CN109688832A - 家畜用饲料或家畜用补充剂、乳杆菌属细菌的生长促进剂以及乳杆菌属细菌的生长促进方法 - Google Patents
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Abstract
本发明的课题在于提供一种家畜用饲料或家畜用补充剂、乳杆菌属细菌的生长促进剂及乳杆菌属细菌的生长促进方法，所述家畜用饲料或家畜用补充剂未从外部供给细菌而改善家畜的肠内环境、更具体而言能够增加乳杆菌属细菌在肠内细菌中的构成比例。根据本发明，提供一种家畜用饲料或家畜用补充剂，其含有五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种，且为了家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进而使用。
Description
技术领域
本发明涉及一种包含五层龙的家畜用饲料或家畜用补充剂。本发明还涉及一种包含五层龙的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂。本发明还涉及一种包括供给五层龙的步骤的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进方法。
背景技术
纯种马是在18世纪早期英格兰的阿拉伯马或从猎人(用于狩猎的传统的英格兰品种)等品种改良成比赛用的轻种马。纯种马现今为了在赛马中获胜为目的反复进行交配及淘汰。纯种马在比赛时能够在背负48～59kg的重量的状态下持续几分钟并以60～70km/小时的速度行走。纯种马为附加价值高的产业用动物，全世界包括美国、澳大利亚、爱尔兰及日本等每年生产约11万头。
作为纯种马的疾病，除了因训练及比赛等而引起的肌肉疲劳、关节疼痛、外伤及骨折等以外，可举出腹泻。作为纯种马的腹泻，可举出因马驹的轮状病毒感染而引起的腹泻、因运输或疾病时的抗菌剂供给而引起的腹泻及因致死率高的X结肠炎(colitis-X)引起的腹泻等。纯种马的腹泻为因马驹的生长抑制而引起的价格下跌或直接与现役马的成绩及生死相关的重大疾病，因此需要以改善这种纯种马的腹泻为目的的肠内环境的正常化。
作为以这种肠内环境的改善为目的而增加肠内的好细菌的方法，已知有使动物摄取乳酸菌或双歧杆菌的方法。专利文献1中记载有饲料添加物，所述饲料添加物的特征在于，含有属于具有指定化学分类学性质的乳酸杆菌(Lactobacillus)属的微生物的培养物和/或微生物菌体而作为有效成分。专利文献2中记载有肠道产品，所述肠道产品将具有对儿童及幼小动物引起腹泻而已知的轮状病毒的抑制活性的新型菌株长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)作为有效成分。
另一方面，五层龙(也称为考特拉)属植物的根及干用作印度及斯里兰卡的传统医学阿育吠陀的天然药物。在斯里兰卡传承有网状五层龙(Salacia reticulata)的根皮对风湿病、淋病及皮肤病的治疗有效并且将上述根皮用于早期糖尿病的治疗。专利文献3中记载有动物用补充剂，所述动物用补充剂的特征在于包含蜂王浆、考特拉及辅酵素Q10。并且，专利文献4中记载有基于α-葡萄糖苷酶抑制剂的降血糖作用增强剂，所述基于α-葡萄糖苷酶抑制剂的降血糖作用增强剂的特征在于，包含选自包括双歧杆菌、乳酸菌、糖化菌及丁酸菌的组中的至少1种菌。专利文献4中记载有作为α-葡萄糖苷酶抑制剂可以使用五层龙。
以往技术文献
专利文献
专利文献1：日本特开2003-235569号公报
专利文献2：日本特开2005-102696号公报
专利文献3：日本特开2008-067632号公报
专利文献4：日本特开2010-248185号公报
发明内容
发明要解决的技术课题
本发明人等以由纯种马为代表的马等家畜的肠内环境正常化为目的而进行了研究的结果，已知效果均不充分。例如，专利文献1中记载的饲料添加物对动物供给乳酸菌本身，因此除了需要提高乳酸菌的稳定性以外，有时因供给的动物的体质而无法得到效果。并且，专利文献2中记载的肠道产品为使用双歧杆菌的产品，但是对马供给的情况下，导致肠内pH过度降低，存在成为对乳酸菌的生育环境不利的肠内环境的可能性。尤其，如专利文献1及2也存在如下问题：使动物摄取乳酸菌或双歧杆菌本身的方法因在摄取前的保存期间生菌数降低或摄取的细菌通过例如胃的酸性环境时灭菌而效果不充分。
专利文献3中记载的动物用补充剂中蜂王浆为主成分，未对肠内环境进行研究。专利文献4中记载的降血糖作用增强剂中，使用选自包括双歧杆菌、乳酸菌、糖化菌及丁酸菌的组中的至少1种菌本身，但是未对肠内环境进行研究。
本发明欲解决的课题在于提供一种未从外部供给细菌而改善家畜的肠内环境、更具体而言能够增加乳杆菌属细菌在肠内细菌中的构成比例的家畜用饲料或家畜用补充剂、乳杆菌属细菌的生长促进剂及乳杆菌属细菌的生长促进方法。
用于解决技术课题的手段
本发明人等为了解决上述课题而深入研究的结果，发现通过使家畜摄取五层龙无需从外部供给细菌就能够迅速增加乳杆菌属细菌的数量，从而完成了本发明。根据本发明，提供以下发明。
[1]一种用于促进家畜中的乳杆菌属细菌生长的家畜用饲料或家畜用补充剂，其含有五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物中的至少一种。
[2]根据[1]所述的家畜用饲料或家畜用补充剂，其中，
摄取6天后的粪便的平均pH为6.0～8.2。
[3]根据[1]或[2]所述的家畜用饲料或家畜用补充剂，其中，
摄取6天后的粪便中的乙酸的量与摄取前的粪便中的乙酸的量相比增加了1.1倍以上。
[4]根据[1]至[3]中任一项所述的家畜用饲料或家畜用补充剂，其中，
乳杆菌属细菌为选自包括Lactobacillus equi、Lactobacillus hayakitensis、Lactobacillus equigenerosi、Lactobacillus delbrueckii及Lactobacillus ingluviei的组中的至少一种。
[5]一种家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂，其含有五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物中的至少一种。
[6]根据[5]所述的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂，其中，
摄取6天后的粪便的平均pH为6.0～8.2。
[7]根据[5]或[6]所述的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂，其中，
摄取6天后的粪便中的乙酸的量与摄取前的粪便中的乙酸的量相比增加了1.1倍以上。
[8]根据[5]至[7]中任一项所述的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂，其中，
乳杆菌属细菌为选自包括Lactobacillus equi、Lactobacillus hayakitensis、Lactobacillus equigenerosi、Lactobacillus delbrueckii及Lactobacillus ingluviei的组中的至少一种。
[9]一种家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进方法，其包括对家畜供给五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物中的至少一种的步骤。
[10]根据[9]所述的方法，其中，
摄取6天后的粪便的平均pH为6.0～8.2。
[11]根据[9]或[10]所述的方法，其中，
摄取6天后的粪便中的乙酸的量与摄取前的粪便中的乙酸的量相比增加了1.1倍以上。
[12]根据[9]至[11]中任一项所述的方法，其中，
乳杆菌属细菌为选自包括Lactobacillus equi、Lactobacillus hayakitensis、Lactobacillus equigenerosi、Lactobacillus delbrueckii及Lactobacillus ingluviei的组中的至少一种。
发明效果
根据基于本发明的家畜用饲料或家畜用补充剂、乳杆菌属细菌的生长促进剂及乳杆菌属细菌的生长促进方法，无需从外部供给细菌就能够增加乳杆菌属细菌的数量。
具体实施方式
以下，对本发明的实施方式进行说明。
基于本发明的家畜用饲料或家畜用补充剂及基于本发明的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂含有五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种。
通常，人体摄取五层龙的情况下，可知因下述理由而显现体重增加被抑制的倾向或体重降低的倾向。首先，若人体摄取五层龙，则肠内主要增加双歧杆菌。该双歧杆菌分解糖，生成比糖还容易消耗的能源即乳酸或乙酸。并且，已知五层龙具有分解多糖的酵素即α-葡萄糖苷酶的抑制作用。因此，已知在人体中可得到基于五层龙摄取的的血糖上升抑制效果及抗肥胖效果。
与此相对，通过本发明人等的研究确认了非人类动物摄取五层龙的情况下体重增加。更具体而言，通过本发明人现已发现在肠内作为乳酸菌的一种的乳杆菌属细菌增加。
在该方面，本发明人等推测为如下。
非人类动物摄取五层龙的情况下、多碳水化合物以二碳水化合物或寡糖的形式到达大肠，在大肠中发生基于细菌的这些碳水化合物的分解，但是由于非人类动物没有双歧杆菌，因此认为乳酸菌组增加而肠内环境正常化。在该方面，本发明人等进一步进行详细研究的结果，非人类动物摄取五层龙的情况下，作为好细菌，分类为厚壁菌门的细菌即乳杆菌属细菌的增加显著。可推测与体重增加相关联的是由于所增加的乳杆菌属细菌而生成乳酸及乙酸来提高能量代谢，除此以外这些酸分解作为原本营养而无法吸收的食物纤维等而变成作为营养能够吸收的状态。即，认为非人类动物摄取五层龙的情况下，通过改善肠内环境，来自膳食的能量回收率变高，作为脂肪容易存储的结果确认到体重的增加。并且，如上所述，由于乳酸或乙酸为容易消耗的能源，能源也通过这些的增加而增加，因此认为摄取的非人类动物的耐力得到增加。
如上所述，五层龙的效果在人体与非人类动物中存在很大差异，通过马等家畜摄取五层龙，无需从外部供给细菌就能够增加肠内中的乳杆菌属细菌。即，完全出乎意料的是上述家畜原本拥有的乳杆菌属细菌的增殖被促进。另外，人体中的肠内的双歧杆菌的比例为最大20％左右，相对于此在马中未检测到双歧杆菌，因此人体与马中，肠内细菌中的双歧杆菌与乳酸菌的比例大不相同。因此，人体或非人类动物摄取细菌本身的情况下，应摄取的细菌的种类也应该不同，但是以往这些研究还不充分。如上述人体及马中肠内细菌的结构也不同，因此难以预测家畜等的非人类动物中的五层龙摄取的效果。
＜家畜＞
家畜通常是指除了人体以外的哺乳类及鸟类且通过人体来饲养的动物。本发明中的家畜为除了鸟类及宠物以外的家畜，具体而言，能够举出马(轻种马、中级马、重马)、猪、牛(奶牛、肉牛)、羊、山羊等。家畜优选为食草动物。
本发明中的家畜优选为马，更优选为轻种马。轻种马为马的种类，通常是指阿拉伯、纯种马、英国阿拉伯、阿拉伯物种及纯种马物种。本发明中的家畜尤其优选为纯种马。另外，纯种马等马不仅为竞走马，也可以为饲养中的年轻的马、引退后的骑马用马或肉食用马。
＜五层龙属植物、五层龙属植物的萃取物及五层龙属植物的粉碎物＞
五层龙属植物主要为斯里兰卡、印度及东南亚区域中自生的希藤科植物。作为五层龙属植物的具体例，可举出选自网状五层龙(Salacia reticulata)、捕圆形五层龙(Salacia oblonga)、五层龙(Salacia prinoides)、柳叶五层龙(Salacia chinensis)、薄片五层龙(Salacia latifolia)、河口五层龙(Salacia burunoniana)、粉叶五层龙(Salacia grandiflora)、大杆五层龙(Salacia macrosperma)中的1种以上的植物。作为五层龙属植物，优选为选自网状五层龙(Salacia reticulata)、捕圆形五层龙(Salaciaoblonga)及柳叶五层龙(Salacia chinensis)中的至少1种植物。
本发明中，使用五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种即可，但是能够优选使用五层龙属植物。作为五层龙属植物，能够直接使用五层龙属植物的根、干、叶、花、果实等可食用部分。
本说明书中，五层龙属植物的萃取物及五层龙属植物的粉碎物是以包含五层龙属植物的根、干、叶、花、果实等可食用部分的萃取物和/或粉碎物以及上述萃取物和/或粉碎物的干燥物的含义而使用。本说明书中，干燥物可以为干燥粉末(提取粉末)。制备上述的五层龙属植物的萃取物和/或粉碎物时，也可以混合五层龙属植物的1种以上的部位而使用。从提高家畜的摄取效率的观点考虑，作为五层龙属植物的萃取物，更优选使用将从选自根及干的部位提取的萃取物进行干燥而得到的提取粉末。
干燥粉末(提取粉末)能够优选通过如下而得到，即，通过溶剂提取五层龙属植物的可食用部分等，且使在上述中得到的萃取物干燥。
作为提取中所使用的溶剂，可举出水、醇或酮等，也可以混合2种以上的该些的混合溶剂。
作为醇，可举出甲醇或乙醇等，优选乙醇。
作为酮，优选丙酮、甲基乙基酮或环己烷等。
上述中，优选水、醇、水与醇的混合溶剂或水与酮的混合溶剂，更优选水、醇或水与醇的混合溶剂，进一步优选50℃～98℃的热水、乙醇或水与乙醇的混合溶剂。
水与醇的混合溶剂中的醇含量优选30质量％～90质量％，更优选40质量％～70质量％。
干燥萃取物而得到干燥粉末(提取粉末)时的干燥方法并无特别限制，可举出公知的干燥方法、例如喷雾干燥、冷冻干燥等方法。
＜家畜用饲料或家畜用补充剂＞
根据本发明的第一侧面，提供一种含有五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种的家畜用饲料或家畜用补充剂。本发明的家畜用饲料或家畜用补充剂为了家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进而使用。关于乳杆菌属细菌，在本说明书的后面进行叙述。
本发明的家畜用饲料能够通过根据家畜的种类在通常使用的基本饲料中配合五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种而制造。
作为基本饲料，以往对各家畜提供的饲料即可。竞走马等马的情况下，可举出牧草类、燕麦等谷类、豆类(大豆等)及油渣等，但是并无特别限定。也能够使用配合多个原材料的配合饲料。
作为配合饲料，例如能够使用如下所述的配合饲料。
配合燕麦、麦麸、玉米、大豆粕、大麦、苜蓿、维生素及矿物质的饲料；
以燕麦、麦麸、苜蓿粉、玉米、小麦粉、玉米蛋白饲料、大豆油渣为主原料配合维生素、矿物质及香草等的饲料；
以玉米、大麦、燕麦、小麦粉、大豆、麦麸、大豆粕、菜籽粕、糖蜜、植物油为主原料配合维生素、矿物质及香草等的饲料；
除了燕麦、麦麸、大麦、玉米、小麦粉、大豆油渣、大豆、糖蜜、维生素/矿物质、香草等的通常的原料以外，配合辅酵素Q10、肌肽、大豆肽的饲料：
以玉米、大麦、小麦粉、大豆、米糠、麦麸、大豆粕、菜籽粕、黑色向日葵、糖蜜、植物油为主原料配合维生素、矿物质及香草等的饲料；
以与燕麦混合而提供为前提，以大豆、黑色向日葵、大豆粕、玉米蛋白粉、糖蜜、玉米、甜菜浆为主原料配合蛋白质、维生素、矿物质的饲料；以及
配合玉米、大麦、加热处理大豆、黑色向日葵种子、燕麦、大豆粕、菜籽粕、甜菜浆等的饲料。
本发明的家畜用饲料根据需要也可以包含增强剂、质量改进剂、抗生素、抗菌剂、酵素、防霉剂、抗氧化剂、着色剂、甜味剂、香料等添加剂。
本发明的家畜用饲料中的“五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种”的含量并无特别限定，但是通常为1质量％～50质量％，优选为2质量％～40质量％，更优选为3质量％～30质量％，进一步优选为5质量％～20质量％。
家畜用补充剂是指以保持健康、恢复或增进或者疾病的予防或改善等为目的而添加到家畜的饲料中与饲料一同食用的物质。本发明的家畜用补充剂尤其优选设为竞走马(纯种马)用补充剂。
作为本发明的家畜用补充剂，可以仅单独使用五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种，也可以对五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种配合其他成分。
作为上述其他成分，例如可举出矿物质酵母、类黄酮、聚苯酚及具有免疫刺激作用的口服物质等，但是并无特别限定。作为上述其他成分，具体而言，能够举出日本特开2015-127340号公报的0023～0038段中所记载的成分。
本发明的家畜用补充剂中还可以适当含有选自维生素、维生素类物质、蛋白质、氨基酸、油脂、有机酸、碳水化合物、植物衍生原料、动物衍生原料、食品用添加物及医药品用添加物的1种以上等能够口服摄取的成分。
本发明的家畜用补充剂能够使用选自各种载体例如赋形剂、润滑剂、稳定剂、分散剂、结合剂、稀释剂、香味料、甜味剂、风味剂及着色剂的1种以上的添加物来制备，优选作为口服药剂来制备。
本发明的家畜用补充剂的形式只要实现本发明的效果，则并无特别限制，例如可以为片剂、丸剂、颗粒剂、细粒剂、咀嚼剂、胶囊剂(硬胶囊、软胶囊中填充的形式)、液剂、咀嚼片的形式。
本发明的家畜用补充剂中的“五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种”的含量并无特别限定，但是通常为10质量％～100质量％，优选为20质量％～100质量％，更优选为50质量％～100质量％，进一步优选为70质量％～100质量％，尤其优选为90质量％～100质量％，最优选为100质量％。即，最优选将“五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种”直接用作本发明的家畜用补充剂。
＜家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂＞
根据本发明的第二侧面，提供一种含有五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂。
乳酸杆菌(Lactobacillus)属细菌是指分类为乳酸菌的革兰氏阳性杆菌。乳杆菌属为约30种的乳酸菌属中最大的属。乳杆菌属细菌在自然界中广泛分布，乳杆菌属细菌存在70种类以上。
乳杆菌属细菌优选为存在于马的肠内的细菌。
乳杆菌属细菌更优选为存在于马的肠内的细菌且不存在于人体的肠内的细菌。
乳杆菌属细菌更优选为选自包括Lactobacillus equi、Lactobacillushayakitensis、Lactobacillus equigenerosi、Lactobacillus delbrueckii及Lactobacillus ingluviei的组中的至少一种。
基于本发明的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂是否能够促进乳杆菌属细菌的增殖能够通过例如以下的方法来确认。
使家畜摄取一定时间指定量的基于本发明的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂，并回收摄取期间前后的粪便。从回收的便提取DNA，利用得到的DNA来制备序列库。通过下一代序列(MiSeq；Illumina K.K.)，进行排序，将类似性高的数据分成组(OTU；OperationTaxonomic Unit；操作的分类单位)，估计系统分类。统计属于各分类组的排列数据数，进行前后的数据比较，但是每个菌的存在比率大不相同，因此将初始值设为100，实施摄取前后的菌数的比较，摄取后小于100，藉此能够确认是否能够抑制上述指定的菌的数量。
作为基于本发明的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂，可以仅单独使用五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种，也可以对五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种配合其他成分。
作为上述其他成分，例如可举出矿物质酵母、类黄酮、聚苯酚及具有免疫刺激作用的口服物质等，但是并无特别限定。作为上述其他成分，具体而言，能够举出日本特开2015-127340号公报的0023～0038段中记载的成分。
基于本发明的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂还可以适当含有选自维生素、维生素类物质、蛋白质、氨基酸、油脂、有机酸、碳水化合物、植物衍生原料、动物衍生原料、饲料添加物及动物医药品用添加物的1种以上等能够口服摄取的成分。
基于本发明的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂能够使用选自各种载体、例如赋形剂、润滑剂、稳定剂、分散剂、结合剂、稀释剂、香味料、甜味剂、风味剂及着色剂的1种以上的添加物来制备，优选可以作为优选口服药剂来制备。
基于本发明的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂的形式只要实现本发明的效果，则并无特别限制，例如可以为片剂、丸剂、颗粒剂、细粒剂、咀嚼剂、胶囊剂(硬胶囊、软胶囊中所填充的形式)、液剂、咀嚼片的形式。
基于本发明的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂中的“五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种”的含量并无特别限定，但是通常为10质量％～100质量％，优选为20质量％～100质量％，更优选为50质量％～100质量％，进一步优选为70质量％～100质量％，尤其优选为90质量％～100质量％，最优选为100质量％。即，最优选直接将“五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种”用作基于本发明的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂。
＜家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进方法＞
基于本发明的家畜用饲料或家畜用补充剂以及乳杆菌属细菌的生长促进剂以家畜为供给对象，能够对家畜口服供给。
即，根据本发明的第三侧面，提供一种包括对家畜供给五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种步骤的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进方法。
乳杆菌属细菌及其优选的范围如本说明书中所述。
对家畜供给五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种的方法并无特别限定，但是口服供给、即使家畜口服摄取即可。
对家畜供给基于本发明的家畜用饲料或家畜用补充剂或乳杆菌属细菌的生长促进剂的肠内细菌数抑制剂的情况下，“五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种”的一日摄取量或供给量优选0.1mg/kg/天以上，更优选0.5mg/kg/天以上，进一步优选1.0mg/kg/天以上，更进一步优选2.0mg/kg/天以上，尤其优选4.0mg/kg/天以上。五层龙属植物的萃取物和/或粉碎物的一日摄取量或供给量的上限并无特别限定，但是通常为2000mg/kg/天以下，优选为1000mg/kg/天以下。
对家畜供给基于本发明的家畜用饲料或家畜用补充剂或乳杆菌属细菌的生长促进剂的肠内细菌数抑制剂的情况下，乳杆菌属细菌的数增殖优选1.1倍以上，更优选1.5倍以上，进一步优选2倍以上，更进一步优选5倍以上，尤其优选10倍以上。此时，增殖的乳杆菌属细菌优选为选自包括Lactobacillus equi、Lactobacillus hayakitensis、Lactobacillus equigenerosi、Lactobacillus delbrueckii及Lactobacillus ingluviei的组中的至少一种，最优选包含Lactobacillus equi。
＜关于摄取6天后的粪便的平均pH＞
摄取6天基于本发明的家畜用饲料或家畜用补充剂或乳杆菌属细菌的生长促进剂之后的粪便的平均pH并无特别限定，但是优选6.0～8.2，更优选6.5～8.2，进一步优选为7.0～8.2，更进一步优选7.4～8.2，尤其优选为7.6～8.0。通过将粪便的平均pH设为上述范围内，能够抑制使纤维素分解菌死灭的效果，并且能够抑制坏细菌的增加，能够保持良好的肠内环境。
粪便的平均pH能够通过以下方法来测定。称取一定量的粪便，相对于其质量添加9倍量的蒸馏水来制备试样溶液。充分震荡所得到的试样溶液，使试样分散于蒸馏水中，接着，在80℃下加热试样溶液30分钟，使包含于试样中的病毒等失活之后，静放试样溶液。静放试样溶液之后，采取试样溶液的上清，通过玻璃电极进行pH测定。pH测定中能够使用紧凑型pH计(HORIBA,Ltd.制、LAQUQtwin B-172)。
＜关于乙酸＞
根据基于本发明的家畜用饲料或家畜用补充剂、乳杆菌属细菌的生长促进剂以及乳杆菌属细菌的生长促进方法，能够优选使粪便中的乙酸量增加。通过乙酸促进肠的蠕动，能够改善肠内环境。摄取6天后的粪便中的乙酸的量与摄取前的粪便中的乙酸的量相比增加优选1.1倍以上，更优选1.2倍以上，进一步优选1.3倍以上，更进一步优选1.4倍以上，尤其优选1.5倍以上。
粪便中的乙酸量的测定能够通过常规方法来进行。例如作为例子举出后面叙述的实施例中记载的方法。
＜关于梭菌(Clostridium)属细菌＞
根据基于本发明的家畜用饲料或家畜用补充剂、乳杆菌属细菌的生长促进剂以及乳杆菌属细菌的生长促进方法，优选能够降低肠内细菌中的梭菌(Clostridium)属细菌的数和/或比例。通过基于本发明的家畜用饲料或家畜用补充剂或者乳杆菌属细菌的生长促进剂的摄取，与摄取前进行比较，梭菌(Clostridium)属细菌的数降低优选0.9倍以下，更优选0.8倍以下，进一步优选为0.7倍以下，尤其优选为0.6倍以下。
梭菌属细菌是指土壌内部或生物的肠内等氧浓度低的环境中生息的绝对嫌气性菌，在氧存在下无法增殖。梭菌属细菌中也包含多个病原菌，因此根据本发明，有时能够抑制基于病原菌的不良影响。
是否降低梭菌(Clostridium)属细菌的数或比例的测定能够与是否能够促进乳杆菌属细菌的增殖的测定方法相同地进行。
＜五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的用途＞
另外，根据本发明，提供用于包含为了家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进而使用的饲料或补充剂的供给的家畜的饲养的五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种。
另外，根据本发明，提供用于促进家畜中的乳杆菌属细菌的增殖的处置的五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种。
另外，根据本发明，提供用于制造为了家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进而使用的家畜用饲料或家畜用补充剂的五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种的使用。
另外，根据本发明，提供用于制造家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂的五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种的使用。
上述的各发明中的优选的方式如本说明书中所述。
实施例
通过以下实施例进一步对本发明进行说明，但是本发明并不限定于以下实施例。本说明书中，Tris为三羟甲基氨基甲烷的简称，EDTA为乙二胺四乙酸的简称。
实施例1：
粉碎网状五层龙(Salacia reticulata)及捕圆形五层龙(Salacia oblonga)的根及干的部分之后，等重量混合，对经过98℃的热水提取工序得到的液体进行喷雾干燥，从而得到了五层龙提取提取粉末。
实施例2：
＜粪便中的乳酸杆菌(Lactobacillus)属细菌与梭菌(Clostridium)属细菌的数的变化＞
使2岁～12岁的纯种马12头(体重：440～480kg)每天摄取9g的五层龙提取提取粉末。通过T-RFLP(Nagashima法，长岛方法)测定了五层龙提取提取粉末的摄取前以及摄取6天五层龙提取提取粉末之后的粪便中的乳酸杆菌(Lactobacillus)属细菌与梭菌(Clostridium)属细菌的数的变化。T-RFLP(Terminal Restriction Fragment LengthPolymorphism，关于末端限制片段长度多态性)解析，通过经末端荧光标识的底胶套装PCR(polymerase chain reaction、聚合酶链反应)放大模板DNA，基于限制酶的消化之后，进行碎片解析。T-RFLP解析为利用因DNA碱排列不同而限制酶切断部位不同的方法并通过检测峰值的强度、位置、数来评价或比较的断片多型性解析。粪便中的细菌数通过『Nagashima法』来创建数据库，通过属级别估计肠内细菌，能够使其变化视觉化或数值化。
将结果示于表1中。
表中的数值表示将五层龙提取提取粉末的摄取前的各细菌的数量设为100时的相对值。
[表1]
如表1所示，通过摄取五层龙提取提取粉末，作为好细菌的乳酸杆菌(Lactobacillus)属细菌的比例显著增加，多个病原菌所属的梭菌(Clostridium)属细菌的比例降低。
＜粪便的平均pH及粪便中的乙酸量的变化＞
并且，摄取五层龙提取提取粉末之前以及摄取6天五层龙提取提取粉末之后，测定了粪便的平均pH及粪便中的乙酸量。
粪便的平均pH通过以下方法来测定。称取一定量的试样(粪便)，相对于其质量添加9倍量的蒸馏水来制备了试样溶液。充分震荡所得到的试样溶液，使试样分散于蒸馏水中。接着，在80℃下加热试样溶液30分钟，使包含于试样中的病毒等失活之后，静放试样溶液。静放试样溶液之后，采取试样溶液的上清，通过玻璃电极进行了pH测定。pH测定中使用了紧凑型pH计(HORIBA,Ltd.制、LAQUQtwin B-172)。
粪便中的乙酸量通过以下方法来测定。
由精馏管精确称取一定量的试样(粪便)，用提取溶液使其悬浊，得到试样溶液。接着，对所得到的试样溶液进行热处理(85℃下20分钟)之后，通过物理粉碎(珠磨及震荡)使试样粉碎之后，进行了离心分离(14000rpm、10分钟)。采取试样溶液的上清，将通过孔径0.45μm的膜过滤器进行过滤而得到的溶液设为测定用样品。
用高效液相色谱测定了测定用样品中所包含的乙酸的浓度，转换成试样中的乙酸量。
另外，作为提取溶液，只要为包含水的溶液，则并无特别限定，但是优选为p-甲苯磺酸溶液。
将结果示于表2中。表中的粪便中的乙酸量的数值表示将摄取五层龙提取提取粉末之前的粪便中的乙酸量设为100时的相对值。
[表2]
| 粪便的平均pH | 粪便中的乙酸量 | |
| 摄取五层龙提取提取粉末之前 | 7.6 | 100 |
| 摄取6天五层龙提取提取粉末之后 | 8.0 | 150 |
如表2所示，与摄取五层龙提取提取粉末之前相比，在摄取6天之后粪便的平均pH也没有降低。若粪便的pH低于pH5.0，则存在纤维素分解菌的活性降低的悬念，但是摄取五层龙提取提取粉末时不存在上述问题。并且，通过摄取五层龙提取提取粉末，粪便中的有机酸的一种即乙酸的量增加。已知有乙酸促进肠的蠕动而改善肠内环境。
＜乳杆菌属的每一个菌种的菌数的变化＞
另外，摄取五层龙提取提取粉末之前以及摄取6天五层龙提取提取粉末之后，对每一个菌种调查了乳杆菌属的菌数的变化。
菌数的变化的测定通过以下方法来进行。使用采变试剂(TechnoSurugaLaboratory Co.,Ltd.,Shizuoka,Japan)回收了摄取期间前后的粪便。使回收的便悬浊于GTC(硫氰酸胍)Buffer(缓冲液)(100mmol/L Tris-HCl[pH 9.0],40mmol/L Tris-EDTA[pH8.0],4mol/L Guanidine Thiocyanate)中。通过氧化锆珠使添加到液中的粪便破碎，从100μl的悬浊液使用自动核酸提取装置(Precision System Science,Chiba,Japan)来进行了DNA提取。利用得到的DNA，通过NexteraTM DNA样品制备试剂(Illumina K.K.)进行排序用程序库的样品制备。并且，通过对各样品附加(按照试剂的协议)指数排列，能够进行样品的判别。利用已制备的序列程序库，通过下一代序列(MiSeq；Illumina K.K.)进行了排序。关于所得到的数据，进行碱排列的质量检查，实施了低质量数据的过滤。将去除质量检查的数据分成类似性高的数据的组(OTU；Operation Taxonomic Unit；操作的分类单位)。关于各OTU，进行相对于16S rRNA基因创建数据库的相同性检索，估计系统分类。统计属于各分类组的排列数据数，进行了前后的数据比较，但是每个菌的存在比率大不相同，因此将初始值设为1，将摄取后的菌数设为相对值来便是，由此实施了摄取前后的菌数的比较。将结果示于表3中。
[表3]
从表3所示的结果，证明了五层龙提取提取粉末具有显著增加马原有的乳杆菌属细菌的效果。
产业上的可利用性
根据本发明，能够未从外部供给细菌来增加家畜中的肠内作为好细菌的乳杆菌属细菌，并且能够优选降低有害的菌。并且，称为好细菌的菌中使肠内pH降低，且还存在对纤维素分解菌的作用不利的菌，但是本发明中，优选不将肠内pH而能够增加作为好细菌的乳酸菌。
根据本发明，通过对家畜供给五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物的至少一种，能够使家畜的肠内环境稳定，并能够实现腹泻及便秘等消化器疾病的予防或治疗、压力的缓解、压力耐性的赋予、健康保持、生长促进、消化吸收促进、饲料效率的提高和/或粪便的形状或臭味改善等。
Claims (12)
1.一种用于促进家畜中的乳杆菌属细菌生长的家畜用饲料或家畜用补充剂，其含有五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的家畜用饲料或家畜用补充剂，其中，
摄取6天后的粪便的平均pH为6.0～8.2。
3.根据权利要求1或2所述的家畜用饲料或家畜用补充剂，其中，
摄取6天后的粪便中的乙酸的量与摄取前的粪便中的乙酸的量相比增加了1.1倍以上。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的家畜用饲料或家畜用补充剂，其中，
乳杆菌属细菌为选自由Lactobacillus equi、Lactobacillus hayakitensis、Lactobacillus equigenerosi、Lactobacillus delbrueckii及Lactobacillus ingluviei组成的组中的至少一种。
5.一种家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂，其含有五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物中的至少一种。
6.根据权利要求5所述的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂，其中，
摄取6天后的粪便的平均pH为6.0～8.2。
7.根据权利要求5或6所述的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂，其中，
摄取6天后的粪便中的乙酸的量与摄取前的粪便中的乙酸的量相比增加了1.1倍以上。
8.根据权利要求5至7中任一项所述的家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进剂，其中，
乳杆菌属细菌为选自由Lactobacillus equi、Lactobacillus hayakitensis、Lactobacillus equigenerosi、Lactobacillus delbrueckii及Lactobacillus ingluviei组成的组中的至少一种。
9.一种家畜中的乳杆菌属细菌的生长促进方法，其包括对家畜供给五层龙属植物、五层龙属植物萃取物及五层龙属植物粉碎物中的至少一种的步骤。
10.根据权利要求9所述的方法，其中，
摄取6天后的粪便的平均pH为6.0～8.2。
11.根据权利要求9或10所述的方法，其中，
摄取6天后的粪便中的乙酸的量与摄取前的粪便中的乙酸的量相比增加了1.1倍以上。
12.根据权利要求9至11中任一项所述的方法，其中，
乳杆菌属细菌为选自由Lactobacillus equi、Lactobacillus hayakitensis、Lactobacillus equigeneros-i、Lactobacillus delbrueckii及Lactobacillusingluviei组成的组中的至少一种。
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