CN109674822A

CN109674822A - 美洲大蠊提取物发酵方法及其应用

Info

Publication number: CN109674822A
Application number: CN201811622711.7A
Authority: CN
Inventors: 郝振平; 徐溧
Original assignee: Kunming Cinorch Pharmaceutical Ltd By Share Ltd
Current assignee: Kunming Cinorch Pharmaceutical Ltd By Share Ltd
Priority date: 2018-12-28
Filing date: 2018-12-28
Publication date: 2019-04-26

Abstract

本发明涉及医药技术领域，具体涉及美洲大蠊提取物发酵方法及其应用。美洲大蠊提取物发酵方法及其应用，包括以下步骤：A、取美洲大蠊提取物浸膏，糖分，水，搅拌混合均匀；过滤，滤除不溶性杂质，得到混合溶液；B、取步骤A所得混合液体进行高温灭菌，得到灭菌液体；C、取步骤B所得灭菌液体，然后添加乳酸菌接种，厌氧发酵，得到发酵液；D、将步骤C所得发酵液放入储藏罐中后熟；E、将步骤D后熟结束的发酵液取出，真空冷冻干燥，取出；然后粉碎，即得美洲大蠊提取物发酵产物。本发明使美洲大蠊中的大分子物质减少，而有用的小分子活性物质含量增加，从而使得美洲大蠊提取物发酵产物的昆虫特有异味得以减轻或消除。

Description

美洲大蠊提取物发酵方法及其应用

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及美洲大蠊提取物发酵方法及其应用。

背景技术

美洲大蠊(Periplanetaamericana)是蜚蠊科中体积最大的昆虫，成虫体长29～35毫米，红褐色，翅长于腹部末端。触角很长，前胸背板中间有较大的蝶形褐色斑纹，斑纹的后缘有完整的黄色带纹，原产于南美洲，食性广泛、喜食糖和淀粉、污染食物。

美洲大蠊是传统的中药材，以成虫入药。性寒味咸，有毒，有辛辣味、有散瘀、消积、解毒、利水、消肿等功能。现代研究发现，美洲大蠊表皮含有巩膜质、甲壳质、溴、锌、镍、猛、钾、钙、钛、氯、硫、硅、铝、镁等元素，肌肉水解13种氨基酸，身体贮藏微生素B1、B2、烟酸和抗坏血酸等，淋巴含海藻糖、海藻糖酶、糖蛋白、肌醇、原儿茶酸葡萄甙等，全体含麦角硫因、龙虾肌碱、胡芦巴碱、甘氨酸、甜菜碱、肛碱、三甲胺、腺嘌呤等。

美洲大蠊干燥虫体提取物，含有WHF(多元醇类、表皮生长因子)、粘氨酸、粘糖氨酸及多种氨基酸等活性物质，具有抗炎、消肿、促进细胞增殖和新生肉芽组织增长，加速病损组织修复，加快坏死组织脱落，提高机体免疫功能等作用。

美洲大蠊目前在治疗烧烫伤、口腔溃疡、胃溃疡、痔疮、肛裂、胃炎和消化性胃溃疡、胃溃疡性结肠炎、妇科疾病、尿布疹、过敏性鼻炎、抗肿瘤等方面均有应用，但是，目前的应用多为传统中药应用方式，部分应用是干燥成虫作为药物组方的一部分，部分是将其提取物与其他药物配伍使用。

CN201210446618.1发明提供一种治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物的提取方法，包括步骤：A、粉碎；B、浸泡；C、提取；D、一级浓缩；E、脱脂；F、二级浓缩。采用方法提取，可有效去除美洲大蠊中含有的大量蛋白质，除脂率高；且用浓度90%～95%的乙醇浸泡粗粉，既延长保存时间，又提高了治疗消化道溃疡的特定有效成份得率。因各工艺参数控制合理，可防止提取物中对治疗消化道溃疡的活性物质水解，提高其药物疗效。采用本发明工艺，生产成本低、生产效率高。取上述发明所得美洲大蠊提取物，加入适量药剂辅料，可以制成临床上适用的制剂（片剂、胶囊、合剂、口服液、微丸剂、滴丸剂、喷雾剂、气雾剂、凝胶剂等），用于消化道溃疡（内服或喷涂）的治疗。

目前，采用现有的美洲大蠊提取物制备方法提取的美洲大蠊提取物色泽较深、腥臭味较重，口感很差，直接影响病人的顺应性。在保持美洲大蠊原有疗效的前提下，通过对美洲大蠊一定的处理，从而改善口感，是十分必要的。

发明内容

本发明的目的在于克服上述现有技术之不足，提供一种美洲大蠊提取物发酵方法及其应用，该方法使美洲大蠊中的大分子物质减少，而有用的小分子活性物质如脂肪酸、多肽以及氨基酸含量增加，从而使得美洲大蠊提取物发酵产物的昆虫特有异味得以减轻或消除。

本发明采用以下技术实现上述目的：

美洲大蠊提取物发酵方法及其应用，包括以下步骤：

A、按重量取美洲大蠊提取物浸膏1份，糖分0.l～0.2份，水1～2份，搅拌混合均匀；过滤，滤除不溶性杂质，得到澄清的混合溶液；

B、取步骤A所得混合液体在温度100～12O℃条件下进行高温灭菌，时间10～15分钟，然后冷却至25～45℃，得到灭菌液体；

C、取步骤B所得灭菌液体，然后添加乳酸菌接种，接种比例为0.5%～5%；然后将温度控制在35～45℃，密封厌氧发酵12～24小时，直至pH值达到3.8～4.5时结束发酵，得到发酵液；

D、将步骤C所得发酵液放入储藏罐中，然后转移至0～4℃冷库中后熟12～36小时，使乳酸菌对发酵液中的蛋白、脂肪等高分子物质进一步降解，生成所需的小分子脂肪酸、多肽以及氨基酸等活性物质；

E、将步骤D后熟结束的发酵液取出，放入冷冻干燥盘中，转移至真空冷冻干燥机中，在温度-1O～-5O℃、压力 1.3～13Pa条件下使水分直接升华成气态，使物料脱水，冷冻干燥时间约24～48小时，含水量为5.0%～8.0%时取出；然后粉碎至10～40目，即得美洲大蠊提取物发酵产物。

更优选地，所述步骤A中糖分为蔗糖或者葡萄糖与蔗糖按重量比1:l～2混合。

更优选地，所述步骤C中的乳酸菌选自干酪乳杆菌、嗜热链球菌、鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、副干酪乳杆菌和罗伊式乳杆菌中的一种或几种。

更优选地，所述步骤C中的乳酸菌为干酪乳杆菌、嗜热链球菌和鼠李糖乳杆菌，三种菌种接种比例 1:1.8～2.2:1.8～2.2；或者乳酸菌为嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌，菌种比例为 1:1.0～2.0:1；或者乳酸菌为植物乳杆菌、嗜热链球菌和德氏乳杆菌亚种，菌种比例为1:0.8～1.2:0.8～1.2。

更优选地，所述步骤C中的乳酸菌接种比例为2%～3%，发酵温度控制在40～42℃，发酵时间控制在15～20小时，发酵结束控制点pH值为4.0～4.2。

本发明的有益效果：

1.本发明经过乳酸菌发酵，使得美洲大蠊提取物发酵产物的昆虫特有异味得以减轻或消除，并具有乳酸的香味。口服异味小，口感好，临床效果好，病人的顺应性高。

2. 本发明获得的美洲大蠊提取物发酵产物含有的大分子物质减少，而有用的小分子活性物质如脂肪酸、多肽以及氨基酸含量增加。

3. 本发明保留了美洲大蠊的所有营养成分及活性物质，也保持了益生菌菌种的活力，且含水量低，质量稳定，易于储存、运输、销售、携带，保质期长达3年以上。

4. 本发明采用真空冷冻和粉碎，使美洲大蠊提取物发酵产物因冷冻干燥而疏松多孔，而具有速溶效果，且流动性好，方便包装和运输。

具体实施例

实施例1

美洲大蠊提取物发酵方法及其应用，包括以下步骤：

A、按重量取美洲大蠊提取物浸膏1Kg，糖分0.lKg，水1Kg，搅拌混合均匀；过滤，滤除不溶性杂质，得到澄清的混合溶液；

B、取步骤A所得混合液体在温度100℃条件下进行高温灭菌，时间10分钟，然后冷却至25℃，得到灭菌液体；

C、取步骤B所得灭菌液体，然后添加乳酸菌接种，接种比例为0.5%；然后将温度控制在35～45℃，密封厌氧发酵12～24小时，直至pH值达到3.8时结束发酵，得到发酵液；

D、将步骤C所得发酵液放入储藏罐中，然后转移至0～4℃冷库中后熟12小时，使乳酸菌对发酵液中的蛋白、脂肪等高分子物质进一步降解，生成所需的小分子脂肪酸、多肽以及氨基酸等活性物质；

E、将步骤D后熟结束的发酵液取出，放入冷冻干燥盘中，转移至真空冷冻干燥机中，在温度-1O℃、压力 1.3～13Pa条件下使水分直接升华成气态，使物料脱水，冷冻干燥时间约24～48小时，取出；然后粉碎至10目，即得美洲大蠊提取物发酵产物0.89Kg，含水量为5.1%。

所述步骤A中糖分为蔗糖。

所述步骤C中的乳酸菌为干酪乳杆菌、嗜热链球菌和鼠李糖乳杆菌，三种菌种接种比例 1:1.8:1.8。

实施例2

美洲大蠊提取物发酵方法及其应用，包括以下步骤：

B、取步骤A所得混合液体在温度100℃条件下进行高温灭菌，时间11分钟，然后冷却至25℃，得到灭菌液体；

C、取步骤B所得灭菌液体，然后添加乳酸菌接种，接种比例为1%；然后将温度控制在35～45℃，密封厌氧发酵12～24小时，直至pH值达到3.9时结束发酵，得到发酵液；

E、将步骤D后熟结束的发酵液取出，放入冷冻干燥盘中，转移至真空冷冻干燥机中，在温度-2O℃、压力 1.3～13Pa条件下使水分直接升华成气态，使物料脱水，冷冻干燥时间约24～48小时，取出；然后粉碎至10目，即得美洲大蠊提取物发酵产物0.92Kg，含水量为5.3%。

所述步骤A中糖分为蔗糖。

所述步骤C中的乳酸菌为干酪乳杆菌、嗜热链球菌和鼠李糖乳杆菌，三种菌种接种比例 1:2.2:2.2。

实施例3

美洲大蠊提取物发酵方法及其应用，包括以下步骤：

A、按重量取美洲大蠊提取物浸膏1Kg，糖分0.l5Kg，水1.5Kg，搅拌混合均匀；过滤，滤除不溶性杂质，得到澄清的混合溶液；

B、取步骤A所得混合液体在温度11O℃条件下进行高温灭菌，时间12分钟，然后冷却至30℃，得到灭菌液体；

C、取步骤B所得灭菌液体，然后添加乳酸菌接种，接种比例为2%；然后将温度控制在40～42℃，密封厌氧发酵15～20小时，直至pH值达到4.0时结束发酵，得到发酵液；

D、将步骤C所得发酵液放入储藏罐中，然后转移至0～4℃冷库中后熟24小时，使乳酸菌对发酵液中的蛋白、脂肪等高分子物质进一步降解，生成所需的小分子脂肪酸、多肽以及氨基酸等活性物质；

E、将步骤D后熟结束的发酵液取出，放入冷冻干燥盘中，转移至真空冷冻干燥机中，在温度-30℃、压力 1.3～13Pa条件下使水分直接升华成气态，使物料脱水，冷冻干燥时间约24～48小时，取出；然后粉碎至24目，即得美洲大蠊提取物发酵产物0.95Kg，含水量为5.9%。

所述步骤A中糖分为葡萄糖与蔗糖按重量比1:l混合。

所述步骤C中的乳酸菌为嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌，菌种比例为1:1:1。

实施例4

美洲大蠊提取物发酵方法及其应用，包括以下步骤：

B、取步骤A所得混合液体在温度11O℃条件下进行高温灭菌，时间13分钟，然后冷却至35℃，得到灭菌液体；

C、取步骤B所得灭菌液体，然后添加乳酸菌接种，接种比例为3%；然后将温度控制在40～42℃，密封厌氧发酵15～20小时，直至pH值达到4.2时结束发酵，得到发酵液；

E、将步骤D后熟结束的发酵液取出，放入冷冻干燥盘中，转移至真空冷冻干燥机中，在温度-40℃、压力 1.3～13Pa条件下使水分直接升华成气态，使物料脱水，冷冻干燥时间约24～48小时，取出；然后粉碎至24目，即得美洲大蠊提取物发酵产物0.97Kg，含水量为7.2%。

所述步骤A中糖分为葡萄糖与蔗糖按重量比1:l混合。

所述步骤C中的乳酸菌为嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌，菌种比例为1: 2.0:1。

实施例5

美洲大蠊提取物发酵方法及其应用，包括以下步骤：

A、按重量取美洲大蠊提取物浸膏1Kg，糖分0.2Kg，水2Kg，搅拌混合均匀；过滤，滤除不溶性杂质，得到澄清的混合溶液；

B、取步骤A所得混合液体在温度12O℃条件下进行高温灭菌，时间14分钟，然后冷却至40℃，得到灭菌液体；

C、取步骤B所得灭菌液体，然后添加乳酸菌接种，接种比例为4%；然后将温度控制在35～45℃，密封厌氧发酵12～24小时，直至pH值达到4.4时结束发酵，得到发酵液；

D、将步骤C所得发酵液放入储藏罐中，然后转移至0～4℃冷库中后熟36小时，使乳酸菌对发酵液中的蛋白、脂肪等高分子物质进一步降解，生成所需的小分子脂肪酸、多肽以及氨基酸等活性物质；

E、将步骤D后熟结束的发酵液取出，放入冷冻干燥盘中，转移至真空冷冻干燥机中，在温度-5O℃、压力 1.3～13Pa条件下使水分直接升华成气态，使物料脱水，冷冻干燥时间约24～48小时，取出；然后粉碎至40目，即得美洲大蠊提取物发酵产物1.01Kg，含水量为7.9%。

所述步骤A中糖分为葡萄糖与蔗糖按重量比1: 2混合。

所述步骤C中的乳酸菌为植物乳杆菌、嗜热链球菌和德氏乳杆菌亚种，菌种比例为1:0.8:0.8。

实施例6

美洲大蠊提取物发酵方法及其应用，包括以下步骤：

B、取步骤A所得混合液体在温度12O℃条件下进行高温灭菌，时间15分钟，然后冷却至45℃，得到灭菌液体；

C、取步骤B所得灭菌液体，然后添加乳酸菌接种，接种比例为5%；然后将温度控制在35～45℃，密封厌氧发酵12～24小时，直至pH值达到4.5时结束发酵，得到发酵液；

E、将步骤D后熟结束的发酵液取出，放入冷冻干燥盘中，转移至真空冷冻干燥机中，在温度-5O℃、压力 1.3～13Pa条件下使水分直接升华成气态，使物料脱水，冷冻干燥时间约24～48小时，取出；然后粉碎至40目，即得美洲大蠊提取物发酵产物1.02Kg，含水量为7.8%。

所述步骤A中糖分为葡萄糖与蔗糖按重量比1: 2混合。

所述步骤C中的植物乳杆菌、嗜热链球菌和德氏乳杆菌亚种，菌种比例为1:1.2:1.2。

实施例7

美洲大蠊提取物发酵方法及其应用，包括以下步骤：

E、将步骤D后熟结束的发酵液取出，放入冷冻干燥盘中，转移至真空冷冻干燥机中，在温度-3O℃、压力 1.3～13Pa条件下使水分直接升华成气态，使物料脱水，冷冻干燥时间约24～48小时，取出；然后粉碎至24目，即得美洲大蠊提取物发酵产物0.94Kg，含水量为6.4%。

所述步骤A中糖分为葡萄糖与蔗糖按重量比1:l混合。

所述步骤C中的乳酸菌为副干酪乳杆菌。

实施例8

美洲大蠊提取物发酵方法及其应用，包括以下步骤：

E、将步骤D后熟结束的发酵液取出，放入冷冻干燥盘中，转移至真空冷冻干燥机中，在温度-4O℃、压力 1.3～13Pa条件下使水分直接升华成气态，使物料脱水，冷冻干燥时间约24～48小时，取出；然后粉碎至24目，即得美洲大蠊提取物发酵产物0.93Kg，含水量为7.0%。

所述步骤A中糖分为葡萄糖与蔗糖按重量比1:l混合。

所述步骤C中的乳酸菌为罗伊式乳杆菌。

实施例9

美洲大蠊提取物发酵产物对胃溃疡或胃与十二指肠复合性溃疡治疗作用

病例资料及分组：79例，经胃纤维内镜确诊为胃溃疡或胃与十二指肠复合性溃疡；均无并发症；分为治疗组45例和对照组34例。治疗组男28例，女17例；年龄15～62岁；病程6个月～17年；胃溃疡38例（84.4%），复合性溃疡7例（15.6%）。对照组男20例，女14例，年龄16～60岁；病程6个月～15年；胃溃疡26例（76.5%），复合性溃疡8例（23.5%）。

方法：对照组采用三联疗法（1999年海南全国幽门螺杆菌科研协作会议推荐的三联疗法方案）：奥美拉唑20mg+阿莫西林1g+替硝唑0.5g，每日2次，早、晚饭前服用。治疗组在对照组治疗基础上加实施例4制得的美洲大蠊提取物发酵产物50mg开水冲服，每日3次，早晚饭前及睡前各1次，与前三联药物间隔至少40分钟服用。两组病例用药均为2周，服药期间忌烟、酒及酸辣刺激性食物。治疗结束后4周及1年进行复查。

疗效判断标准：（1）显效：自觉症状及体征消失，溃疡面愈合；（2）有效：自觉症状和体征明显减轻，溃疡面缩小50%以上；（3）无效：自觉症状及体征未见减轻，溃疡面未见缩小。显效率+有效率=总有效率。

试验数据(见表1，其中n代表人数，百分比数值采取四舍五入保留小数点后两位)

表1：两组疗效比较

结果：经过积极治疗后，治疗组患者的显效率高于对照组。

实施例10

美洲大蠊提取物发酵产物对慢性萎缩性胃炎治疗作用

病例资料及分组：84例，经电子胃镜及病理确诊为慢性萎缩性胃炎，并排除合并有消化性溃疡及心、肝、肾、造血系统严重疾病及妊娠、恶性肿瘤者。其中男50例，女34例；年龄37～70岁，平均年龄（52.1±11.5）岁；病程4～20年，平均病程（10.4±8.2）年；入选的患者均自愿参加本次研究，且与患者签订知情同意书。随机分为治疗组和对照组，每组各42 例，两组患者的年龄、性别及病程均无明显差异，具有可比性（P>0.05）。

方法：治疗组用实施例4制得的美洲大蠊提取物发酵产物50mg开水冲服，每日3次，早晚饭前及睡前各1次，疗程为4周，连续用药2个疗程。对照组服用胃复春片，每次4片，每日3次，30天为1个疗程，休息1周，继续下1个疗程，共治疗6个疗程。两组患者治疗结束后2周左右复查胃镜及病理。

疗效判断标准：（1）显效：症状全部消失，胃镜显示胃黏膜红润，炎症消失，病变范围明显缩小，病理检查证实腺体萎缩、肠上皮化生、非典型增生消失或减轻2个级度以上（含2个级度）。（2）有效：症状明显改善，胃镜显示胃黏膜红白相间，以红相为主，急性炎症消失，病理检查证实腺体萎缩、肠上皮化生、非典型增生消失或减轻1个级度以上（含 1个级度）。（3）无效：症状不减轻或加重，胃镜显示胃黏膜急性炎症无好转或恶化。显效率+有效率=总有效率。

表1：两组疗效比较

结果：经过积极治疗后，治疗组患者的显效率和总有效率均明显高于对照组。

实施例11

以下是本发明预防和改善老年痴呆症的药物对记忆减退、判断能力下降、情感淡漠、反应迟钝等症状的改善作用：

病例资料及分组：86例，经医院确诊为轻度老年痴呆；分为治疗组47例和对照组39例。治疗组男28例，女19例；年龄50~90岁；病程6个月~5年；记忆减退21例（44.7%），判断能力下降14例（29.8%），情感淡漠、反应迟钝12例（25.5%）。对照组男23例，女16例；年龄50~90岁；病程6个月~3年；记忆减退16例（41%），判断能力下降12例（30.8%），情感淡漠、反应迟钝11例（28.2%）。

方法：对照组口服阿瑞斯（盐酸多奈哌齐片），治疗用量5mg/次(一日1次)，每晚睡前口服，服用一个月。治疗组采用实施例4制得的美洲大蠊提取物发酵产物50mg开水冲服，每日3次，早晚饭前及睡前各1次；服用一个月，服药期间忌烟、酒及酸辣刺激性食物。治疗结束后2周内到医院进行复查。

疗效判断标准：（1）显效：以上症状全部消失，记忆力明显增强，能够对事件进行分析、思考、判断，对外界刺激有相应的情感反应，开始关注周围发生时事，反应敏捷；（2）有效：以上症状明显改善，记忆力、判断能力、情感和行动反应都有了明显改善；（3）无效：以上症状不减轻或加重，记忆严重受损，丧失判断能力，情感由淡漠变为急躁不安，常走动不停，可见尿失禁。显效率+有效率=总有效率。

试验数据(见表1，其中n代表人数，百分比数值采取四舍五入保留小数点后一位)

表1：两组疗效比较

实施例12

以下是本发明预防和改善老年痴呆症的药物对记忆严重受损、认知障碍、语言障碍、思维障碍、定向力障碍、生活自理能力障碍等症状的改善作用：

病例资料及分组：92例，经医院确诊为中重老年痴呆；其中男53例，女39例；年龄50~90岁，平均年龄（70±15）岁；病程2~12年，平均病程（7±4）年；入选的患者均自愿参加本次研究，且与患者签订知情同意书。随机分为治疗组和对照组，每组各46 例，两组患者的年龄、性别及病程均无明显差异，具有可比性（P>0.05）。

方法：对照组口服盐酸美金刚片，治疗第一周的剂量为每日5mg（半片，晨服），第二周每天10mg（每次半片，每日两次），第三周每天15mg（早上服一片，下午服半片），第4周开始以后维持剂量每天20mg（每次一片，每日两次），治疗两个月。治疗组采用实施例4制得的美洲大蠊提取物发酵产物50mg开水冲服，每日3次，早晚饭前及睡前各1次，疗程为一个月，连续用药2个疗程，服药期间忌烟、酒及酸辣刺激性食物。两组患者治疗结束后2周左右到医院进行复查。

疗效判断标准：（1）显效：以上症状全部消失，记忆力明显增强，认知、语言能力恢复，思维清晰，视空间能力明显增强，对时间、地点和人物能做出定向，恢复生活自理能力；（2）有效：以上症状明显改善，记忆力、认知、语言能力有了明显改善，思维障碍有所改善，恢复简单结构的视空间能力，时间、地点和人物定向障碍改善，生活自理能力有所改善；（3）无效：以上症状不减轻或加重，严重记忆力丧失，完全丧失自理能力。显效率+有效率=总有效率。

试验数据(见表2，其中n代表人数，百分比数值采取四舍五入保留小数点后一位)

表2：两组疗效比较

实施例13

以下是本发明美洲大蠊提取物发酵产物对继发性肺结核的治疗作用：

病例资料及分组：76例，经胸部 X 线检查确诊为继发性肺结核；分为治疗组44例和对照组32例。治疗组男23例，女21例；年龄15~60岁；病程6个月~12年；浸润型肺结核25例（56.8%），慢性纤维空洞型肺结核19例（43.2%）。对照组男19例，女13例；年龄16~62岁；病程6个月~11年；浸润型肺结核18例（56.2%），慢性纤维空洞型肺结核14例（43.8%）。

方法：对照组口服吡嗪酰胺和乙胺丁醇，吡嗪酰胺按每6小时按体重5～8.75mg/kg服用；乙胺丁醇与吡嗪酰胺合用，其用量：按体重15mg/kg，每日一次顿服，连续服用25天，之后按体重25mg/kg每日一次顿服，连续服用35天，继以按体重15mg/kg，每日一次顿服。治疗组在对照组的治疗基础上加实施例4制得的美洲大蠊提取物发酵产物50mg开水冲服，每日3次，早晚饭前及睡前各1次，与吡嗪酰胺和乙胺丁醇间隔至少40分钟服用。两组病例用药均为5个月，治疗结束后一周内到医院进行复查。

疗效判断标准：（1）显效：自觉症状及体征消失，空洞消失，病灶稳定，痰菌转为阴性；（2）有效：自觉症状和体征明显减轻，病灶吸收好转，空洞缩小，痰菌持续转为阴性；（3）无效：自觉症状及体征未见减轻或加重，病灶增多增大，出现空洞或空洞扩大，痰菌检查转阳性，发热等临床症状加重。显效率+有效率=总有效率。

表1：两组疗效比较

实施例14

以下是本发明美洲大蠊提取物发酵产物对结核性胸膜炎的治疗作用：

病例资料及分组：82例，经胸部 X 线检查确诊为结核性胸膜炎；其中男48例，女34例；年龄18~60岁，平均年龄（39±20）岁；病程1~13年，平均病程（7±5）年；入选的患者均自愿参加本次研究，且与患者签订知情同意书。随机分为治疗组和对照组，每组各41 例，两组患者的年龄、性别及病程均无明显差异，具有可比性（P>0.05）。

方法：对照组采用链霉素（SM）、异烟肼（INH）和利福平（RFP）联合治疗。链霉素（SM）肌内注射，异烟肼（INH）、利福平顿服，上述口服药物均连续服用9个月。治疗组采用实施例4制得的美洲大蠊提取物发酵产物50mg开水冲服，每日3次，早晚饭前及睡前各1次；连续服用6个月，服药期间忌烟、酒及酸辣刺激性食物。两组患者治疗结束后一周内到医院进行复查。

疗效判断标准：（1）显效：自觉症状及体征消失，病侧胸腔积液消失，肋膈角变清晰锐利，胸膜恢复正常厚度；（2）有效：自觉症状和体征明显减轻，病侧胸腔积液减少，肋膈角明显变锐利，胸膜厚度变小；（3）无效：自觉症状及体征未见减轻或加重，病侧胸腔积液增多，肺野大部呈均匀浓密阴影，膈影被遮盖，纵隔向健侧移位。显效率+有效率=总有效率。

表2：两组疗效比较

Claims

1.美洲大蠊提取物发酵方法及其应用，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的美洲大蠊提取物发酵方法及其应用，其特征在于，所述步骤A中糖分为蔗糖或者葡萄糖与蔗糖按重量比1:l～2混合。

3.根据权利要求1或2所述的美洲大蠊提取物发酵方法及其应用，其特征在于，所述步骤C中的乳酸菌选自干酪乳杆菌、嗜热链球菌、鼠李糖乳杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、副干酪乳杆菌和罗伊式乳杆菌中的一种或几种。

4.根据权利要求1或2所述的美洲大蠊提取物发酵方法及其应用，其特征在于，所述步骤C中的乳酸菌为干酪乳杆菌、嗜热链球菌和鼠李糖乳杆菌，三种菌种接种比例 1:1.8～2.2:1.8～2.2；或者乳酸菌为嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌，菌种比例为 1:1.0～2.0:1；或者乳酸菌为植物乳杆菌、嗜热链球菌和德氏乳杆菌亚种，菌种比例为1:0.8～1.2:0.8～1.2。

5.根据权利要求3所述的美洲大蠊提取物发酵方法及其应用，其特征在于，所述步骤C中的乳酸菌为干酪乳杆菌、嗜热链球菌和鼠李糖乳杆菌，三种菌种接种比例 1:1.8～2.2:1.8～2.2；或者乳酸菌为嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌，菌种比例为 1:1.0～2.0:1；或者乳酸菌为植物乳杆菌、嗜热链球菌和德氏乳杆菌亚种，菌种比例为1:0.8～1.2:0.8～1.2。

6.根据权利要求1或2所述的美洲大蠊提取物发酵方法及其应用，其特征在于，所述步骤C中的乳酸菌接种比例为2%～3%，发酵温度控制在40～42℃，发酵时间控制在15～20小时，发酵结束控制点pH值为4.0～4.2。

7.根据权利要求3所述的美洲大蠊提取物发酵方法及其应用，其特征在于，所述步骤C中的乳酸菌接种比例为2%～3%，发酵温度控制在40～42℃，发酵时间控制在15～20小时，发酵结束控制点pH值为4.0～4.2。