CN105349430A - 色二孢菌及其促进沉香属植物产生沉香的应用 - Google Patents

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CN105349430A CN201510715717.9A CN201510715717A CN105349430A CN 105349430 A CN105349430 A CN 105349430A CN 201510715717 A CN201510715717 A CN 201510715717A CN 105349430 A CN105349430 A CN 105349430A
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Abstract

本发明提供了5株色二孢菌及其促进沉香属植物产生沉香的应用。本发明提供了的5株色二孢菌属于真菌界(Fungi),子囊菌门(Ascomycota),座囊菌纲(Dothideomycetes),葡萄座腔菌目(Botryosphaeriales),葡萄座腔菌科(Botryosphaeriaceae),毛色二孢属(Lasiodiplodia)。本发明提供了的5株色二孢菌从白木香中分离获得,对沉香的形成具有促进作用,具有结香速度快和提高沉香品质的特点,对沉香生产有着重要的意义。

Description

色二孢菌及其促进沉香属植物产生沉香的应用
技术领域
本发明涉及微生物及微生物应用领域,具体涉及色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)及其促进沉香属植物产生沉香的应用。
背景技术
沉香为瑞香科(Thymelaeaceae)沉香属(Aquilaria)植物含有树脂的木材,沉香的形成非常特殊,健康的白木香不能产生沉香类物质,只有受到物理伤害、化学伤害及真菌侵染等外界的伤害后才诱导结香。质量高的沉香需要几年甚至几十年方能形成。由于天然沉香形成的特殊性及结香周期长,所以结香技术成为研究的热点。
本课题通过对白木香微生物的研究发现真菌对沉香的形成发挥着重要的作用,找到能有效提高沉香品质的菌株应用于生产有着重要的意义。
发明内容
针对上述问题,本发明提供了5株能促进沉香形成的色二孢菌及其应用,该5株色二孢菌的菌株粉剂或膏剂、菌株发酵液、除菌后的滤液、及菌液/滤液浓缩制剂可促进沉香属植物结香。
本发明提供的色二孢菌的优点是:结香菌株接菌沉香属植株2个月后即可促进沉香形成,随着时间延长,沉香变厚。
第一方面,本发明提供了一种色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae),其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为:CGMCCNO.9591、9592、9593、9595或ASAF04。
本发明共提供了5株色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae),分别命名为色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)2CXW3、2CXW2、2CXW11、ASAF12、ASAF04;均为从白木香的结香层中分离获得,能促进沉香的形成,对沉香的产业化有着重要的意义。5株色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)有4株均已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC,地址为:中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所),保藏号分别为:CGMCCNO.9591、9592、9593、9595。
说明:该保藏编号为CGMCCNO.9591的可可毛色二孢的相关保藏信息如下:
保藏日期:2014年09月09日;保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心;保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号;保藏编号:CGMCCNO.9591;分类命名:Lasiodiplodiatheobromae。
说明:该保藏编号为CGMCCNO.9592的可可毛色二孢的相关保藏信息如下:
保藏日期:2014年09月09日;保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心;保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号;保藏编号:CGMCCNO.9592;分类命名:Lasiodiplodiatheobromae。
说明:该保藏编号为CGMCCNO.9593的可可毛色二孢的相关保藏信息如下:
保藏日期:2014年09月08日;保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心;保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号;保藏编号:CGMCCNO.9593;分类命名:Lasiodiplodiatheobromae。
说明:该保藏编号为CGMCCNO.9595的可可毛色二孢的相关保藏信息如下:
保藏日期:2014年09月09日;保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心;保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号;保藏编号:CGMCCNO.9595;分类命名:Lasiodiplodiatheobromae。
本发明所述的色二孢菌属于真菌界(Fungi),子囊菌门(Ascomycota),座囊菌纲(Dothideomycetes),葡萄座腔菌目(Botryosphaeriales),葡萄座腔菌科(Botryosphaeriaceae),毛色二孢属(Lasiodiplodia)。
在本发明一实施方式中,色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)2CXW3(CGMCCNO.9591)的rDNA的ITS长度为520bp,序列为序列表中SEQUENCENO.1所示的核苷酸序列。
在本发明一实施方式中,色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)2CXW2(CGMCCNO.9592)的rDNA的ITS长度为516bp,序列为序列表中SEQUENCENO.2所示的核苷酸序列。
在本发明一实施方式中,色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)2CXW11(CGMCCNO.9593)的rDNA的ITS长度为518bp,序列为序列表中SEQUENCENO.3所示的核苷酸序列。
在本发明一实施方式中,色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)ASAF12(CGMCCNO.9595)的rDNA的ITS长度为541bp,序列为序列表中SEQUENCENO.4所示的核苷酸序列。
在本发明一实施方式中,色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)ASAF04的rDNA的ITS长度为541bp,序列为序列表中SEQUENCENO.5所示的核苷酸序列。
本发明提供的所述5株色二孢菌的在PDA培养基上的形态特征为:在PDA的培养基上,菌落生长初期为白色,慢慢变成灰绿色最后变成灰色,只是各菌株之间颜色变化的周期各有不同。菌落匀质状,边缘整齐;菌丝纤细,有叉状分枝,不易产孢。
第二方面,本发明提供了5株色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)中的至少一种在促进沉香属(Aquilaria)植物产生沉香中的应用,其中,所述5株色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)的保藏编号为CGMCCNO.9591、CGMCCNO.9592、CGMCCNO.9593、CGMCCNO.9595和ASAF04。
第三方面,本发明提供了至少一种5株色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)的菌株、菌丝(优选为菌丝粉剂或菌丝膏剂)、菌株发酵液、发酵液除菌获得的滤液、菌株发酵液/菌株发酵液滤液浓缩制剂中的一种或多种在制备促进沉香属(Aquilaria)、拟沉香属(Gyrinops)或其他诱导型植物结香的结香剂中的应用,其中,所述5株色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)的保藏编号为CGMCCNO.9591、CGMCCNO.9592、CGMCCNO.9593、CGMCCNO.9595和ASAF04。
第四方面,本发明提供了一种结香剂,其活性成分包括至少一种色二孢菌的(Lasiodiplodiatheobromae)菌株、菌丝(优选为菌丝粉剂或菌丝膏剂)、菌株发酵液、发酵液除菌获得的滤液、菌株发酵液/菌株发酵液滤液浓缩制剂中的一种或多种,其中,所述5株色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)的保藏编号为CGMCCNO.9591、CGMCCNO.9592、CGMCCNO.9593、CGMCCNO.9595和ASAF04。
如本发明所述的,“除菌后滤液中的活性成分”包括但不限于为由如下方法制备:采用本领域常规的分离提纯方法,提取到的可作为促香剂的成分,所述的促香剂为促进沉香属(Aquilaria)、拟沉香属(Gyrinops)或其他诱导型植物结香的结香剂。
如本发明所述的,“菌株发酵液”的获得方法优选为将如第一方面所述的色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)菌株接种于温度为15-30℃(优选为30℃)的液体培养基中培养,得到菌株发酵液。所述液体培养基的pH值可以为pH5-11(优选为pH7和/或8);具体的培养基可以为液体PDA培养基,培养的时间可以为3-15天,培养的方式可以为摇床培养或发酵罐发酵。培养的温度为30℃。
如本发明所述的,所述“菌株发酵液/菌株发酵液滤液浓缩制剂”表示“菌株发酵液浓缩制剂或菌株发酵液除菌后的滤液浓缩制剂”。
如本发明所述的,所述菌丝可制备成菌丝粉剂或膏剂。
为便于运输、存储和产业化应用,在所述的微生物菌株、菌丝、菌株发酵液、菌株发酵液浓缩制剂和/或微生物发酵液过滤菌体后的滤液中,加入药学上可接受的赋形剂或载体,可制备成各种剂型,比如溶液剂、注射剂、胶囊剂、颗粒剂、片剂、膏剂中的至少一种。可以理解的是,在具体应用时,各种剂型的微生物促香剂可以加水溶解制备成膏状或溶液,便于输液、刷涂、喷涂;比如,采用输液法时,将各剂型加水制备成溶液即可。
本发明一个实施方式中,所述的微生物促香剂的剂型为微生物和/或微生物发酵液过滤菌体后的滤液的溶液剂、注射剂、胶囊剂、颗粒剂、片剂、膏剂中的至少一种,进一步优选为菌丝胶囊剂、颗粒剂或菌液的溶液剂或注射剂。
第五方面,本发明提供了一种促进沉香属(Aquilaria)、拟沉香属(Gyrinops)或其他诱导型植物产生沉香的方法,是将本发明第四方面所述的结香剂接种于沉香属(Aquilaria)植物根、茎和/或分枝上。
本发明利用色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)菌株、菌丝(优选为菌丝粉剂或菌丝膏剂)、菌株发酵液、除菌的滤液、菌株发酵液/菌株发酵液滤液浓缩制剂促进结香,具体的技术方案为:将色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)菌株、菌丝(优选为菌丝粉剂或菌丝膏剂)、菌株发酵液、除菌的滤液、菌株发酵液/滤液浓缩制剂作为结香剂中的至少一种接种到白木香根、茎或分枝上。
如本发明所述的,所述对产沉香植物进行处理并接种的方法包括行业常用的诱导沉香的处理方法,产沉香植物经处理后可形成接种口、接种孔、接种沟等接种区域;可采用本发明提供的微生物促香剂喷、刷、涂或填充在接种区域,至获得点状和/或点线状沉香。
本发明一个实施方式中,包括但不限于采用输液法、网状法、钻孔接菌、斜切法、饼状切口法、钻孔接菌中的至少一种对产沉香植物进行处理。优选地,上述的接种方式为输液法和网状法。
如本发明所述的,所述的“输液法、网状法、钻孔接菌、斜切法、饼状切口法、钻孔接菌”优选为如本发明人另一篇专利所述(申请号为201510630892.8)。
所述通体结香技术接种优选为:将接种色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)发酵菌液、发酵液去除菌体后的滤液、菌株发酵液浓缩制剂、菌株发酵液滤液浓缩制剂中的至少一种直接用通体结香法输入沉香属的树上通过输液装置注入沉香属(Aquilaria)植物,利用植物的蒸腾作用疏导至植物茎干、枝条、根等各器官,促使整个植株内部结香;所述钻洞接种为在待接种的沉香属(Aquilaria)植物自根部到地上50cm-1m处部位钻洞,洞深至3-5cm,将上述接种色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)菌株、菌丝(优选为菌丝粉剂或菌丝膏剂)、菌株发酵液、除菌的滤液、滤液中的活性成分、菌株发酵液/菌株发酵液滤液浓缩制剂中的至少一种注入洞中。进一步优选地,所述通体结香技术接种方式中,所得的菌液和无菌滤液直接用通体结香法输入沉香属的树上。
如本发明所述的,在所述的第二、三、四、五方面中,所述沉香属(Aquilaria)植物包括但不限于马来沉香(Aquilariamalaccensis),越南沉香(Aquilariacrassna)或白木香(Aquilariasinensis);优选为白木香(Aquilariasinensis)。所述白木香的树龄优选为6年以上的白木香。
本发明提供的5株色二孢菌的优点是:在pH5-11和温度15-30℃的条件下仍能生长,说明具有很强的环境耐受力。色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)接种2个月后可促进沉香形成,随着结香时间的延长,形成的沉香品质比较好。
附图说明
图1为本发明实施例提供的色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)2CXW3、2CXW2、2CXW11、ASAF12和ASAF04的菌株促进白木香树结香结果;
图2-6分别为本发明实施例3的色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)2CXW3、2CXW2、2CXW11、ASAF12或ASAF04的菌落形态图;
图7为本发明实施例提供的色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)2CXW3、2CXW2、2CXW11、ASAF12和ASAF04的菌株促进白木香树所结沉香的薄层鉴定结果。
具体实施方式
以下所述是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。
本发明实施例中无特别说明外,所用试剂及耗材均为市售商品。
下述实施例中的方法,如无特别说明,均为常规方法。
下述实施例中的百分含量,如无特别说明,均为质量百分含量。
下述实施例中所用的PDA液体培养基:称量去皮马铃薯200g,切成小块,加水煮30min,纱布过滤,加葡萄糖20g,最后定容至1L。固体PDA培养基为:称量去皮马铃薯200g,切成小块,加水煮30min,纱布过滤,加葡萄糖20g,加15-20g琼脂,最后定容至1L。
实施例1色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)菌株的分离和筛选
本发明利用组织分离法进行菌株分离。具体方法如下所述:在海南省南药园和琼中沉香湾采取天然的沉香样品,在水龙头下冲洗30min,然后用70%的酒精消毒3-5min,用无菌水冲洗3次,然后用10%(质量百分浓度)的次氯酸钠浸泡5min,再用无菌水冲洗3次,然后切成3mm-3mm的小段放在含有链霉素的培养基中,最后一次无菌水作对照。3d后每天检查并挑取菌株并纯化,直至2周。
将分离到的菌株在PDA液体培养基培养3-15d,接种真菌菌丝、或者利用输液法输入菌株发酵液、除菌滤液,含滤液中的活性成分的提取液对白木香进行结香处理,分别发现有5株菌株接种2个月后木质部沉香层轮廓清晰可见。所得5株菌株分别命名为2CXW3、2CXW2、2CXW11、ASAF12或ASAF04菌株。具体方法如下:
1、接种材料的获得2CXW3、2CXW2、2CXW11、ASAF12或ASAF04菌株接种于液体培养基获得菌液,加入生长营养剂获得液剂、粉剂或膏剂。
2、接种:以白木香(A.sinensis(Lour.)Gilg)为接种对象进行接种,接种方法如下:
通体结香技术接种:在6年树龄的白木香上,自根部到地上50cm-1m处部位钻洞,洞深至3-5cm,孔径约1cm,分别将菌液、滤液、浓缩制剂分别通过输液装置利用植物的蒸腾作用疏导至植物茎干、枝条、根等各器官,促使整个植株内部结香。每次输液200-500mL。本实施例中设置1个输液孔。在其他实施例中,每棵树可设置1个或多个输液孔,可每隔50至200cm设置一个输液。
结果表明,上述接种方式2个月均可以使白木香结香,2CXW3、2CXW2、2CXW11、ASAF12或ASAF04菌液的结香效果分别如图1A、B、C、D、E所示。
通过对色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)2CXW3、2CXW2、2CXW11、ASAF12或ASAF04菌株进行形态学观察发现:在PDA的培养基上,菌落白色,匀质状,边缘整齐;菌丝纤细,有叉状分枝,不易产孢。各菌在PDA的培养基上随时间变化的形态如图2-6所示。
其中,图2为本发明的色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)2CXW3菌株真菌形态学特征观察。B1-B4分别为第1天的菌落(正面)、第1天的菌落(反面)、第二天的菌落(正面)、第5天的菌落(正面)2CXW3菌落形态。由图2可知,菌株生长迅速,第一天菌落白色开始产生黄色色素。第二天菌落开始变绿,第5天的菌落颜色变灰绿色。
图3为本发明的色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)2CXW2菌株真菌形态学特征观察。B1-B4分别为第1天的菌落(正面)、第2天的菌落(正面)、第2天的菌落(反面)、第5天的菌落(正面),由图3可知,第1天菌落为白色,第2天菌落为白色并开始产生黄色色素,第3天菌落颜色开始变绿,第5天的菌落颜色变深灰绿色。
图4为本发明的色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)2CXW11菌株真菌形态学特征观察。B1-B4分别为第1天的菌落(正面)、第2天的菌落(正面)、第2天的菌落(反面)、第5天的菌落(正面),由图4可知,第一天菌落为白色,第二天菌落开始变绿并产生黄色色素,图为第5天的菌落颜色变深灰绿色。
图5为本发明的色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)ASAF12菌株真菌形态学特征观察。B1-B2分别为第2天的菌落(正面)、第5天的菌落(正面),由图5可知,第2天菌落为浅绿色,第5天菌落颜色变为深灰色。
图6为本发明的色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)ASAF04菌株真菌群落形态特征观察。B1-B2分别为第1天的菌落(正面)、第5天的菌落(正面),由图6可知,第1天菌落为白色,第5天菌落颜色变为深灰色。
实施例2色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)菌株的分子生物学鉴定
由于菌株不产孢,对色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)2CXW3、2CXW2、2CXW11、ASAF12或ASAF04菌株进行ITS序列鉴定:提取2CXW3菌株DNA,以SEQUENCENO.6:ITS1(5′-TCCGATGGTGAACCTGCGG-3′)和SEQUENCENO.7:ITS4(5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′)为引物进行PCR扩增,PCR扩增测序获得520bp的ITS序列,将获得的序列在Genbank数据库中进行Blast比对,结果显示其序列与LasiodiplodiatheobromaestrainGNF6(AccessionNo.KJ612075.1)同源性达99%,通过形态特征和分子特征将其鉴定为色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)2CXW3。
色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)2CXW3已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC,地址为:中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所),保藏号为:CGMCCNO.9591。
按照本实施例同样的方法,对色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)、2CXW2、2CXW11、ASAF12、ASAF04分别进行形态学及ITS序列鉴定,结果如下表格2所示:
表2.各色二孢形态及分子学鉴定结果
实施例3色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)菌株生长条件检测
将色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)2CXW3的菌丝接种于含有固体PDA培养基的培养皿中心,在分别设置为10℃、15℃、20℃、25℃、28℃、30℃、35℃的恒温箱中培养,结果发现,色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)2CXW3在15℃至30℃条件均能生长,其中30℃最适合生长,35℃生长很慢。用0.1mol/LHCL和0.1mol/LNaOH调节PDA培养基的pH值,制成PH值分别为5、6、7、8、9、10、11的液体PDA培养基,将菌丝接种置于不同pH值的液体PDA培养基中,在30℃200转/分摇床培养,结果发现,菌株在pH5至pH11均能生长,最适pH值为7。
采用与实施例3相同的实验条件,分别对色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)2CXW2、2CXW11、ASAF12、ASAF04进行生长条件检测。具体结果参见表3。
表3.色二孢菌生存条件
菌名 生存温度范围 最适生存温度 生存pH范围 最适生存pH
2CXW3 15-35℃ 30 5-11 7
2CXW2 15-35℃ 30 5-11 7
2CXW11 15-35℃ 30 5-11 7
ASAF12 15-35℃ 30 5-11 8
ASAF04 15-35℃ 30 5-11 7和8
实施例4色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)促进沉香产生效果验证
为更进一步说明本发明的有益效果;本发明将实施例1获得的结香2个月的白木香分别砍下,剖香,然后进行薄层鉴定。
具体方法为:取实施例1获得的2CXW3、2CXW2、2CXW11、ASAF12、ASAF04菌株接种2个月获得的沉香样品粉末1g置于具塞三角瓶中,加甲醇25ml,超声处理60min,过滤,滤液定容至25ml,作为供试品溶液。野生沉香药材(中国药典规定的对照药材,购自中国药品检定研究院,批号:121222201102)的样品和优等的野生沉香(2012年购于海南沉香博览会)及健康白木香(茎部磨成粉末),制备方法同上分别作为对照药材溶液,取6,7-二甲氧基-2(2-苯乙基)色酮加甲醇配制成每毫升含0.05mg6,7-二甲氧基-2(2-苯乙基)色酮的色酮对照品溶液。吸取供试品溶液、对照药材溶液和色酮对照品溶液各5μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以三氯甲烷-乙醚(v﹕v=10﹕1)为展开剂,展开两次,取出晾干,置紫外光灯(365nm)下检视,拍照。
2CXW3、2CXW2、2CXW11、ASAF12、ASAF04菌株结香层析图如图7所示。图中的BK为健康的白木香,ST为色酮对照(6,7-二甲氧基-2(2-苯乙基)色酮加甲醇),A、B、C、D、E为2CXW3、2CXW2、2CXW11、ASAF12、ASAF04菌株接种(滤液3用通体结香技术输液的沉香)2个月的沉香。结果表明,色二孢菌(Lasiodiplodiatheobromae)2CXW3、2CXW2、2CXW11、ASAF12、ASAF04菌株接种2个月后可促进沉香的形成,和野生沉香斑点接近。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.色二孢菌,其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCCNO.9591、CGMCCNO.9592、CGMCCNO.9593、CGMCCNO.9595或ASAF04。
2.如权利要求1所述的色二孢菌,其特征在于,所述保藏编号为CGMCCNO.9591、CGMCCNO.9592、CGMCCNO.9593、CGMCCNO.9595和ASAF04中的至少一种色二孢菌在促进沉香属、拟沉香属或其他诱导型植物产生沉香中的应用。
3.如权利要求1所述的色二孢菌,其特征在于,所述保藏编号为CGMCCNO.9591、CGMCCNO.9592、CGMCCNO.9593、CGMCCNO.9595和ASAF04中的至少一种色二孢菌的菌株、菌丝、菌株发酵液、发酵液除菌获得的滤液、滤液中的活性成分、菌株发酵液浓缩制剂、菌株发酵液滤液浓缩制剂中的一种或多种作为促进沉香属、拟沉香属或其他诱导型植物结香的结香剂中的应用。
4.一种结香剂,其特征在于,包括如权利要求1所述的保藏编号为CGMCCNO.9591、CGMCCNO.9592、CGMCCNO.9593、CGMCCNO.9595和ASAF04中的至少一种色二孢菌的菌株、菌丝、菌株发酵液、发酵液除菌获得的滤液、菌株发酵液浓缩制剂、菌株发酵液滤液浓缩制剂中的一种或多种。
5.如权利要求3或4所述的菌株发酵液的获得方法为将色二孢菌接种于温度为15-30℃的液体培养基中培养,得到菌株发酵液。
6.一种促进沉香属、拟沉香属或其他诱导型植物产生沉香的方法,其特征在于,是将如权利要求3或4所述的结香剂接种于沉香属、拟沉香属或其他诱导型植物的根、茎和/或分枝上。
7.如权利要求6所述的促进沉香属、拟沉香属或其他诱导型植物产生沉香的方法,其特征在于,所述接种方式为输液法、网状法、斜切法、饼状切口法、钻孔接菌中的至少一种。
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