CN109645030A - 防治柑橘黄龙病的海胆制剂 - Google Patents

防治柑橘黄龙病的海胆制剂 Download PDF

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李伟
佟长青
朱春芃
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    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/10—Animals; Substances produced thereby or obtained therefrom

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Abstract

本发明公开一种制作简单、成本低廉、环境友好、无毒高效的防治柑橘黄龙病的海胆制剂，依次按照如下步骤制备：以海胆壳为原料，按照1：10体积比置于发酵液中30~37℃振摇24~72h，所述发酵液是质量浓度为2~6%的混合粉水溶液，所述混合粉是由植物乳杆菌与酵母按质量比1:1混合而成，所述植物乳杆菌≥1×107cfu/g，酵母为干酵母粉；收集海胆壳进行干燥并粉碎，获得700~1000目海胆壳粉；用超声辅助提取法用质量浓度为50%的乙醇对海胆壳粉进行提取，得到海胆粉提取液，所述超声辅助法中料液比1:20，超声时间40min，超声功率60W；对海胆粉提取液减压浓缩后得到海胆制剂。

Description

防治柑橘黄龙病的海胆制剂
技术领域
本发明属于生物防治领域，尤其涉及一种制作简单、成本低廉、环境友好、无毒高效的防治柑橘黄龙病的海胆制剂。
背景技术
柑橘黄龙病是一种亚洲韧皮杆菌感染的疾病，主要危害柑橘的新梢、嫩叶、花及果实，使柑橘在浓绿的树冠中出现新梢黄化以及斑驳型黄化叶片，是柑橘生产上的毁灭性病害。目前，该病分布在亚洲、非洲、大洋洲、美洲等近50个国家和地区，佛罗里达州部分柑橘园使用抗菌剂进行黄龙病的防治，起到了一定的防治效果。
海胆属于棘皮动物门(Echinodermata)、海胆纲(Echinoidea)，是海洋中生存的低等古老无脊椎动物。研究表明，海胆壳中含有海胆色素、棘色素、糖蛋白、脂类、多糖等化学物质，具有抗肿瘤、抑菌等生物活性。迄今为止，尚无海胆制剂应用于柑橘黄龙病防治的报道。
发明内容
本发明是为了解决现有技术所存在的上述技术问题，提供一种制作简单、成本低廉、环境友好、无毒高效的防治柑橘黄龙病的海胆制剂。
本发明的技术解决方案是：一种防治柑橘黄龙病的海胆制剂，其特征在于依次按照如下步骤制备：
a. 以海胆壳为原料，按照1：10体积比置于发酵液中30~37℃振摇24~72h，所述发酵液是质量浓度为2~6%的混合粉水溶液，所述混合粉是由植物乳杆菌与酵母按质量比1:1混合而成，所述植物乳杆菌≥1×107cfu/g，酵母为干酵母粉；
b. 收集海胆壳进行干燥并粉碎，获得700~1000目海胆壳粉；
c. 用超声辅助提取法用质量浓度为50%的乙醇对海胆壳粉进行提取，得到海胆粉提取液，所述超声辅助法中料液比1:20，超声时间40min，超声功率60W；
d. 对海胆粉提取液减压浓缩后得到海胆制剂。
本发明通过植物乳杆菌与酵母对海胆壳进行前处理，所提取的海胆制剂无腥味，其中所含的有效成份可有效抑制柑橘黄龙病，又可防止柑橘木虱、柑橘潜叶蛾、螨类、天牛、尺蠖等引起的柑橘其他病害，具有制作简单、成本低廉、环境友好、无毒高效等优点。
附图说明
图1是罹患柑橘黄龙病的柑橘施用本发明实施例前树叶图片。
图2是罹患柑橘黄龙病的柑橘施用本发明实施例后树叶图片。
实施例1：
本发明的防治柑橘黄龙病的海胆制剂，依次按照如下步骤制备：
a. 以巨紫球海胆（Strongylocentrotus franciscanus）壳为原料，按照1：10体积比置于发酵液中30℃振摇72h，所述发酵液是质量浓度为2%的混合粉水溶液，所述混合粉是由植物乳杆菌与酵母按质量比1:1混合而成，所述植物乳杆菌≥1×107cfu/g，酵母为干酵母粉；
b. 收集海胆壳进行干燥并用球磨机粉碎，获得700目海胆壳粉；
c. 用超声辅助提取法用质量浓度为50%的乙醇对海胆壳粉进行提取，得到海胆粉提取液，所述超声辅助法中料液比1:20，超声时间40min，超声功率60W；
d. 用多级闪蒸器、旋转蒸发器对海胆粉提取液减压浓缩后得到海胆制剂。
实施例2：
本发明的防治柑橘黄龙病的海胆制剂，依次按照如下步骤制备：
a. 以紫海胆（Anthocidaris crassispina）壳为原料，按照1：10体积比置于发酵液中37℃振摇24h，所述发酵液是质量浓度为6%的混合粉水溶液，所述混合粉是由植物乳杆菌与酵母按质量比1:1混合而成，所述植物乳杆菌≥1×107cfu/g，酵母为干酵母粉；
b. 收集海胆壳进行干燥并用球磨机粉碎，获得1000目海胆壳粉；
c. 用超声辅助提取法用质量浓度为50%的乙醇对海胆壳粉进行提取，得到海胆粉提取液，所述超声辅助法中料液比1:20，超声时间40min，超声功率60W；
d. 用多级闪蒸器、旋转蒸发器对海胆粉提取液减压浓缩后得到海胆制剂。
实施例3：
本发明的防治柑橘黄龙病的海胆制剂，依次按照如下步骤制备：
a. 以光棘球海胆（Strongylocentrotus nudus）壳为原料，按照1：10体积比置于发酵液中34℃振摇50h，所述发酵液是质量浓度为4%的混合粉水溶液，所述混合粉是由植物乳杆菌与酵母按质量比1:1混合而成，所述植物乳杆菌≥1×107cfu/g，酵母为干酵母粉；
b. 收集海胆壳进行干燥并用球磨机粉碎，获得800目海胆壳粉；
c. 用超声辅助提取法用质量浓度为50%的乙醇对海胆壳粉进行提取，得到海胆粉提取液，所述超声辅助法中料液比1:20，超声时间40min，超声功率60W；
d. 用多级闪蒸器、旋转蒸发器对海胆粉提取液减压浓缩后得到海胆制剂。
本发明实施例1~3所用植物乳杆菌购自中国工业微生物菌种保藏管理中心（CICC20022），酵母为市售产品。
对所得海胆制剂进行检测，无腥味、无毒无害。含有的海胆色素A（2-乙基-3, 5,6, 7, 8-五羟基-1,4-萘醌）、棘色素A（2-乙酰基-3, 5, 6, 8-四羟基-1, 4-萘二酮）、棘色素B（2, 3, 5, 7- 四羟基-1,4-萘二酮）、棘色素C（2-乙酰基-3, 5, 6, 7, 8-五羟基-1,4-萘二酮）、棘色素D（2, 3, 5, 6, 8-五羟基-1, 4-萘二酮）、棘色素E（六羟基-1, 4-萘二酮）以及（3β）-胆甾-5-烯-3-醇等有效成分，占海胆制剂总质量10~30%。
使用时将本发明的海胆制剂按1：100~400的比例进行兑水稀释，其应用方法为根灌或喷雾。根灌：每株树使用0.5~1kg稀释的海胆制剂，浇在根部15~25cm处；喷雾：每株树使用3~6kg稀释的海胆制剂，喷雾叶片。
将本发明实施例3按400倍质量的清水稀释的海胆制剂（以下简称海胆制剂稀释液）进行了柑橘黄龙病的治疗试验，试验相关信息如下：
试验地点：广东省；
试验品种：砂糖橘；
试验时间：2018年12月6日~2019年1月13日；
试验面积： 8棵患病砂糖橘果树。
处理方法：对8棵患病砂糖橘果树2018年12月6日、2018年12月18日、2018年12月30日及2019年1月13日均使用海胆制剂稀释液进行根灌和喷雾。
2018年12月6日患病果树如图1所示，2019年1月13日果树如图2所示。
结果表明，使用本发明海胆制剂对患黄龙病果树进行根灌和喷雾，果树逐渐恢复健康生长状态并结出果实。

Claims (1)

1.一种防治柑橘黄龙病的海胆制剂，其特征在于依次按照如下步骤制备：
a. 以海胆壳为原料，按照1：10体积比置于发酵液中30~37℃振摇24~72h，所述发酵液是质量浓度为2~6%的混合粉水溶液，所述混合粉是由植物乳杆菌与酵母按质量比1:1混合而成，所述植物乳杆菌≥1×107cfu/g，酵母为干酵母粉；
b. 收集海胆壳进行干燥并粉碎，获得700~1000目海胆壳粉；
c. 用超声辅助提取法用质量浓度为50%的乙醇对海胆壳粉进行提取，得到海胆粉提取液，所述超声辅助法中料液比1:20，超声时间40min，超声功率60W；
d. 对海胆粉提取液减压浓缩后得到海胆制剂。
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