CN109675039A - 药物组合、抗肿瘤的药物和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种药物组合，包括血管阻断剂和乏氧敏感前体药物。本发明提供的药物组合包括有效量的血管阻断剂和有效量的乏氧敏感前体药物。本发明人发现血管阻断剂可以破坏肿瘤内部血管，引起肿瘤乏氧，在与乏氧敏感前体药物联合用药中，两者可以起到协同作用，可以进一步增强对于肿瘤的抑制。本发明提供的血管阻断剂和乏氧敏感前体药物联合可以协同增强对于肿瘤的抑制作用，在癌症治疗领域具有广阔的应用前景。

Description

药物组合、抗肿瘤的药物和应用
技术领域
本发明涉及医药技术领域，尤其是涉及一种药物组合、抗肿瘤的药物和应用。
背景技术
随着生活节奏的加快，癌症的病发率越来越高，严重威胁了人类的生命健康。癌症是指机体在各种致癌因素的作用下，局部细胞异常增生而形成的局部肿块，细胞生长失控和细胞周期的失调是所以癌症共有的特征。目前，癌症的主要治疗方式包括：手术切除、化学治疗(化疗)、放射线治疗(放疗)、免疫治疗、热疗、光动力学治疗等。其中，化疗是不可或缺的重要的治疗手段，在肿瘤的综合治疗中占有重要地位。基于对肿瘤细胞内信号传导、细胞周期的调控、细胞凋亡的诱导以及细胞与胞外基质的相互作用等各种基本过程的研究，新的抗肿瘤药物不断涌现，肿瘤的化疗也取得了飞跃式的发展。由于肿瘤的血管生成对肿瘤的生长有重要的作用，因此破坏肿瘤血管可以造成肿瘤部位营养缺乏，这种方法可以有效地抑制肿瘤的生长。
血管阻断剂(vascular disrupting agents，简称VDAs)是近年来开发的新型抗肿瘤试剂，不同于传统的化疗药物直接杀死肿瘤细胞，血管阻断剂通过特异性破坏肿瘤部位新生血管，切断肿瘤内部血液供给，使肿瘤内部因缺乏营养供给而坏死，但是血管阻断剂只是造成内部营养供给缺乏，肿瘤高度血管化的外围处的肿瘤细胞仍然能正常的生长。
乏氧敏感前体药物(hypoxia-activated prodrugs，简称HAPs)是近年来开发的新型抗肿瘤试剂，乏氧敏感前体药物在乏氧细胞内能够被还原生成一种具有细胞毒性作用的代谢产物。这种代谢产物对乏氧细胞的杀伤作用显著超过它的母体化合物，使肿瘤组织内乏氧细胞死亡，可以同时显著增加肿瘤放射治疗及肿瘤一系列化学治疗药物的抗肿瘤作用。但是，乏氧敏感前体药物临床试验均以失败告终，可能是由于肿瘤内部乏氧水平不够造成的。
发明内容
有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种药物组合物，可以协同增强对于肿瘤的抑制作用。
本发明提供了一种药物组合，包括血管阻断剂和乏氧敏感前体药物。
优选的，所述血管阻断剂包括小分子化合物血管阻断剂或纳米制剂血管阻断剂。
优选的，所述小分子化合物血管阻断剂选自combretastatin A4(CA4)、CA4P(fosbretabulin)、DMXAA(ASA404)、AVE8062(AC7700)、CYT997、NPI2358、MPC-687(Azixa)、ZD6126、MN029(Denebulin)、OXi4503、BNC-105、EPC-2407、Colchicine、Flavone aceticacid(FAA)、xanthenone-4-acetic acid(XAA)、ABT751、TZT-1027、Arsenic trioxide(Trisenox)、SU6668、ZD6474、PTK787/ZK222584、MX-116407、NPI-2358、Dolastatin 10、MPC-6827、MN-029和Exherin中的一种或几种；
优选的，所述纳米制剂血管阻断剂选自poly(L-aspartic acid)-graft-methoxy-poly(ethylene glycol)、combretastatin A4或者其盐的形式，poly(L-glutamic acid)-graft-methoxy-poly(ethylene glycol)、combretastatin A4或者其盐的形式，methoxy-poly(ethylene glycol)-block-poly(L-aspartic acid)、combretastatin A4或者其盐的形式，methoxy-poly(ethylene glycol)-block-poly(L-glutamic acid)、combretastatinA4。
优选的，所述乏氧敏感前体药物选自Tirapazamine(SR4233)，Apaziquone(E09)、TH-302、PR-104、Banoxantrone(AQ4N)、Caricotamide(EP0152R)、tretazicar(CB1954)、RH1、NLCQ-1、SN30000(CEN-209)、SN29730和KS119W中的一种或几种。
优选的，所述血管阻断剂和乏氧敏感前体药物的重量比为(0.1～5):1。
本发明提供了一种抗肿瘤的药物，包括上述技术方案任意一项所述的组合和药学上可接受的辅料。
优选的，所述药物的剂型选自片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、贴剂、混悬剂、糖浆剂、口服液、注射剂、栓剂中的一种或几种。
本发明提供了上述技术方案任意一项所述的组合在制备抗肿瘤的药物中的应用。
优选的，所述肿瘤包括鼻腔及鼻窦恶性肿瘤、鼻咽癌、口腔癌、喉癌、颅内肿瘤、甲状腺癌、舌癌、肺癌、食管癌、乳腺癌、胃癌、大肠癌、乙状结肠和直肠癌、肝癌、胰腺癌与壶腹周围癌、胆道癌、肾癌、前列腺癌、膀胱癌、睾丸恶性肿瘤、阴茎癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、卵巢癌、纤维组织细胞癌、横纹肌肉癌、滑膜肉瘤、黑色素瘤、骨肉瘤、尤文氏肉瘤、淋巴瘤和多发性骨髓瘤中的一种或几种。
与现有技术相比，本发明提供了一种药物组合，包括血管阻断剂和乏氧敏感前体药物。本发明提供的药物组合包括有效量的血管阻断剂和有效量的乏氧敏感前体药物。本发明人发现血管阻断剂可以破坏肿瘤内部血管，引起肿瘤乏氧，在与乏氧敏感前体药物联合用药中，两者可以起到协同作用，可以进一步增强对于肿瘤的抑制。本发明提供的血管阻断剂和乏氧敏感前体药物联合可以协同增强对于肿瘤的抑制作用，在癌症治疗领域具有广阔的应用前景。
附图说明
图1为本发明实施例1中得到的乏氧敏感前体药物TPZ在缺氧或者常氧培养条件下，(a)为24小时时对小鼠乳腺癌细胞4T1的药物细胞毒性；(b)为48小时时对小鼠乳腺癌细胞4T1的药物细胞毒性；
图2为本发明实施例2中得到的乏氧敏感前体药物TH-302在缺氧或者常氧培养条件下，(a)为24小时时对小鼠黑色素瘤细胞B16F10的药物细胞毒性；(b)为48小时时对小鼠黑色素瘤细胞B16F10的药物细胞毒性；
图3为本发明实施例3中得到的实施不同剂量的血管阻断剂CA4-NPs之后，荷瘤小鼠的肿瘤血管的CD31染色结果；
图4为本发明实施例4中得到的实施不同剂量的血管阻断剂CA4-NPs之后，荷瘤小鼠的肿瘤缺氧的染色结果；
图5为本发明实施例5中得到的实施不同剂量的血管阻断剂CA4-NPs之后，荷瘤小鼠的肿瘤部位的血氧饱和度变化；
图6为本发明实施例6中得到的联合药物治疗的(a)肿瘤体积变化和(b)小鼠体重变化结果；(c)抑瘤结束之后的离体肿瘤照片；
图7为本发明实施例7中得到的联合药物治疗的(a)肿瘤体积变化和(b)小鼠体重变化结果；(c)抑瘤结束之后的离体肿瘤照片。
具体实施方式
本发明提供了一种药物组合、抗肿瘤的药物和应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都属于本发明保护的范围。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
本发明提供了一种药物组合，包括血管阻断剂和乏氧敏感前体药物。
血管阻断剂(vascular disrupting agents，简称VDAs)是近年来开发的新型抗肿瘤试剂，不同于传统的化疗药物直接杀死肿瘤细胞，但是血管阻断剂只是造成内部营养供给缺乏，肿瘤高度血管化的外围处的肿瘤细胞仍然能正常的生长。
本发明提供的药物组合，包括血管阻断剂。
本发明所述血管阻断剂是指通过特异性破坏肿瘤部位新生血管，切断肿瘤内部血液供给，使肿瘤内部因缺乏营养供给而坏死的一类化学物。
本发明对于血管阻断剂具有促进效果包括但不限于：肿瘤乏氧，缺氧诱导因子(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶-9(MMP9)的转录或表达。本发明对于所述血管阻断剂没有特殊限定，本领域上技术人员熟知的即可。
按照本发明，所述血管阻断剂包括小分子化合物血管阻断剂或纳米制剂血管阻断剂。
具体的，所述小分子化合物血管阻断剂优选选自combretastatin A4(CA4)、CA4P(fosbretabulin)、DMXAA(ASA404)、AVE8062(AC7700)、CYT997、NPI2358、MPC-687(Azixa)、ZD6126、MN029(Denebulin)、OXi4503、BNC-105、EPC-2407、Colchicine、Flavone aceticacid(FAA)、xanthenone-4-acetic acid(XAA)、ABT751、TZT-1027、Arsenic trioxide(Trisenox)、SU6668、ZD6474、PTK787/ZK222584、MX-116407、NPI-2358、Dolastatin 10、MPC-6827、MN-029和Exherin中的一种或几种；特别优选的为poly(L-glutamic acid)-graft-methoxy-poly(ethylene glycol)/combretastatin A4(CA4-NPs)。
本发明对其来源不进行限定，市售或按照本领域技术人员公开的方法制备即可。
按照本发明，所述纳米制剂血管阻断剂优选选自poly(L-aspartic acid)-graft-methoxy-poly(ethylene glycol)、combretastatin A4或者其盐的形式，poly(L-glutamicacid)-graft-methoxy-poly(ethylene glycol)、combretastatin A4或者其盐的形式，methoxy-poly(ethylene glycol)-block-poly(L-aspartic acid)、combretastatin A4或者其盐的形式，methoxy-poly(ethylene glycol)-block-poly(L-glutamic acid)、combretastatin A4；
具体的说，纳米制剂的具有式(1-4)所示的结构。其中，式(1)：n为20-200，x为20-200，y为20-200，z为1-200；式(2)：n为20-200，x为20-200，y为20-200，z为1-200；式(3)：n为20-500，x为20-200，y为1-200；式(4)：n为20-500，x为20-200，y为1-200。
本发明对于上述纳米制剂的来源不进行限定，市售或者本领域技术人员熟知的方法制备即可；优选可以按照201610379051.9公开的方法制备。
本发明提供的药物组合，包括乏氧敏感前体药物。
乏氧敏感前体药物(hypoxia-activated prodrugs，简称HAPs)是近年来开发的新型抗肿瘤试剂，乏氧敏感前体药物在乏氧细胞内能够被还原生成一种具有细胞毒性作用的代谢产物。这种代谢产物对乏氧细胞的杀伤作用显著超过它的母体化合物，使肿瘤组织内乏氧细胞死亡，可以同时显著增加肿瘤放射治疗及肿瘤一系列化学治疗药物的抗肿瘤作用。
本发明所述乏氧敏感前体药物选自Tirapazamine(TPZ/SR4233)，Apaziquone(E09)、TH-302、PR-104、Banoxantrone(AQ4N)、Caricotamide(EP0152R)、tretazicar(CB1954)、RH1、NLCQ-1、SN30000(CEN-209)、SN29730和KS119W中的一种或几种；最优选为TPZ和TH-302。
本发明所述血管阻断剂和乏氧敏感前体药物的重量比优选为(0.1～5):1；更优选为(0.3～3):1；最优选为(0.6～1.2):1。
本发明创造性的选择上述血管阻断剂和乏氧敏感前体药物协同配合，结合特定配比，最终制备得到的药物组合具有良好的抗肿瘤的作用。
本发明提供了一种抗肿瘤的药物，包括上述技术方案任意一项所述的组合和药学上可接受的辅料。
本发明所述药物的剂型选自片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、贴剂、混悬剂、糖浆剂、口服液、注射剂、栓剂中的一种或几种。
本发明所述联合治疗药物组合可以是以下形式中的任意一种：一)将血管阻断剂和乏氧敏感前体药物分别制成独立的制剂，制剂的剂型可相同或者不同，给药途径亦可相同或者不同。二)将血管阻断剂和乏氧敏感前体药物配置成复方制剂。在将血管阻断剂和乏氧敏感前体药物采用相同给药途径给药并同时施加时，可采用将两者配置成复方制剂的形式。
本发明还提供了一种用于癌症治疗的联合用药治疗方法，为向对象联合施用有效量的血管阻断剂，以及有效量的乏氧敏感前体药物。所述的对象为哺乳动物或所述哺乳动物的肿瘤细胞。所述哺乳动物优选为啮齿目动物、偶蹄目动物、奇蹄目动物、兔形目动物、灵长目动物等。所述灵长目动物优选为猴、猿或智人。所述对象可以是罹患肿瘤的患者，或者为罹患肿瘤的患者的离体肿瘤细胞。可以同步的或者顺序地给予有效量的血管阻断剂和有效量的乏氧敏感前体药物。基于血管阻断剂能够造成肿瘤内部血管密度下降和乏氧，本发明经研究发现，在与乏氧敏感前体药物联合用药中，两者可以起到更显著的肿瘤治疗效果。
本发明在对小鼠进行实验时，给药剂量优选为24mg/kg～48mg/kg。优选的，CA4-NPs通过尾静脉的方式给药，而TPZ通过腹腔给药。
按照本发明，所述肿瘤包括鼻腔及鼻窦恶性肿瘤、鼻咽癌、口腔癌、喉癌、颅内肿瘤、甲状腺癌、舌癌、肺癌、食管癌、乳腺癌、胃癌、大肠癌、乙状结肠和直肠癌、肝癌、胰腺癌与壶腹周围癌、胆道癌、肾癌、前列腺癌、膀胱癌、睾丸恶性肿瘤、阴茎癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、卵巢癌、纤维组织细胞癌、横纹肌肉癌、滑膜肉瘤、黑色素瘤、骨肉瘤、尤文氏肉瘤、淋巴瘤和多发性骨髓瘤中的一种或几种。
本发明所述血管阻断剂和乏氧敏感前体药物可以在接受治疗前、中、后向对象施用。
本发明通过一系列体外实验，发现乏氧培养条件下，TPZ或TH-302显示出更强的细胞杀死能力；(2)在动物水平上，发现poly(L-glutamic acid)-graft-methoxy-poly(ethylene glycol)/combretastatin A4(CA4-NPs)能够破坏肿瘤部位的血管，同时引起肿瘤部位乏氧。(3)在小鼠乳腺癌肿瘤模型上，CA4-NPs联合TPZ或者TH-302能够显著提供单药的治疗效果。(4)本发明利用血管阻断剂能够造成肿瘤内部严重的乏氧，提供一种癌症治疗的联合用药新方案，即将血管阻断剂与乏氧敏感前体药物联用，能显著提供癌症的治疗效果，为癌症的临床治疗提供了新的治疗思路和方案策略，具有很好的应用前景。
本发明提供了上述技术方案任意一项所述的组合在制备抗肿瘤的药物中的应用。
本发明提供了一种药物组合，包括血管阻断剂和乏氧敏感前体药物。本发明提供的药物组合包括有效量的血管阻断剂和有效量的乏氧敏感前体药物。本发明人发现血管阻断剂可以破坏肿瘤内部血管，引起肿瘤乏氧，在与乏氧敏感前体药物联合用药中，两者可以起到协同作用，可以进一步增强对于肿瘤的抑制。本发明提供的血管阻断剂和乏氧敏感前体药物联合可以协同增强对于肿瘤的抑制作用，在癌症治疗领域具有广阔的应用前景。
为了进一步说明本发明，以下结合实施例对本发明提供的一种药物组合、抗肿瘤的药物和应用进行详细描述。
实施例1乏氧敏感前体药物TPZ对不同培养条件的细胞毒性
小鼠乳腺癌细胞4T1铺96孔板，贴壁过夜之后，配制一系列从高到低的药物，并设置对照组，加入孔中，每个浓度设置3个复孔。在常氧细胞培养箱或者缺氧细胞培养箱中孵育24或48小时之后，加入MTT，4小时之后移除废液，加入定量的DMSO，利用多功能酶标仪检测490nm波长的细胞OD值，计算药物作用下的细胞毒性，如图1所示。
在相同的TPZ给药浓度作用下，在缺氧细胞培养箱中孵育24或者48小时之后，TPZ的细胞毒性大于在常氧条件下的细胞毒性。例如，TPZ作用24小时后，在细胞存活率均为50％时，在常氧和缺氧条件下TPZ的给药浓度分别为27.8和6.44μg/mL。
实施例2乏氧敏感前体药物TH-302对不同培养条件的细胞毒性
小鼠黑色素瘤细胞B16F10铺96孔板，贴壁过夜之后，配制一系列从高到低的药物，并设置对照组，加入孔中，每个浓度设置3个复孔。在常氧细胞培养箱或者缺氧细胞培养箱中孵育24或48小时之后，加入MTT，4小时之后移除废液，加入定量的DMSO，利用多功能酶标仪检测490nm波长的细胞OD值，计算药物作用下的细胞毒性，如图2所示。
在相同的TH-302给药浓度作用下，在缺氧细胞培养箱中孵育24或者48小时之后，TH-302的细胞毒性大于在常氧条件下的细胞毒性。例如，TH-302作用48小时后，在细胞存活率均为50％时，在常氧和缺氧条件下TH-302的给药浓度分别为23.8和1.73μg/mL。
实施例3血管阻断剂CA4-NPs对肿瘤血管的影响
将种有4T1细胞的balb/c小鼠随机分为4组(每组3只)，肿瘤体积平均为180-200mm3。给小鼠尾静脉注射PBS，24,36或48mg/kg CA4-NPs(等同CA4的剂量)。24h之后，麻醉并处死小鼠，解剖出肿瘤，用PBS清洗后浸泡在4％的多聚甲醛中，石蜡包埋各个肿瘤组织，切片进行CD31染色。随后，用显微镜进行拍照和病理学分析，如图3所示。
PBS组小鼠的血管丰富，而CA4-NPs治疗的小鼠肿瘤血管密度明显降低。而且，较高的CA4-NP注射剂量会导致更严重的肿瘤血管破坏以及血管密度降低。
实施例4血管阻断剂CA4-NPs对肿瘤乏氧的影响
将皮下种有4T1细胞的balb/c荷瘤小鼠随机分为4组(每组3只)，肿瘤体积平均为180-200mm3。给小鼠尾静脉注射PBS，24,36或48mg/kg CA4-NPs(等同CA4的剂量)。4或24小时之后，腹腔注射60mg/kg哌莫硝唑盐酸盐,1.5小时之后麻醉并处死小鼠，解剖出肿瘤
，用PBS清洗后在-80℃冰箱冰冻，进行冰冻切片。切片在4℃冰丙酮中固定20分钟，10％山羊血清封闭，之后用DylightTM549标记的单克隆抗体4℃孵育过夜。用DAPI染细胞核，然后用盖玻片和指甲油固定组织，并通过激光共聚焦进行拍照和分析，如图4所示。
如图4所示，缺氧区域和细胞核分别被染成红色和蓝色。利用软件ImageJ对免疫荧光图像的荧光强度进行半定量分析。PBS组的肿瘤染色显示出微弱的红色荧光强度,其中光密度为6.1±0.1％。24,36,and 48mg/kg的CA4-NPs(等同CA4的剂量)注射4h之后，肿瘤区域的红色荧光强度展示出浓度依赖的增强，光密度分别为7.4±0.7％,9.2±0.2％,和10.1±0.2％。延长CA4-NPs治疗时间到24h，缺氧染色的光密度分别为10.7±0.6％,12.3±0.2％,and 12.7±0.1％，相对治疗4h的结果，分别提升44％,34％,和26％。
实施例5血管阻断剂CA4-NPs对肿瘤血氧饱和度的影响
将皮下种有4T1细胞的balb/c荷瘤小鼠随机分为4组(每组3只)，肿瘤体积平均为180-200mm3。给小鼠尾静脉注射PBS，24，36或48mg/kg CA4-NPs(等同CA4的剂量)。4或24小时之后，小鼠用2％异氟烷麻醉，固定放置到的多光谱光声层析成象扫描仪(MSOT inVision128,iThera Medical GmbH,Munich,Germany)中进行测试。其中，多光谱过程扫描设置为680，715，730，760，800，850和900纳米，每个波长的帧被设置为8个平均帧。结果以线性模型进行了重构，并在线性回归中进行了多谱处理。血氧饱和度(oxygen saturation，sO2)被用来评估瘤内缺氧程度。血氧饱和度是根据下列公式计算的：
血氧饱和度(oxygen saturation，sO2)＝MHbO2/(MHb+MHbO2)×100％
其中，MHb和MHbO2分别表示肿瘤区域Hb和HbO2的平均强度值。
如图5所示，标记血液中的血红蛋白(Hb)和含氧血红蛋白(HbO2)分别为蓝色和红色信号来观察肿瘤区域血液中的血氧饱和度(sO2)。利用肿瘤区域sO2的变化来反应肿瘤内部缺氧的变化。PBS的血氧饱和度为84.0±5.0％，注射CA4-NPs之后血氧饱和度降低。24,36,and 48mg/kg的CA4-NPs(等同CA4的剂量)尾静脉注射4h之后，小鼠肿瘤区域的血氧饱和度分别为73.6±2.0％,70.3±2.0％,和62.4±3.5％。延长CA4-NPs治疗时间到24h，小鼠肿瘤区域的血氧饱和度分别为56.9±2.1％,50.4±3.1％,和38.2±3.4％。
实施例6血管阻断剂CA4-NPs和乏氧敏感前体药物TPZ联合药物治疗抑瘤结果。
将皮下种有4T1细胞的balb/c荷瘤小鼠随机分为8组(每组6只)，肿瘤体积平均为180mm3：PBS(Group 1),TPZ(40mg/kg,Group 2),CA4-NPs(24mg/kg等同CA4的剂量,Group3),CA4-NPs(36mg/kg等同CA4的剂量,Group 4),CA4-NPs(48mg/kg等同CA4的剂量,Group5),TPZ+CA4-NPs(40mg/kg+24mg/kg等同CA4的剂量,Group 6),TPZ+CA4-NPs(40mg/kg+36mg/kg等同CA4的剂量,Group 7),TPZ+CA4-NPs(40mg/kg+48mg/kg等同CA4的剂量,Group8)。CA4-NPs通过尾静脉的方式给药，而TPZ通过腹腔给药。Group2,3和6一周给药一次，给2次，其余各组只在第0天给药一次。利用游标卡尺测量肿瘤体积。通过测量小鼠体重变化来评价药物治疗效果以及安全性。肿瘤体积(Vt，mm3)通过下面公式计算：
肿瘤体积(Vt，mm3)＝a×b2/2
其中，a和b分别表示游标卡尺测量肿瘤的最长和最短直径。
如图6所示，和PBS对照组相比，TPZ单药治疗组几乎对肿瘤生长没有抑制作用，表明了肿瘤内部的缺氧程度不足以活化TPZ发挥肿瘤杀伤能力。在CA-NPs单药治疗组中(Group 3,4,和5)，CA4-NPs单独给药展示出适中的肿瘤抑制，在治疗结束时，平均肿瘤体积分别为904±76mm3,624±153mm3,和144±71mm3，肿瘤抑制率(TSR)分别为21.7％,46.0％,和87.5％。与预想的结果一致，TPZ+CA4-NPs联合治疗(Group6，7和8)较单一治疗更能抑制肿瘤生长。例如，在治疗结束时Group 6的平均肿瘤体积为354±78mm3，肿瘤抑制率为69.4％，和Group3相比增长了3.2倍。值得一提的是Group 8具有最佳的治疗效果，在治疗Day10时，皮下肿瘤完全消失。
实施例7血管阻断剂CA4-NPs和乏氧敏感前体药物TPZ联合药物治疗抑瘤结果。
将皮下种有4T1细胞的balb/c荷瘤小鼠随机分为8组(每组6只)，肿瘤体积平均为500mm3：PBS(Group 1),TPZ(40mg/kg,Group 2),CA4-NPs(24mg/kg等同CA4的剂量,Group3),CA4-NPs(36mg/kg等同CA4的剂量,Group 4),CA4-NPs(48mg/kg等同CA4的剂量,Group5),TPZ+CA4-NPs(40mg/kg+24mg/kg等同CA4的剂量,Group 6),TPZ+CA4-NPs(40mg/kg+36mg/kg等同CA4的剂量,Group 7),TPZ+CA4-NPs(40mg/kg+48mg/kg等同CA4的剂量,Group8)。CA4-NPs通过尾静脉的方式给药，而TPZ通过腹腔给药，并且只在第0天给药一次。利用游标卡尺测量肿瘤体积。通过测量小鼠体重变化来评价药物治疗效果以及安全性。肿瘤体积(Vt，mm3)通过下面公式计算：
肿瘤体积(Vt，mm3)＝a×b2/2
其中，a和b分别表示游标卡尺测量肿瘤的最长和最短直径。
如图7所示，TPZ单药治疗对抑制肿瘤生长没有显著的作用，再一次表明CA4-NPs诱导的缺氧环境对活化TPZ发挥抗肿瘤的巨大作用。和CA4-NPs单药治疗组(Group 3,4和5)相比，TPZ+CA4-NPs联合治疗组(Group 6,7和8)表现出更显著的肿瘤抑制。值得一提的是，Group 8对肿瘤生长的抑制也最为显著，肿瘤抑制率高达93.3％，同时肿瘤体积缩小到～140mm3。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种药物组合，其特征在于，包括血管阻断剂和乏氧敏感前体药物。
2.根据权利要求1所述的组合，其特征在于，所述血管阻断剂包括小分子化合物血管阻断剂或纳米制剂血管阻断剂。
3.根据权利要求2所述的组合，其特征在于，所述小分子化合物血管阻断剂选自combretastatin A4(CA4)、CA4P、DMXAA(ASA404)、AVE8062(AC7700)、CYT997、NPI2358、MPC-687(Azixa)、ZD6126、MN029(Denebulin)、OXi4503、BNC-105、EPC-2407、Colchicine、Flavone acetic acid(FAA)、xanthenone-4-acetic acid(XAA)、ABT751、TZT-1027、Arsenic trioxide(Trisenox)、SU6668、ZD6474、PTK787/ZK222584、MX-116407、NPI-2358、Dolastatin 10、MPC-6827、MN-029和Exherin中的一种或几种。
4.根据权利要求2所述的组合，其特征在于，所述纳米制剂血管阻断剂选自poly(L-aspartic acid)-graft-methoxy-poly(ethylene glycol)、combretastatin A4或者其盐的形式，poly(L-glutamic acid)-graft-methoxy-poly(ethylene glycol)、combretastatin A4或者其盐的形式，methoxy-poly(ethylene glycol)-block-poly(L-aspartic acid)、combretastatin A4或者其盐的形式，methoxy-poly(ethylene glycol)-block-poly(L-glutamic acid)、combretastatin A4。
5.根据权利要求1所述的组合，其特征在于，所述乏氧敏感前体药物选自Tirapazamine(SR4233)，Apaziquone(E09)、TH-302、PR-104、Banoxantrone(AQ4N)、Caricotamide(EP0152R)、tretazicar(CB1954)、RH1、NLCQ-1、SN30000(CEN-209)、SN29730和KS119W中的一种或几种。
6.根据权利要求1所述的组合，其特征在于，所述血管阻断剂和乏氧敏感前体药物的重量比为(0.1～5):1。
7.一种抗肿瘤的药物，其特征在于，包括权利要求1～5任意一项所述的组合和药学上可接受的辅料。
8.根据权利要求7所述的药物，其特征在于，所述药物的剂型选自片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、贴剂、混悬剂、糖浆剂、口服液、注射剂、栓剂中的一种或几种。
9.权利要求1～6任意一项所述的组合在制备抗肿瘤的药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，所述肿瘤包括鼻腔及鼻窦恶性肿瘤、鼻咽癌、口腔癌、喉癌、颅内肿瘤、甲状腺癌、舌癌、肺癌、食管癌、乳腺癌、胃癌、大肠癌、乙状结肠和直肠癌、肝癌、胰腺癌与壶腹周围癌、胆道癌、肾癌、前列腺癌、膀胱癌、睾丸恶性肿瘤、阴茎癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、卵巢癌、纤维组织细胞癌、横纹肌肉癌、滑膜肉瘤、黑色素瘤、骨肉瘤、尤文氏肉瘤、淋巴瘤和多发性骨髓瘤中的一种或几种。
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