CN109536283A - 一种提高品质的苏合香油的制备方法及其应用 - Google Patents
一种提高品质的苏合香油的制备方法及其应用 Download PDFInfo
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Abstract
一种提高品质的苏合香油的制备方法，采用烟杆、玉米芯、甘蔗渣吸附复合微生物、酶制剂，温育水解发酵苏合香树皮榨取树脂后的残渣，再通过水蒸气蒸馏技术提取制备苏合香挥发油，具有清新花香、奶香、桂皮油和肉桂香气、温和辛香、柠檬香等丰富自然的香气，刺激性降低，香料品质提高，提取率提高，原料价廉易得，工艺条件温和；在卷烟烟丝和卷烟纸中应用，协调烟香，并具有清新花香、奶香、桂皮油和肉桂香气、温和辛香、柠檬香等丰富香气，降低刺激性，改善口感。
Description
技术领域
本发明涉及烟用添加剂领域，具体涉及一种提高品质的苏合香油的制备方法及其应用。
背景技术
烟用添加剂为改善烟草理化性能的助剂，包括香料香精、保润剂、助燃剂、防霉剂和吸附剂。低焦油卷烟的生产更需要加香加料以弥补烟香的不足。烟制品加香加料的目的在于掩盖天然烟草的刺激性和杂气等，并提高或改善其香味。天然香料因其天然性、安全性和自然复合的香气，更迎合消费者对健康的需求，但仍然具有提取效率较低、溶剂残留多、杂质含量高、纯度较低、纯化步骤复杂导致成本高，有些因特征香气显著，会导致外加香气掩盖烟香等缺陷。
苏合香为金缕梅科植物苏合香树LiquidambarorientalisMill.所分泌的树脂(因为产地得名，《本草纲目》说:"此香出苏合国，因以名之")。又名帝膏(侯宁极《药谱》)，苏合油(《太平寰宇记》)，苏合香油(《局方》)，帝油流(《现代实用中药》)。苏合香为刺激性祛痰药，并有较弱的抗菌作用，可用于各种呼吸道感染。
天然提取物通常采用常规的水提、醇提等制备方法，在提取香味物质的同时，还带有对卷烟吸味不利的蛋白质、鞣质、淀粉、果胶、纤维素、木质素及其他大分子物质，增香的同时也具有增加刺激性、杂气和残留感的缺陷。
生物产香技术是利用微生物工程、酶工程、细胞培养、基因改造等生物技术，通过微生物代谢出特定香气成分，从而提升产品质量的一门新技术。在生物产香技术制备天然香料的过程中，多采用悬浮微生物发酵，这种方式同样存在天然浸膏和提取物类香料产品得率低下、产品质量不稳定、纯化步骤复杂、成本高等缺陷，严重阻碍了生物产香天然香料的应用推广。
目前有专利“一种含有降香和苏合香的药物组合物、制备方法和制剂”(授权号ZL200610014193.1)公开了一种治疗冠心病的中药组合物，以丹参、三七、降香油和红花或者丹参、三七、苏合香和红花为原料药制成：将丹参、三七、红花混合或单独制成水提液或醇提液，进行初步澄清处理，然后超滤，将超滤液浓缩，加入降香油或苏合香，按常规方法制成制剂，该发明药物对缺血心肌细胞再灌注心肌细胞坏死性变化有良好的保护作用；专利“一种苏合香型鼻烟”(授权号ZL201310013441.0)公开了一种由纯天然原料制成的苏合香型鼻烟及其制备方法，由含苏合香6-14份(重量份的)天然原料组成，该苏合香型鼻烟可提神醒脑，能使鼻腔通气，并且可辅助戒烟；专利“烟用苏合香浸膏及其制备方法”(授权号ZL201510173828.1)公开了制备方法：干燥苏合香破碎后，与果糖、乙酸，加入到70-95％的乙醇溶液中，浸泡后加热回流提取2-5h，冷却过滤浓缩，得到苏合香浸膏；还公开了一种含有烟用苏合香浸膏的卷烟，该卷烟烟香丰富，甜感强，烟气的干燥感低，辛辣感以及刺激性弱，并且烟气中的有害成分苯并[a]芘、苯酚明显降低。
而将苏合香树皮榨取树脂后的残渣作为原料，采用烟杆、玉米芯、甘蔗渣吸附复合生物制剂，进行水解发酵预处理，然后通过水蒸气蒸馏提取挥发油，并在卷烟烟丝和卷烟纸中应用，具有丰富香气、止咳祛痰、增强喉部舒适性的作用。
发明内容
根据上述不足，本发明的目的是提供一种提高品质的苏合香油的制备方法及其应用，采用烟杆、玉米芯、甘蔗渣吸附复合微生物、酶制剂，温育水解发酵苏合香树皮榨取树脂后的残渣，再通过水蒸气蒸馏技术提取制备苏合香挥发油，具有清新花香、奶香、桂皮油和肉桂香气、温和辛香、柠檬香等丰富自然的香气，刺激性降低，香料品质提高，提取率提高，原料价廉易得，工艺条件温和；在卷烟烟丝和卷烟纸中应用，协调烟香，并具有清新花香、奶香、桂皮油和肉桂香气、温和辛香、柠檬香等丰富香气，降低刺激性，改善口感。
本发明通过以下技术方案实现：
一种提高品质的苏合香油的制备方法，包括如下步骤：
(1)原料前处理：苏合香树皮榨取树脂后的残渣，经粉碎机粉碎至40目～120目粉末；
(2)微生物菌株的活化：将扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)和植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)VP4-4的活性固体冻干菌粉，加入到5～20倍质量的灭菌处理的质量浓度为5～30％葡萄糖或果糖溶液中，置于35～50℃水浴锅活化30～60min，得到微生物菌株活化液，其中所述的植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)VP4-4保藏号为CCTCC NO：M 2012005，2012年1月11日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心；
(3)固定化载体制备：将烟杆、玉米芯、甘蔗渣洗净烘干，将烟杆、玉米芯处理成约1cm，与甘蔗渣按一定比例混合，经高压灭菌后烘干，得到混合固定化载体；
(4)微生物菌株和酶的固定化处理：将一定量上述步骤(3)灭菌烘干后的混合固定化载体，装入微滤袋中，放入容器，按照固定化载体与微生物菌株活化液质量比为1:1～10，加入已培养好的活化液，再加入一定量的α-L-呋喃阿拉伯糖苷酶，混合均匀，放置于4±0.5℃冷藏柜固定12～72h，得到生物制剂-固定化载体；
(5)吸附水解发酵：将步骤(1)所得苏合香树皮残渣粉末与5～15倍质量的水混合均匀，加入步骤(4)所述装有生物制剂-固定化载体的微孔滤袋，其中生物制剂-固定化载体与苏合香树皮残渣粉末质量比为1:2.1～4，在温度为35～65℃，匀速搅拌，添加肉桂酸调节pH值为4.0～6.0，发酵1～6d，取出微孔滤袋，得到苏合香发酵液与残渣混合物；
(6)水蒸气蒸馏：将步骤(5)苏合香发酵液与残渣混合物，转入蒸馏器中，加热至沸腾，水蒸气冷凝后静置过夜，取油状物，为苏合香油A；
(7)液液萃取：将步骤(6)中的苏合香蒸馏残液与残渣中，加入苏合香树皮残渣粉末质量1～15倍的乙酸乙酯，加入一定量的醋酸锌，55～75℃加热回流2～6h，减压抽滤保留滤液，45～55℃减压浓缩得到苏合香油B；
(8)将步骤(6)和步骤(7)的苏合香油A、B按一定比例复配，得到本发明的提高品质的苏合香油。
进一步的，所述步骤(2)中的扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)和植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)VP4-4均为食品级，活力分别为10～30u/mg，葡萄糖、果糖为食品级。
进一步的，所述步骤(3)中烟杆、玉米芯、甘蔗渣之间的质量比为1:0.5～2：0.5～2。
进一步的，所述步骤(4)中α-L-呋喃阿拉伯糖苷酶为食品级，酶活为100～2000u/g，与所述步骤(2)的复合活性固体冻干菌粉按质量比为1:0.5～2。
进一步的，所述步骤(5)中肉桂酸为食品级，匀速搅拌的转速为20～80rpm。
进一步的，所述步骤(7)中的乙酸乙酯为食品级。
进一步的，所述步骤(7)中的醋酸锌为分析纯级，占苏合香残渣粉末质量的0.1～1％。
进一步的，所述步骤(7)中的苏合香油B的相对密度为1.0～1.2。
进一步的，所述步骤(8)中的苏合香油A和B按质量比1:100～1000复配混匀。
本发明还提供一种上述方法制备的提高品质的苏合香油在卷烟配方烟丝中加香的应用，所述苏合香油的添加量为卷烟配方烟丝的0.01～0.08ppm。
本发明还提供一种上述方法制备的提高品质的苏合香油在卷烟纸中的应用，所述苏合香油的添加量为卷烟纸的0.1～0.8ppm。
本发明的优点：
(1)采用烟杆、玉米芯、甘蔗渣作为复合生物制剂吸附固定化的载体，其中晾晒烟杆是烟草本源物质，含有的纤维素吸附作用强，玉米芯的纤维底物吸附性能强、含有大量木糖成分，而甘蔗渣约有50％的纤维，吸附能力强，也含有一定糖分，三者按一定比例混合后，其协同作用下吸附微生物菌株效率高、不易解吸，后期与发酵物液过滤分离容易；
(2)苏合香树皮经榨取树脂后的残渣中，仍含有大量致香物质和其他活性成分，当溶解在水中，与吸附在烟杆、玉米芯、甘蔗渣固定化载体上的复合生物制剂的复杂酶体系下，进行酸性条件下的温育水解发酵，生物产香效果好，且与菌株分离容易。其中扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)具有产淀粉酶、β-葡萄糖苷酶、酸性蛋白酶等特性，能够高效降解苏合香残渣粉末细胞壁中及游离的纤维素、淀粉、纤维二糖、蔗糖等大分子物质，转化为葡萄糖，并进一步转化为酯香为主的香味物质和乙醇，增加清新酒香，将非挥发性糖苷转化成挥发性的香气物质，产香产酯除杂味，破坏细胞壁更多地释放细胞中的活性化学物质，提高产率和增加香气自然复杂性；植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)VP4-4具有产β-半乳糖苷酶活性转化非挥发性糖苷为挥发性香气物质、转化细胞壁和游离阿魏酸合成天然香兰素的能力，能分解利用葡萄糖、蔗糖、鼠李糖、麦芽糖、松二糖、海藻糖等糖类物质产醇、酯、酸等香气成分，使苏合香残渣发酵液中带有香兰素及其香味前体物质等奶香气成分，并破坏细胞壁释放更多有效成分，提高提取率。α-L-呋喃阿拉伯糖苷酶作用于6-O-β-L-阿拉伯呋喃-β-D-吡喃糖苷，使双糖糖苷之间的双糖连接断开，分别产生α-L-呋喃阿拉伯糖和β-D-吡喃糖苷，后者在扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)具有的β-葡萄糖苷酶活性作用下，产生葡萄糖和相应配糖基，释放出被键合的芳香物质。在这微生物产香菌株和糖苷酶的协同强效联合作用下，更好地转化非挥发性糖苷为挥发性香气成分，更有效地分解细胞壁中的纤维素、纤维二糖、阿魏酸释放胞内活性成分，降解多糖类物质为挥发性致香小分子成分，且能将部分葡萄糖转化为乙醇，释放到发酵液中，形成发酵液自然复合丰富的清新花香、桂皮油和肉桂香气、温和辛香、柠檬香，经简单过滤即可与带有微生物菌株的固定化载体分离，步骤简单；
(3)再结合水蒸气蒸馏提取的苏合香油A，以及第二步液液乙酸乙酯-水萃取的苏合香油B，并复配，工艺条件温和，生产时间较短，致香成分尽量多的提取出来，且萃取过程中添加醋酸铝进一步吸附发酵液中残留的影响吸味的杂质如鞣质成分，进一步增香减杂。
总的来说，本发明使得杂质大分子成分包括蛋白质、纤维素、多糖、淀粉等分解、转化为香味物质，杂质杂味减少，刺激性降低，香气种类自然复杂性增加，具有清新花香、奶香、桂皮油和肉桂香气、温和辛香、柠檬香等丰富自然的香气，刺激性降低，香气品质提高；生产工艺条件温和、步骤简单、易操作、提取率高；本发明还提供一种上述方法制备的提高品质的苏合香油，按0.01～0.08ppm的质量比，在卷烟配方烟丝中加香和按0.1～0.8ppm的质量比在卷烟纸中的应用，协调烟香，并具有清新花香、奶香、桂皮油和肉桂香气、温和辛香、柠檬香等丰富香气，降低刺激性，改善口感。
具体实施方式
以下具体实施例对本发明进行详细地说明。
实施例1
一种提高品质的苏合香油的制备方法，包括如下步骤：
(1)原料前处理：苏合香树皮榨取树脂后的残渣，经粉碎机粉碎至40目粉末；
(2)微生物菌株的活化：将扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)和植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)VP4-4的活性固体冻干菌粉，加入到5倍质量的灭菌处理的质量浓度为5％葡萄糖或果糖溶液中，置于35℃水浴锅活化30min，得到微生物菌株活化液，其中所述的植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)VP4-4保藏号为CCTCC NO：M2012005，2012年1月11日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心；
(3)固定化载体制备：将烟杆、玉米芯、甘蔗渣洗净烘干，将烟杆、玉米芯处理成约1cm，与甘蔗渣按一定比例混合，经高压灭菌后烘干，得到混合固定化载体；
(4)微生物菌株和酶的固定化处理：将一定量上述步骤(3)灭菌烘干后的混合固定化载体，装入微滤袋中，放入容器，按照固定化载体与微生物菌株活化液质量比为1:1，加入已培养好的活化液，再加入一定量的α-L-呋喃阿拉伯糖苷酶，混合均匀，放置于4±0.5℃冷藏柜固定12h，得到生物制剂-固定化载体；
(5)吸附水解发酵：将步骤(1)所得苏合香树皮残渣粉末与5～15倍质量的水混合均匀，加入步骤(4)所述装有生物制剂-固定化载体的微孔滤袋，其中生物制剂-固定化载体与苏合香树皮残渣粉末质量比为1:2.1，在温度为35℃，匀速搅拌，添加肉桂酸，调节pH值为4.0，发酵1d，取出微孔滤袋，得到苏合香发酵液与残渣混合物；
(6)水蒸气蒸馏：将步骤(5)苏合香发酵液与残渣混合物，转入蒸馏器中，加热至沸腾，水蒸气冷凝后静置过夜，取油状物，为苏合香油A；
(7)液液萃取：将步骤(6)中的苏合香蒸馏残液与残渣中，加入苏合香树皮残渣粉末质量1倍的乙酸乙酯，加入一定量的醋酸锌，55℃加热回流2h，减压抽滤保留滤液，45℃减压浓缩得到苏合香油B；
(8)将步骤(6)和步骤(7)的苏合香油A、B按一定比例复配，得到苏合香油。
进一步的，所述步骤(2)中的扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)和植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)VP4-4均为食品级，活力均为10u/mg，葡萄糖、果糖为食品级；
进一步的，所述步骤(3)中烟杆、玉米芯、甘蔗渣之间的质量比为1:0.5：0.5。
进一步的，所述步骤(4)中α-L-呋喃阿拉伯糖苷酶为食品级，酶活为100u/g，与所述步骤(2)的复合活性固体冻干菌粉按质量比为1:0.5。
进一步的，所述步骤(5)中肉桂酸为食品级，匀速搅拌的转速为20rpm。
进一步的，所述步骤(7)中的乙酸乙酯为食品级。
进一步的，所述步骤(7)中的醋酸锌为分析纯级，占苏合香残渣粉末质量的0.1％。
进一步的，所述步骤(7)中的苏合香油B的相对密度为1.02。
进一步的，所述步骤(8)中的苏合香油A和B按质量比1:100复配混匀。
上述方法制备的提高品质的苏合香油，按0.02ppm的质量比，在卷烟配方烟丝中加香应用，与烟香协调，具有清新花香、奶香、桂皮油和肉桂香气、温和辛香、柠檬香等丰富香气，降低刺激性，改善口感。
实施例2
一种提高品质的苏合香油的制备方法，包括如下步骤：
(1)原料前处理：苏合香树皮榨取树脂后的残渣，经粉碎机粉碎至80目粉末；
(2)微生物菌株的活化：将扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)和植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)VP4-4的活性固体冻干菌粉，加入到13倍质量的灭菌处理的质量浓度为18％葡萄糖或果糖溶液中，置于42℃水浴锅活化45min，得到微生物菌株活化液，其中所述的植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)VP4-4保藏号为CCTCC NO：M2012005，2012年1月11日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心；
(3)固定化载体制备：将烟杆、玉米芯、甘蔗渣洗净烘干，将烟杆、玉米芯处理成约1cm，与甘蔗渣按一定比例混合，经高压灭菌后烘干，得到混合固定化载体；
(4)微生物菌株和酶的固定化处理：将一定量上述步骤(3)灭菌烘干后的混合固定化载体，装入微滤袋中，放入容器，按照固定化载体与微生物菌株活化液质量比为1:5，加入已培养好的活化液，再加入一定量的α-L-呋喃阿拉伯糖苷酶，混合均匀，放置于4±0.5℃冷藏柜固定48h，得到生物制剂-固定化载体；
(5)吸附水解发酵：将步骤(1)所得苏合香树皮残渣粉末与5～15倍质量的水混合均匀，加入步骤(4)所述装有生物制剂-固定化载体的微孔滤袋，其中生物制剂-固定化载体与苏合香树皮残渣粉末质量比为1:3.2，在温度为50℃，匀速搅拌，添加肉桂酸调节pH值为5.0，发酵3d，取出微孔滤袋，得到苏合香发酵液与残渣混合物；
(6)水蒸气蒸馏：将步骤(5)苏合香发酵液与残渣混合物，转入蒸馏器中，加热至沸腾，水蒸气冷凝后静置过夜，取油状物，为苏合香油A；
(7)液液萃取：将步骤(6)中的苏合香蒸馏残液与残渣中，加入苏合香树皮残渣粉末质量8倍的乙酸乙酯，加入一定量的醋酸锌，65℃加热回流4h，减压抽滤保留滤液，50℃减压浓缩得到苏合香油B；
(8)将步骤(6)和步骤(7)的苏合香油A、B按一定比例复配，得到苏合香油。
进一步的，所述步骤(2)中的扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)和植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)VP4-4均为食品级，活力分别为20u/mg，葡萄糖、果糖为食品级；
进一步的，所述步骤(3)中烟杆、玉米芯、甘蔗渣之间的质量比为1:1:1。
进一步的，所述步骤(4)中α-L-呋喃阿拉伯糖苷酶为食品级，酶活为1100u/g，与所述步骤(2)的复合活性固体冻干菌粉按质量比为1:1。
进一步的，所述步骤(5)中肉桂酸为食品级，匀速搅拌的转速为50rpm。
进一步的，所述步骤(7)中的乙酸乙酯为食品级。
进一步的，所述步骤(7)中的醋酸锌为分析纯级，占苏合香残渣粉末质量的0.5％。
进一步的，所述步骤(7)中的苏合香油B的相对密度为1.15。
进一步的，所述步骤(8)中的苏合香油A和B按质量比1:500复配混匀。
上述方法制备的提高品质的苏合香油，按0.4ppm的质量比在卷烟纸中加香应用，嗅香清新，燃吸时与烟香协调，具有清新花香、奶香、桂皮油和肉桂香气、温和辛香、柠檬香等丰富香气，降低刺激性，增强喉部舒适性。
实施例3
一种提高品质的苏合香油的制备方法，包括如下步骤：
(1)原料前处理：苏合香树皮榨取树脂后的残渣，经粉碎机粉碎至120目粉末；
(2)微生物菌株的活化：将扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)和植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)VP4-4的活性固体冻干菌粉，加入到20倍质量的灭菌处理的质量浓度为5～30％葡萄糖或果糖溶液中，置于50℃水浴锅活化30～60min，得到微生物菌株活化液，其中所述的植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)VP4-4保藏号为CCTCC NO：M 2012005，2012年1月11日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心；
(3)固定化载体制备：将烟杆、玉米芯、甘蔗渣洗净烘干，将烟杆、玉米芯处理成约1cm，与甘蔗渣按一定比例混合，经高压灭菌后烘干，得到混合固定化载体；
(4)微生物菌株和酶的固定化处理：将一定量上述步骤(3)灭菌烘干后的混合固定化载体，装入微滤袋中，放入容器，按照固定化载体与微生物菌株活化液质量比为1:10，加入已培养好的活化液，再加入一定量的α-L-呋喃阿拉伯糖苷酶，混合均匀，放置于4±0.5℃冷藏柜固定72h，得到生物制剂-固定化载体；
(5)吸附水解发酵：将步骤(1)所得苏合香树皮残渣粉末与5～15倍质量的水混合均匀，加入步骤(4)所述装有生物制剂-固定化载体的微孔滤袋，其中生物制剂-固定化载体与苏合香树皮残渣粉末质量比为1:4，在温度为65℃，匀速搅拌，添加肉桂酸调节pH值为6.0，发酵6d，取出微孔滤袋，得到苏合香发酵液与残渣混合物；
(6)水蒸气蒸馏：将步骤(5)苏合香发酵液与残渣混合物，转入蒸馏器中，加热至沸腾，水蒸气冷凝后静置过夜，取油状物，为苏合香油A；
(7)液液萃取：将步骤(6)中的苏合香蒸馏残液与残渣中，加入苏合香树皮残渣粉末质量15倍的乙酸乙酯，加入一定量的醋酸锌，75℃加热回流6h，减压抽滤保留滤液，55℃减压浓缩得到苏合香油B；
(8)将步骤(6)和步骤(7)的苏合香油A、B按一定比例复配，得到苏合香油。
进一步的，所述步骤(2)中的扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)和植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)VP4-4均为食品级，活力分别为10～30u/mg，葡萄糖、果糖为食品级；
进一步的，所述步骤(3)中烟杆、玉米芯、甘蔗渣之间的质量比为1:2:2。
进一步的，所述步骤(4)中α-L-呋喃阿拉伯糖苷酶为食品级，酶活为2000u/g，与所述步骤(2)的复合活性固体冻干菌粉按质量比为1:2。
进一步的，所述步骤(5)中肉桂酸为食品级，匀速搅拌的转速为80rpm。
进一步的，所述步骤(7)中的乙酸乙酯为食品级。
进一步的，所述步骤(7)中的醋酸锌为分析纯级，占苏合香残渣粉末质量的1％。
进一步的，所述步骤(7)中的苏合香油B的相对密度为1.2。
进一步的，所述步骤(8)中的苏合香油A和B按质量比1:1000复配混匀。
将上述方法制备的苏合香油，按0.8ppm的质量比在卷烟纸中加香应用，嗅香清新自然，燃吸时协调烟香，具有清新花香、奶香、桂皮油和肉桂香气、温和辛香、柠檬香等丰富香气，降低刺激性，改善口感。
试验例1：应用的感官效果对比评价
将实施例1-3吸附发酵制备的提高品质的苏合香油与空白对照，在卷烟烟丝和卷烟纸中添加，分别进行感官评价对比实验。
结果表明(如表1所示)：本发明制备的提高品质的苏合香油在卷烟烟丝和卷烟纸中的应用，协调烟香，并具有清新花香、奶香、桂皮油和肉桂香气、温和辛香、柠檬香等丰富香气，降低刺激性，改善口感。
表1.苏合香油应用的感官对比评价
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何属于本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求的保护范围为准。
Claims (10)
1.一种提高品质的苏合香油的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)原料前处理：苏合香树皮榨取树脂后的残渣，经粉碎机粉碎至40目～120目粉末；
(2)微生物菌株的活化：将扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)和植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)VP4-4的活性固体冻干菌粉，加入到5～20倍质量的灭菌处理的质量浓度为5～30％葡萄糖或果糖溶液中，置于35～50℃水浴锅活化30～60min，得到微生物菌株活化液，其中所述的植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)VP4-4保藏号为CCTCC NO：M 2012005，2012年1月11日保藏于武汉大学中国典型培养物保藏中心；
(3)固定化载体制备：将烟杆、玉米芯、甘蔗渣洗净烘干，将烟杆、玉米芯处理成约1cm，与甘蔗渣按一定比例混合，经高压灭菌后烘干，得到混合固定化载体；
(4)微生物菌株和酶的固定化处理：将一定量上述步骤(3)灭菌烘干后的混合固定化载体，装入微滤袋中，放入容器，按照固定化载体与微生物菌株活化液质量比为1:1～10，加入已培养好的活化液，再加入一定量的α-L-呋喃阿拉伯糖苷酶，混合均匀，放置于4+0.5℃冷藏柜固定12～72h，得到生物制剂-固定化载体；
(5)吸附水解发酵：将步骤(1)所得苏合香树皮残渣粉末与5～15倍质量的水混合均匀，加入步骤(4)所述装有生物制剂-固定化载体的微孔滤袋，其中生物制剂-固定化载体与苏合香树皮残渣粉末质量比为1:2.1～4，在温度为35～65℃，匀速搅拌，添加肉桂酸调节pH值为4.0～6.0，发酵1～6d，取出微孔滤袋，得到苏合香发酵液与残渣混合物；
(6)水蒸气蒸馏：将步骤(5)苏合香发酵液与残渣混合物，转入蒸馏器中，加热至沸腾，水蒸气冷凝后静置过夜，取油状物，为苏合香油A；
(7)液液萃取：将步骤(6)中的苏合香蒸馏残液与残渣中，加入苏合香树皮残渣粉末质量1～15倍的乙酸乙酯，加入一定量的醋酸锌，55～75℃加热回流2～6h，减压抽滤保留滤液，45～55℃减压浓缩得到苏合香油B；
(8)将步骤(6)和步骤(7)的苏合香油A、B按一定比例复配，得到本发明的提高品质的苏合香油。
2.如权利要求1所述的提高品质的苏合香油的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中的扣囊复膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)和植生拉乌尔菌(Raoultellaplanticola)VP4-4均为食品级，活力分别为10～30u/mg，葡萄糖、果糖为食品级。
3.如权利要求1所述的提高品质的苏合香油的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中烟杆、玉米芯、甘蔗渣之间的质量比为1:0.5～2：0.5～2。
4.如权利要求1所述的提高品质的苏合香油的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中α-L-呋喃阿拉伯糖苷酶为食品级，酶活为100～2000u/g，与所述步骤(2)的复合活性固体冻干菌粉按质量比为1:0.5～2。
5.如权利要求1所述的提高品质的苏合香油的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中肉桂酸为食品级，匀速搅拌的转速为20～80rpm。
6.如权利要求1所述的提高品质的苏合香油的制备方法，其特征在于：所述步骤(7)中的醋酸锌为分析纯级，占苏合香残渣粉末质量的0.1～1％。
7.如权利要求1所述的提高品质的苏合香油的制备方法，其特征在于：所述步骤(7)中的苏合香油B的相对密度为1.0～1.2。
8.如权利要求1所述的提高品质的苏合香油的制备方法，其特征在于：所述步骤(8)中的苏合香油A和B按质量比1:100～1000复配混匀。
9.一种如权利要求1-8中任一项所述方法制备的苏合香油在卷烟配方烟丝中加香的应用，所述苏合香油的添加量为卷烟配方烟丝的0.01～0.08ppm。
10.一种如权利要求1-8中任一项所述方法制备的苏合香油在卷烟纸中的应用，所述苏合香油的添加量为卷烟纸的0.1～0.8ppm。
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