CN109541116A - 一种沉香的鉴别方法 - Google Patents

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郭学东
陈相银
张红莲
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Abstract

本发明公开了一种沉香的鉴别方法，包括以下步骤：S1：制备供试品溶液：取供试沉香粉末1g，加入乙醇溶液20‑30mL，超声处理50‑70min，滤过，滤液定容至25mL，制得供试品溶液；S2：制备对照药材溶液和对照品溶液：对照药材溶液：取沉香药材0.5g，同步骤S1制得对照药材溶液；对照品溶液：取6，7‑二甲基‑2（2‑苯乙基）色酮的甲醇溶液制成每1mL含0.05mg的对照品溶液；S3：薄层色谱检测：吸取三种溶液各5μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以甲醇‑冰乙酸为展开剂，展开，取出，晾干，在紫外光灯和日光下检视；另外，本发明的鉴别方法具有操作安全，重现性更好、色谱信息更完全的优点。

Description

一种沉香的鉴别方法
技术领域
本发明涉及分析测试技术领域，更具体地说，它涉及一种沉香的鉴别方法。
背景技术
沉香为瑞香料植物白木香含树脂的木材，产地在中国南方及东南亚，是一种名贵的木材，同时也是珍贵的中药材和香料。由于天然沉香结香缓慢、价格昂贵，而人工沉香结香技术仍处于发展阶段，无法大规模生产优质沉香，因此无法满足市场需求，于是以假冒真、以次充好的情况并不鲜见，其中以添加香精的木材或带香味的低价木材冒充高价沉香为典型。
2015版《中国药典》一部沉香项下规定的鉴别方法之一为薄层色谱法，其具体方法为：取本品粉末0.5g，加乙醚30ml，超声处理60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，作为供试品溶液。另取沉香对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚(10∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
现有技术中，申请公布号为CN201410472942.X的中国发明专利文件中公开了一种沉香的鉴别方法，包括如下步骤：A、制备供试品溶液：取沉香供试品粉末0.5g，加乙醇10-20mL，超声处理20-30分钟，放冷，滤过，取续滤液作为供试品溶液；B、制备对照药材溶液：取沉香对照药材0.5g，加乙醇10-20mL，超声处理20-30分钟，放冷，滤过，取续滤液作为对照药材溶液；C、薄层色谱检测：吸取步骤A和B制备的溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丙酮为展开剂，展开，展距12cm，取出，晾干，置紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
现有的这种沉香的鉴别方法虽然使用乙醇作为提取溶液，避免乙醚的挥发，但存在以下问题：1、使用乙醇作为提取液，乙醇沸点较高，导致超声时间较短，有效组分的信息提取不完全；2、使用乙酸乙酯和丙酮作为展开剂，乙酸乙酯和丙酮均具有刺激性，对操作人员的健康有不利影响；3、仅设置对照药材溶液作为对照品溶液，重现性不好，色谱信息不全。
发明内容
针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种沉香的鉴别方法，其具有操作安全，重现性更好、色谱信息更完全的优点。
为实现上述第一个目的，本发明提供了如下技术方案：一种沉香的鉴别方法，包括以下步骤：
S1：制备供试品溶液：取供试沉香粉末1g，加入乙醇溶液20-30mL，超声处理50-70min，滤过，滤液定容至25mL，制得供试品溶液；
S2：制备对照药材溶液和对照品溶液：
对照药材溶液：取沉香药材0.5g，加入乙醇溶液20-30mL，超声处理50-70min，滤过，滤液定容至25mL，制得对照药材溶液；
对照品溶液：取6，7-二甲基-2（2-苯乙基）色酮的甲醇溶液制成每1mL含0.05mg的对照品溶液；
S3：薄层色谱检测：吸取供试品溶液、对照药材溶液和对照品溶液各5μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为10:1的三氯甲烷-乙醚为展开剂，展开2次，取出，晾干，分别在波长254nm和365nm的紫外光灯下检视，并在日光下进行检测，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
通过采用上述技术方案，由于使用甲醇代替乙醚作为提取溶剂，甲醇的沸点是64.7℃，比乙醚的沸点高，但比乙醇的沸点低，在超声处理过程中，甲醇溶液挥发较少，减少了提取过程中能的溶液挥发损失，且超声时间长，不会影响沉香有效成分的信息，同时不对滤液进行蒸干、残渣加三氯甲烷溶解的操作，使用将滤液定容至25mL作为供试品溶液，避免了三氯甲烷的毒性对供试品的影响，也能够有益于实验人员的健康，同时节省了时间，操作更为简便，使用以体积比为10-15:1的甲醇-冰乙酸为展开剂，甲醇含有酒精气味，对人体无刺激性，冰乙酸对人体刺激性小，使用GF254薄层板，使得在观察荧光斑点时，斑点清晰，观察准确，使用254nm和365nm的波长对GF254薄层板进行检视，避免了使用365nm一种波长检视时，造成色谱信息不全面，重复性不好，使用6，7-二甲基-2（2-苯乙基）色酮的甲醇溶液制备对照品溶液，在进行检视时，通过对比得到色谱信息更全面，且重复性较好、精密度良好。
进一步地，所述步骤S3中，在对照对照药品溶液的荧光斑点前，在GF254薄层板上均匀喷涂质量分数为5%的香草醛-硫酸乙醇试液，再将GF254薄层板在104-106℃下加热至斑点显色清晰。
通过采用上述技术方案，采用质量分数为5%的香草醛-硫酸乙醇试液作为显色剂，喷涂在GF254薄层板上，香草醛能够与沉香中的挥发油反应呈紫红色，加热后的GF254薄层板，因为喷涂了显色剂，荧光斑点较为清晰，便于观察对照药品溶液和供试品溶液的荧光斑点位置，提高精准度和荧光斑点的稳定性。
进一步地，所述步骤S2中的沉香对照药材为中国食品药品检定研究院批号为121222-201203的沉香。
通过采用上述技术方案，使用中国食品药品检定研究院规定批号的沉香，为鉴别提供较为准确的对照信息，提高鉴别精准度。
进一步地，所述步骤S1和步骤S3中，超声处理的功率为100-500W；超声处理的频率为30-50KHz；超声处理的温度为30-40℃。
通过采用上述技术方案，将超声处理功率控制在100-500W内，功率为30-50KHz，处理效果好，便于提取出供试品溶液和对照药材溶液，提取温度为30-40℃，防止提取液挥发过快。
进一步地，所述步骤S1中供试沉香粉末的颗粒为30-40目的粉末。
通过采用上述技术方案，配制供试品溶液的供试沉香粉末的颗粒较细，在制备供试品溶液时，便于溶液溶解完全，鉴别结果较为精确。
进一步地，所述步骤S3中三种溶液的展距均为11-12cm。
通过采用上述技术方案，将三种溶液的展距控制为11-12cm，可提高检测精准度，并且提高重现性。
进一步地，所述步骤S1中超声处理的装置选自美国必能信、上海声彦或郑州宝晶。
进一步地，所述步骤S3中GF254薄层板选自青岛基亿达硅胶试剂有限公司、青岛邦凯高新技术材料有限公司、青岛鑫昶来硅胶有限公司。
综上所述，本发明具有以下有益效果：
第一、本发明的方法中，采用供试品溶液、供试药材溶液和供试品溶液三年中溶液进行紫外检视，能够提高检测精准度和重现性，并且能够使得色谱信息较为全面。
第二、本发明的方法，由于使用甲醇代替乙醚作为提取溶剂，甲醇的沸点是64.7℃，比乙醚的沸点高，但比乙醇的沸点低，在超声处理过程中，甲醇溶液挥发较少，减少了提取过程中能的溶液挥发损失，且超声时间长，不会影响沉香有效成分的信息。
第三、本发明的方法，通过采用254nm和365nm的波长作为薄层色谱的检视波长，并且在日光下进行检测，可以得到比单一波长检视时更加全面的样品信息，使得鉴别更加精准和精确。
第四、本发明的方法中，采用滤液定容后直接作为试样的方法，减少了对提取液进行蒸干、使用三氯甲烷对残渣进行溶解的步骤，不仅节省了鉴别时间，使得操作更加简单方便，还避免了三氯甲烷在使用时，对实验人员的健康造成影响。
附图说明
图1是本发明中实施例1中三种溶液在紫外灯光254nm波长下检视的薄层色谱图；
图2是本发明中实施例2中三种溶液在紫外灯光365nm波长下检视的薄层色谱图；
图3是本发明中实施例3中三种溶液在日光下检视的薄层色谱图；
图4是本发明中对比例1中两种溶液在紫外灯光254nm波长下检视的薄层色谱图；
图5是本发明中对比例2中两种溶液在紫外灯光365nm波长下检视的薄层色谱图；
图6是本发明中对比例3中两种溶液在日光下检视的薄层色谱图。
图1中：1为对照药材溶液、2为对照药品溶液、3-14为供试溶液1-12；
图2中：1为对照药材溶液、2为对照药品溶液、3-14为供试溶液1-12；
图3中：1为对照药材溶液、2为对照药品溶液、3-14为供试溶液1-12；
图4中: 1为供试溶液A、2为对照药材溶液B；
图5中：1为供试溶液C、2为对照药材溶液D；
图6中：1为供试品溶液E，2为对照药材F。
具体实施方式
以下结合附图和实施例对本发明作进一步详细说明。
以下实施例中超声处理装置选自济宁双和超声设备有限公司、北京弘祥隆生物技术股份有限公司或必能信超声（上海）有限公司；GF254薄层板选自青岛基亿达硅胶试剂有限公司、青岛邦凯高新技术材料有限公司或青岛鑫昶来硅胶有限公司。
实施例
实施例1：一种沉香鉴别方法，包括以下步骤：
S1：制备供试品溶液：取供试沉香粉末1g，加入乙醇溶液20mL，超声处理50min，滤过，滤液定容至25mL，重复操作，制得供试品溶液1-12；
其中供试沉香粉末的颗粒为30目，超声处理的功率为100W，频率为30KHz，温度为30℃；
S2：制备对照药材溶液和对照品溶液：
对照药材溶液：取沉香药材0.5g，加入乙醇溶液20mL，超声处理50min，滤过，滤液定容至25mL，制得对照药材溶液；
其中沉香对照药材为中国食品药品检定研究院批号为121222-201203的沉香，超声处理的功率为100W，频率为30KHz，温度为30℃；
对照品溶液：取6，7-二甲基-2（2-苯乙基）色酮的甲醇溶液制成每1mL含0.05mg的对照品溶液；
S3：薄层色谱检测：吸取供试品溶液1-12、对照药材溶液和对照品溶液各5μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为10:1的三氯甲烷-乙醚为展开剂，展开2次，展距为11cm，取出，晾干，在波长254nm的紫外光灯下检视，结果见图1，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，在GF254薄层板上均匀喷涂质量分数为5%的香草醛-硫酸乙醇试液，再将GF254薄层板在104℃下加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
实施例2：一种沉香鉴别方法，包括以下步骤：
S1：制备供试品溶液：取供试沉香粉末1g，加入乙醇溶液25mL，超声处理60min，滤过，滤液定容至25mL，重复操作，制得供试品溶液1-12；
其中供试沉香粉末的颗粒为35目，超声处理的功率为300W，频率为40KHz，温度为35℃；
S2：制备对照药材溶液和对照品溶液：
对照药材溶液：取沉香药材0.5g，加入乙醇溶液25mL，超声处理60min，滤过，滤液定容至25mL，制得对照药材溶液；
其中沉香对照药材为中国食品药品检定研究院批号为121222-201203的沉香，超声处理的功率为300W，频率为40KHz，温度为35℃；
对照品溶液：取6，7-二甲基-2（2-苯乙基）色酮的甲醇溶液制成每1mL含0.05mg的对照品溶液；
S3：薄层色谱检测：吸取供试品溶液1-12、对照药材溶液和对照品溶液各5μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为10:1的三氯甲烷-乙醚为展开剂，展开2次，展距为12cm，取出，晾干，在波长365nm的紫外光灯下检视，结果如图2所示，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，在GF254薄层板上均匀喷涂质量分数为5%的香草醛-硫酸乙醇试液，再将GF254薄层板在105℃下加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
实施例3：一种沉香鉴别方法，包括以下步骤：
S1：制备供试品溶液：取供试沉香粉末1g，加入乙醇溶液30mL，超声处理70min，滤过，滤液定容至25mL，重复操作，制得供试品溶液1-12；
其中供试沉香粉末的颗粒为40目，超声处理的功率为500W，频率为50KHz，温度为40℃；
S2：制备对照药材溶液和对照品溶液：
对照药材溶液：取沉香药材0.5g，加入乙醇溶液30mL，超声处理70min，滤过，滤液定容至25mL，制得对照药材溶液；
其中沉香对照药材为中国食品药品检定研究院批号为121222-201203的沉香，超声处理的功率为500W，频率为50KHz，温度为40℃；
对照品溶液：取6，7-二甲基-2（2-苯乙基）色酮的甲醇溶液制成每1mL含0.05mg的对照品溶液；
S3：薄层色谱检测：吸取供试品溶液1-12、对照药材溶液和对照品溶液各5μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为10:1的三氯甲烷-乙醚为展开剂，展开2次，展距为12cm，取出，晾干，在日光下检视，结果如图3所示，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，在GF254薄层板上均匀喷涂质量分数为5%的香草醛-硫酸乙醇试液，再将GF254薄层板在105℃下加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
对比例
对比例1：参考《中国药典》2015年版一部沉香鉴别方法：
供试品的制备：取本品粉末0.5g，加乙醚30ml，超声处理60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，作为供试品溶液A。
对照药材溶液的制备：另取沉香对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液B。
照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚(10∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm波长下检视，结果参见图3，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
对比例2：参考《中国药典》2015年版一部沉香鉴别方法：
供试品的制备：取本品粉末0.5g，加乙醚30ml，超声处理60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，作为供试品溶液C。
对照药材溶液的制备：另取沉香对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液D。
照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚(10∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm波长下检视，结果参见图3，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
对比例3：参考《中国药典》2015年版一部沉香鉴别方法：
供试品的制备：取本品粉末0.5g，加乙醚30ml，超声处理60分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷2ml使溶解，作为供试品溶液E。
对照药材溶液的制备：另取沉香对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液F。
照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚(10∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，置日光下检视，结果参见图3，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
图1中在254nm的紫外波长下，供试品溶液与对照药材溶液、对照药品溶液色谱相应的位置上，显示相同颜色的荧光斑点；图2中在365nm的紫外波长下，供试品溶液与对照药材溶液、对照药品溶液色谱相应的位置上，显示相同颜色的荧光斑点；图3在日光下，供试品溶液与对照药材溶液、对照药品溶液色谱相应的位置上，显示相同颜色的荧光斑点，表示该批沉香供试品符合该项检测标准。
对比例1和实施例1的区别在于，对比例1中未设置对照药品溶液，由图4中的色谱信息可以看出，在254nm波长下，供试品溶液的色谱斑点不清晰，观察到的色谱信息不完全。
对比例2和实施例1的区别在于，对比例2中未设置对照药品溶液，且在365nm紫外波长下检视，虽然比对比例1中在254nm的紫外波长下观察到的色板斑点清晰，但与实施例1相比，色谱信息不完全，且斑点不够清晰，说明设置对照药品溶液能够使色谱信息完全。
对比例3和对比例1的区别在于，未设置对照药品溶液，且在日光下检测，由图6和图1中的色谱斑点可以看出，图6中的色谱斑点不清晰，且色谱信息不完全，由此可以看出，设置对照药品溶液且在日光下进行检视，能够得到比单一波长检视更加全面的样品信息。
本具体实施例仅仅是对本发明的解释，其并不是对本发明的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本发明的权利要求范围内都受到专利法的保护。

Claims (8)

1.一种沉香的鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：制备供试品溶液：取供试沉香粉末1g，加入甲醇溶液20-30mL，超声处理50-70min，滤过，滤液定容至25mL，制得供试品溶液；
S2：制备对照药材溶液和对照品溶液：
对照药材溶液：取沉香药材0.5g，加入甲醇溶液20-30mL，超声处理50-70min，滤过，滤液定容至25mL，制得对照药材溶液；
对照品溶液：取6，7-二甲基-2（2-苯乙基）色酮的甲醇溶液制成每1mL含0.05mg的对照品溶液；
S3：薄层色谱检测：吸取供试品溶液、对照药材溶液和对照品溶液各5μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为10-15:1的甲醇-冰乙酸为展开剂，展开2次，取出，晾干，分别在波长254nm和365nm的紫外光灯下检视，并在日光下进行检测，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，供试品色谱中，在与对照色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
2.根据权利要求1所述的沉香的鉴别方法，其特征在于，所述步骤S3中，在对照对照药品溶液的荧光斑点前，在GF254薄层板上均匀喷涂质量分数为5%的香草醛-硫酸乙醇试液，再将GF254薄层板在104-106℃下加热至斑点显色清晰。
3.所述步骤S3中在将三种溶液点在GF254薄层板上之前，先将GF254薄层板放入温度为100-250℃的烘箱中活化25-30min，冷却后取出。
4.根据权利要求1所述的沉香的鉴别方法，其特征在于，所述步骤S2中的沉香对照药材为中国食品药品检定研究院批号为121222-201203的沉香。
5.根据权利要求1所述的沉香的鉴别方法，其特征在于，所述步骤S1和步骤S3中，超声处理的功率为100-500W；超声处理的频率为30-50KHz；超声处理的温度为30-40℃。
6.根据权利要求1所述的沉香的鉴别方法，其特征在于，所述步骤S1中供试沉香粉末的颗粒为30-40目的粉末。
7.根据权利要求1所述的沉香的鉴别方法，其特征在于，所述供试沉香粉末由沉香在-15至-20℃下粉碎制得。
8.根据权利要求1所述的沉香的鉴别方法，其特征在于，所述步骤S3中三种溶液的展距均为11-12cm。
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