CN109666614A

CN109666614A - 一种鼠李糖乳杆菌及其在制备预防过敏性哮喘的保健食品和药品中的应用

Info

Publication number: CN109666614A
Application number: CN201910114820.6A
Authority: CN
Inventors: 索化夷
Original assignee: Southwest University
Current assignee: Southwest University
Priority date: 2019-02-14
Filing date: 2019-02-14
Publication date: 2019-04-23
Anticipated expiration: 2039-02-14
Also published as: CN109666614B

Abstract

本发明公开了保藏编号为CCTCC NO：M 2018592的鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601(Lactobacillus rhamnosus 2016SWU.05.0601)以及该鼠李糖乳杆菌在制备预防过敏性哮喘的保健食品和药品中的应用，对开发功能保健制品、丰富发酵产品种类、建立乳酸菌菌种资源库具有重要的现实意义，同时也给过敏性哮喘的预防带来了新的希望。

Description

一种鼠李糖乳杆菌及其在制备预防过敏性哮喘的保健食品和药品中的应用

技术领域

本发明涉及一种鼠李糖乳杆菌，还涉及该鼠李糖乳杆菌在制备保健食品和药品中的应用。

背景技术

牦牛酸乳是青藏高原地区牧民沿用古老而传统的方法制作而成的Ⅳ型发酵乳。在自然发酵过程中，因受到海拔、奶源、制作工艺等多种因素影响，形成了复杂多样的微生物菌落区系，是分离鉴定乳酸菌的丰富来源。

乳酸菌是一类革兰氏染色阳性、过氧化氢酶阴性的杆菌或球菌，不形成芽孢，不运动，能利用葡萄糖产乳酸，在无氧或少氧的环境中生长良好的兼性厌氧菌。乳酸菌最开始在食品中的应用是作为保藏技术，如泡菜、酿酒和酸奶等传统食品，利用乳酸菌发酵糖类产生乳酸使得周围环境偏酸，进而抑制一些腐败微生物的生长。随着人们对肠道菌群研究的不断深入，发现绝大部分的乳酸菌在肠道中扮演着重要角色，发挥了许多益生作用。研究表明，乳酸菌具有维持肠道菌群的微生态平衡、增强机体免疫力、预防肿瘤发生、降低胆固醇、延缓机体衰老和预防龋齿等作用。目前我国对于乳酸菌的研究仍处于探索阶段，许多商品依赖于国外的菌种来生产，缺乏具有自主知识产权的益生乳酸菌，因此充分利用中国特色的乳酸菌资源，筛选优良菌种，研究其各种潜在的益生特性，对改善我国乳酸菌制品的品质、提高我国发酵食品行业在国际中的竞争力、推动功能保健食品的发展具有重要意义。

近年来，过敏性皮炎、过敏性鼻炎、过敏性哮喘等过敏性疾病的发病率逐步攀升，已成为全球范围内常见的慢性病之一。据世界卫生组织统计，全球有2.35亿人经受着过敏性疾病的困扰，造成大量的医疗保健支出。而在过敏性疾病发病率提高的同时，伴随的是传染类疾病发病率的逐年递减。基于这一现象，有学者提出了“卫生学假说”，即随着城市工业化的进程、疫苗的研制和抗生素的广泛使用，人类的生活方式和饮食习惯发生了翻天覆地的变化，微生物暴露强度和多样性减少是驱动异常免疫成熟和增加过敏疾病发生率的一个主要因素。过敏性哮喘是常见的过敏性疾病之一，即患者对环境(过敏源)做出自身免疫反应导致IgE产生，通常伴随咳嗽、胸闷气短、呼吸困难等症状，多发生在婴幼儿时期且伴随终身。目前临床多采用药物治疗来缓解症状，但不能彻底治愈，且药物治疗存在着价格昂贵、副作用大等缺点。因此，迫切需要寻找能够有效预防和治疗过敏性哮喘且成本经济的药物替代品。近年随着高通量测序技术的出现和发展，菌群干预技术作为一种新手段，成为诊断、预防和治疗过敏性哮喘等免疫类疾病的有效靶点。

作为菌群干预的手段之一，乳酸菌对过敏性哮喘预防作用的靶向应用在食品科学及医疗保健方面具有广泛的研究和应用前景。因此筛选具有优良益生特性、可预防过敏性哮喘的乳酸菌菌株，对于开发功能保健制品、丰富发酵产品种类、建立乳酸菌菌种资源库具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的在于从牦牛酸乳中筛选消化道抗性强、可预防过敏性哮喘的乳酸菌菌株，以开发功能保健制品、丰富发酵产品种类、建立乳酸菌菌种资源库。

经研究，本发明提供如下技术方案：

1.鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601(Lactobacillus rhamnosus2016SWU.05.0601)，保藏编号为CCTCC NO：M 2018592。

2.鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601在制备预防过敏性哮喘的保健食品和药品中的应用。

本发明从青海地区11份牦牛酸乳中分离纯化获得48株乳酸菌，经16S rDNA序列分析鉴定为37株德氏乳杆菌保加利亚亚种、1株植物乳杆菌、2株瑞士乳杆菌、1株鼠李糖乳杆菌、2株短乳杆菌、1株柠檬明串珠菌、2株食窦魏斯氏菌、1株融合魏斯氏菌和1株耐久肠球菌。根据卫生部2010年印发的《可用于食品的菌种名单》，对经过初筛后得到的11株生长旺盛的乳酸菌进行人工胃液和胆盐耐受性评价，筛选出6株耐酸菌株及1株耐胆盐菌株，经综合比较，鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601为最佳抗性菌株，其在pH3.0人工胃液中存活率为119.53％，在0.30％胆盐中生长率为41.64％。

本发明的鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601于2018年9月4日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC，地址：武汉市武汉大学)，保藏编号为CCTCC NO：M 2018592。

本发明考察了鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601对过敏性哮喘的预防作用。结果发现，经鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601处理可以使过敏性哮喘小鼠的肺部组织炎症浸润现象明显改善，肺泡间隔完整，血清中总IgE含量和OVA特异性IgE含量显著下降，可以上调T-bet、Foxp3的mRNA表达，下调GATA-3、RORγt的mRNA表达，同时促进Th1细胞和Treg细胞分泌IFN-γ、IL-2、IL-10和TGF-β，并抑制Th2细胞和Th17细胞产生IL-4、IL-5、IL-17和IL-23，从而调控Th1/Th2、Treg/Th17平衡，降低OVA特异性IgE的表达，达到预防过敏性哮喘的作用。因此，鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601可用于制备预防过敏性哮喘的保健食品和药品。

本发明的有益效果在于：本发明利用中国特色的乳酸菌资源，从传统发酵牦牛酸乳中筛选出了一株消化道抗性强、可预防过敏性哮喘的乳酸菌菌株——鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601，对开发功能保健制品、丰富发酵产品种类、建立乳酸菌菌种资源库具有重要的现实意义，同时也给过敏性哮喘的预防带来了新的希望。

附图说明

图1为分离菌株菌落形态(a)及革兰氏染结果(b)。

图2为鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601的16S rDNA序列PCR产物琼脂糖凝胶电泳图。图中M为DNA分子量标准，0为阴性对照，1为鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601。

图3为鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601的API 50CH反应结果。

图4为小鼠肺部组织切片观察。

图5为鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601对小鼠血清总IgE、OVA-IgE含量的影响

图6为鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601对小鼠血清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、TGF-β、IL-17、IL-23含量的影响。

图7为鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601对小鼠肺部组织中IFN-γ、T-bet、IL-4、GATA-3、IL-10、Foxp3、IL-17和RORγt mRNA表达的影响。

上述图5至图7中，标有相同小写英文字母(a、b、c、d)的组之间不存在显著差异(p＞0.05)；标有不同小写英文字母(a、b、c、d)的组之间存在显著差异(p<0.05)。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明的优选实施例进行详细的描述。

一、鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601的分离与鉴定

1实验材料

11份传统发酵牦牛酸乳采集自青海省海南藏族自治州不同牧民家中。

2实验方法

2.1乳酸菌的分离纯化

分别将11份牦牛酸乳按1％接种量接种到脱脂乳培养基中于37℃培养，待其凝乳后进行10倍梯度稀释，依次稀释至10^-7。选择4个适宜稀释度分别取100μL涂布在MRS固体平板上，37℃培养48h后，选取形态各异的单菌落采用平板划线法分离菌株。重复上述步骤直至得到纯化菌株，通过革兰氏染色进行形态学观察。

2.2PCR扩增16S rDNA序列

采用细菌基因组DNA提取试剂盒提取纯化菌株的DNA。采用25μL反应体系进行PCR扩增，反应结束后利用琼脂糖凝胶电泳进行检测。合格样品送华大基因科技有限公司测序，测序结果通过NCBI中的BLAST程序进行同源性比对分析。

2.3菌株在pH 3.00人工胃液中存活率的测定

分离菌株在37℃培养18h，于3 000r/min、15min的条件下离心收集菌体，用无菌生理盐水洗涤菌体后重悬为菌悬液。将所得菌悬液与人工胃液(0.2％NaCl、0.35％胃蛋白酶1︰10 000，用1mol/L的HCl调节pH至3.00)按体积比1︰9混合，37℃培养3h后，采用平板涂布法分别测定0h、3h的活菌数，按式(1)计算菌株在pH 3.00人工胃液中的存活率。

式中：

c——存活率，％；

m₁——3h活菌数，CFU/mL；

m₂——0h活菌数，CFU/mL。

2.4菌株在0.30％胆盐中生长率的测定

分离菌株在37℃培养18h，以2％的接种量分别接种于含0.00％、0.30％牛胆盐的MRS-THIO培养基中，37℃培养4h后测定其生长率，以不接种菌液的液体培养基作为空白对照，按照式(2)计算菌株在胆盐中的生长率。

式中：

c——生长率，％；

A₀——空白对照OD_600nm值；

A₁——含0.00％胆盐培养基OD_600nm值；

A₂——含0.30％胆盐培养基OD_600nm值。

2.5API试剂盒鉴定

分离菌株在37℃培养18h，于3 000r/min、15min的条件下离心收集菌体，用无菌生理盐水洗涤菌体后重悬为菌悬液。参考API试剂盒说明书进行操作。

2.6统计分析

每个试验做3次平行试验，试验数据以“平均值±标准方差”表示，用SPSS20进行方差分析，以P＜0.05表示有统计学意义。

3结果与分析

3.1分离菌株的菌落形态和细胞形态

采集的11份传统发酵牦牛酸乳共分离出48株乳酸菌。菌株纯化后在MRS培养基中形成单菌落，菌落形态几乎一致，大多数呈圆形，白色，表面光滑湿润。革兰氏染色后在显微镜下观察到紫色细胞形态，判定为革兰氏阳性菌(G⁺)。其中，编号为2016SWU.05.0601的菌株的菌落形态和革兰氏染色结果见图1。

3.2菌株16S rDNA序列PCR扩增结果

48株乳酸菌的16S rDNA基因扩增产物在1000bp与2500bp之间均出现一条清晰亮带，阴性对照无条带，符合PCR扩增预期结果，说明PCR扩增产物可用于之后测序工作。其中，编号为2016SWU.05.0601的菌株的PCR扩增结果见图2。

3.3菌株16S rDNA序列分析

16S rDNA同源性分析结果显示，48株乳酸菌在种属关系上具有一定的生物多样性，包括乳杆菌属、明串珠菌属、魏斯氏菌属和肠球菌属，具体涉及植物乳杆菌1株、鼠李糖乳杆菌1株、瑞士乳杆菌2株、德氏乳杆菌保加利亚亚种37株、短乳杆菌2株、柠檬明串珠菌1株、食窦魏斯氏菌2株、融合魏斯氏菌1株、耐久肠球菌1株。其中，编号为2016SWU.05.0601的菌株的16S rDNA基因扩增产物的序列如SEQ ID No.1所示，与Gene Bank数据库中已知鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)的同源性达100％。

3.4菌株对人工胃液耐受性评价

消化道是机体抵御外来物质侵扰的天然屏障，胃是人体重要消化器官，胃蛋白酶和胃液中强酸环境成为大多数微生物进入肠道的阻碍。一般情况下，进食后人胃部pH通常在3.00左右，消化时间为1～3h。故以人工胃液pH 3.00，作用时间3h为筛选条件，根据卫办监督发〔2010〕65号文件《可用于食品的菌种名单》，对初筛后获得的11株生长旺盛的乳酸菌进行人工胃液耐受性评价。

结果见表1，11株乳酸菌中有8株乳酸菌对人工胃液有一定的耐受性，但差异明显，其中6株乳酸菌存活率＞50.00％，尤其是编号为2016SWU.05.0601的菌株和编号为2016SWU.05.1011的菌株，存活率＞100.00％，表明这2株乳酸菌在pH 3.00人工胃液环境中继续生长繁殖，使得其活菌数增加，出现存活率＞100％的情况。

表1乳酸菌对人工胃液耐受力评价

注：ND表示未检测到。

3.5菌株对胆盐耐受性评价

菌株对小肠内胆盐耐受性是筛选乳酸菌的基本标准之一。人体中胆盐的质量浓度大约为0.03％～0.30％。选择在人工胃液中存活率达到50.00％以上的菌株，测定其在0.10％、0.20％、0.30％3种不同胆盐浓度的生长率来评价菌株对胆盐的耐受力。

结果见表2，在人工胃液中存活率达到50.00％以上的6株乳酸菌在胆盐中的生长率随着胆盐浓度增加而降低，这可能与高胆盐浓度在细胞外产生高渗透压对菌体细胞造成影响导致菌株耐受力下降有关；6株菌中，编号为2016SWU.05.0601的菌株对胆盐的耐受能力最强，在0.30％胆盐中的生长率达到41.64±0.06％，而另外5株乳酸菌对胆盐的耐受性均较差，其中编号为2016SWU.05.1011的菌株虽然在人工胃液中存活率达到102.30％，但在0.30％胆盐中的生长率仅为3.38±0.00％。同时有研究表明，鼠李糖乳杆菌在发酵过程中只产生L-乳酸，产物的单一化使得其产品安全性大大提高，婴幼儿发生不良反应几率下降。因此进一步研究鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601的益生功能及发酵性能具有广泛的应用前景。

表2乳酸菌在不同浓度胆盐中的生长率

3.6最佳抗性菌株的生化特性鉴定结果

综合比较人工胃液和胆盐耐受性评价结果，编号为2016SWU.05.0601的菌株为最佳抗性菌株。乳酸杆菌种水平的表型鉴定主要依据碳水化合物发酵试验。API50CH试剂盒是通过菌株对49种不同碳水化合物的利用情况来进行鉴定。

图3示出了编号为2016SWU.05.0601的菌株的API 50CH反应结果。表3示出了编号为2016SWU.05.0601的菌株对49种碳水化合物发酵试验结果。由图3和表3可知，在供试的49种碳源中，编号为2016SWU.05.0601的菌株可以利用其中25种碳水化合物。经API lab plus系统最终鉴定，编号为2016SWU.05.0601的菌株为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)，其ID值为99.60％，T值为0.76，达到鉴定要求(ID值≥99.0％且T值≥0.5)。

表3 2016SWU.05.0601对49种碳水化合物发酵试验结果

注：“+”代表反应阳性；“－”代表反应阴性。

综合上述实验结果，编号为2016SWU.05.0601的菌株确认为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)，将其命名为鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601(Lactobacillusrhamnosus 2016SWU.05.0601)，于2018年9月4日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC No：M 2018592。

二、鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601对小鼠过敏性哮喘的预防作用

1实验材料

实验菌株为鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601(Lactobacillus rhamnosus2016SWU.05.0601)，保藏编号为CCTCC No：M 2018592。

实验动物为6周龄雄性昆明小鼠，购自重庆中药研究院动物实验中心。饲养于室温25±2℃、相对湿度50±5％、12h光照/12h黑暗的标准化实验室中，适应性喂养一周后开始实验。

2实验方法

2.1实验动物分组及处理

将50只昆明小鼠随机分成正常组、模型组、高浓度组、低浓度组、灭活组5组，每组10只，实验周期为29天。动物实验造模方法为：第1、8、15、22天对除正常组以外的各组小鼠通过腹腔注射1mg/kg·BW卵清蛋白(OVA)致敏液进行基础致敏，正常组小鼠腹腔注射生理盐水；第22-28天对除正常组以外的各组小鼠以1％OVA溶液进行雾化激发致敏，正常组小鼠以生理盐水进行雾化实验。整个实验过程中，对正常组和模型组小鼠灌胃生理盐水，高浓度组小鼠灌胃10¹⁰CFU/kg·BW鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601菌液，低浓度组小鼠灌胃10⁹CFU/kg·BW鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601菌液，灭活组小鼠灌胃10¹⁰CFU/kg·BW 100℃水浴30min灭活的鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601菌液。

2.2肺部组织切片观察

取黄豆大小的肺部组织，立即放于10％福尔马林溶液中固定48h，经脱水、透明、浸蜡、包埋、切片后进行HE染色，最后在光学显微镜下观察组织形态变化。

2.3血清中细胞因子的测定

按照ELISA试剂盒说明书对小鼠血清中各细胞因子含量进行测定。

2.4qPCR测定肺部组织中mRNA的表达

按照Trizol(Invitrogen，美国加利福尼亚州卡尔斯巴德)说明书提取肺部总RNA，用超微量分光光度计测定总RNA的纯度和浓度，将每个样本的RNA浓度调整到同一水平(1μg/μL)；然后取1μg/μL的RNA样品1μL，加入1μL(oligo)primer dT和10μL无菌超纯水，混合物于65℃反应5min，反应完成后，在反应体系中加入1μL Ribolock RNase Inhibitor、2μL100mM dNTP mix、4μL 5×Reaction buffer和1μL Revert Aid M-mu/v RT，混合均匀后，在42℃、60min和70℃、5min条件下合成cDNA；接着以表4所述引物序列对目标基因进行反转录和扩增，反应条件为：95℃变性15min，60℃退火1h，95℃延伸15min，总共40个循环；最后以DAPDH作为持家基因，通过2^-ΔΔCT计算目的基因的相对表达量。

表4实验中用到的引物序列

3实验结果与分析

3.1鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601对过敏性哮喘小鼠肺部组织形态的影响

图4示出了小鼠肺部组织切片观察结果。由图可见，正常组小鼠肺部组织结构正常，未见炎性细胞浸润；与正常组小鼠肺部组织相比，经OVA刺激的小鼠肺部组织病理改变明显，肺泡正常结构消失，肺泡间隔增厚，支气管周围有大量的炎性细胞浸润，且出现气道管腔狭窄，管壁变形等现象，经鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601处理后，小鼠肺部组织炎症浸润现象明显改善，肺泡间隔完整。

3.2鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601对过敏性哮喘小鼠血清中免疫球蛋白的影响

普遍认为过敏性哮喘发病机制是由IgE介导的超敏反应，即接触特异性抗原后的IgE抗体与肥大细胞、嗜碱性粒细胞表面的IgE受体结合，通过桥联作用引起快速脱粒和释放可引起局部炎症的介质，产生胸闷、喘息、咳嗽、气促等症状。

图5示出了鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601对小鼠血清总IgE、OVA-IgE(即OVA特异性IgE)含量的影响。由图可见，与正常组相比，模型组小鼠血清中总IgE含量和OVA-IgE含量显著性增加，而鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601处理组小鼠血清中总IgE含量和OVA-IgE含量较之模型组显著性下降，且高浓度组效果最好，接近正常组水平。

3.3鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601对过敏性哮喘小鼠血清中细胞因子的影响

过敏性哮喘的发生常诱发T细胞亚群失衡和特异性IgE抗体产生。T细胞亚群根据其功能和分泌的细胞因子不同分为Th1、Th2、Treg和Th17细胞。研究表明体内Th1/Th2平衡被打破是过敏性哮喘发病的重要因素。在Th1、Th2细胞调控中，IL-4起着重要的作用，它可以通过调节抗体同型转换抑制IgG_2a和IgG_2b的产生，促进IgE和IgG₁生成，从而加重过敏性哮喘症状。同时Th2细胞分泌的细胞因子可以诱导气道嗜酸粒细胞的聚集，引起炎症的发生。而Th1细胞分泌的IFN-γ、IL-2等细胞因子可以抑制Th2细胞因子的增加，减轻哮喘症状。最近研究证实Treg/Th17平衡在炎症及自身免疫性疾病相关中的作用也不容忽视。Treg细胞主要介导免疫耐受，它通过IL-10依赖的方式抑制免疫应答，使机体产生耐受，IL-10实际是一种由Treg细胞分泌的具有较强免疫抑制效应的抗炎细胞因子。而Th17细胞主要介导一系列炎症反应，两者相互拮抗，共同参与维持机体的免疫平衡。

图6示出了鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601对小鼠血清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、TGF-β、IL-17、IL-23含量的影响。由图可见，与正常组相比，模型组小鼠血清中Th2细胞分泌的IL-4、IL-5和Th17细胞分泌的IL-17、IL-23含量显著性增加，Th1细胞分泌的IFN-γ、IL-2和Treg细胞分泌的IL-10、TGF-β含量有所降低；而鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601处理可以促进Th1细胞和Treg细胞分泌IFN-γ、IL-2、IL-10、TGF-β，抑制Th2细胞和Th17细胞产生IL-4、IL-5、IL-17、IL-23，从而调节Th1/Th2、Treg/Th17平衡，降低OVA特异性IgE的表达，达到预防过敏性哮喘的作用。

3.4鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601对过敏性哮喘小鼠肺部组织中mRNA表达的影响

T-bet、GATA-3、Foxp3和RORγt分别是Th1、Th2、Treg和Th17细胞特定的表面标志，特异性调控Th0细胞分化，起着Th1/Th2、Treg/Th17转换开关作用。而IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-17是Th1、Th2、Treg和Th17细胞主要分泌的细胞因子，这些细胞因子的表达可以间接反映Th1/Th2、Treg/Th17细胞数量。

图7示出了鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601对肺中IFN-γ、T-bet、IL-4、GATA-3、IL-10、Foxp3、IL-17和RORγt mRNA表达的影响。由图可见，模型组小鼠肺部组织中GATA-3、RORγt、IL-4、IL-17的mRNA表达水平显著性高于正常组，而T-bet、Foxp3、IFN-γ、IL-10的mRNA表达低于正常组；经过鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601处理后，小鼠肺部组织中GATA-3、RORγt、IL-4、IL-17的mRNA表达量显著性降低，T-bet、Foxp3、IFN-γ、IL-10的mRNA表达有所提升，因此认为鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601可以上调T-bet、Foxp3的mRNA表达，下调GATA-3、RORγt的mRNA表达，同时促进IFN-γ、IL-10的分泌并抑制IL-4、IL-17的分泌，从而调控Th1/Th2、Treg/Th17平衡。

最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过参照本发明的优选实施例已经对本发明进行了描述，但本领域的普通技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围。

序列表

<110> 西南大学

<120> 一种鼠李糖乳杆菌及其在制备预防过敏性哮喘的保健食品和药品中的应用

<160> 19

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 1360

<212> DNA

<213> 鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601(Lactobacillus rhamnosus2016SWU.05.0601)

<400> 1

tgcatcttga tttaattttg aacgagtggc ggacgggtga gtaacacgtg ggtaacctgc 60

ccttaagtgg gggataacat ttggaaacag atgctaatac cgcataaatc caagaaccgc 120

atggttcttg gctgaaagat ggcgtaagct atcgcttttg gatggacccg cggcgtatta 180

gctagttggt gaggtaacgg ctcaccaagg caatgatacg tagccgaact gagaggttga 240

tcggccacat tgggactgag acacggccca aactcctacg ggaggcagca gtagggaatc 300

ttccacaatg gacgcaagtc tgatggagca acgccgcgtg agtgaagaag gctttcgggt 360

cgtaaaactc tgttgttgga gaagaatggt cggcagagta actgttgtcg gcgtgacggt 420

atccaaccag aaagccacgg ctaactacgt gccagcagcc gcggtaatac gtaggtggca 480

agcgttatcc ggatttattg ggcgtaaagc gagcgcaggc ggttttttaa gtctgatgtg 540

aaagccctcg gcttaaccga ggaagtgcat cggaaactgg gaaacttgag tgcagaagag 600

gacagtggaa ctccatgtgt agcggtgaaa tgcgtagata tatggaagaa caccagtggc 660

gaaggcggct gtctggtctg taactgacgc tgaggctcga aagcatgggt agcgaacagg 720

attagatacc ctggtagtcc atgccgtaaa cgatgaatgc taggtgttgg agggtttccg 780

cccttcagtg ccgcagctaa cgcattaagc attccgcctg gggagtacga ccgcaaggtt 840

gaaactcaaa ggaattgacg ggggcccgca caagcggtgg agcatgtggt ttaattcgaa 900

gcaacgcgaa gaaccttacc aggtcttgac atcttttgat cacctgagag atcaggtttc 960

cccttcgggg gcaaaatgac aggtggtgca tggttgtcgt cagctcgtgt cgtgagatgt 1020

tgggttaagt cccgcaacga gcgcaaccct tatgactagt tgccagcatt tagttgggca 1080

ctctagtaag actgccggtg acaaaccgga ggaaggtggg gatgacgtca aatcatcatg 1140

ccccttatga cctgggctac acacgtgcta caatggatgg tacaacgagt tgcgagaccg 1200

cgaggtcaag ctaatctctt aaagccattc tcagttcgga ctgtaggctg caactcgcct 1260

acacgaagtc ggaatcgcta gtaatcgcgg atcagcacgc cgcggtgaat acgttcccgg 1320

gccttgtaca caccgcccgt cacaccatga gagtttgtaa 1360

<210> 2

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<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

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aggtcggtgt gaacggattt g 21

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ggggtcgttg atggcaaca 19

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<213> 人工序列(Artificial Sequence)

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<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

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gtggacatat aagcggttcc c 21

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<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

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<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

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<213> 人工序列(Artificial Sequence)

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<212> DNA

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cgccaaggga gttaaagact t 21

Claims

1.鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601(Lactobacillus rhamnosus 2016SWU.05.0601)，保藏编号为CCTCC NO：M 2018592。

2.权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601在制备预防过敏性哮喘的保健食品和药品中的应用。