CN109602742A - 咯萘啶在制备用于诱导细胞凋亡的药物及抗乳腺癌药物中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开式I所示化合物在制备用于诱导细胞凋亡的药物中的用途。本发明式I的化合物啶能够诱导乳腺细胞凋亡、增加Caspase3过表达和增加裂解的Caspase3磷酸化，进而用于治疗乳腺癌。

Description

咯萘啶在制备用于诱导细胞凋亡的药物及抗乳腺癌药物中的 用途

技术领域

本发明涉及咯萘啶的新用途，具体涉及咯萘啶在制备用于诱导细胞凋亡的药物及抗乳腺癌药物中的用途。

背景技术

咯萘啶(PND)为一种抗疟药物，其作用优于咯啶，主要能杀灭裂殖体，抗疟疗效显著。适用于治疗各种疟疾包括脑型疟和凶险疟疾的危重患者。周效磺胺，乙胺嘧啶或伯氢喹与本品合用可增强疗效，延缓抗药性的产生，防止复燃。副作用较氯喹轻。

近来，有研究利用咯萘啶逆转肿瘤多药耐性(MDR)，提高了化疗效果。通过体外、体内实验均证明PND具有高效逆转肿瘤MDR的基础上，并进一步从给药剂量、给药途径两方面调整PND的给药方案，完善PND作为肿瘤耐药逆转剂的临床前药效学数据。参见，刘桂英，《咯萘啶逆转肿瘤耐药药效学研究》中国协和医科大学硕士研究生学位论文。

发明内容

在现有研究基础上，本发明人发现咯萘啶能够诱导乳腺细胞凋亡、增加Caspase3过表达和增加裂解的Caspase3磷酸化，进而用于治疗乳腺癌。至少部分地基于此完成了本发明。具体地，本发明包括以下内容。

本明的第一方面，提供式I所示的化合物在制备用于诱导细胞凋亡的药物中的用途：

在某些实施方案中，本发明所述细胞凋亡包括Caspase3过表达升高和裂解的Caspase3磷酸化的过程。

在某些实施方案中，本发明所述细胞为肿瘤细胞。优选地，所述肿瘤细胞为MCF-7或MDA-231乳腺癌细胞。

本发明的第二方面，提供式I所示的化合物在制备用于治疗乳腺癌的药物中的用途：

在某些实施方案中，式I所示的化合物能够激活细胞凋亡、增加Caspase3过表达和增加裂解的Caspase3磷酸化。

本发明第三方面，提供用于治疗乳腺癌的药物组合物，其包括式I所示的化合物以及药物学可接受载体：

在某些实施方案中，本发明的药物组合物进一步包括抗乳腺癌剂。

在某些实施方案中，所述抗乳腺癌剂选自由芙瑞、依维莫司、紫杉醇、埃坡霉素B、赫赛汀、希罗达、阿帕替尼、速莱、西帕替尼和抗雌激素药物组成的组。

在某些实施方案中，本发明的药物学可接受载体包括稀释剂或赋形剂。

具体实施方式

现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。

应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为具体公开了该范围的上限和下限以及它们之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。

除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。除非另有说明，否则“％”为基于重量的百分数。

本发明所述的式I所述的化合物分子式为C₂₉H₃₂ClN₅O₂4H₃PO₄，其分质量为910.04，化学名称为2-甲氧基-7-10-[(3’-5’双四氢吡咯次甲基-4’-羟基-苯基)氨基]笨比[b]1,5-萘啶：

本发明优选使用微黄色固体粉末的化合物。

本发明发现式I的化合物通过干预肿瘤细胞线粒体的功能，从而激活细胞凋亡通路，增加Caspase3过表达，进而增加cleaved Caspase3磷酸化，导致肿瘤细胞凋亡，达到杀伤肿瘤细胞的目的。

[式I所示的化合物在制备用于诱导细胞凋亡的药物中的用途]

本发明的第一方面，提供式I所示的化合物在制备用于诱导细胞凋亡的药物中的用途。本发明中，用于诱导细胞凋亡的药物形式特别限定，只要其由式I的化合物组成或包含式I的化合物的即可。具体地，本发明的药物形式包括粉末或溶液。

本发明中的细胞优选为肿瘤细胞。更优选地，所述肿瘤细胞为MCF-7或MDA-231乳腺癌细胞。

[式I所示的化合物在制备用于治疗乳腺癌的药物]

本发明的第二方面，提供式I所示的化合物在制备用于治疗乳腺癌的药物中的用途：

在某些实施方案中，式I所示的化合物能够激活细胞凋亡、增加Caspase3过表达和增加裂解的Caspase3磷酸化。

[用于治疗乳腺癌的药物组合物]

本发明第三方面，提供用于治疗乳腺癌的药物组合物，其包括式I所示的化合物以及药物学可接受载体：

本发明的药物组合物可以是任何适宜的剂型。例如，注射剂、悬浮剂、乳化剂等。本发明的药物组合物可通过已知的方式施用至体内。例如，通过肌肉注射递送到感兴趣组织中，可选地经由静脉内、经皮、鼻内、经口、粘膜、或其他递送方法进行施用。这样的施用可以经由单剂量或多剂量来进行。本领域技术人员理解的是，本文有待施用的实际剂量可以在很大程度上取决于多种因素而变化，如靶细胞、生物类型或其组织、待治疗受试者的一般状况、给药途径、给药方式等等。

在某些实施方案中，除了式I所示的化合物外，本发明的药物组合物进一步包括抗乳腺癌剂。优选地，抗乳腺癌剂选自由芙瑞、依维莫司、紫杉醇、埃坡霉素B、赫赛汀、希罗达、阿帕替尼、速莱、西帕替尼和抗雌激素药物组成的组。

本发明中，药物学可接受载体在领域内是熟知的，本领域普通技术人员能够确定其符合临床标准。药物学可接受载体包括稀释剂和赋形剂。合适的药物学可接受载体的实例包括但不限于：(1)Dulbecco磷酸缓冲盐溶液，pH约7.4，包含或不包含大约1mg/ml到25mg/ml人血清白蛋白；(2)0.9％盐水(0.9％w/v氯化钠)，和(3)5％(w/v)葡萄糖；也可以包含抗氧化剂例如色胺和稳定剂例如Tween20。

本发明的药物组合物可以是任何适宜的剂型。例如，注射剂、悬浮剂、乳化剂等。本发明的药物组合物可通过已知的方式施用至体内。例如，通过肌肉注射递送到感兴趣组织中，可选地经由静脉内、经皮、鼻内、经口、粘膜、或其他递送方法进行施用。这样的施用可以经由单剂量或多剂量来进行。本领域技术人员理解的是，本文有待施用的实际剂量可以在很大程度上取决于多种因素而变化，如靶细胞、生物类型或其组织、待治疗受试者的一般状况、给药途径、给药方式等等。

实施例

目的

验证咯萘啶在乳腺癌细胞系和细胞系小鼠成瘤模型中细胞毒性作用

检测方法

利用MTT检测咯萘啶对MCF-7,MDA-231乳腺癌细胞的细胞毒作用。

利用免疫组化，流式细胞检测，qRT-PCR检测细胞凋亡及凋亡相关基因的表达。

利用细胞系小鼠成瘤模型验证咯萘啶对体内肿瘤组织的杀伤作用。

实验结果

1.咯萘啶对人乳腺癌细胞系MCF-7,MDA-231有明显的细胞毒性，存在剂量依赖性，分别为IC50＝0.52umol,IC50＝0.77umol。

2.Annexin V/PI流式细胞检测提示咯萘啶可以明显引起肿瘤细胞的凋亡，存在剂量依赖性。免疫组化染色显示咯萘啶治疗明显增高了肿瘤细胞内Caspase3表达,同时qRT-PCR结果也显示增加了肿瘤细胞Caspase3基因的表达。

3.利用裸鼠移植瘤模型，在每公斤体重咯萘啶在体内40mg剂量下，对抑瘤率达76.81～86.73％。表明体内具有明显的抗肿瘤作用。

所以实验均重复3次。

在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见得的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。

Claims (10)

1.式I所示的化合物在制备用于诱导细胞凋亡的药物中的用途：

2.根据权利要求1所述的用途，其中所述细胞凋亡包括Caspase3过表达升高和裂解的Caspase3磷酸化的过程。

3.根据权利要求1所述的用途，其中所述细胞为肿瘤细胞。

4.根据权利要求3所述的用途，其中所述肿瘤细胞为MCF-7或MDA-231乳腺癌细胞。

5.式I所示的化合物在制备用于治疗乳腺癌的药物中的用途：

6.根据权利要求3所述的用途，其中式I所示的化合物能够激活细胞凋亡、增加Caspase3过表达和增加裂解的Caspase3磷酸化。

7.一种用于治疗乳腺癌的药物组合物，其包括式I所示的化合物以及药物学可接受载体：

8.根据权利要求7所述的药物组合物，其进一步包括抗乳腺癌剂。

9.根据权利要求8所述的药物组合物，其中所述抗乳腺癌剂选自由芙瑞、依维莫司、紫杉醇、埃坡霉素B、赫赛汀、希罗达、阿帕替尼、速莱、西帕替尼和抗雌激素药物组成的组。

10.根据权利要求7所述的药物组合物，其中所述药物学可接受载体包括稀释剂或赋形剂。