CN109655612A - 一种Asia1型口蹄疫病毒的检测试剂盒及检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种Asia1型口蹄疫病毒的检测试剂盒及检测方法，属于病毒检测技术领域；所述检测试剂盒包括包被酶标板、洗涤液、血清稀释液、底物显色液、酶标二抗、终止液；所述包被酶标板是以Asia1型口蹄疫病毒抗体作为包被抗原包被后获得。所述检测试剂盒使用方便、快速，能够实现可视化检测，特异性好。

Description

一种Asia1型口蹄疫病毒的检测试剂盒及检测方法
技术领域
本发明属于病毒检测技术领域，尤其涉及一种Asia1型口蹄疫病毒的检测试剂盒及检测方法。
背景技术
口蹄疫是一种由口蹄疫病毒(FMDV)所致的急性的、热性的、高度接触性传染病，主要侵害偶蹄兽，经常在羊、牛、猪等动物中传播。发病时易感动物的唇和蹄部出现水疱，同时伴有发烧、食欲不振等症状，患病动物体重和产奶量大幅下降。口蹄疫病毒易通过空气传播，传染性强，流行快速，易感动物在抵抗力较弱的情况下也会导致死亡，给养殖户造成巨大的经济损失，严重阻碍了养殖业的发展。
目前对于Asia1型口蹄疫病毒的诊断方法和疫苗免疫效果的评价方法只能在实验室完成，不适合基层检测，需要建立更为灵敏、快捷和简便的可视化的检测方法。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种Asia1型口蹄疫病毒的检测试剂盒及检测方法；所述检测试剂盒能够实现快速、可视化检测Asia1型口蹄疫病毒，检测结果准确可靠。
为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：
一种Asia1型口蹄疫病毒的检测试剂盒，包括包被酶标板、洗涤液、血清稀释液、底物显色液、酶标二抗和终止液；
所述包被酶标板是以Asia1型口蹄疫病毒抗体作为包被抗原包被后获得。
优选的，所述洗涤液为含吐温-20的磷酸盐缓冲液，所述吐温-20为所述磷酸盐缓冲液质量的0.05％；所述洗涤液的pH值为7.1～7.3。
优选的，所述底物显色液为含有过氧化氢和四甲基联苯胺的混合溶液，所述过氧化氢为所述底物显色液质量的0.8～1.2％；所述四甲基联苯胺的浓度为0.8～1.2mol/L。
优选的，所述血清稀释液为含45～55g/L脱脂奶粉的所述洗涤液。
优选的，所述检测试剂盒还包括阳性标准品和阴性标准品。
优选的，所述终止液为SDS溶液。
本发明还提供了一种利用上述检测试剂盒进行Asia1型口蹄疫病毒的检测方法，包括以下步骤：
1)用血清稀释液稀释待检血清得到稀释血清；
2)向所述包被酶标板中加步骤1)中所述稀释血清，进行第一孵育、第一洗涤获得待检测酶标板；
3)向所述待检测酶标板中加入酶标二抗，进行第二孵育、第二洗涤获得待显色酶标板；
4)向所述待显色酶标板加入底物显色液，进行显色获得显色酶标板；观察所述显色酶标板的颜色，当所述显色酶标板显示蓝色则为阳性，当所述显色酶标板显示无色则为阴性。
优选的，步骤1)中所述血清稀释液与待检血清的体积比为(35～45):1。
优选的，步骤3)所述酶标二抗的稀释倍数为1:18000～22000。
优选的，步骤1)和步骤2)中所述的第一孵育和第二孵育的时间独立为45～65min；所述第一孵育和第二孵育的温度独立为20～30℃。
本发明的有益效果：本发明提供的Asia1型口蹄疫病毒的检测试剂盒，包括包被酶标板、洗涤液、血清稀释液、底物显色液、酶标二抗和终止液；所述包被酶标板是以Asia1型口蹄疫病毒抗体作为包被抗原包被后获得。本发明提供的检测试剂盒能够实现可视化检测，阳性血清检测结果呈蓝色，阴性血清检测结果呈无色；所述检测试剂盒使用方便、快速；对本发明提供的检测试剂盒进行特异性评价，使用所述检测试剂盒检测猪流行性腹泻病毒、猪瘟病毒、乙脑病毒、猪圆环病毒、猪细小病毒、伪狂犬病毒和蓝耳病病毒阳性血清样品，检测结果均呈无色，检测Asia1型口蹄疫病毒阳性血清样品，检测结果呈蓝色；可见所述检测试剂盒特异性好。
附图说明
图1为本发明实施例2的实验结果图。
具体实施方式
本发明提供了一种Asia1型口蹄疫病毒的检测试剂盒，包括包被酶标板、洗涤液、血清稀释液、底物显色液、酶标二抗和终止液。
在本发明中，所述检测试剂盒包括包被酶标板，所述包被酶标板是以Asia1型口蹄疫病毒抗体作为包被抗原包被后获得；所述包被抗原的浓度优选为1.5～2.5μg/mL，更优选为2.0μg/mL；本发明中，所述包被酶标板为脱脂奶粉封闭后的包被酶标板；本发明中，所述脱脂奶粉优选为脱脂奶粉的磷酸盐缓冲液；所述脱脂奶粉的质量浓度优选为45～55g/L，更优选为50g/L。本发明所述包被酶标板的包被液优选为0.05M碳酸盐缓冲液；所述包被液的制备方法优选包括：将Na2CO31.59g和，NaHCO32.93g加蒸馏水定容至1000mL，pH为9.6。本发明中，所述包被酶标板的制备方法包括以下步骤：用pH为9.6的碳酸盐缓冲液按1:1000-2000的比例稀释抗体，约2～3μg/mL，4℃过夜，更优选为1:1500。
在本发明中，所述检测试剂盒包括洗涤液，所述洗涤液优选的为含吐温-20的磷酸盐缓冲液，所述吐温-20在所述磷酸盐缓冲液中的质量百分含量为0.05％，所述洗涤液的pH值优选为7.1～7.3，更优选为7.2。本发明中，所述洗涤液以1L计，优选的包括以下组分：NaCl 8～9g，NaH2PO4·2H2O 0.3～0.4g，NaH2PO4·12H2O 2.5～3.0g，吐温-200.4～0.6mL；更优选的包括以下组分：NaCl 8.5g，NaH2PO4·2H2O 0.356g，NaH2PO4·12H2O 2.772g，吐温-200.5mL。本发明中所述洗涤液的制备方法优选的如下：将NaCl、NaH2PO4·2H2O、NaH2PO4·12H2O混合后，用蒸馏水溶解并定容至999.5mL，再向其中加入0.5mL吐温-20。
在本发明中，所述检测试剂盒包括血清稀释液，所述血清稀释液优选为含45～55g/L脱脂奶粉的洗涤液，更优选为含50g/L脱脂奶粉的洗涤液。在本发明中，所述血清稀释液的作用是稀释待检血清。
在本发明中，所述检测试剂盒包括底物显色液；本发明中所述底物显色液优选为含有过氧化氢的四甲基联苯胺溶液；所述过氧化氢优选为所述底物显色液质量的0.8～1.2％，更优选为0.9～1.1％，最优选为1％；所述四甲基联苯胺的浓度优选为0.8～1.2mol/L，更优选为0.9～1.1mol/L，最优选为1mol/L。
在本发明中，所述检测试剂盒包括酶标二抗，所述酶标二抗优选的辣根过氧化物酶标二抗；本发明中所述酶标二抗在使用过程中的稀释比例优选为1:18000～22000，更优选为1:20000。本发明所述酶标二抗购于sigma公司。
在本发明中，所述检测试剂盒包括终止液，本发明中，所述终止液优选为SDS溶液或硫酸溶液；本发明中，所述SDS溶液的质量浓度优选为0.8～1.2％，更优选为1.0％。本发明中，所述硫酸溶液的浓度优选为1.8～2.2mol/L，更优选为2.0mol/L。本发明中，所述终止液的作用为终止显色反应。
在本发明中，所述检测试剂盒优选的还包括阳性标准品和阴性标准品。所述阳性标准品优选为含有Asia1型口蹄疫病毒抗体的血清；所述阴性标准品优选为不含Asia1型口蹄疫病毒抗体的血清。
本发明提供了一种利用所述的检测试剂盒进行Asia1型口蹄疫病毒的检测方法，包括以下步骤：1)用血清稀释液稀释待检血清得到稀释血清；2)向所述包被酶标板中加步骤1)中所述稀释血清，进行第一孵育、第一洗涤获得待检测酶标板；3)向所述待检测酶标板中加入酶标二抗，进行第二孵育、第二洗涤获得待显色酶标板；4)向所述待显色酶标板加入底物显色液，进行显色获得显色酶标板；观察所述显色酶标板的颜色，当所述显色酶标板显色为蓝色则为阳性，当所述显色酶标板显色为无色则为阴性。
本发明中，用血清稀释液稀释待检血清得到稀释血清。在本发明中，所述血清稀释液与待检血清的体积比优选为(35～45):1，更优选为40:1。
本发明向所述包被酶标板中加入所述稀释血清，进行第一孵育、第一洗涤获得待检测酶标板。在本发明中，所述稀释血清的加入量优选为50～150μL/孔，更优选为100μL/孔；所述第一孵育的时间优选为45～65min；更优选为60min；本发明对所述第一孵育的温度没有特殊限定，常规室温即可；在本发明具体实施过程中，优选为20～30℃。本发明中，所述第一洗涤优选的包括将酶标板内的液体倒弃；用洗涤液清洗酶标板孔，所述清洗的次数优选为2～4次，更优选为3次；本发明所述清洗每次的时间优选为3～7min，更优选为5min。本发明在每次清洗结束后，优选的拍打酶标板，弃尽孔内液体。
本发明在获得所述待检测酶标板后，向所述待检测酶标板中加入酶标二抗，进行第二孵育、第二洗涤获得待显色酶标板。在本发明中，所述酶标二抗的稀释比例优选为1:18000～22000，更优选为1:20000；本发明中，所述酶标二抗的加入量优选为50～150μL/孔，更优选为100μL/孔；本发明所述第二孵育的时间和温度与所述第一孵育相同。本发明所述第二洗涤的步骤与第一洗涤相同。
本发明在获得所述显色酶标板后，向所述待显色酶标板加入底物显色液，进行显色获得显色酶标板；观察所述显色酶标板的颜色，如为蓝色则为阳性，如为无色则为阴性。本发明中，所述显色液的加入量优选为加入量50～150μL/孔，更优选为100μL/孔；所述显色优选的在避光的环境中进行，所述显色的时间优选为15～25min，更优选为20min；本发明对所述显色的温度没有特殊要求，室温即可，在本发明具体实施过程中，优选为20～30℃。本发明在所述显色后优选的加入终止液；所述终止液的加入量优选为50～150μL/孔，更优选为100μL/孔。当所述终止液为SDS溶液时可肉眼观察颜色，如为蓝色则为阳性，如为无色则为阴性。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
1.样品稀释液、洗涤液、终止液的配制
包被液为0.05M碳酸盐缓冲液：Na2CO31.59g，NaHCO32.93g，加蒸馏水定容至1000mL，pH为9.6；
洗涤液为含0.05％Tween-20的0.01M pH为7.2的磷酸盐缓冲液，其配方为：
NaCl 8.5g，NaH2PO4·2H2O 0.356g，NaH2PO4·12H2O 2.772g，将其混合后，再用蒸馏水溶解并定容至999.5mL，再向其中加入0.5mL吐温-20得到上述洗涤液；
血清稀释液为含50g/L脱脂奶粉的洗涤液；
终止液为1％SDS。
取出已包被并封闭好的ELISA板条，用血清稀释液将待检血清做1：40倍稀释，加入酶标板各孔，每孔100μL，各加一孔，Asia1型口蹄疫病毒阴性、阳性血清各加两孔，室温作用1h；弃去孔内液体，每孔用洗涤液洗3次并拍打，弃尽孔内液体；每孔加入100μL酶标二抗，室温作用1h；弃去孔内液体，每孔用洗涤液洗涤3次并拍打，弃尽孔内液体；每孔加入100μLTMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)底物显色液后，室温避光显色20min，加入100μLSDS终止液；肉眼观察颜色，蓝色为阳性，无色为阴性。
实施例2
按实施例1中的试剂盒和检测方法分别检测已知的猪瘟病毒、乙脑病毒、猪圆环病毒、猪细小病毒、伪狂犬病毒、蓝耳病病毒和Asia1型口蹄疫病毒阳性血清样品，实验结果如图1所示，其中1为口蹄疫病毒；2为猪瘟病毒；3为乙脑病毒；4为猪圆环病毒；5为猪细小病毒；6为伪狂犬病毒；7为蓝耳病病毒；8为乙脑病毒，可见，只有标号1的口蹄疫病毒表现为蓝色。
由上述实施例可知，本发明提供的检测试剂盒用于检测Asia1型口蹄疫病毒的抗体，具有高效、灵敏特异性和重复性均良好的优点，所述检测方法操作简便、快速、成本低廉，可以在室温下可视化检测，适合于在临床应用中进行推广，为Asia1型口蹄疫病毒的快速检测提供可靠的技术手段。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种Asia1型口蹄疫病毒的检测试剂盒，其特征在于，包括包被酶标板、洗涤液、血清稀释液、底物显色液、酶标二抗和终止液；
所述包被酶标板是以Asia1型口蹄疫病毒抗体作为包被抗原包被后获得。
2.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述洗涤液为含吐温-20的磷酸盐缓冲液，所述吐温-20为所述磷酸盐缓冲液质量的0.05％；所述洗涤液的pH值为7.1～7.3。
3.根据权利要求1或2所述的检测试剂盒，其特征在于，所述底物显色液为含有过氧化氢和四甲基联苯胺的混合溶液，所述过氧化氢为所述底物显色液质量的0.8～1.2％；所述四甲基联苯胺的浓度为0.8～1.2mol/L。
4.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述血清稀释液为含45～55g/L脱脂奶粉的所述洗涤液。
5.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒还包括阳性标准品和阴性标准品。
6.根据权利要求1所述的检测试剂盒，其特征在于，所述终止液为SDS溶液。
7.一种利用权利要求1～6任意一项所述的检测试剂盒进行Asia1型口蹄疫病毒的检测方法，包括以下步骤：
1)用血清稀释液稀释待检血清得到稀释血清；
2)向所述包被酶标板中加步骤1)中所述稀释血清，进行第一孵育、第一洗涤获得待检测酶标板；
3)向所述待检测酶标板中加入酶标二抗，进行第二孵育、第二洗涤获得待显色酶标板；
4)向所述待显色酶标板加入底物显色液，进行显色获得显色酶标板；观察所述显色酶标板的颜色，当所述显色酶标板显示蓝色则为阳性，当所述显色酶标板显示无色则为阴性。
8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，步骤1)中所述血清稀释液与待检血清的体积比为(35～45):1。
9.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，步骤3)所述酶标二抗的稀释倍数为1:18000～22000。
10.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，步骤1)和步骤2)中所述的第一孵育和第二孵育的时间独立为45～65min；所述第一孵育和第二孵育的温度独立为20～30℃。
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Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101241138A (zh) * 2007-11-29 2008-08-13 中国农业科学院兰州兽医研究所 Asia 1型口蹄疫抗体水平检测试纸及制备方法
US20110014639A1 (en) * 2009-07-14 2011-01-20 Tsu-Han Chen Hybridoma cell line producing monoclonal antibody against foot-and-mouth disease virus, the monoclonal antibody therefrom, immunoassay reagent and kit, and immunoassay method
CN102998460A (zh) * 2012-10-31 2013-03-27 广东现代农业集团研究院有限公司 一种口蹄疫病毒抗体的elisa试剂盒及其制备方法
CN106706903A (zh) * 2016-11-25 2017-05-24 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种检测猪A型口蹄疫病毒特异性IgA抗体的方法及其检测试剂盒
CN106706923A (zh) * 2016-11-25 2017-05-24 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种检测猪O型口蹄疫病毒特异性IgA抗体的方法及其检测试剂盒
WO2017097875A1 (en) * 2015-12-08 2017-06-15 Danmarks Tekniske Universitet Kit-of-parts for use in a prime-boost vaccination strategy to protect cloven-footed animals against foot-and-mouth disease virus infection
CN109142727A (zh) * 2018-10-10 2019-01-04 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种o型口蹄疫病毒抗体的可视化快速检测试剂盒及其应用
CN109187993A (zh) * 2018-09-13 2019-01-11 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种口蹄疫A型病毒sIgA抗体ELISA检测试剂盒及其应用
CN109232720A (zh) * 2018-09-13 2019-01-18 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种口蹄疫O型病毒sIgA抗体ELISA检测试剂盒及其应用

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101241138A (zh) * 2007-11-29 2008-08-13 中国农业科学院兰州兽医研究所 Asia 1型口蹄疫抗体水平检测试纸及制备方法
US20110014639A1 (en) * 2009-07-14 2011-01-20 Tsu-Han Chen Hybridoma cell line producing monoclonal antibody against foot-and-mouth disease virus, the monoclonal antibody therefrom, immunoassay reagent and kit, and immunoassay method
CN102998460A (zh) * 2012-10-31 2013-03-27 广东现代农业集团研究院有限公司 一种口蹄疫病毒抗体的elisa试剂盒及其制备方法
WO2017097875A1 (en) * 2015-12-08 2017-06-15 Danmarks Tekniske Universitet Kit-of-parts for use in a prime-boost vaccination strategy to protect cloven-footed animals against foot-and-mouth disease virus infection
CN106706903A (zh) * 2016-11-25 2017-05-24 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种检测猪A型口蹄疫病毒特异性IgA抗体的方法及其检测试剂盒
CN106706923A (zh) * 2016-11-25 2017-05-24 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种检测猪O型口蹄疫病毒特异性IgA抗体的方法及其检测试剂盒
CN109187993A (zh) * 2018-09-13 2019-01-11 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种口蹄疫A型病毒sIgA抗体ELISA检测试剂盒及其应用
CN109232720A (zh) * 2018-09-13 2019-01-18 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种口蹄疫O型病毒sIgA抗体ELISA检测试剂盒及其应用
CN109142727A (zh) * 2018-10-10 2019-01-04 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种o型口蹄疫病毒抗体的可视化快速检测试剂盒及其应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
林彤 等。: "利用Asia1型口蹄疫病毒VP1蛋白的单克隆抗体检测单抗竞争ELISA方法。", 《安徽农业科学》 *
梁伟峰 等。: "Asia 1型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立。", 《中国预防兽医学报》 *
魏孔福。: "Asia-Ⅰ型口蹄疫抗体固相竞争ELISA检测方法研究。", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》 *

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