剂不会对皮肤造成任何显著有害作用。所述添加剂可促进向皮肤给药和/或可有助于制备期望的组合物。这些组合物能够以不同方式，例如作为透皮贴剂、作为滴剂或作为软膏剂给予。

尤其有利的是将以上提及的药物组合物配制成单位剂型以实现给药简易性和剂量均一性。如本说明书和权利要求书中所用的单位剂型在此是指适合作为单位剂量的物理离散单位，每一单位含有经计算以与所需的药物载体结合而产生所希望的治疗作用的预定量的活性成分。此类单位剂型的实例是片剂(包括刻痕或包衣片剂)、胶囊、丸剂、散剂包、糯米纸囊剂、可注射溶液或悬浮液、茶匙剂、汤匙剂以及类似剂型，及其分开的多个。

本发明化合物可以用于全身性给予，如经口、经皮或肠胃外给予；或局部给予，如经由吸入、鼻用喷雾、滴眼剂或经由乳膏、凝胶、香波等。化合物优选地经口给予。给药的确切剂量和频率取决于所用的具体的具有式(I)的化合物、所治疗的具体病状、所治疗的病状的严重程度、具体患者的年龄、体重、性别、病症程度和一般物理病状以及个体可以服用的如本领域的普通技术人员所熟知的其他药物。此外，显而易见的是，所述有效日用量可以降低或提高，这取决于所治疗的受试者的响应和/或取决于给出本发明化合物处方的医生的评估。

本发明的化合物可以单独或与一种或多种另外的治疗剂组合给予。组合疗法包括给予含有根据本发明的化合物和一种或多种另外的治疗剂的单一药物剂量配制品，以及给予根据本发明的化合物和每种另外的治疗剂(呈其自身单独药物剂量配制品形式)。举例来说，根据本发明的化合物和治疗剂可以按一种单一经口剂量组合物(如片剂或胶囊)形式一起给予患者，或每种药剂可以按单独经口剂量配制品形式给予。

因此，本发明的一个实施例涉及一种产品，含有一种根据本发明的化合物作为第一活性成分和一种或多种抗癌剂作为另一种活性成分，以组合制剂形式用于同时、单独或连续用于治疗罹患癌症的患者。

一种或多种其他医药剂与根据本发明的化合物可以同时(例如以单独或整体组合物形式)或以任一顺序依序给予。在后一种情况下，两种或更多种化合物将在一个时间段内并且以一定量和方式给予，以便足以确保实现一种有利或协同作用。应了解，组合的每种组分的优选给予方法和顺序以及对应的剂量和方案将取决于所给予的具体其他医药剂和本发明的化合物、其给药途径、具体条件，特别是所治疗的肿瘤以及所治疗的具体宿主。最佳给药方法和顺序以及剂量和方案可以由本领域技术人员使用常规方法并且鉴于在此陈述的信息而容易地确定。

当以组合形式给出时，根据本发明的化合物与一种或多种其他抗癌剂的重量比可以由本领域的普通技术人员确定。如本领域技术人员所熟知的，所述比率以及精确的给予剂量和频率取决于所用的具体的根据本发明的化合物以及其他一种或多种抗癌剂、所治疗的具体病症、所治疗的病症的严重程度、具体患者的年龄、体重、性别、饮食、给药时间和一般身体状况、给药方式连同个体可以服用的其他药物。此外，显然该有效日用量可以降低或提高，这取决于所治疗的受试者的响应和/或取决于给出本发明化合物处方的医生的评估。本发明的具有式(I)的化合物与另一种抗癌剂的具体重量比可以在从1/10到10/1，更尤其从1/5到5/1，甚至更尤其从1/3到3/1的范围内。

以下实例进一步展示了本发明。

实例

数种用于制备本发明的化合物的方法在以下实例中进行了展示。除非另外指出，所有的起始材料是从商业供应商获得并且不进行进一步纯化而使用。

以下，术语：‘ACN或‘MeCN’表示乙腈；‘DCM’表示二氯甲烷；‘DIPEA’表示N,N-二异丙基乙胺；‘DIPE或‘DiPE’表示二异丙醚；‘h’表示一个或多个小时；‘min’表示一个分钟或多个分钟；‘DMF’表示二甲基甲酰胺；‘DSC’表示差示扫描量热法；‘TEA或‘Et₃N’表示三乙胺；‘Et₂O’表示二乙醚；‘EtOAc’或‘EA’表示乙酸乙酯；‘EtOH’表示乙醇；‘HPLC’表示高效液相色谱法；‘iPrOH’表示异丙醇；‘LC/MS’表示液相色谱/质谱；‘MeOH’表示甲醇；‘NMR’表示核磁共振；‘rt或‘RT’表示室温；‘SFC’表示超临界流体色谱法；‘OR’表示旋光度；‘sat.aq.’表示饱和水性溶液。‘AcCl’表示乙酰氯；‘AcOH’或‘HOAc’表示乙酸；‘BOC’或‘Boc’表示叔-丁氧羰基；

表示硅藻土；‘CH₃COONH₄’表示乙酸铵；

表示(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代亚乙基氨基氧基)二甲基氨基-吗啉代-碳正六氟磷酸酯；‘CO₂’表示二氧化碳；‘DCE’表示二氯乙烷；‘DMAP’表示二甲基氨基吡啶；‘DMSO’表示二甲基亚砜；‘DBU’表示1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳烯-7；‘EDCI.HCl’表示1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐；‘ee’表示对映体过量；‘eq.’或‘equiv.’表示当量；‘EtMgBr’表示乙基溴化镁；‘Et₂O’表示二乙醚；‘EtOAc’表示乙酸乙酯；‘Et₃N’或‘TEA’表示三乙胺；‘EtOH’表示乙醇；‘h’表示一个或多个小时；‘HATU’表示O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸酯；‘HCl’表示盐酸；‘HOBT’表示N-羟基苯并三唑一水合物；‘H₂O’表示水；‘iPrMgCl’表示异丙基氯化镁；‘iPrNH₂’表示异丙基胺；‘K₂CO₃’表示碳酸钾；‘Me-THF’表示2-甲基-四氢呋喃；‘MeMgBr’或‘CH₃MgBr’表示甲基溴化镁；‘MeOH’表示甲醇；‘MgSO₄’表示硫酸镁；‘min’表示一个或多个分钟；‘NaBH(OAc)₃’表示三乙酰氧基硼氢化钠；‘NaBH₃CN’表示氰基硼氢化钠；‘Na₂CO₃’表示碳酸钠；‘NaH’表示氢化钠；‘NaHCO₃’表示碳酸氢钠；‘NaOH’表示氢氧化钠；‘Na₂SO₄’表示硫酸钠；‘NH₄Cl’表示氯化铵；‘NH₄HCO₃’表示碳酸氢铵；‘NH₄OH’表示氨溶液30％的水性溶液；‘Quant.或quant’表示定量的；‘R_t’表示保留时间；‘SFC’表示超临界流体色谱法；‘T’表温度；‘TBAF’表示四丁基氟化铵；‘TBDMS’或‘SMDBT’表示叔丁基二甲基硅基；‘TFA’或‘CF₃COOH’表示三氟乙酸；‘THF’表示四氢呋喃；‘Ti(OEt)₄’表示乙醇钛；‘Ti(OiPr)₄’表示异丙氧基钛；‘v.’表示体积；‘F₃C’或‘CF₃’表示三氟甲基；‘HBTU’表示1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-苯并三唑鎓六氟磷酸盐(1-)3-氧化物。

如本领域技术人员所理解的，使用所示方案合成的化合物可以作为溶剂化物(例如水合物和/或含有残余溶剂或微量杂质)存在。以盐形式分离的化合物可以是整数化学计量的，即单盐或二盐，或中间化学计量。

当将一种或多种混合物被分离时，将在一些化合物中心的立体化学构型指定为“R”或“S”；对于某些化合物，当绝对立体化学是未确定的(即使这些键被立体选择性地绘制出)，尽管化合物本身已被分离为单一的立体异构体并且是对映体异构体纯的，将在所示中心处的立体化学构型指定为“*R”(首先在合成方案描述的柱条件的情况下并且当仅存在一种立体中心时从柱中洗脱出来)或“*S”(第二次在合成方案描述的柱条件的情况下并且当仅存在一种立体中心时从柱中洗脱出来)。

例如，将清楚的是，化合物179

是

具有两个立体中心的化合物遵循如上述相似的规则，其仅中一个立体中心的立体化学构型由*(例如，*R或*S)表示(参见例如化合物186或281)。这表明由*表示的该立体中心的绝对立体构型是未确定的(即使这些键被立体选择性地绘制出)，尽管该化合物在指定的中心处是对映异构体纯的。

对于化合物(如188、189、190、191、235、236、237，和238)，其中两个立体中心的立体化学构型由*(例如，*R或*S)表示，这些立体中心的绝对立体化学是未确定的(即使这些键被立体选择性地绘制出)，尽管化合物本身已被分离为单一的立体异构体并且是对映异构体纯的。在这种情况下，在相同的化合物中，第一个立体中心的构型独立于第二个立体中心的构型。

例如，对于化合物188

这表明该化合物是

以上关于立体化学构型的段落还适用于中间体。

如在此使用的术语“对映异构体纯的”表示该产物含有至少按重量计80％的一种对映异构体和按重量计20％或更少的另一种对映异构体。优选地该产物含有至少按重量计90％的一种对映异构体和按重量计10％或更少的另一种对映异构体。在最优选的实施例中，术语“对映异构体纯的”表示该组合物含有至少按重量计99％的一种对映异构体和1％或更少的另一种对映异构体。

当在以下实验部分中的中间体或化合物被表示为‘HCl盐’、‘HCOOH盐’或‘TFA盐’，没有指示HCl或TFA的当量数时，这表明没有确定HCl或TFA的当量数。

技术人员将意识到，即使在下面的实验方案中没有明确提及的情况下，典型地在柱色谱纯化之后，将所希望的级分收集并蒸发溶剂。

在由L1表示的螺环中没有指示立体化学的情况下，这表明它是立体异构体的混合物，除非另有说明或从上下文中是清楚的。

当立体中心用‘RS’表示时，这表明在指定的中心处获得外消旋混合物，除非另有说明。

A.中间体的制备

中间体1的制备：

将如在Journal ofMedicinal Chemistry[医药化学杂志](2016)，59(3)，892-913中所述制备的4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(525mg，2.08mmol)、叔丁基2,7-二氮杂螺[4.5]癸烷-2-甲酸酯(550mg，2.29mmol)和DIPEA(1.43mL，8.3mmol)在ACN(12mL)中的混合物在80℃下加热过夜。将该溶液冷却并且将混合物倾倒进冷水中，将产物用EtOAc萃取，将有机层经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(固定相：不规则15μm至40μm 50g，流动相：DCM/MeOH：梯度从100/0至99/1)进行纯化。收集含有产物的级分，并且蒸发至干燥，产出770mg(产率81％)的中间体1。

通过使用与用于制备中间体1所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

中间体3的制备：

将4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(11.4g；44.96mmol)、叔丁基2,6二氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸酯(10.5g；49.46mmol)和DIPEA(15.5mL；89.93mmol)在iPrOH(183mL)中的溶液在90℃下加热过夜。将该溶液冷却至室温，并且将该溶液倾倒进水中，然后用EtOAc萃取(3X)。将该有机层用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并且过滤掉。

将沉淀物(在水层中)过滤掉，用少量的DCM洗涤，并且用先前的滤液进行合并。将溶剂蒸发以给出19.9g的棕色固体。将残余物用乙醚吸收，将沉淀物过滤，并且干燥以给出18.5g浅棕色固体的中间体3(96％)。

中间体3的替代制备：

向4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(3.00g，11.9mmol)和叔丁基2,6-二氮杂螺[3.4]辛烷-2-甲酸酯(2.5g，11.8mmol)在EtOH(50mL)中的混合物里一次性添加DIPEA(2g，15.5mmol)。将该混合物在室温下搅拌18h。将该混合物进行蒸发，并且将残余物稀释在EA(200mL)中。将该溶液用水(100mL*2)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤，并且蒸发以给出呈棕色油的中间体3(5.10g，11.9mmol，100％产率)。

中间体6的制备：

将中间体1(770mg，1.69mmol)和4N HCl在ACN(45mL)在二噁烷(4.22mL，16.9mmol)中的的溶液的混合物在室温下搅拌过夜。将该混合物倾倒进冰水中，用3NNaOH碱化，将该产物用DCM萃取，将有机层经MgSO₄干燥，蒸发至干燥，提供670mg中间体6，将该中间体6用于下一步骤而无需进一步的纯化。

通过使用与用于制备中间体6所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

中间体9的制备：

在密封管中，在90℃下，将如在Journal of Medicinal Chemistry[医药化学杂志](2016)，59(3)，892-913中所述制备的4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(0.6g，2.37mmol)、叔丁基2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸酯(0.57g，2.85mmol)、DIPEA(0.82mL，4.75mmol)在iPrOH(15mL)中加热2h。将该溶液冷却至室温，并且将反应混合物倾倒进水中，然后用EtOAc萃取。将有机层用水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干。该粗产物由Et₂O结晶，提供0.6g(产率61％)的中间体9。

中间体10的制备：

将中间体9(4.43g；10.69mmol)在甲酸(24mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。将该反应混合物进行蒸发。将残余物用Et₂O吸收两次并且蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH；80g；流动相：90％DCM，10％MeOH，1％NH₄OH)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥产生3.34g(99％)的中间体10。

中间体10b的制备：

将中间体9(0.55g，1.33mmol)在甲酸(3mL)中的混合物在室温下搅拌20h。将该混合物在真空中蒸发以给出残余物，将该残余物用Et₂O吸收两次，并且蒸发至干燥，给出0.4g(产率96％)中间体10b(甲酸盐)。将没有任何进一步纯化的该粗产物用于下一个步骤中。

通过使用与用于制备中间体10b所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

中间体11的制备：

将中间体3(8.57g；20mmol)在甲酸(51mL)中的混合物在室温下搅拌20h。将反应混合物在室温下搅拌过周末。将该混合物进行蒸发，并且将残余物冷却至5℃，用DCM吸收，并且用NaOH3N的水性溶液进行中和。将有机层用水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发溶剂。将残余物(7.63g橙色油)通过硅胶色谱法(不规则裸二氧化硅120g，流动相：1％NH₄OH，85％DCM，15％MeOH)进行纯化。收集这些纯级分，并且将溶剂进行蒸发，以给出3.65g黄色油的中间体11(56％)。

中间体11的替代制备：

在5℃下，将TFA(17.9mL；233.38mmol)添加至中间体3(5g；11.67mmol)在DCM(130mL)的溶液中，并且将该反应混合物在室温下搅拌4h。将该反应混合物用庚烷进行稀释，并且蒸发至干燥(3X)以给出10.7g的棕色油。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH 40μm；220g，流动相：1％NH₄OH，90％DCM，10％MeOH)进行纯化。收集纯级分并将溶剂蒸发。将残余物(4g)用DCM溶解，并且将该产物结晶。将该混合物蒸发，并且用ACN吸收若干次，并且将溶剂进行蒸发以给出4g浅黄色固体的中间体11。

中间体11b的制备：

在0℃下，将TFA(2.2mL；28mmol)添加至中间体3(600mg；1.4mmol)在DCM(13mL)的溶液中，然后将该反应混合物在室温下搅拌过夜。将该反应混合物蒸发直到干燥，以给出1.26g呈TFA盐的中间体11b。将该产物无需纯化直接使用。

中间体11c的制备：

在室温下，将HCl 4M在二噁烷(150mL)中的溶液添加至中间体3(6.5g；15.17mmol)中。在室温下将反应混合物搅拌1h。将该混合物在真空中蒸发，以给出5.7g呈HCl盐的黄色固体的中间体11c。将该产物无需纯化用于下一步。

中间体13的制备：

在室温下，将乙酸酐(1mL，10.7mmol)逐滴添加至2-氨基-5-(2,2,2-三氟乙基)噻吩-3-甲酰胺(2g，8.92mmol)在甲苯(50mL)和三甲胺(6.2mL，44.6mmol)的溶液中。将溶液在回流下加热5h，倾倒进水中，用EtOAc萃取，并且用盐水洗涤(x2)。将有机层经MgSO₄干燥，过滤，并且蒸发至干燥，将该粗产物用Et₂O吸收，并且将该沉淀物进行过滤以提供1.5g中间体13(产率63％/棕色固体)。

中间体14的制备：

在室温下，向中间体13(1.5g，5.63mmol)在EtOH(70mL)的溶液中逐滴添加KOH的1M溶液。将该反应混合物在室温下搅拌30min，然后将该混合物在回流下加热3h。将该反应混合物冷却至室温，然后倾倒进冰水中，用3N HCl进行酸化，用DCM萃取并且倾析。将合并的有机层用盐水洗涤，并且经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物由Et₂O结晶，以给出0.7g中间体14(产率50％)，该中间体14无需进一步纯化用于下一个步骤。

中间体15的制备：

在110℃下，将中间体14(0.7g，2.82mmol)和三氯磷酰(5mL)加热2h。将该反应混合物冷却至室温，然后蒸发至干燥。将该残余物用冰和DCM小心吸收，用K₂CO₃(10％)的水性溶液进行碱化，并且将有机层用水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干燥以给出0.75g(产率99％)的中间体15，将该中间体15无需进一步纯化用于下一个步骤。

中间体16的制备：

螺[3.3]庚-2-基甲基甲磺酸酯

向螺[3.3]庚-2-基甲醇(153mg，1.08mmol)在4mL的DCM中的溶液里添加TEA(0.464mL，3.2mmol)，并且将该反应混合物冷却至0℃。然后逐滴添加甲基磺酰氯(0.184g，1.605mmol)，使该混合物加热至室温并且搅拌2h。添加饱和NaHCO₃(30mL)和DCM(30mL)的水性溶液。将该混合物分离，收集有机层，用盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且蒸发以给出300mg呈黄色油的中间体16，将该中间体16无需进一步纯化用于下一个步骤。

中间体17的制备：

在N₂流下，向中间体11c(400mg)和TEA(0.38mL，2.76mmol)在DCM(20mL)的溶液中添加1-[2-(乙酰氧基)乙基]-1H-吡咯-2-甲醛(200mg，1.11mmol)。在室温下将该混合物搅拌4h。添加NaBH(OAc)₃(390mg，1.84mmol)并且在室温下将该混合物搅拌48h。然后，将其倾倒进冰水中，并且将该混合物进行分离，并且将该水性层用DCM萃取。将这些有机层进行合并，用盐水洗涤，然后经MgSO₄干燥，并且蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm至40μm 24g，流动相：DCM/MeOH：97/3)进行纯化。收集这些纯级分，并且将溶剂在真空下进行蒸发产出180mg的中间体17。

中间体35

的制备

将1H-吡唑-4-甲醛(0.5g；5.2mmol)和碳酸铯(3.39g；10.4mmol)在ACN(10mL)中稀释。然后，添加2-溴乙基甲醚(0.636mL；6.77mmol)，并且将该反应混合物回流2小时。将该反应混合物在NaHCO₃饱和溶液和EtOAc之间分配。将有机层分离，经MgSO₄干燥，过滤并浓缩。

将残余物通过硅胶色谱(不规则SiO₂，120g，DCM/MeOH：100/0至95/5)进行纯化。将含有产物的这些级分混合并且浓缩以提供439mg(55％)的中间体35。

中间体20的制备：

在室温下，将中间体11(150mg，0.46mmol)、(+/-)-甲基α-溴苯基乙酸酯(0.08mL，0.50mmol)和K₂CO₃(127mg；0.92mmol)在DMF(10mL)中搅拌5h。将反应混合物倾倒进冰水中并添加EtOAc。将有机层分离，用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm至40μm 24g，流动相：DCM/MeOH(+10％NH₄OH)：梯度从97/3至95/5)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥，产出162mg(产率74％)的中间体20。

中间体32

的制备

在室温下，向中间体20(162mg；0.34mmol)在THF(3mL)和水(3mL)中的溶液里添加氢氧化锂一水合物(71mg；1.7mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜，然后浓缩，并用HCl 3N(pH＝2-4)的水性溶液酸化。将沉淀物过滤并干燥，以给出33mg(21％)的中间体32(基于LC/MS，90％的纯度)。将母层蒸发直到干燥，以给出243mg中间体32的不纯级分。

中间体54

的制备

将中间体11c(333mg)、甲基2-甲酰基苯甲酸酯(148.5mg；0.905mmol)、NaBH(OAc)₃(872mg；4.11mmol)和三甲胺(250mg；2.47mmol)在二氯乙烷(16mL)中混合，并且将该反应在室温下搅拌过夜。然后，添加NaHCO₃水性溶(1mL)，并且将该混合物用DCM(4*15mL)萃取。将这些有机层分离，混合，经MgSO₄干燥，过滤并且浓缩以提供450mg呈白色固体的中间体54。

通过使用与用于制备中间体54所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的中间体。

中间体47

的制备

在50℃下，将中间体10b(150mg)、1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-甲醛(225mg；1.249mmol)和AcOH(24μL；0.416mmol)在二氯乙烷(4.5mL)中的混合物搅拌2小时。将该反应混合物冷却至室温，并且添加NaBH(OAc)₃(265mg；1.249mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌过夜，倾倒进10％的K₂CO₃水性溶液中，并且用DCM萃取。将有机层倾析，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，24g；流动相：梯度从0％MeOH，100％DCM至10％MeOH，90％DCM)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥产出150mg的中间体47。

通过使用与用于制备中间体47所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的中间体。

中间体25的制备：

将(4S)-1-Boc-4-甲基-L-脯氨酸(174mg，0.761mmol)、HBTU(288mg，0.761mmol)和DIPEA(0.65mL，3.804mmol)在DMF(7.5mL)中的混合物搅拌1h。然后，添加中间体10(250mg，0.761mmol)在DMF(5mL)中的溶液。将该反应混合物在室温下搅拌过夜。将该反应混合物倾倒进冰水中，用10％的K₂CO₃水性溶液碱化，并且用EtOAc萃取。将有机层用水，然后用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干燥。将残余物(490mg)通过硅胶色谱法(不规则SiOH，40g；流动相：NH₄OH/DCM/MeOH：0.5/95/5)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥，产出330mg(产率82％)的中间体25。

通过使用与用于制备中间体25所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的中间体。

中间体104

的制备

将DIPEA(0.48mL；2.775mmol)添加至中间体10b(200mg)、3-羧基苯甲醛(100mg；0.666mmol)和HATU(317mg；0.833mmol)在DMF(10mL)的溶液中，并且将该反应混合物在室温下搅拌4小时。将该反应混合物倾倒进水中，并且用EtOAc萃取。将有机层倾析，用水然后盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，24g；流动相：梯度从0％MeOH，100％DCM至10％MeOH，90％DCM)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥产出62mg的中间体104。

中间体41的制备：

在N₂流下，在室温下，向中间体11(250mg，0.76mmol)在DCM(12mL)的溶液中添加中间体42(246mg，0.91mmol)。将该混合物在室温搅拌3h。将该混合物冷却至5℃，添加NaBH(OAc)₃(323mg，1.52mmol)，并且将混合物在室温下搅拌过夜。然后，将其倾倒进冰水中，并且将各层进行分离。将水性层用DCM萃取。将这些有机层进行合并，用盐水洗涤，然后经MgSO₄干燥，蒸发。将残余物由Et₂O和戊烷结晶。将白色沉淀物过滤掉，并且在真空下干燥产出55mg(产率100％)中间体41。

中间体43的制备：

在室温下，将中间体11(500mg，1.52mmol)、2-(氯甲基)-1,1-二甲基乙酯-1H-吡咯-1-甲酸)(493mg，2.28mmol)和K₂CO₃(1.05g，7.61mmol)在ACN(12mL)中搅拌24h。将反应混合物倾倒进冰水中并添加EtOAc。将有机层分离，用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm至40μm 24g，流动相：NH₄OH/DCM/MeOH：梯度从0.1/97/3至0.1/95/5)进行纯化。将纯级分混合，并且蒸发产出100mg(产率14％)的中间体43。

通过使用与用于制备中间体43所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的中间体。

中间体50的制备：

在N₂流下，向中间体11(202mg，0.62mmol)在DCM(10mL)中的溶液里添加叔丁基4-甲酰基-1H-吡唑-1-甲酸酯(133mg，0.68mmol)和AcOH(35μL，0.62mmol)。将混合物在室温下搅拌2h。添加NaBH(OAc)₃(521mg，2.46mmol)，并且将该混合物在室温下搅拌过夜，倾倒进冰水中，并且将各层进行分离。将水性层用DCM萃取。将这些有机层进行合并，用盐水洗涤，然后经MgSO₄干燥，蒸发。将残余物通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm至40μm 24g，流动相：DCM/MeOH(+10％NH₄OH)：97/3)进行纯化。将纯级分混合，并且蒸发产出145mg(产率46％)的中间体50。

中间体55的制备：

在密封管中，在N₂流下，将中间体53(349mg，1.37mmol)和Ti(OiPr)₄(436μL，1.83mmol)添加至中间体11(300mg，0.914mmol)在THF(6mL)的溶液中。将该溶液在50℃下搅拌5小时，然后在室温下过夜。将反应混合物冷却至5℃，并且逐滴添加在THF(2.28mL，4.57mmol)中的2N iPrMgCl。允许该反应混合物缓慢升至室温并搅拌过夜。将该反应混合物用EtOAc稀释，并且倾倒入10％的K₂CO₃水性溶液中。将不可溶的物质通过经

过滤去除。将有机层倾析，用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，40g；流动相：MeOH/DCM：梯度从0/100至10/90)进行纯化。收集纯级分，并且蒸发至干燥产出：0.3g(产率54％)的中间体55。

中间体63

的制备，

中间体63a

和中间体63b

在45℃下，将叔丁基3-乙酰基氮杂环丁烷-1-甲酸酯(364mg；1.83mmol)、中间体11(400mg；1.22mmol)、异丙醇钛(IV)(725μL；2.44mmol)在乙醇(2mL)中的溶液搅拌30min(溶液变成深黄色)。添加乙醇(12mL)和NaBH₄(138mg；3.66mmol)，然后溶液变成浅黄色。将反应混合物在室温下搅拌过夜。然后，将其倾倒进10％的K₂CO₃和DCM水性溶液中。将不可溶的物质通过

垫过滤。将有机层倾析，通过

过滤，并且将溶剂蒸发，将624mg浅黄色油通过硅胶色谱法(SiO₂；25g；流动相：梯度从98％DCM，2％MeOH至96％DCM，4％MeOH)进行纯化。收集含有产物的这些级分，并且将溶剂蒸发以给出223mg(36％)呈白色泡沫的中间体63。

将中间体63通过手性SFC(固定相：CHIRALCEL OJ-H 5μm 250x20mm，流动相：92％CO2，8％MeOH(0.3％iPrNH₂))进行纯化。收集纯级分，并且将溶剂蒸发以给出83mg(13％)呈无色油的中间体63a和90mg(14％)的中间体63b。

通过使用与用于制备中间体63所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的中间体。

中间体68

中间体68a

的制备

中间体68b

和

化合物61：

将中间体113(1.67g；6.54mmol)在THF(15mL)中的溶液添加至中间体11(1.4g；4.36mmol)和TFA(2mL；26.16mmol)在THF(30mL)中的溶液里。将该反应混合物在室温下搅拌过夜。然后分部分地添加NaBH(OAc)₃(2.77g；13.08mmol)。在室温下，将反应混合物搅拌10天。将溶液倾倒进10％的K₂CO₃水性溶液中，并且添加EtOAc。将该混合物用EtOAc进行萃取(3x)。将这些有机层合并，用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，并且将溶剂蒸发。将残余物(2.9g；黄色油)通过硅胶色谱法(SiO₂；40g；洗脱液：从97％DCM，3％MeOH，0.3％NH₄OH至90％DCM，10％MeOH，1％NH₄OH)进行纯化。收集所希望的级分，并且将溶剂蒸发以给出266mg呈无色油的中间体68和215mg呈无色油的级分1。

将中间体68通过手性SFC(Lux-cellulose-25μm 250*30mm，流动相：50％CO₂，50％MeOH(0.3％iPrNH₂))进行纯化。收集纯级分，并且将溶剂蒸发以给出114mg(5％)呈无色油的中间体68a和109mg(4％)呈无色油的中间体68b。

将级分1通过反相(YMC-actus Triart C1810μm 30*150mm，流动相：梯度从65％NH₄HCO₃0.2％，35％ACN至25％NH₄HCO₃0.2％，75％ACN)进行纯化。收集含有产物的这些级分，并且将溶剂蒸发。将残余物(160mg；无色油)用水-ACN冷冻-干燥，以给出90mg(6％)呈白色固体的化合物61。

中间体69

的制备，

中间体69a

和中间体69b

在90℃下，将4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(5.07g；20.08mmol)、2-BOC-2,7-二氮杂-螺[4.4]壬烷(5g；22.09mmol)和DIPEA(6.9mL；40.17mmol)在iPrOH(80mL)中的溶液加热过夜。将该溶液冷却至室温，并且将该溶液倾倒进水中，然后用EtOAc萃取(3X)。将有机层用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，并且将溶剂蒸发至干燥。将残余物(9g，浅棕色固体)用乙醚吸收，将沉淀物过滤并且干燥以给出8.4g的中间体69(95％，灰白色固体)。

将中间体69通过手性SFC(Chiralpak IG 5μm 250*20mm，流动相：65％CO₂，35％iPrOH(0.3％iPrNH₂))进行纯化。收集纯级分，并且将溶剂蒸发以给出4.07g的中间体69a(46％，黄色泡沫)和4.29g的中间体69b(48％，黄色泡沫)。

中间体70a的制备：

通过使用与用于可替代制备中间体11所述的类似方法，由各自的起始材料中间体69a开始，制备中间体70a。

通过使用与用于可替代制备中间体11所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的中间体。

中间体71

的制备，

中间体71a

以及中间体71b

方法A：

将中间体11b(4.2g)和中间体72(1.6g；7mmol)在THF(50mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。然后，分部分地添加NaBH(OAc)₃(3g；14mmol)。将反应混合物在室温下搅拌24小时。将溶液倾倒进冷水中，用NaOH 3N的水性溶液进行碱化，并且添加EtOAc。将该有机层分离，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH 80g，流动相：梯度从98％DCM，2％MeOH(+10％NH₄OH)至95％DCM，5％MeOH(+10％NH₄OH))进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥产生852mg的中间体71。

将这些对映异构体通过手性SFC(CHIRALCEL OD-H 5μm 250*30mm；流动相：70％CO₂，30％EtOH)进行分离。收集纯级分，并且蒸发至干燥，产出294mg的中间体71a和303mg的中间体71b。

方法B：

该实验按相同量(640mg；1.95mmol)进行6次。

在室温下，将Ti(OEt)₄(0.8mL；3.9mmol)添加至中间体11(640mg；1.95mmol)和中间体72(665mg；2.92mmol)在DCE(20mL)和MeOH(8mL)的溶液中。将反应混合物在室温下搅拌24h，在10℃下冷却，然后分部分添加NaBH₃CN(367mg；5.84mmol)。将反应混合物在室温下搅拌8天。收集溶液用于后处理：倾倒入冷水中，用K₂CO₃粉末进行碱化，并且用DCM萃取。将该悬浮液通过

垫过滤。将滤液倾析，经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干燥。

将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，40g；流动相：梯度从100％DCM，0％MeOH至97％DCM，3％MeOH，0.1％NH₄OH)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥产生1.7g(28％)的中间体71。

将对映异构体通过手性SFC(Chiralcel OD-H 5μm 250*30mm；流动相：70％CO₂，30％EtOH(0.3％iPrNH₂))进行分离。收集纯级分，并且蒸发至干燥产出697mg(11％)的中间体71a和727mg(12％)的中间体71b。

遵循用于制备中间体71、71a和71b所述的方法A，由各自的起始材料开始，制备下表中的中间体。

中间体77

的制备，

中间体77a

和中间体77b

反应混合物1：在密封管中，将中间体78(2当量)、中间体11(100mg；0.305mmol)和Ti(OiPr)₄(6当量)在EtOH(0.2mL)中的溶液在45℃下加热1小时。将混合物冷却降至室温，用EtOH(3mL)稀释，并且添加NaBH₄(2当量)。根据LC/MS 60％的中间体77的形成指示，将反应混合物在室温下搅拌4小时。

反应混合物2和3：将反应按相同量进行两次：

在密封管中，将中间体78(2当量)、中间体11(450mg；1.37mmol)和Ti(OiPr)₄(6当量)在EtOH(0.9mL)中的溶液在45℃下加热1小时。将混合物冷却降至室温，用EtOH(13mL)稀释，并且添加NaBH₄(2当量)。将反应混合物在室温下搅拌18小时。

将三种反应混合物用EtOAc稀释，并且倾倒入10％K₂CO₃和盐水的混合物中。将悬浮液超声处理30min，并且通过

垫过滤。将有机层倾析，用10％水性K₂CO₃然后用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，并且蒸发至干燥。将残余物(2.6g)通过硅胶色谱法(不规则SiOH，50g；流动相：梯度从0％NH₄OH，0％MeOH，100％DCM至0.7％NH₄OH，7％MeOH，93％DCM)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥。将残余物(1.5g；89％)通过硅胶色谱法(不规则SiOH，40g；流动相：60％庚烷，35％EtOAc，5％MeOH(+10％NH₄OH))进行第二次纯化。收集含有产物的这些级分并且蒸发至干燥产出980mg(58％；基于LC/MS，82％纯度)的中间体77。

将中间体77的不纯的级分通过手性SFC(二乙基氨丙基5μm 150x30mm；流动相：90％CO2，10％MeOH)进一步纯化。收集这些纯级分，并且蒸发至干燥产出620mg(37％)的中间体77。

将这些对映异构体通过手性SFC(Lux纤维素-25μm 250*30mm；流动相：50％CO₂，50％MeOH(0.3％iPrNH₂))进行分离。收集这些含有产物的这些级分，并且将其蒸发至干燥产出276mg(16％)的中间体77a和269mg(16％)的中间体77b。

使用与用于制备中间体77、77a和77b所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的中间体。

中间体72的制备：

在N₂下，在5℃下，将在THF(19mL；38.33mmol)中的iPrMgCl 2M添加至中间体73(4.6g；18.83mmol)在THF(70mL)中的溶液里。将该溶液在5℃下搅拌30min，允许缓慢升至室温，然后搅拌1h，在40℃下加热5h。

将反应混合物冷却至室温，倾倒进冰水和饱和水性NH₄Cl溶液的混合物中，并且用EtOAc萃取。将有机层倾析，经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干燥产出4.7g的中间体72(定量的)。

使用与用于制备中间体72所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的中间体。

中间体73的制备：

在N₂下，将1-Boc-氮杂环丁烷-3-甲酸(5g；24.9mmol)和N,O-二甲基羟胺盐酸盐(3.64g；37.3mmol)置于圆底烧瓶中。添加DCM(75mL)，随后添加EDCI.HCl(7.15g；37.3mmol)、DMAP(155mg；1.27mmol)和DIPEA(6.5mL，37.4mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16h，并且用DCM(100mL)稀释。将有机层用水性1M HCl(2x 50mL)、饱和NaHCO₃溶液(50mL)，和盐水(50mL)洗涤。将有机相倾析，经MgSO₄干燥，过滤，并且蒸发至干燥产出6.04g(99％)的中间体73。

使用与用于制备中间体73所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的中间体。

中间体85的制备：

在N₂下，在室温下，将中间体11(204mg；0.62mmol)、中间体86(217mg；0.81mmol)和Ti(OEt)₄(0.26mL；1.24mmol)在DCE(7mL)中的溶液搅拌过夜。添加NaBH₃CN(129mg；2mmol)并且将溶液搅拌4天。逐滴添加水，然后将该溶液通过

垫进行过滤。将该滤液进行分离。将有机层用水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发直到干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，24g；流动相：梯度从97％DCM，3％MeOH(+10％NH₄OH)至95％DCM，5％MeOH(+10％NH₄OH))进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥产生209mg(80％)的中间体85。

使用与用于制备中间体85所述的类似方法，从相应的起始材料开始，制备下表中的中间体。

中间体86的制备：

将在DMF(10mL)中的2-溴-1-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-乙酮(0.5g；2.46mmol)添加至邻苯二甲酰亚胺钾(0.46g；2.46mmol)中。将反应混合物在室温下搅拌5h，倾倒进水-冰中，并且添加EtOAc。将有机层分离，用水，盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，并且蒸发直到干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH 15μm至40μm，24g；流动相：97％DCM，3％MeOH(+10％NH₄OH))进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥产生460mg(69％)的中间体86。

中间体89的制备：

在N₂下，在-70℃下，将在己烷(6.2mL；9.92mmol)中的n-BuLi 1.6M添加至4-碘-1-甲基-1H-吡唑(1.7g；8.17mmol)在THF(35mL)的溶液中。将反应混合物在-70℃下搅拌1小时，然后逐滴添加中间体73(2g；8.19mmol)在THF(10mL)中的溶液。将反应混合物在-70℃下搅拌2小时，允许加热至室温并且搅拌过夜。将溶液倾倒进冰-水和饱和NH₄Cl溶液的混合物中，然后添加EtOAc。将有机层倾析，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，50g；流动相：梯度从100％DCM，0％MeOH至98％DCM，2％MeOH，0.1％NH₄OH)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥产生320mg(15％)的中间体89。

中间体92的制备：

在N₂下，将HBTU(210mg；0.555mmol)添加至BOC-L-脯氨酸(119mg；0.555mmol)和DIPEA(0.48mL；2.775mmol)在DMF(10mL)中的溶液里。将溶液搅拌30min。然后，添加中间体10b(200mg)并且将溶液在室温下搅拌经过整个周末。随后，将反应混合物倾倒进冰水中，用10％的K₂CO₃水性溶液碱化，并且用EtOAc萃取。将有机层用水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，24g；流动相：梯度从0.5％NH₄OH，5％MeOH，95％DCM至1％NH₄OH，10％MeOH，90％DCM)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥产生168mg的中间体92。

使用与用于制备中间体92所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的中间体。

中间体107

的制备

在氮气下，将中间体11(250mg；0.761mmol)、N-Boc-4-甲酰基哌啶(195mg；0.914mmol)在THF(7mL)中的溶液在室温下搅拌3h。添加NaBH(OAc)₃(323mg；1.52mmol)，并且将混合物在室温下搅拌过夜。添加10％的K₂CO₃水性溶液和DCM。将该有机层分离，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱(不规则SiOH，24g；流动相：梯度从100％DCM 0％MeOH(0％NH₄OH)至90％DCM 10％MeOH(10％NH₄OH))进行纯化。将含有产物的这些级分混合，并且蒸发至干燥产出383mg(96％)的中间体107。

中间体110的制备：

将DIPEA(0.45mL，3.24mmol)添加至2-(4-氟苯基)丙醇(CAS[59667-20-8])(0.25g，1.62mmol)在DCM(1.4mL)中的冰冷的溶液里，随后添加甲磺酰氯化物(0.155mL，1.95mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。将该混合物用DCM(20mL)稀释，并且用饱和的碳酸氢钠溶液(15mL)洗涤。将溶液经MgS0₄干燥，过滤，并且在减压下浓缩产出0.377g的中间体110。将该产物无需进一步纯化用于下一个步骤。

中间体112的制备：

在室温下(在5min至10min内)，将中间体111(607mg，2.1mmol)和异丙醇钛(1.25mL，1.37mmol)在EtOH(4.6mL)中的溶液逐滴添加至中间体11(459mg，1.4mmol)和NaBH₃CN(264mg，4.2mmol)在EtOH(9.2mL)中的混合物里。将该混合物在室温下搅拌1h。将反应混合物用DCM稀释，并且倾倒进10％的K₂CO₃水性溶液中。将该悬浮液经

垫过滤。将有机层倾析，用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，24g；流动相：DCM/MeOH：梯度从100/0至90/10)进行纯化。收集这些纯级分，并且蒸发至干燥产出0.521g(62％)的中间体112(62％)。

B.化合物的制备

实例B1

化合物1的制备：

将TEA(88.5mg，0.875mmol)和苯甲醛(46.4mg，0.44mmol)顺序地添加至中间体11(190mg，0.44mmol)在无水DCM(4mL)中的溶液里，并且将该混合物在室温下搅拌30min。然后添加NaBH(OAc)₃(185.4mg，0.875mmol)，并且将该混合物在室温下搅拌过夜。添加饱和水性NaHCO₃(10mL)和DCM(10mL)并且将混合物倾析。将水性层用DCM(10mL)萃取两次。将这些有机层合并，用盐水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，并且蒸发以给出黄色油。将粗残余物通过硅胶色谱法(柱Gemini 150*255um，流动相：水(0.05％氢氧化铵v/v)/ACN：梯度从55/45至25/75)进行纯化。然后将该残余物冷冻-干燥以给出65mg呈黄色固体的化合物1(35％产率)。

实例B2

化合物2的制备：

在室温下，将中间体11(100mg，0.3mmol)、3,3,3-三氟丙醛(51mg，0.46mmol)在干燥DCM(3mL)中搅拌1h，然后添加NaBH(OAc)₃(129mg，0.61mmol)，并且将该混合物在室温下搅拌过夜。将该混合物倾倒进水中，然后用DCM萃取，将有机层经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干燥。将该残余物通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm至40μm 24g，流动相：NH₄OH/DCM/MeOH：0.1/97/3)进行纯化。收集含有产物的级分，并且蒸发至干燥产出58mg(45％)的化合物2，将其用ACN/水20/80冷冻-干燥以给出45mg的化合物2。

化合物13

的制备

将中间体11c(600mg)、异丁醛(160mg；2.221mmol)、NaBH(OAc)₃(1.57g；7.405mmol)和Et₃N(0.64mL；4.443mmol)在DCE(12mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。添加NaHCO₃的饱和水性溶液(20mL)和DCM(20mL)。将有机层倾析，并且将水层用DCM(20mL*2)萃取。将这些合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，过滤并且蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(流动相：梯度从石油醚/EtOAc从100/0至0/100，然后EtOAc/MeOH从100/0至85/15)进行纯化。收集这些纯级分，蒸发至干燥，并且冷冻干燥产出320mg的化合物13。

通过使用与用于制备化合物2所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B3

化合物14的制备：

在室温下，将在ACN(20mL)中的中间体10b(0.42g)、苄基溴(0.19mL，1.6mmol)，和K₂CO₃(0.55g，4.0mmol)搅拌过夜。将混合物倾倒入水中，用EtOAc萃取，将有机层用盐水洗涤，然后经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm至40μm 40g，流动相：NH₄OH/DCM/MeOH：0.1/97/3)进行纯化。收集含有产物的级分，并且蒸发至干燥产出170mg(31％)的化合物14，该化合物14由DIPE结晶，过滤并且干燥以给出103mg的化合物14。

通过使用与用于制备化合物14所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物和中间体。

实例B4

化合物20的制备：

将如在Journal ofMedicinal Chemistry[医药化学杂志](2016)，59(3)，892-913中所述制备的4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(150mg，0.59mmol)、2-苄基2,7-二氮杂-螺-[4.4]壬烷(CAS[885275-27-4])(129mg，0.59mmol)和DIPEA(0.31mL，1.78mmol)在ACN(15mL)中的混合物在80℃下加热过夜。将混合物冷却并且倾倒进冷水中，将该产物用EtOAc萃取，将有机层经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(固定相：不规则裸二氧化硅24g，流动相：DCM/MeOH/NH₄OH：97/3/0.1)进行纯化。收集含有产物的级分，并且蒸发至干燥产出200mg(产率78％)的化合物20(外消旋混合物)。

对映异构体20a

和20b

的制备

将对映异构体通过手性SFC(固定相：Lux纤维素-45μm 250*21.2mm，流动相：CO₂/MeOH(0.3％iPrNH₂)：70/30)进行分离。收集含有产物的级分，并且蒸发至干燥产出80mg(产率31％)的第一洗脱级分F1和81mg(产率31％)的第二洗脱级分F2。

在10℃下，将F1(80mg；0.185mmol)溶解于丙酮中，并且添加在二噁烷(2当量，0.37mmol，93μL)中的4N HCl，随后添加Et₂O。将混合物蒸发至干燥，并且用Et₂O吸收，将沉淀物过滤并干燥给出65mg(产率20％)呈盐酸盐的化合物20a(1.95HCl.1.25H₂O.0.19二噁烷.0.06Et₂O)。

在10℃下，将F2(81mg，0.187mmol)溶解于丙酮中，并且添加在二噁烷(2当量，0.37mmol，93μL)中的4N HCl，随后添加Et₂O。将混合物蒸发至干燥，用Et₂O吸收，将沉淀物过滤并干燥给出49mg(产率15％)呈盐酸盐的化合物20b(2.0HCl.1.8H₂O)。

实例B5

化合物18的制备：

在室温下，将中间体6(222mg，0.63mmol)、苄基溴(82μL，0.685mmol)和K₂CO₃(430mg，3.11mmol)在ACN(20mL)中的混合物搅拌过夜。将溶液倾倒进冷水中，将该产物用EtOAc萃取，将有机层经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(固定相：不规则15μm至40μm，30g，流动相：DCM/MeOH/NH₄OH：梯度从100/0/0至97/3/0.1)进行纯化。收集含有产物的级分，并且蒸发至干燥产出170mg(产率61％)的化合物18(外消旋混合物)。

对映异构体化合物21a

的制备

和化合物21b

将化合物18经手性SFC(固定相：Lux纤维素-25μm 250*30mm，流动相：CO₂/MeOH：75/25)分离成它的对映异构体。收集含有产物的级分，并且蒸发至干燥产出72mg(产率26％)的第一洗脱级分F1和76mg(产率27％)的第二洗脱级分F2。

将F1溶解于丙酮(3mL)中，在10℃下逐滴添加4N HCl在二噁烷(2当量，80μL，0.32mmol)中的溶液，添加Et₂O，并且30min后，将沉淀物过滤且干燥给出54mg(产率16％)呈盐酸盐的化合物21a(1.8HCl.1.9H₂O)。

将F2溶解于丙酮(3mL)中，在10℃下逐滴添加4N HCl在二噁烷(2当量，85μL，0.34mmol)中的溶液，添加Et₂O，并且30min后，将沉淀物过滤并且干燥给出34mg(产率10％)呈盐酸盐的化合物21b(1.8HCl.2.1H₂O)。

实例B6

化合物22的制备：

向中间体11(200mg，0.51mmol)在ACN(5mL)中的溶液里添加中间体16(220mg，1.08mmol)和K₂CO₃(221.4mg，1.53mmol)。将混合物加热至90℃并搅拌过夜。将水(10mL)和DCM(10mL)添加至反应混合物中。将有机相分离，水性层用DCM(10mL)萃取。将这些有机层合并，用盐水(10mL)洗涤，蒸发以给出残余物，将该残余物通过硅胶色谱法(柱：Gemini 150*255u；流动相：水(0.05％氢氧化铵v/v)/CH₃CN：梯度从42/58至12/88，梯度时间(min)：10；100％B保持时间(min)：2；流速(ml/min)：25)进行纯化。

收集所希望的级分并且在真空中干燥以给出残余物。将该残余物冻干以给出65mg(产率28％)呈淡黄色固体的化合物22。

实例B7

化合物24的制备：

在室温下，将在MeOH(10mL)中的中间体17(180mg，0.36mmol)和3N NaOH(0.61mL，1.82mmol)搅拌1h。将混合物冷却至室温，倾倒进水中并且用EtOAc萃取。将有机层经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将该残余物用乙腈/水20/80冷冻-干燥产出130mg的化合物24(79％产率)。

实例B8

化合物25的制备：

在5℃下，向中间体43(100mg，0.2mmol)在DCM(10mL)中的溶液里逐滴添加在二噁烷(246μL，0.99mmol)中的4N HCl，并且将混合物在室温下搅拌15h。将该反应蒸发至干燥。然后，将该残余物用DCM吸收，用NaHCO₃洗涤。将有机层经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将该残余物通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm至40μm 24g，流动相：NH₄OH/DCM/MeOH梯度从0.5/95/5至1/90/10)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥。将该残余物用乙腈/水20/80冷冻-干燥产出25mg的化合物25(31％产率)。

通过使用与用于制备化合物25所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B9

化合物26的制备：

在密封管中，在90℃下，将4-氯-6-(2,2,2-三氟乙基)噻吩并[2,3-d]嘧啶(0.15g，0.594mmol)、6-(苯基甲氧基)-2-氮杂螺[3.3]庚烷(0.145g，0.713mmol)和DIPEA(0.205mL，1.19mmol)在异丙醇(2mL)中加热过夜。将该溶液冷却至室温，并且倾倒进水中然后用EtOAc萃取。将有机层用水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干。将该粗产物由Et₂O结晶并且干燥。将该残余物通过硅胶色谱法(15μm至40μm，24g，洗脱液：庚烷/EtOAc：80/20至20/80)进行纯化。将纯级分混合并将溶剂蒸发。将残余物通过Et₂O吸收，过滤并且干燥产出0.111g的化合物26(45％产率)。

实例B10

化合物28的制备：

在50℃下，将中间体10b(200mg)、1-甲基-1H-吡唑-4-甲醛(183mg；1.66mmol)和AcOH(32μL；0.555mmol)在DCE(6mL)中的混合物搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，并且添加NaBH(OAc)₃(353mg；1.665mmol)。将该反应混合物在室温下搅拌过夜，倾倒进10％的K₂CO₃水性溶液中，并且用DCM萃取。将有机层倾析，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，24g；流动相：梯度从0％NH₄OH，0％MeOH，100％DCM至1％NH₄OH，10％MeOH，90％DCM)进行纯化。收集纯级分，并且蒸发至干燥产出165mg呈油状物的化合物28(73％)。将化合物28溶解于ACN中，并且添加HCl(4N在二噁烷中)(277μL；1.11mmol)。将HCl盐过滤，但显示是过于吸湿的。然后将残余物溶解于DCM/MeOH中，并且将有机层用10％的K₂CO₃水性溶液洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干燥。将所得残余物溶解于ACN中，并且添加富马酸(47mg；0.404mmol；1当量)，并且允许溶液静置直到结晶(过夜)。将沉淀物过滤，用ACN，然后用Et₂O洗涤，并且干燥产出188mg呈富马酸盐的化合物28(基于1H NMR，1当量)。

通过使用与用于制备化合物28所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B11

化合物29的制备：

在10℃下，将在二噁烷(0.7mL；2.85mmol)中的4N HCl添加至中间体50(145mg；0.28mmol)在ACN(7mL)中的溶液里。在室温下将该溶液搅拌过夜。将溶液蒸发至干燥。将该残余物吸收于冰水中，用NH₄OH碱化，并且添加DCM。将有机层分离，经MgSO₄干燥，过滤，并且蒸发直到干燥。将残余物通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm至40μm 12g，流动相：DCM/MeOH/NH₄OH 90/10/10)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥。将残余物用乙腈/水20/80冷冻-干燥，产出0.050g(43％产率)化合物29。

通过使用与用于制备化合物29所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B12

化合物36的制备：

在N₂流下，向中间体11(287mg，0.87mmol)在DCM(14mL)中的溶液里添加1-异丙基-1H-吡唑-4-甲醛(133mg，0.68mmol)和AcOH(51μL，0.87mmol)。将该混合物在室温下搅拌2h。添加NaBH(OAc)₃(742mg，3.5mmol)并且将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物倾倒进冰水中并且进行分离。将水性层用DCM萃取。将有机层用盐水洗涤，然后经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发。将残余物通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm至40μm 24g，流动相：DCM/MeOH(+10％NH₄OH)：梯度从97/3至90/10)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥。将残余物用乙腈/水：20/80冷冻-干燥产出0.057g(15％产率)的化合物36。

通过使用与用于制备化合物36所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B13

化合物45

的制备

向中间体11c(200mg)在二氯乙烷(10mL)中的溶液里添加2-甲基苯甲醛(59mg；0.494mmol)、NaBH(OAc)₃(523mg；2.47mmol)和三乙胺(150mg；1.48mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜，并且然后添加NaHCO₃(10mL)的饱和水性溶液和DCM(10mL)。将混合物分离并且将水性层用DCM(10mL*2)萃取。

将这些有机层合并，用水(10mL)洗涤，经Na₂SO₄干燥，蒸发以给出300mg的黄色油，将该黄色油通过制备型高效液相色谱法(柱：Kromasil 150*25mm*10um；条件：

A：水(0.05％氢氧化氨v/v)，B：MeCN，在开始时：A(52％)和B(48％)，在结束时：A：(22％)和B(78％)，梯度时间(min)8；流速(ml/min)：30)进行纯化。

收集含有产物的这些级分，并且将溶剂在真空下蒸发。将水层冻干至干燥以给出150mg(70％)呈白色固体的化合物45。

通过使用与用于制备化合物45所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B14

化合物108

的制备

将S)-5-甲基-5-氮杂螺[2.4]庚烷-6-甲酸(94mg；0.61mmol)、HBTU(231mg；0.61mmol)和DIPEA(0.52mL；3.04mmol)在DMF(5mL)中的混合物搅拌1小时。然后，添加中间体10b(200mg)在DMF(5mL)中的溶液，并且将该反应混合物在室温下搅拌过夜。将该反应混合物倾倒进冰水中，用10％的K₂CO₃水性溶液碱化，并且用EtOAc萃取。将有机层用H₂O然后用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，10g；流动相：梯度从3％MeOH，97％DCM至10％MeOH，90％DCM)进行纯化。收集含有产物的级分并且蒸发至干燥产出144mg不纯的级分1。进行第二纯化(不规则SiOH，40g；流动相：0.5％NH₄OH，95％DCM，5％MeOH)。收集含有产物的级分，并且蒸发至干燥产出43mg不纯的级分2。

将级分2通过硅胶色谱法(不规则SiOH，10g；流动相：梯度从3％MeOH，97％DCM至10％MeOH，90％DCM)再次进行纯化。收集含有产物的级分并蒸发至干燥。将所得残余物用二异丙醚吸收。将该固体过滤并且干燥产出17mg的化合物108。

通过使用与用于制备化合物108所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B18

化合物57的制备：

将LiAlH₄(66mg，1.73mmol)添加至在THF(12mL)中的中间体54(450mg，0.693mmol)中。将反应在室温下搅拌1.5h。将反应用饱和NH₄Cl水性溶液淬灭，用DCM萃取，并且浓缩以提供白色固体。将该固体通过制备型高效液相色谱法(柱：Xtimate C18150*25mm*10um，条件：水(0.05％氢氧化铵,v/v)/ACN：梯度从52/48至42/58)进行纯化。向水性层中添加0.1mL1N HCl。将溶液冷冻-干燥产出30mg呈黄色固体(HCl盐)的化合物57。

实例B19

化合物58的制备：

向中间体8(200mg，0.5mmol)在THF(10mL)中的溶液里添加异丁醛(70μL，0.77mmol)和TEA(0.37mL，2.63mmol)。将混合物在室温下搅拌3h。添加NaBH(OAc)₃(317mg，1.5mmol)并且将溶液在室温下搅拌过夜。将溶液倾倒进冷水中，并且用K₂CO₃粉末碱化。将产物用EtOAc萃取。将有机层经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(固定相：不规则裸二氧化硅40g，流动相：NH₄OH/DCM/MeOH：0.2/98/2)进行纯化。在10℃下，将残余物溶解于5mL的ACN中，逐滴添加在二噁烷(117μL；0.47mmol)中的2当量的4N HCl。添加Et₂O，并且30min后，将溶液蒸发至干燥，添加Et₂O，并且将沉淀物过滤并且干燥产出38mg的化合物58(HCl盐)。

通过使用与用于制备化合物58所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B21

化合物62的制备：

将在THF(0.815mL，0.815mmol)中的1M TBAF逐滴添加至中间体55(0.248g，0.407mmol)在Me-THF(8mL)中的溶液里，并且将反应混合物在室温下搅拌过夜。该反应混合物倾倒进10％水性K₂CO₃溶液中并用EtOAc萃取。将有机层用10％水性K₂CO₃(30mL)、水(30mL)和盐水(30mL)洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(80g，15μm至40μm，洗脱液：DCM/MeOH：97/3至88/12)进行纯化。将纯级分混合，并且将溶剂蒸发产出0.043g的化合物62(21％产率)。

实例B22

化合物63的制备：

在室温下，将2,2-二甲基-四氢吡喃-4-甲醛(87mg；0.609mmol)和NaBH(OAc)₃(645mg；3.045mmol)添加至中间体11(200mg；0.609mmol)在DCE(4mL)的溶液中，并且将反应混合物搅拌过夜。将反应混合物用DCM稀释，并且倾倒进10％的K₂CO₃水性溶液中。将有机层倾析，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，24g；流动相：NH₄OH/MeOH/DCM：梯度从0/0/100至0.7/7/93)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥。将残余物由水/ACN(80/20；10mL)冷冻-干燥产出155mg的化合物63(56％产率)。

通过使用与用于制备化合物63所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B23

化合物64的制备：

在室温下，将中间体11(150mg，0.457mmol)、2,2,2-三氟乙基三氟甲基磺酸酯(69μL，0.502mmol)和DBU(CAS[6674-22-2])(136μL，0.914mmol)在DMSO(3mL)中的混合物搅拌18h。将该反应混合物倾倒进水中，并且用EtOAc萃取。将有机层用水然后用盐水洗涤若干次，经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，24g；流动相：NH₄OH/MeOH/DCM：梯度从0/0/100至0.7/7/93)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，10g；流动相：EtOAc/庚烷：梯度从60/40至80/20)进行第二次纯化。收集纯级分并蒸发至干燥。将残余物由DIPE结晶，在真空下在50℃下干燥后产出100mg的化合物64(53％产率)。

实例B24

化合物67的制备：

在N₂下，将中间体11(100mg；0.31mmol)、2-(四氢-2H-吡喃-4-基))乙醛(48μL；0.37mmol)在THF(3mL)中的溶液在室温下搅拌3h。添加NaBH(OAc)₃(129mg；0.61mmol)，并且将混合物在室温下搅拌过夜。添加10％的K₂CO₃水性溶液和EtOAc。将混合物用EtOAc萃取(x3)。将有机层合并，用盐水洗涤，然后经MgSO₄干燥，过滤，并且将溶剂蒸发。

将残余物(136mg)通过硅胶色谱法(SiO₂，4g；梯度：从95％DCM，5％MeOH，0.5％NH₄OH至90％DCM，10％MeOH，1％NH₄OH)进行纯化。收集含有产物的级分，并且将溶剂蒸发以给出90mg的无色油，将该无色油用二异丙基醚重结晶。将沉淀物过滤并且干燥以给出45mg(34％)呈白色固体的化合物67。

实例B25

化合物71

的制备

在密封管中，在N₂下，将中间体35(211mg；1.37mmol)和Ti(OiPr)₄(436μL；1.83mmol)添加至中间体11(300mg；0.914mmol)在THF(6mL)中的溶液里。将该溶液在50℃下搅拌5小时，然后在室温下过夜。将反应混合物冷却至5℃，并且逐滴添加在THF(2.28mL；4.57mmol)中的异丙基氯化镁2M。允许该反应混合物缓慢升至室温并搅拌过夜。将该反应混合物用EtOAc稀释，并且倾倒入10％的K₂CO₃水性溶液中。将沉淀物通过经

过滤去除。将有机层倾析，用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，40g；流动相：梯度从0％MeOH，100％DCM至10％MeOH，90％DCM)进行纯化。收集含有产物的这些级分，并且蒸发至干燥以给出0.337g的中间体残余物，将该残余物通过色谱分析经反相(固定相：YMC-actus Triart C1810μm 30*150mm，流动相：梯度从55％NH₄HCO₃0.2％，45％ACN至0％NH₄HCO₃0.2％，100％ACN)再次进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥。将残余物用乙腈/水20/80冷冻-干燥以提供120mg(26％)的化合物71。

实例B26

化合物77的制备：

将肼(36μL，0.92mmol)添加至中间体41(110mg，0.18mmol)在乙醇(5mL)中的溶液里。将溶液在70℃下加热1h 30min。将该反应冷却至室温，然后倾倒进水中并用DCM萃取。将有机层用盐水洗涤，然后经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(固定相：不规则裸二氧化硅40g，流动相：NH₄OH/DCM/MeOH：1/85/15)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥。将残余物溶解于2mL的ACN中，在10℃下，逐滴添加在iPrOH中的3当量的6NHCl。添加Et₂O并且30分钟后，将沉淀物过滤并干燥产出83mg的化合物77(37％产率)。

实例B28

化合物82的制备：

将TFA(1.5mL)添加至中间体25(300mg，0.571mmol)在DCM(15mL)中的溶液里，并且将反应混合物搅拌18h。该反应混合物倾倒进10％K₂CO₃水性溶液中并用DCM萃取。将有机层倾析，经

过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，10g；流动相：NH₄OH/MeOH/DCM：梯度从0.3/3/97至1.5/15/85)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥。将残余物由DIPE结晶，并且干燥产出118mg的化合物82(48％产率)。

通过使用与用于制备化合物82所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B29

化合物84的制备：

在室温下，将中间体11b(198mg)和4-氟苯基丙酮(68μL，0.51mmol)在THF(5mL)中搅拌过夜。然后将NaBH(OAc)₃(161mg，0.76mmol)分部分地添加。将混合物在室温下搅拌24h。将溶液倾倒进冷水中，并且用3NNaOH溶液碱化，添加EtOAc。将该有机层分离，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(固定相：不规则裸二氧化硅40g，流动相：NH₄OH/DCM/MeOH：0.1/97/3)进行纯化。将这些纯级分进行收集并且将该溶剂在真空下蒸发。将残余物用乙腈/水20/80冷冻-干燥产出30mg的化合物84。

通过使用与用于制备化合物84所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B32

化合物133

的制备，

化合物137

和化合物138

在室温下，将Ti(OEt)₄(251μL；1.2mmol)添加至中间体11(200mg；0.6mmol)和2,5,6,7-四氢-2-甲基-4H-吲唑-4-酮(120mg；0.8mmol)在二氯乙烷(5mL)和MeOH(1.5mL)中的溶液里。将混合物在室温下搅拌2小时，然后分部分地添加NaBH₃CN(127mg；2mmol)。在室温下将该混合物搅拌2天。将溶液倾倒进冷水中，并添加DCM。将混合物用K₂CO₃粉末碱化，通过

垫过滤。将产物用DCM萃取。将有机层经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。

将残余物(361mg)通过硅胶色谱(固定相：不规则裸二氧化硅40g，流动相：0.5％NH₄OH，95％DCM，5％MeOH)进行纯化。将含有产物的级分混合并浓缩以提供120mg(43％)的化合物133。

经手性SFC(固定相：ChiralpakAD-H 5μm 250*30mm，流动相：70％CO₂，30％MeOH(0.3％iPrNH₂))进行化合物133的手性分离。将含有产物的这些级分混合并且浓缩以提供：

-45mg的级分1，将该级分1用乙腈/水20/80冷冻-干燥，以给出40mg(43％)呈白色粉末的化合物137。

-46mg的级分2，将该级分2用乙腈/水20/80冷冻-干燥，以给出42mg(46％)呈白色粉末的化合物138。

实例B33

化合物145

的制备，

化合物154

和化合物155

在45℃下，将1-四氢-2H-吡喃-4-基乙酮(351mg；2.74mmol)、中间体11(600mg；1.83mmol)、Ti(OiPr)₄(870μL；2.92mmol)在EtOH(3mL)中的溶液搅拌2小时。添加另外的EtOH(18mL)和NaBH₄(138mg；3.65mmol)。将反应混合物在室温下搅拌5小时。将反应混合物用DCM稀释，并且倾倒进10％的K₂CO₃水性溶液中。将不可溶的物质通过经

过滤去除。将有机层分离，用水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，24g；流动相：梯度从0％NH₄OH，0％MeOH，100％DCM至1％NH₄OH，10％MeOH，90％DCM)进行纯化。收集含有产物的这些级分并且蒸发至干燥产出487mg(60％)的化合物145。通过手性SFC(CHIRALPAK AD-H 5μm 250*30mm；流动相：70％CO₂，EtOH/iPrOH 50/50v/v的30％混合物)分离化合物145的对映异构体。收集含有产物的这些级分并且蒸发至干燥。将这些残余物由水/ACN(80/20；10mL)冷冻干燥产出171mg(21％)的化合物154和178mg(22％)的化合物155。

通过使用与用于制备化合物145所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。最相关的小偏差在‘化合物编号’列中指示。

化合物312(非对映异构体A(2种化合物(RR和SS)或(RS和SR)的混合物)和

化合物313(非对映异构体B(2种化合物(RS和SR)或(RR和SS)的混合物)的制备：

Co312：非对映异构体A(RR和SS)或(RS和SR)

Co313：非对映异构体B(RS和SR)或(RR和SS)

反应混合物1：在45℃下，将3-甲基-1-(6-氧杂螺[4.5]癸-9-基)-1-丁酮(1.5当量)、中间体11(100mg；0.285mmol)、Ti(OiPr)₄(1.6当量)在乙醇中的溶液(0.25mL)搅拌2小时。添加乙醇(3mL)和NaBH₄(2当量)。将反应混合物在室温下搅拌18小时。

反应混合物2：在45℃下，将3-甲基-1-(6-氧杂螺[4.5]癸-9-基)-1-丁酮(546mg；2.436mmol；2当量)、中间体11(400mg；1.22mmol)、Ti(OiPr)₄(580μL；1.95mmol)在乙醇(1mL)中的溶液搅拌2小时。添加乙醇(12mL)和NaBH₄(92mg；2.436mmol)。将反应混合物在室温下搅拌18小时。

收集两种反应混合物，并且用EtOAc稀释，倾倒进10％的K₂CO₃水性溶液中，并且通过

垫过滤。将有机层倾析，用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，24g；流动相：梯度从0％NH₄OH，0％MeOH，100％DCM至0.9％NH₄OH，9％MeOH，91％DCM)进行纯化。收集希望的级分并蒸发至干燥。

将残余物(280mg)通过硅胶色谱法(不规则SiOH，24g；流动相：67％庚烷，33％EtOAc(含有10％NH₄OH的+5％MeOH))进一步分离。收集所希望的级分并蒸发至干燥产出：

-100mg(12％)的化合物312(第一次洗脱；不足够纯)，将该化合物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，24g；流动相：梯度从0％NH₄OH，0％MeOH，100％DCM至0.5％NH₄OH，5％MeOH，95％DCM)进一步纯化。收集纯级分并蒸发至干燥。将纯级分由水/ACN(80/20；10mL)冷冻干燥产出80mg(10％)的化合物312。

-110mg(13％)的化合物313(第二次洗脱；不足够纯)，将该化合物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，24g；流动相：梯度从0％NH₄OH，0％MeOH，100％DCM至0.5％NH₄OH，5％MeOH，95％DCM)进一步纯化。收集纯级分并蒸发至干燥。将纯级分由水/ACN(80/20；10mL)冷冻干燥产出70mg(9％)的化合物313。

实例B34

化合物147的制备：

将中间体60a(216mg；0.4mmol)和TFA(1mL；13.067mmol)在DCM(10mL)中的混合物在室温下搅拌4h。将反应混合物用DCM稀释，并且用10％的K₂CO₃水性溶液碱化。将有机层倾析，用水洗涤，通过

过滤，并且蒸发至干燥。将残余物(200mg)通过硅胶色谱法(不规则SiOH，10g；流动相：85％DCM，14％MeOH，1％NH₄OH)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥。将残余物由水/ACN(80/20；10mL)冷冻-干燥产出136mg的化合物147(77％)。

通过使用与用于制备化合物147所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B35

化合物156

的制备

化合物193

化合物162

和化合物157：

将2-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1-丙酮(1.66g；10.63mmol)在THF(30mL)中的溶液添加至中间体11(2.33g；7.08mmol)和TFA(3.3mL；42.5mmol)在THF(45mL)中的溶液里。将该反应混合物在室温下搅拌过夜。然后分部分地添加NaBH(OAc)₃(4.5g；21.25mmol)。在室温下，将反应混合物搅拌7天。在室温下，将反应混合物搅拌3天。将溶液倾倒进10％的K₂CO₃水性溶液，添加EtOAc。将该混合物用EtOAc进行萃取(3x)。将这些有机层合并，用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤，并且将溶剂蒸发。将残余物(3.9g；黄色油)通过硅胶色谱法(SiO₂；40g；洗脱液：从97％DCM，3％MeOH，0.3％NH₄OH至90％DCM，10％MeOH，1％NH₄OH)进行纯化。收集纯级分并且将溶剂蒸发以给出666mg的浅棕色固体化合物156。

将化合物156通过反相(YMC-actus Triart C1810μm 30*150mm，流动相：梯度从50％NH₄HCO₃0.2％，50％ACN至0％NH₄HCO₃0.2％，100％ACN)进行纯化。收集纯级分，并且将溶剂蒸发以给出66mg的化合物157(无色油)和264mg的化合物156(8％；无色油)。

将50mg的化合物156用水-ACN冷冻-干燥，以给出47mg的化合物156(白色固体)。

将化合物157用水-ACN冷冻-干燥，以给出53mg的化合物157(2％，白色固体)。

将化合物156(214mg)通过手性SFC(CHIRALPAK AD-H 5μm 250*30mm，流动相：75％CO₂，25％EtOH(0.3％iPrNH₂))进行纯化。收集纯级分，并且将溶剂蒸发以给出82mg的化合物193(无色油)和82mg的化合物162(无色油)。

将化合物193用水-ACN冷冻-干燥，以给出72mg的化合物193(2％，白色固体)。

将化合物162用水-ACN冷冻-干燥，以给出77mg的化合物162(2％，白色固体)。

通过使用与用于制备化合物193所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B36

化合物161

的制备

化合物166：

和化合物167：

在密封管中，在N₂下，将1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲醛(284mg；2.28mmol)和Ti(iPrO)₄(727μL；3.05mmol)添加至中间体11(500mg；1.52mmol)在THF(10mL)中的溶液里。在50℃下将溶液搅拌2h。将反应混合物冷却至5℃，并且逐滴添加iPrMgCl(3.8mL；7.61mmol)。允许该反应混合物缓慢升至室温并搅拌过夜。将反应混合物倾倒进10％的K₂CO₃和EtOAc水性溶液中。将不可溶的物质通过

垫过滤，然后将有机层倾析，经MgSO₄干燥，过滤，并且将溶剂蒸发。将残余物(866mg，棕色油)通过硅胶色谱法(SiO₂；40g；洗脱液：从96％DCM，4％MeOH，0.4％NH₄OH至93％DCM，7％MeOH，0.7％NH₄OH)进行纯化。收集纯级分并且将溶剂蒸发至干燥。将残余物(496mg，黄色油)用乙醚重结晶。将沉淀物过滤，并且干燥以给出324mg的化合物161(45％，白色固体)。

将270mg的化合物161通过手性SFC(CHIRALPAK AD-H 5μm 250*30mm，流动相：70％CO₂，30％iPOH(0.3％iPrNH₂))进行纯化。收集纯级分，并且将溶剂蒸发以给出128mg的化合物166(18％，无色油)和131mg的化合物167(18％，无色油)。

将化合物166用水-ACN冷冻-干燥，以给出110mg的化合物166(15％，白色固体)。

将化合物167用水-ACN冷冻-干燥，以给出115mg的化合物167(16％，白色固体)。

通过使用与用于制备化合物161所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。最相关的小偏差在产率列中指示。

实例B38

化合物170的制备：

中间体11b(198mg)和在THF(5mL)中的1-(3,5-二氟苯基)丙-2-酮)(86mg；0.51mmol)。将该混合物在室温下搅拌过夜。然后将NaBH(OAc)₃(161mg；0.76mmol)分部分地添加。将混合物在室温下搅拌24h。将溶液倾倒进冷水中，用NaOH 3N的溶液碱化，添加EtOAc。将该有机层分离，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物(141mg)通过硅胶色谱法(不规则裸二氧化硅40g，流动相：0.1％NH₄OH，97％DCM，3％MeOH)进行纯化。收集纯级分并将溶剂蒸发。将残余物(50mg)用ACN/水20/80冷冻-干燥以给出16mg的化合物170。

通过使用与用于制备化合物170所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B39

化合物184的制备：

在50℃下，将中间体70a(250mg；0.73mmol)、异丁醛(200μL；2.19mmol)和AcOH(42μL；0.73mmol)在DCE(8mL)中的混合物搅拌3h。将反应混合物冷却至室温，并且添加NaBH(OAc)₃(464mg；2.19mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，倾倒进10％的K₂CO₃水性溶液中，并且用DCM萃取。将有机层倾析，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，24g；流动相：梯度从100％DCM至10％MeOH(+10％NH₄OH)，90％DCM)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥。将盐酸盐进行制备：将残余物(110mg，38％)溶解于ACN中，并且添加在1,4-二噁烷(2当量)中的HCl4N。将溶液蒸发至干燥，并且用ACN吸收若干次。将残余物由Et₂O结晶产出120mg的化合物184(HCl盐)。

通过使用与用于制备化合物184所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B40

化合物289

的制备

将中间体70a(100mg；0.29mmol)、对-甲苯甲醛(50μL；0.35mmol)在二氯乙烷(3mL)中的溶液在室温下搅拌3h。添加NaBH(OAc)₃(124mg；0.58mmol)，并且将混合物在室温下搅拌过夜。添加10％的K₂CO₃水性溶液和DCM。将有机层倾析，通过

过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，10g；流动相：梯度从0％NH4OH，0％MeOH，100％DCM至0.5％NH₄OH，5％MeOH，95％DCM)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥。将残余物由水/ACN(80/20；10mL)冷冻干燥产出73mg(56％)的化合物289。

通过使用与用于制备化合物289所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。最相关的小偏差在产率列中指示。

实例B41

化合物273

的制备

化合物200

和化合物222

将中间体71(546mg；1.01mmol)和TFA(1.5mL；19.6mmol)在DCM(15mL)中的混合物在室温下搅拌4小时。将混合物蒸发至干燥。

将残余物用DCM和H₂O吸收，然后用水性NaOH 3N碱化。将有机层倾析，经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干燥产出400mg(90％)的化合物222。

将这些对映异构体通过手性SFC(Chiralpak AD-H 5μm 250*30mm；流动相：50％CO₂，50％EtOH(0.3％iPrNH₂))进行分离。收集纯级分，并且蒸发至干燥产出106mg(24％)的化合物273和130mg(29％)的化合物200。

使用相同的方法还可以由中间体71a来制备化合物273。

使用相同的方法还可以由中间体71b来制备化合物200。

使用与用于制备化合物273所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B42

化合物274

的制备

和化合物203

在N₂下，在室温下，将1-甲基-1H-吡唑-4-甲醛(100mg；0.913mmol)和Ti(OEt)₄(0.25mL；1.233mmol)添加至中间体11(200mg；0.609mmol)在THF(3mL)中的溶液里。将该溶液在室温下搅拌20小时。将反应混合物冷却至5℃，并且逐滴添加在THF(1.5mL；3.045mmol)中的iPrMgCl 2M。在5℃下，将反应混合物搅拌30min，允许其在6小时内缓慢升至室温，并且倾倒进K₂CO₃的冷水性溶液。添加DCM，并且将反应混合物通过

垫过滤。将不可溶的物质用DCM洗涤若干次。将有机层倾析，经

过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，24g；流动相：梯度从0％NH₄OH，0％MeOH，100％DCM至0.8％NH₄OH，8％MeOH，92％DCM)进行纯化。收集纯级分，并且蒸发至干燥产出195mg(69％)的外消旋化合物。将这些对映异构体通过手性SFC(Lux纤维素-25μm 250*30mm；流动相：55％CO₂，45％MeOH(0.3％iPrNH₂))进行分离。将两个级分由水/ACN(80/20；12mL)冷冻干燥产出80mg(28％)的化合物274和82mg(29％)的化合物203。

实例B43

化合物197

的制备，

化合物198

和化合物199

在N₂下，在室温下，将1-甲基-1H-吡唑-4-甲醛(99mg；0.9mmol)和Ti(OEt)₄(0.25mL；1.2mmol)添加至中间体11(197mg；0.6mmol)在THF(3mL)中的溶液里，将该溶液在室温下搅拌20小时。将反应混合物冷却至0℃，并且逐滴添加CH₃MgBr(在Et₂O中3M；1mL；3mmol)。在0℃下将溶液搅拌30min，并且允许其缓慢升至室温持续6小时。将溶液倾倒进冷水和水性饱和NH₄Cl的混合物中，然后添加EtOAc。将混合物通过

垫过滤，并且用EtOAc萃取。将有机层经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，24g；流动相：梯度从0％NH₄OH，0％MeOH，100％DCM至0.5％NH₄OH，5％MeOH，95％DCM)进行纯化。收集纯级分，并且蒸发至干燥产出130mg(50％)的化合物197。将这些对映异构体通过手性SFC(Lux纤维素-45μm 250*21.2mm；流动相：60％CO₂，40％MeOH(+0.3％iPrNH₂))进行分离。收集纯级分，蒸发并且由水/ACN(80/20)冷冻干燥产出46mg(17％)的化合物198和45mg(17％)的化合物199。

使用与用于制备化合物274所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B44

化合物195

的制备

将一水合肼(34μL；0.86mmol)添加至中间体85(100mg；0.17mmol)在EtOH(4mL)中的溶液里。在50℃下，将溶液加热2h 30min。将反应混合物倾倒进冰水中并且用DCM萃取。将有机层分离，经MgSO₄干燥，过滤，并且蒸发直到干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，12g；流动相：90％DCM，10％MeOH(+10％NH₄OH))进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥。将残余物用Et₂O吸收，并且蒸发至干燥产出35mg(45％)的化合物195。

实例B45

化合物287

的制备，

化合物201

和化合物202

将中间体87(145mg；0.24mmol)和TFA(0.7mL；9.15mmol)在DCM(7mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物蒸发至干燥。将残余物用DCM并且然后用H₂O稀释，用水性NaOH 3N碱化。将有机层倾析，经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干燥产出100mg(83％)的化合物287。

将对映异构体通过手性SFC(CHIRALPAK IC 5μm 250x20mm；流动相：50％CO₂，50％MeOH(+2％iPrNH₂))进行分离。收集含有每种对映异构体的级分，蒸发至干燥并且通过反相色谱法(YMC-actus Triart-C1810μm 30*150mm；流动相：梯度从75％NH₄HCO₃0.2％，25％ACN至35％NH₄HCO₃0.2％，65％ACN)进行纯化。收集纯级分，蒸发至干燥并且由ACN/水(20/80)冷冻干燥产出21mg(17％)的化合物201和23mg(19％)的化合物202。

实例B46

化合物224

的制备，

化合物251

和化合物252

在N₂下，将中间体11b(1g)和5-乙酰基-1-甲基吡唑(168mg，1.35mmol)在THF(15mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。然后，分部分地添加NaBH(OAc)₃(718mg；3.4mmol)。在室温下，将反应混合物搅拌72h，倾倒进冷水中，用K₂CO₃粉末碱化，并且用EtOAc萃取。将有机层经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，12g；流动相：梯度从100％DCM，0％MeOH至95％DCM，5％MeOH，0.3％NH₄OH)进行纯化。收集这些级分并且蒸发至干燥。将残余物(300mg)通过反相色谱法(YMC-actus Triart C1810μm 30*150mm；流动相：梯度从65％NH₄HCO₃0.2％水性溶液，35％ACN至25％NH₄HCO₃0.2％水性溶液，75％ACN)纯化第二次。收集纯级分，蒸发至干燥产出104mg的化合物224。

将化合物224经受手性SFC分离((固定相：Chiralcel OD-H 5μm 250x21.2mm，流动相：70％CO2，30％EtOH(0.3％iPrNH₂))。

将含有产物的这些级分混合，浓缩并且冷冻-干燥(ACN/水：80/20)以提供48mg的化合物251和46mg的化合物252。

使用与用于制备化合物224所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B47

化合物234

的制备

在室温下，将中间体88(130mg；0.225mmol)和在1,4-二噁烷(0.7mL；2.8mmol)中的HCl 4M在MeOH(7mL)中的混合物搅拌24小时。在5℃下将溶液冷却并且添加Et₂O。将沉淀物过滤，并且干燥产出111mg的化合物234(HCl盐)。

实例B48

化合物270

的制备

和化合物271

在60℃下，将中间体11(300mg；0.854mmol)和(R)-氧化苯乙烯(293μL；2.563mmol)在EtOH(6mL)中的混合物搅拌4小时。将反应混合物蒸发至干燥并且将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，12g；流动相：梯度从0％NH₄OH，0％MeOH，100％DCM至1％NH₄OH，10％MeOH，90％DCM)进行纯化。收集含有产物的这些级分，并且蒸发至干燥产出157mg的中间体残余物，将该残余物通过反相色谱法(YMC-actus Triart C1810μm 30*150mm；流动相：梯度从60％NH₄HCO₃0.2％水性溶液，40％ACN至40％NH₄HCO₃0.2％水性溶液，60％ACN)进行纯化。收集含有产物的这些级分，蒸发至干燥并且由水/ACN(80/20；10mL)冷冻干燥产出58mg(15％)的化合物270和62mg(16％)的化合物271。

实例B50

化合物105

的制备

将TFA(2.5mL)添加至中间体93(500mg；0.95mmol)在DCM(25mL)中的溶液里，并且将该反应混合物搅拌18小时。该反应混合物倾倒进10％K₂CO₃水性溶液中并用DCM萃取。将有机层分离，经

过滤，并且蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，10g；流动相：0.7％NH₄OH，7％MeOH，93％DCM)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥。将残余物由二异丙基乙醚结晶，并且干燥产出120mg(29％)的化合物105。

使用与用于制备化合物105所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B51

化合物89

的制备

将在1,4-二噁烷(0.708mL；2.833mmol)中的HCl 4N添加至中间体101(150mg；0.283mmol)在ACN(7.5mL)中的溶液里，并且将该反应混合物在室温下搅拌过夜。该反应混合物倾倒进10％K₂CO₃水性溶液中并用DCM萃取。将有机层倾析，经

过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，12g；流动相：梯度从0％MeOH，100％DCM至15％MeOH，85％DCM)进行纯化。收集纯级分并蒸发至干燥。将残余物用Et₂O吸收若干次产出30mg(25％)的化合物89。

使用与用于制备化合物89所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B56

化合物317的制备：

在90℃下，将中间体11(266mg，0.812mmol)、中间体110(377mg，1.62mmol)和K₂CO₃在ACN(8mL)中搅拌过夜。将该混合物倾倒进水中，然后用EtOAc萃取。将有机层经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(固定相：不规则SiOH 15μm至40μm 40g，流动相：DCM/MeOH：梯度从100/0至92/8)进行纯化。将残余物通过硅胶色谱法通过反相(固定相：YMC-actus Triart-C1810μm 30*150mm，流动相：0.2％NH₄HCO₃/ACN：梯度从60/40至0/100)进行纯化。收集含有产物的级分并蒸发至干燥。将所得残余物溶解于ACN中，并且添加2当量的在二噁烷中的4N HCl溶液。将混合物浓缩并且然后用乙腈/水20/80冷冻-干燥产出0.091g的化合物317(HCl盐)。

实例B57

化合物320

的制备

向中间体11b(200mg)在乙醇(5mL)的溶液中添加1-(3-甲氧基苯基)丙-2-酮(200mg，1.218mmol)、PtO₂(20mg)和AcOH(2滴)。在H₂下，在60℃下搅拌过夜后，将反应混合物浓缩以给出残余物，将该残余物通过制备型HPLC(柱：SunFire 19*250mm 10um，流动相A：0.1％TFA/H₂O，B：ACN)进行纯化以给出35mg(12％)呈黄色固体的化合物320。

使用与用于制备化合物320所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

实例B57

化合物61与中间体68、68a和68b一起合成。参见针对中间体68、68a和68b的合成方案。

转化

转化C1

化合物196

的制备

将化合物273(106mg；0.24mmol)、水性甲醛37％w/w(110μL；1.48mmol)和MgSO₄(580mg；4.83mmol)在DCM(5mL)中的溶液在室温下搅拌1小时。添加NaBH(OAc)₃(614mg；2.9mmol)，并且将反应混合物在室温下搅拌15小时。将溶液倾倒进冰水中，用K₂CO₃碱化，并且用DCM萃取(x2)。将有机层用盐水洗涤，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，10g，流动相：梯度从100％DCM，0％MeOH，0％NH₄OH至90％DCM，10％MeOH，0.5％NH₄OH)进行纯化。收集纯级分，蒸发至干燥并且将残余物由ACN/水(20/80)冷冻干燥产出70mg(64％)的化合物196。

使用与用于制备化合物196所述的类似方法，由各自的起始材料开始，制备下表中的化合物。

转化C2

化合物216

的制备

将化合物200(110mg；0.25mmol)和水性甲醛37％w/w(19μL；0.25mmol)在MeOH(5mL)中的溶液在室温下搅拌3小时。添加NaBH₄(19mg；0.5mmol)，并且将反应混合物在室温下搅拌15小时，倾倒进冰水中，用K₂CO₃碱化，并且用DCM萃取(x2)。将有机层用盐水洗涤，然后经MgSO₄干燥，过滤并且蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH 300g；流动相：梯度从0.1％NH₄OH，5％MeOH，95％DCM至1％NH₄OH，10％MeOH，90％DCM)进行纯化。收集纯级分，蒸发至干燥，并且由ACN/水20/80冷冻-干燥产出15mg(13％)的化合物216。

转化C3

化合物303

的制备

在N₂下，在10℃下，将溴乙基(45μL；0.6mmol)添加至化合物222(150mg；0.34mmol)和DIPEA(207μL；1.2mmol)在THF(3mL)中的溶液里。将溶液在室温下搅拌过夜，然后倾倒进冷水中。将产物用EtOAc萃取。将有机层经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。

将残余物(164mg)通过硅胶色谱(固定相：不规则裸二氧化硅12g，流动相：梯度从100％DCM，0％MeOH(+10％NH₄OH)至90％DCM，10％MeOH(+10％NH₄OH))进行纯化。将含有产物的这些级分混合并且浓缩以提供77mg的中间体级分，将该中间体级分通过反相(固定相：YMC-actus Triart C1810μm30*150mm，流动相：梯度从65％NH₄HCO₃0.2％，35％ACN至25％NH₄HCO₃0.2％，75％ACN)进一步纯化。将含有产物的这些级分混合并且浓缩以提供40mg的残余物，将其残余物用乙腈/水20/80冷冻-干燥，以给出34mg(21％)呈白色粉末的化合物303。

转化C4

化合物316

的制备

将化合物315(114mg；0.237mmol)、甲醛(37％，在水中)(106μL；1.42mmol)和MgSO₄(568mg)在DCM(5mL)中的溶液在室温下搅拌1小时。然后，添加NaBH(OAc)₃(602mg；2.84mmol)并且将混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用DCM稀释，并且用10％的K₂CO₃水性溶液碱化。将有机层倾析，经MgSO₄干燥，过滤并蒸发至干燥。将残余物通过硅胶色谱法(不规则SiOH，12g；流动相：梯度从0％NH₄OH，0％MeOH，100％DCM至1％NH₄OH，10％MeOH，90％DCM)进行纯化。收集含有产物的这些级分，蒸发至干燥并且由水/ACN(80/20；10mL)冷冻燥产出110mg(94％)的化合物316。

分析部分

LCMS(液相色谱/质谱)

通用程序

使用LC泵、二极管阵列(DAD)或UV检测器以及如在对应的方法中所指定的柱进行高效液相色谱(HPLC)测量。如果必要的话，包括另外的检测器(参见以下方法表)。

将来自柱的流带至配置有大气压离子源的质谱仪(MS)。设置调谐参数(例如扫描范围、停留时间等)以便获得允许鉴定化合物的标称单一同位素分子量(MW)的离子在技术人员的知识内。使用适当的软件进行数据采集。

通过其实验保留时间(R_t)和离子描述化合物。如果未在数据表中不同地指定，那么报道的分子离子对应于[M+H]⁺(质子化的分子)和/或[M-H]^-(去质子的分子)。在该化合物不是直接可电离的情况下，指定加合物类型(即[M+NH₄]⁺、[M+HCOO]^-等)。对于具有多种同位素模式的分子(Br、Cl等)来说，报道的值是针对最低同位素质量获得的值。获得的所有结果具有与使用的方法通常相关的实验不确定性。

在下文中，“SQD”意思是单四极检测器，“RT”室温，“BEH”桥连的乙基硅氧烷/二氧化硅杂合体，“HSS”高强度二氧化硅，“DAD”二极管阵列检测器。所有其他使用的缩写词如前文的定义。

表1a：LCMS方法代码(以mL/min表示流量；以℃表示柱温度(T)；以分钟表示运行时间)。

表1b：LCMS数据.Co.No.表示化合物编号；R_t表示以min计的保留时间。

SFCMS-方法

用于SFC-MS方法的通用程序

使用分析型超临界流体色谱(SFC)系统来进行SFC测量，该系统由以下构成：用于递送二氧化碳(CO₂)和改性剂的二元泵、自动进样器、柱烘箱、配备有经得起400巴的高压流动池的二极管阵列检测器。如果配置有质谱仪(MS)，来自该柱的流被引至该(MS)。设置调谐参数(例如扫描范围、停留时间等)以便获得允许鉴定化合物的标称单一同位素分子量(MW)的离子在技术人员的知识内。使用适当的软件进行数据采集。

表2a.分析型SFC-MS方法(以mL/min表示流量；以℃表示柱温度(T)；以分钟表示运行时间，以巴表示背压(BPR)；所有其他使用的缩写词如前文的定义)

表2b. SFC-MS数据.(异构体洗脱顺序在所述条件下‘A’在‘B’之前洗脱)

*异构体洗脱顺序化合物变化235对比化合物编号236；化合物编号237对比化合物编号238。

在相同的SFCMS条件下，针对化合物188、189、190和191还测量了SFC-MS。结果显示于表2c中。(异构体洗脱顺序‘A’在‘B’之前，‘B’在‘C’之前，‘C’在‘D’之前)

化合物编号	R_t(min)	UV％面积	异构体洗脱顺序	SFCMS方法
					188	2.78	100	B	8
189	3.02	96.66	C	8
					190	2.40	100	A	8
191	3.21	99.15	D	8

旋光度(OR)

旋光度用偏振计341Perkin Elmer进行测量。使偏振光通过样品，路径长度为1分米并且样品浓度为0.2至0.4克/100毫升。将2mg至4mg的小瓶中的产物称重，然后用1ml至1.2ml的光谱溶剂(例如DMF)溶解。将电池填充溶液，并在20℃的温度下放入偏光计。以0.004的精度读出OR。

浓度的计算：重量以克x 100/体积(以ml计)

比旋光度(OR)：[α]_d ²⁰：(旋光读数x 100)/(1.000dmx浓度)。

^d是钠D线(589纳米)。

表3.OR数据：波长：589nm(如果不同则指定)；溶剂：DMF(如果不同则指定)；温度：20℃；‘conc’表示浓度(g/100mL)；‘OR’表示旋光度。

NMR

使用以下仪器进行NMR试验：Bruker Avance 500光谱仪(配备有具有z梯度的Bruker 5mm BBFO探头)并且针对质子在500MHz下工作，并且针对碳在125MHz下工作，或使用Bruker Avance DRX 400光谱仪，使用内部氘锁并配备有具有z梯度的反向双重共振(¹H、¹³C、SEI)探头，并且针对质子在400MHz下工作，并且针对碳在100MHz下工作。化学位移(δ)以百万分率(ppm)报告。J值以Hz表示。

可替代地，一些NMR试验使用以下仪器进行：在环境温度下(298.6K)使用BrukerAvance III 400光谱仪，使用内部氘锁，并且配备有具有z梯度的5mmPABBO BB-探头，并且针对质子在400MHz下工作，并且针对碳在100MHz下工作。化学位移(δ)以百万分率(ppm)报告。J值以Hz表示。

化合物13：

1H NMR(400MHz,氯仿-d)δppm 8.42(s,1H),7.38(s,1H),3.95(br s,2H),3.83(brt,J＝6.6Hz,2H),3.63(q,J＝10.1Hz,2H),3.27(br s,4H),2.32(d,J＝6.8Hz,2H),2.28-2.18(m,2H),1.69-1.57(m,1H),0.90(d,J＝6.6Hz,6H)

化合物20b：

¹HNMR(500MHz,DMSO-d₆)δppm 11.64(br s,1H)8.49(s,1H)7.77(s,1H)7.67(br d,J＝3.8Hz,2H)7.35-7.51(m,3H)4.32-4.48(m,2H)4.03-4.18(m,2H)3.91(br s,4H)3.17-3.61(m,4H)2.00-2.32(m,4H)

化合物82：

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δppm 8.35(s,1H)7.39(s,1H)4.28-4.77(m,6H)4.01-4.19(m,4H)3.62(br t,J＝7.9Hz,1H)2.88(dd,J＝9.9,6.8Hz,1H)2.45(br dd,J＝9.9,7.7Hz,1H)2.00-2.21(m,2H)1.17-1.28(m,1H)0.95(d,J＝6.3Hz,3H)

化合物84：

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δppm 8.33(s,1H)7.72(s,1H)7.22(dd,J＝8.4,5.8Hz,2H)7.09(t,J＝9.0Hz,2H)4.08(q,J＝11.0Hz,2H)3.66-3.96(m,4H)3.17(s,4H)2.65-2.73(m,1H)2.38-2.45(m,1H)2.27(dd,J＝12.9,8.5Hz,1H)2.14(br s,2H)0.72(d,J＝6.3Hz,3H)

化合物193：

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δppm 8.32(s,1H)7.70(s,1H)4.07(q,J＝11.1Hz,2H)3.65-3.91(m,6H)3.07-3.30(m,6H)2.14(br s,2H)1.85(br s,1H)1.70-1.82(m,1H)1.63(br s,1H)1.28-1.52(m,4H)0.88(dd,J＝9.6,7.1Hz,6H)

化合物196：

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δppm 8.32(s,1H)7.70(s,1H)4.07(q,J＝10.9Hz,2H)3.52-3.97(m,4H)3.34-3.43(m,2H)3.02-3.22(m,4H)2.72(dd,J＝8.5,6.3Hz,1H)2.58(dd,J＝8.8,6.6Hz,1H)2.51-2.53(m,1H)2.28-2.35(m,1H)2.19(dd,J＝9.5,2.2Hz,1H)2.12(s,4H)1.58(td,J＝7.1,2.2Hz,1H)0.79(dd,J＝14.8,6.9Hz,6H)

化合物273：

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δppm 8.32(s,1H)7.67(s,1H)4.03(q,J＝11.0Hz,2H)3.87(s,2H)3.79(t,J＝6.9Hz,2H)3.61(br t,J＝7.6Hz,1H)3.46(br t,J＝7.9Hz,1H)3.12-3.34(m,7H)2.66-2.77(m,1H)2.28(dd,J＝9.1,2.2Hz,1H)2.15(t,J＝6.9Hz,2H)1.62(td,J＝6.9,2.2Hz,1H)0.82(dd,J＝14.2,6.9Hz,6H)

化合物274：

¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)δppm 8.31(s,1H)7.69(s,1H)7.45(s,1H)7.20(s,1H)4.07(q,J＝10.9Hz,2H)3.58-3.93(m,7H)2.97-3.08(m,4H)2.52-2.55(m,1H)2.12(br s,2H)1.7(td,J＝6.6,4.4Hz,1H)0.70(dd,J＝12.6,6.6Hz,6H)

化合物320：

1HNMR(400MHz,CD₃OD)δ8.37(s,1H),7.63(s,1H),7.28(t,J＝8.8Hz,1H),6.87-6.86(m,3H),4.30-4.18(m,5H),4.08-3.93(m,3H),3.91-3.88(m,2H),3.88-3.85(s,3H),3.72-3.70(m,1H),3.06(dd,J＝5.2Hz,J＝13.6Hz,1H),2.64(dd,J＝9.2Hz,J＝13.6Hz,1H),2.47-2.385(m,2H),1.19-1.18(d,J＝6.8Hz 3H)

化合物321：

¹H NMR(400MHz,DMSO)δ8.38(d,J＝5.2Hz 1H),7.65(s,1H),7.21(d,J＝8.4Hz,2H),6.92(d,J＝8.4Hz,2H),3.75-4.33(m,11H),3.74(s,3H),3.61(s,1H),2.93(dd,J＝3.6Hz,12.8Hz,1H),2.27-2.36(m,2H,),1.03(d,J＝5.6Hz,3H)。

化合物322：

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.40(s,1H),7.66(s,1H),7.38-7.34(m,2H),7.22-1.13(m,2H),4.37-4.26(m,5H),4.13(s,1H),4.01(s,2H),3.91(q,J＝10.4Hz,2H),3.74-3.69(m,1H),2.98(dd,J＝3.6Hz,13.2Hz 1H),2.68(dd,J＝9.6Hz,13.2Hz 1H),2.47(s,2H),1.20(d,J＝6.4Hz 3H)。

化合物323：

¹HNMR(400MHz,CD₃OD)δ8.38(s,1H),7.64(s,1H),7.10(d,J＝8.4Hz,2H),6.78(d,J＝8.4Hz,2H),3.86-7.27(m,10H),3.60-6.62(m,1H),2.96(dd,J＝4.8Hz,14.0Hz,1H),2.60(dd,J＝4.8Hz,14.0Hz 1H),2.37-2.46(m,2H),1.18(d,J＝6.8Hz,3H)。

化合物324：

1H NMR(400MHz,CD₃OD)δ8.36(s,1H),7.62(s,1H),7.19-7.15(m,4H),4.28-4.16(m,5H),4.14-3.98(m,4H),3.93-3.87(m,2H),3.66-3.64(m,1H),3.04(dd,J＝4.8Hz,J＝13.6Hz,1H),2.63(dd,J＝9.2Hz,J＝13.6Hz 1H),2.46-2.32(m,5H),1.18(d,J＝6.4Hz,3H)。

药理学部分

1)Menin/MLL荧光偏振测定

向非表面结合，黑色384孔微量滴定板上添加在DMSO中的50nL 160X测试化合物和在测定缓冲液(40mM Tris·HCl，pH 7.5，50mMNaCl，1mM DTT和0.001％吐温20)中的4μL2Xmenin。在环境温度下，将测试化合物和menin孵育10min之后，添加在测定缓冲液中的4μL 2X FITC-MBM1肽(FITC-β-丙氨酸-SARWRFPARPGT-NH₂)，在1000rpm将微量滴定板离心1min，并且将测定混合物在环境温度下孵育15min。在环境温度下，通过用BMG Pherastar平板读数仪(ex.485nm/em.520nm)测量FITC标记的荧光偏振(FP)来确定在测定混合物中存在的menin·FITC-MBM1复合物的相对量。在结合测定中试剂的终浓度是在测定缓冲液中100nM menin、5nM FITC-MBM1肽和0.625％DMSO。使用11个点，三倍连续稀释方案，在31μM处开始进行测试化合物的剂量-反应滴定。

根据以下公式1通过首先计算在每个化合物浓度处的％抑制来确定化合物效能：

％抑制＝((HC-LC)-(FP^化合物-LC))/(HC-LC))*100(公式1)

其中化合物的饱和浓度存在或缺失的情况下测定的LC和HC是FP值，该化合物与FITC-MBM1竞争对menin结合，并且在测试化合物的存在下用FP^化合物测定FP值。HC和LC FP值表示至少16个重复/平板的平均值。对于每种测试化合物，对比测试化合物浓度的对数绘制％抑制值，并且IC₅₀值来源于将这些数据根据公式2拟合成：

％抑制＝底部+(顶部-底部)/(1+10^((logIC₅₀-log[cmpd])*h))(公式2)

其中底部和顶部分别是剂量-反应曲线的较低和较高的渐近线，IC₅₀是产生50％信号抑制的化合物浓度，并且h是希尔系数。

2)增殖测定

在人类白血病细胞系中评价menin/MLL蛋白/蛋白相互作用抑制剂测试化合物的抗增殖效应。细胞系MV-4-11和MOLM14分别带有MLL易位并且表达MLL融合蛋白MLL-AF4和MLL-AF9，以及来自第二个等位基因的野生型蛋白质。因此，MLL重排的细胞系MV-4-11和MOLM14展示干细胞样HOXA/MEIS1基因表达标记。将K562和KG1用作含有两种MLL野生型等位基因的对照细胞系，以便于排除显示一般细胞毒性效应的化合物。

将MV-4-11和MOLM14在补充有10％胎牛血清(HyClone)、2mM L-谷氨酰胺(西格玛奥德里奇公司(Sigma Aldrich))和50μg/ml庆大霉素(Gibco)的RPMI-1640(西格玛奥德里奇公司)中进行培养。将K562在补充有20％胎牛血清(HyClone)、2mM L-谷氨酰胺(西格玛奥德里奇公司)和50μg/ml庆大霉素(浠思生物测定技术有限公司(Gibco))的RPMI-1640(西格玛奥德里奇公司)中繁殖。将KG1在补充有20％胎牛血清(HyClone)、2mM L-谷氨酰胺(西格玛奥德里奇公司)和50μg/ml庆大霉素(浠思生物测定技术有限公司(Gibco))的Iscove’sMDM(浠思生物测定技术有限公司(Gibco))中进行培养。在培养过程中将细胞保持在30万至250万细胞/ml，并且传代数不超过25。

为了评价抗增殖效应，将1,500MV-4-11、300MOLM14、750K562或1,300KG1细胞以200μl介质/孔接种在96孔圆底，超低附接板中(Costar，目录编号7007)。基于生长曲线选择细胞接种数，以确保贯穿实验中的线性增长。在不同的浓度下添加测试化合物，并且将DMSO含量标准化至0.3％。在37℃和5％CO₂下将细胞孵育8天。通过活细胞成像(IncuCyteZOOM，Essenbio，4x物镜)实时监测球形样生长，持续8天每四小时获取一次图像。使用整合的分析工具确定作为球形尺寸度量的融合度(％)。

为了确定测试化合物随时间的累积效应，计算在融合度对时间的图的曲线下面积(AUC)。在试验的开始(t＝0)将融合度用作用于AUC计算的基线。

根据以下方法计算绝对IC₅₀值：

％对照＝(AUC样品/AUC对照)*100

AUC对照＝对照值的平均AUC(不含有化合物/DMSO的细胞作为载体对照)

使用最小二乘法(普通)拟合方法将非线性曲线拟合应用于％对照对比化合物浓度的图。基于此，计算绝对IC₅₀值(相对于载体对照物，引起相对于载体对照50％的抗增殖效应的测试化合物的一半最大抑制浓度)。

3)Menin/MLL均相时间分辨荧光(HTRF)测定

向未经处理的，白色384-孔微量滴定板中添加在DMSO中的40nL 200X测试化合物和在在测定缓冲液(40mM Tris·HCl，pH 7.5，50mM NaCl，1mM DTT和0.05％Pluronic F-127)中的4μL 2X铽螯合标记的menin(见下文用于制备)。在环境温度下，将测试化合物和铽螯合标记的menin孵育5min之后，添加在测定缓冲液中的4μL 2X FITC-MBM1肽(FITC-β-丙氨酸-SARWRFPARPGT-NH₂)，在1000rpm下将微量滴定板离心1min，并且将测定混合物在环境温度下孵育15min。在环境温度下，使用BMG Pherastar平板读数仪(ex.337nm/铽em.490nm/FITC em.520nm)，通过测量铽/FITC供体/受体荧光对的均相时间分辨荧光(HTRF)来确定存在于测定混合物中的menin·FITC-MBM1复合物的相对量。将荧光共振能量转移(HTRF值)度表示为FITC的荧光发射强度和铽荧光(F^em 520nm/F^em 490nm)的比率。在结合测定中试剂的终浓度是在测定缓冲液中100pM铽螯合标记的menin、75nM FITC-MBM1肽和0.5％DMSO。使用11个点，三倍连续稀释方案，在31μM处开始进行测试化合物的剂量-反应滴定。

％抑制＝((HC-LC)-(HTRF^化合物-LC))/(HC-LC))*100(公式1)

其中化合物的饱和浓度存在或缺失的情况下测定的LC和HC是HTRF值，该化合物与FITC-MBM1竞争对menin结合，并且在测试化合物的存在下用HTRF^化合物测定HTRF值。HC和LCHTRF值表示至少16个重复/平板的平均值。对于每种测试化合物，对比测试化合物浓度的对数绘制％抑制值，并且IC₅₀值来源于将这些数据根据公式2拟合成：

％抑制＝底部+(顶部-底部)/(1+10^((logIC₅₀-log[cmpd])*h))(公式2)

Menin的铽穴状化合物标记的制备：将Menin(a.a.1-610-6xhis标签)用铽穴状化合物标记如下。将2mg Menin的缓冲液交换为1x磷酸盐缓冲盐水。在室温下，将16uM Menin用4倍摩尔过量的NHS-铽穴状化合物(浠思生物测定技术有限公司(Cisbio Bioassays)，贝德福德，马萨诸塞州)孵育2小时。将经标记的蛋白质通过经Superdex 200Increase 10/300GL柱，以0.75ml/min运行反应从游离标记中纯化澄清。收集峰级分，等分并且在-80℃下冷冻。

MENIN蛋白质序列(SEQ ID NO：1)：

表4.在Menin荧光偏振(FP)测定(1)中的生物学数据、Menin/MLL同质时间分辨荧光(HTRF)测定(3)和增殖测定(2)。Co.No.表示化合物编号。表4中的值是所有测量值的平均值。

表5.在Menin荧光偏振(FP)测定(1)中的生物学数据、Menin/MLL同质时间分辨荧光(HTRF)测定(3)和增殖测定(2)。Co.No.表示化合物编号。表5中的值是针对单个测量值(未平均化)的值：如果将值确定超过1次，则每个值在表5中单独记录。

Claims

1.一种具有化学式(I)的化合物

或其立体异构形式，其中

R²选自下组，该组由以下各项组成：氢和CH₃；

--L²-R³选自(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)，或(g)，其中

R³选自下组，该组由以下各项组成：

(e)--L²-R³是-O-CHR⁵-R³，当L²连接至L¹的碳原子时；其中

R⁵选自下组，该组由以下各项组成：-C(＝O)NR^13aR^13b；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-OR¹⁴、和-NR^15aR^15b；以及含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元的非芳香族杂环基；其中

R^13a、R^13b、R¹⁴、R^15a和R^15b各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟和-C(＝O)NR^16aR^16b；以及

被选自下组的取代基取代的C_2-4烷基，该组由以下各项组成：-OR¹⁷和-NR^16aR^16b；其中

(f)--L²-R³是

其中

R^18a选自下组，该组由以下各项组成：氢、氟和C_1-4烷基；

(g)--L²-R³是

并且其中

Ar是任选被一个或两个独立地选择的卤素取代基取代的苯基；

Het¹是选自下组的单环杂芳基，该组由以下各项组成：吡唑基、咪唑基、吡咯基、4-或5-噻唑基、吡啶基、哒嗪基、4-、5-或6-嘧啶基和吡嗪基；或选自咪唑并吡啶基的二环杂芳基；其各自可以任选地被一个或两个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素和任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR^26a、-NR^27aaR^27bb、和-C(＝O)NR^27aaR^27bb，其中R^26a、R^27aa、和R^27bb各自独立地选自氢和C_1-4烷基；并且

Het²是任选地被一个、两个或三个取代基取代的非芳香族杂环基，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素，-CN，-OR²⁴，-NR^25aR^25b，和任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR²⁶、-NR^27aR^27b、和-C(＝O)NR^27aR^27b；其中R²⁴、R^25a、R^25b、R²⁶、R^27a、和R^27b各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟和-C(＝O)NR^28aR^28b；和被选自下组的取代基取代的C_2-4烷基，该组由以下各项组成：-OR²⁹和-NR^28aR^28b；其中R^28a、R^28b和R²⁹各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；C_1-4烷基；以及含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；

或其药学上可接受的盐，

其前提是以下化合物，及其药学上可接受的加成盐被排除在外：

2.根据权利要求1所述的化合物，其中

R³选自下组，该组由以下各项组成：

(e)--L²-R³选自下组，该组由以下各项组成：

其中

R¹⁸是氢；或

(f)--L²-R³是

并且其中

Het²是选自氮杂环丁烷基、吡咯烷基和哌啶基的非芳香族杂环基。

3.根据权利要求1所述的化合物，其中

R¹是CF₃；

(a)L²是>CR^4aR^4b；其中

R^4a选自下组，该组由以下各项组成：氢；-C(＝O)NR^7aR^7b；

R^4b选自下组，该组由以下各项组成：氢和甲基；其中

R³选自下组，该组由以下各项组成：

(e)--L²-R³选自下组，该组由以下各项组成：

其中R¹⁸是氢；或

(f)--L²-R³是

并且其中

Ar是任选地被卤素取代基取代的苯基；并且

4.根据权利要求1所述的化合物，其中

R¹是CF₃；

L¹表示含有一个或两个N原子的N-连接的7元至10元饱和螺杂二环系统，其选自下组，该组由以下各项组成：(a)、(b)、(c)、(d)、(e)、(f)和(g)

其中a表示连接至噻吩并嘧啶基杂环的位置；

Ar是任选地被一个卤素取代基取代的苯基；并且

Het¹是选自下组的单环杂芳基，该组由以下各项组成：4-、5-或6-嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基，和4-或5-噻唑基；或二环杂芳基，该二环杂芳基选自咪唑并吡啶基；其各自可以任选地被一个或两个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素和C_1-4烷基。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中

R¹是CF₃；

R²是氢；

其中a表示连接至噻吩并嘧啶基杂环的位置；

Ar是任选地被一个卤素取代基取代的苯基；并且

Het¹是选自下组的单环杂芳基，该组由以下各项组成：4-、5-或6-嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡咯基、吡唑基，和咪唑基；或二环杂芳基，该二环杂芳基选自咪唑并吡啶基；其各自可以任选地被一个或两个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素和C_1-4烷基。

6.根据权利要求1所述的化合物，其中

R¹是CF₃；

R²选自下组，该组由以下各项组成：氢和CH₃；

--L²-R³选自(a)、(b)、(c)、(d)、(f)或(g)，其中

(b)L²是>CR^4cR^4d，其中R^4c和R^4d是氢；并且

R³是

其中R^12a、R^12b，和R^12c是C_1-6烷基；或

(d)L²是O，并且R³是-CH₂-Ar；或

(f)--L²-R³是

其中

R¹⁸选自下组，该组由以下各项组成：氢；和C_1-4烷基；

R^18a选自下组，该组由以下各项组成：氢，和氟；

R^18a和R^18b与相同的碳原子结合并且一起形成

C_3-5环烷基；或

(g)--L²-R³是

并且其中

Het²是任选地被一个、两个或三个取代基取代的非芳香族杂环基，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素、-CN、和任选地被-OR²⁶取代的C_1-4烷基；其中R²⁴、R²⁶、R^27a，和R^27b各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；C_1-4烷基；和被-NR^28aR^28b取代的C_2-4烷基；其中R^28a和R^28b是氢。

7.根据权利要求1所述的化合物，其中

R²选自下组，该组由以下各项组成：氢和CH₃；

--L²-R³选自(a)、(b)、(d)、(e)，或(f)，其中

R³选自下组，该组由以下各项组成：

(e)--L²-R³是-O-CHR⁵-R³，当L²连接至L¹的碳原子时；其中

R⁵选自下组，该组由以下各项组成：-C(＝O)NR^13aR^13b；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-OR¹⁴，和-NR^15aR^15b；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基；其中

(f)--L²-R³是

其中

R^18a选自下组，该组由以下各项组成：氢、氟和C_1-4烷基；

R^18a和R^18b与相同的碳原子结合并且一起形成C_3-5环烷基或含有氧原子的C-连接的4元至6元杂环基；

并且其中

Het²是任选地被一个、两个或三个取代基取代的非芳香族杂环基，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素，-CN，-OR²⁴，-NR^25aR^25b、和任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR²⁶、-NR^27aR^27b、和-C(＝O)NR^27aR^27b；其中R²⁴、R^25a、R^25b、R²⁶、R^27a、和R^27b各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟和-C(＝O)NR^28aR^28b；和被选自下组的取代基取代的C_2-4烷基，该组由以下各项组成：-OR²⁹和-NR^28aR^28b；其中R^28a、R^28b和R²⁹各自独立地选自下组，该组由以下各项组成：氢；C_1-4烷基；和含有至少一个氮、氧或硫原子的C-连接的4元至7元非芳香族杂环基。

8.根据权利要求1所述的化合物，其中

--L²-R³是(a)；

R³是Het¹或Het²；

Het¹是选自下组的单环杂芳基，该组由以下各项组成：吡啶基、4-、5-或6-嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡咯基吡唑基，和咪唑基；其各自可以任选地被一个或两个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素和任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR^26a、-NR^27aaR^27bb、和-C(＝O)NR^27aaR^27bb，其中R^26a、R^27aa、和R^27bb各自独立地选自氢和C_1-4烷基；并且

Het²是选自下组的非芳香族杂环基，该组由以下各项组成：氮杂环丁烷基、吡咯烷基，和哌啶基；其各自可以任选地被一个、两个或三个取代基取代，每个取代基独立地选自下组，该组由以下各项组成：卤素，-CN，-OR²⁴，-NR^25aR^25b，和任选地被选自下组的取代基取代的C_1-4烷基，该组由以下各项组成：氟、-CN、-OR²⁶、-NR^27aR^27b、和-C(＝O)NR^27aR^27b。

9.根据权利要求1所述的化合物，其中所述咪唑并吡啶基是咪唑并[1,2-a]吡啶基。

10.根据权利要求1所述的化合物，其中

L¹表示含有一个或两个N原子的N-连接的7元至10元饱和螺杂二环系统，其选自由以下各项组成的组：(a)、(b)、(c)、(e)、(f)、(g)、(h)和(i)

其中a表示连接至噻吩并嘧啶基杂环的位置。

11.一种药物组合物，包含如权利要求1到10中任一项所述的化合物以及药学上可接受的载体或稀释剂。

12.一种用于制备如在权利要求11中所述的药物组合物的方法，该方法包括：将药学上可接受的载体与治疗有效量的根据权利要求1至10中任一项所述的化合物混合。

13.如权利要求1至10中任一项所述的化合物或权利要求11中所述的药物组合物在制备用于治疗或预防选自癌症、骨髓增生异常综合症(MDS)和糖尿病的病症的药物中的用途。

14.根据权利要求13所述的用途，其中该病症是癌症。

15.根据权利要求14所述的用途，其中癌症选自以下各项：白血病，骨髓瘤或实体瘤癌症。

16.根据权利要求15所述的用途，其中所述实体瘤癌症选自前列腺癌、肺癌、乳癌、胰腺癌、结肠癌、肝癌、黑色素瘤和胶质母细胞瘤。

17.根据权利要求15所述的用途，其中该白血病选自以下各项：急性白血病、慢性白血病、髓性白血病、成淋巴细胞白血病、淋巴细胞白血病、T细胞前淋巴细胞白血病(T-PLL)、大颗粒淋巴细胞白血病、毛细胞白血病(HCL)、MLL-重排白血病、MLL-PTD白血病、MLL增加的白血病、MLL-阳性白血病，以及展示HOX/MEIS1基因表达标记的白血病。

18.根据权利要求17所述的用途，其中所述白血病选自骨髓白血病。

19.根据权利要求17所述的用途，其中所述白血病选自急性髓性白血病(AML)和慢性髓性白血病(CML)。

20.根据权利要求17所述的用途，其中所述白血病选自急性成淋巴细胞白血病(ALL)和慢性淋巴细胞白血病(CLL)。