CN109526741A - 一种中红杨诱导植株再生的培养方法 - Google Patents

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孙红英
辛全伟
罗海凌
严少娟
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Abstract

本发明属于植物培养技术领域，具体涉及一种中红杨诱导植株再生的培养方法。中红杨不定芽诱导培养基配方包括以下成分和含量：MS+0.5mg L‑16‑BA+0.2 mg L‑1 NAA+30 g L‑1蔗糖。本发明筛选出一种不定芽诱导培养基配方，达到稳定再生的目的，可以进行工厂化生产，为市场提供大量的苗木。本发明的中红杨诱导植株再生方法，不仅可以简化操作过程，而且可以降低生产成本，达到更高的经济效益。

Description

一种中红杨诱导植株再生的培养方法
技术领域
本发明属于植物培养技术领域，具体涉及一种中红杨诱导植株再生的培养方法。
背景技术
中红杨（原名中华红叶杨）（Populus × euramericana ‘zhonghong’）是黑杨派杨树2025的芽变品种，2006年获得国家林业局新品种保护权。中红杨是目前国内唯一的杨树红叶品种, 叶面色彩鲜亮明快，颜色三季四变，观赏价值极高，是园林彩叶树种中成景速度最快的良种，在通道绿化、城乡美化 、城区绿化中都具有十分广阔的应用前景，市场潜力巨大。中红杨作为绿化树种，以适种区域广、见效快、效益大等优点，深受广大生产者和经营者的青睐。然而，随着城市、园林、道路绿化建设力度的加大，优良红叶速生杨苗木紧缺的问题日益突出。通过植物组织培养技术，可以快速繁殖出大量的无菌苗木，满足彩叶市场对苗木的需求。此外，通过建立稳定的植物再生体系，为进一步转基因研究奠定基础。
发明内容
本发明的目的在于提供一种中红杨诱导植株再生的培养方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
中红杨不定芽诱导培养基配方包括以下成分和含量：MS + 0.5 mg L-1 6-BA + 0.2 mgL-1 NAA + 30 g L-1蔗糖，pH5.8。
所述一种中红杨诱导植株再生的培养方法，具体步骤为：（1）以中红杨组培苗叶片为材料；（2）在超净工作台上将中红杨叶片切成大小为4 mm × 4 mm的块状；（3）将切下的叶片背部朝下接种到不定芽诱导培养基中；（4）将接种后的瓶苗放于组培室内培养，培养室光照每天16 h光照 + 8 h暗处理，温度25+2°C，相对湿度60%，培养30d观察统计不定芽再生率。
本发明的显著优点在于：
本发明筛选出一种不定芽诱导培养基配方，达到稳定再生的目的，可以进行工厂化生产，为市场提供大量的苗木。本发明的中红杨诱导植株再生方法，不仅可以简化操作过程，而且可以降低生产成本，达到更高的经济效益。
具体实施方式
为进一步公开而不是限制本发明，以下结合实例对本发明作进一步的详细说明。
实施例1
所述一种中红杨诱导植株再生的培养方法，试验采用L9 (34)正交实验设计，以MS为基本培养基，分别添加：细胞分裂素6-BA，生长素NAA，蔗糖。6-BA设计为三个浓度梯度：0.1 mgL-1，0.5 mg L-1，1.0 mg L-1；NAA设计三个梯度浓度为：0.1 mg L-1，0.2 mg L-1，0.3 mg L-1；蔗糖三个梯度为10 g L-1，20 g L-1，30 g L-1。
具体步骤为：（1）以中红杨组培苗叶片为材料；（2）在超净工作台上将中红杨叶片切成大小为4 mm × 4 mm的块状；（3）将切下的叶片背部朝下接种到不定芽诱导培养基中；（4）将接种后的瓶苗放于组培室内培养，培养室光照每天16 h光照 + 8 h暗处理，温度25+2°C，相对湿度60%，培养30d观察统计不定芽再生率。
表1 不同处理对不定芽再生影响的正交实验设计L9 (34)
表2 不同浓度6-BA、NAA和蔗糖对不定芽诱导的影响
最终优选出，中红杨不定芽诱导最优的培养基为：MS + 0.5 mg L-1 6-BA + 0.2 mg L-1 NAA + 30 g L-1蔗糖。
对照组：以WPM为基本培养基，其配方为WPM + 0.5 mg L-1 6-BA + 0.2 mg L-1 NAA+ 30 g L-1蔗糖为对照组，此配方不定芽再生率仅为29%，不定芽再生率较低，且再生芽较细，生长较慢。
本发明直接从中红杨叶片直接再生不定芽，省掉了诱导愈伤组织阶段，获得了较高的不定芽诱导率，为工厂化育苗提供技术支持，为转基因提供高效的可试材料。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本发明的涵盖范围。

Claims (2)

1.一种中红杨诱导植株再生的培养方法，其特征在于：中红杨不定芽诱导培养基配方包括以下成分和含量：MS + 0.5 mg L-1 6-BA + 0.2 mg L-1 NAA + 30 g L-1蔗糖，pH5.8。
2.根据权利要求1所述的一种中红杨诱导植株再生的培养方法，其特征在于：具体步骤为：（1）以中红杨组培苗叶片为材料；（2）在超净工作台上将中红杨叶片切成大小为4 mm ×4 mm的块状；（3）将切下的叶片背部朝下接种到中红杨不定芽诱导培养基中；（4）将接种后的瓶苗放于组培室内培养，培养室光照每天16 h光照 + 8 h暗处理，温度25+2℃，相对湿度60%，培养30d观察统计不定芽再生率。
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RJ01 Rejection of invention patent application after publication
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