CN109517018B - 一种索磷布韦新晶型及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种索磷布韦新晶型及其制备方法。本发明的索磷布韦新晶型的粉末X‑射线衍射在2θ为8.1±0.2°、10.4±0.2°、12.4±0.2°、16.9±0.2°、17.2±0.2°、19.4±0.2°、20.1±0.2°、20.9±0.2°处有特征峰。本发明索磷布韦新晶型堆密度高，流动性好，更有利于干法制粒操作,避免含水体系中析晶过程，制备工艺条件温和，能耗低，操作简单，无粘稠胶状物及结块现象出现，不堵塞反应釜下料，质量稳定可控，工艺成本低，适合产业化生产，为索非磷韦药物的制备提供了一种新途径。

Description

一种索磷布韦新晶型及其制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种索磷布韦新晶型及其制备方法。

背景技术

丙型肝炎，是一种由丙型肝炎病毒(HCV)感染引起的病毒性肝炎，其可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可发展为肝硬化甚至肝细胞癌(HCC)，对患者的健康和生命危害极大。

丙型肝炎呈全球性流行，据世界卫生组织统计，全球有超过2亿感染者，并且每年至少有300～400万新增感染者。目前针对丙肝的治疗主要是单用重组β干扰素或联合使用核苷类似物利巴韦林的免疫治疗，临床效果有限。

索磷布韦(Sofosbuvir)，是美国吉利德药物公司开发用于治疗慢性丙肝的新药，是首个无需联合干扰素就能安全有效治疗某些类型丙肝的药物，于2013 年12月6日经美国食品药品监督管理局(FDA)批准在美国上市，2014年1月16 日经欧洲药品管理局(EMEA)批准在欧盟各国上市。

索磷布韦是一种丙型肝炎病毒核苷类似物NS5B聚合酶抑制剂，化学名为 (S)-2-{(S)-[((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-二氧代-3,4-二氢-2H-嘧啶-1-基)-4-氟-3-羟基-4- 甲基四氢呋喃-2-基)甲氧基]-(苯氧基)磷酰基氨基}-丙酸异丙酯，结构如式1所示：

WO2011123645中描述了索磷布韦的七种晶型：形式1、形式2、形式3、形式4、形式5、形式6和无定形。其中，形式1为非溶剂化形式，形式2为1:1二氯甲烷溶剂化物，形式3为1:1氯仿溶剂化物，形式4和5分别为从乙腈和茴香醚溶液获得的结晶。形式2-5均为不稳定晶型，在过滤和/或干燥后均转化为形式1。形式1 的熔点为94℃，在粉末X-射线图中，具有以下衍射角度(2θ)的特征峰：5.0°、 7.3°、9.4°和18.1°。形式1引湿性强，在湿度大的环境条件下，粘性增加，过滤困难，且不利于制剂产品制备。将形式1悬浮于水中，可转化为形式6。形式6的熔点为124.5～126℃，在粉末X-射线图中，具有以下衍射角度(2θ)的特征峰：6.1°、8.2°、10.4°、12.7°、17.2°、17.7°、18.0°、18.8°、19.4°、19.8°、20.1°、20.8°、 21.8°和23.3°。形式6相对于形式1引湿性降低，且由于从水中结晶还除去了极性更高的痕量杂质，纯度也得到提高，具有重要临床应用意义。但形式6结晶过程时间长、工艺条件难以控制、重现性差；结晶工艺不稳定，过程中易得到其它晶型如晶型7或晶型8；在制备过程中形成大量粘稠胶状物并结块，无法进行粒径检测，不利于搅拌，也不利于放料，增加了规模化生产难度；水中结晶，干燥困难；且由于形式6为块状固体，制剂使用前需粉碎，不仅增加生产周期，且有物料损失，增加了生产成本。

中国专利申请CN105801645A描述了索磷布韦晶型6(即形式6，下同)改进的制备方法：将索磷布韦溶解于甲醇中，将该溶液缓慢滴加到预热至50℃的纯化水中，并加入索磷布韦晶型6作为晶种。滴加完成后保温搅拌约3～4小时析晶，然后降温至0℃搅拌2～3小时，过滤，滤饼在60℃真空干燥至恒重，得索磷布韦晶型6。该制备方法仍然是在大量水中结晶，物料易结块；溶剂量大，不适合大量生产；物料从水中分离，干燥困难，干燥温度高，60℃下干燥产品存在变质风险。

中国专利申请CN106496295A描述了另一种索磷布韦晶型6的制备方法： 5-10℃，在单口烧瓶中将索磷布韦晶型1完全溶解于叔丁醇中得索磷布韦的叔丁醇溶液，然后将该醇溶液转入恒压滴液漏斗中，备用。向配有机械搅拌的反应器中加入水，开启机械搅拌，转速为230转/分钟，室温下(10℃-35℃)，将索磷布韦叔丁醇溶液通过恒压滴液漏斗缓慢滴入水溶液中，耗时约60分钟，滴毕可得乳白色悬浊液。继续室温(10℃-35℃)搅拌24小时析晶，用200目-300目滤布过滤，滤饼用水淋洗一次，45℃-50℃真空干燥20小时(真空度-0.008MPa)，得索磷布韦晶型6产品。该制备方法仍是从大量水中析晶，滴加索磷布韦的醇溶液需严格控制速度，否则易结块；搅拌析晶时间长，通常需要24小时，不利于工业化应用；长时间剧烈搅拌下获得的晶型不稳定，易得到其它晶型如晶型7或晶型8。

中国专利申请CN104829673A描述了另一种索磷布韦晶型6的制备方法：将索氟布韦与环戊基甲醚及苯甲醚混合，加热此混合物至75±3℃并于20转/分钟下搅拌使固体完全溶解，接着在90分钟内冷却至10±3℃并在此温度下静置48小时，通过过滤取出析出的白色粉末状晶体，用3毫升异丙醚洗涤后烘干获得索磷布韦晶型6产品。该制备方法静置或搅拌析晶时间长，不利于工业化应用；重现性差，CN106496295A中描述该技术方案不可复制，使用该方法未能析出固体。

中国专利CN 105873593 A描述了索磷布韦晶型7的制备方法：蒸馏索磷布韦在四氢呋喃和乙酸异丙酯混合溶剂中的溶液，共沸去除四氢呋喃，温度调节至约 60-70℃并保持4小时直到形成浆液。浆液经至少10小时冷却至约15-25℃，并保持至少8小时。然后，以均匀速率经至少1小时加入正庚烷。过滤，用乙酸异丙酯和正庚烷的混合物清洗。在温度不超过40℃的真空炉中干燥。该制备方法析晶时间长，不利于工业化应用；物料密度小，易堵塞下料口，难以压成带状物，不利于干法制粒操作。

发明内容

针对现有技术存在问题，本发明人对索磷布韦结晶进行了大量研究，终于找到了一种制备工艺简单、稳定可控，适合工业化生产，且所得晶型更有利于制剂工艺开发的索磷布韦新结晶。

因此，本发明一方面提供一种索磷布韦晶型(本发明中称之为β晶型)，其特征在于，使用Cu-Kα辐射，以2θ角度(°)表示的粉末X-射线衍射在以下位置有特征峰：8.1±0.2°、10.4±0.2°、12.4±0.2°、16.9±0.2°、17.2±0.2°、19.4±0.2°、 20.1±0.2°、20.9±0.2°。

优选地，本发明的索磷布韦晶型，其特征在于，使用Cu-Kα辐射，以2θ角度(°)表示的粉末X-射线衍射在以下位置有特征峰：8.1±0.2°、10.4±0.2°、12.4±0.2°、13.5±0.2°、16.3±0.2°、16.9±0.2°、17.2±0.2°、18.7±0.2°、19.4±0.2°、 20.1±0.2°、20.9±0.2°。

更优选地，在本发明的一些实施方案中，所述的索磷布韦晶型，使用Cu-Kα辐射，以2θ角度(°)表示的粉末X-射线衍射图中，8.1±0.2°为最强峰；10.4±0.2°、 12.4±0.2°、16.9±0.2°、17.2±0.2°、19.4±0.2°、20.1±0.2°、20.9±0.2°的相对峰强度至少为15％；13.5±0.2°、16.3±0.2°和18.7±0.2°的相对峰强度至少为10％。

进一步优选地，在本发明的一些实施方案中，所述的索磷布韦晶型，使用 Cu-Kβ辐射，其具有基本上如附图1或2任一所示的粉末X-射线衍射图谱。术语“基本上如附图所示”是指基本上纯净的某种晶型其粉末X-射线衍射图谱中至少90％，或至少95％，或至少96％，或至少97％，或至少98％，或至少99％的峰出现在所给出粉末X-射线衍射图谱中。

本发明另一方面还提供一种索磷布韦β晶型的制备方法，包括如下步骤：将索磷布韦粗品溶解于溶剂1中，控温25～45℃，任选加入晶种，向索磷布韦的上述溶液中缓慢加入部分溶剂2，搅拌析晶0.5～1小时，再加入剩余的溶剂2，任选降温至5～10℃，继续搅拌析晶1～2小时，分离固体，35～50℃真空干燥得索磷布韦β晶型。其中，溶剂1选自乙醇、异丙醇、正丁醇、丙酮，溶剂2选自正庚烷、异丙醚。

优选地，粗品与溶剂量的质量体积比(w/v)为粗品:溶剂1:溶剂 2＝1:2～3:10～15，优选为1:2.5～3:12～15。

优选地，溶剂2首次加入量与溶剂1加入量的体积比为1～2:1，优选为1:1。

优选地，所述干燥步骤的压力优选为真空度＞0.090Mpa；干燥时间优选为 4～10h，更优选为4～8h。

本发明中所述索磷布韦粗品，可采用现有技术中公开的任何已知方法进行制备，如下述文献公开的索磷布韦的制备方法：CN101918425A、CN102459299A、 CN102906102A、CN102858790A、CN104130302A以及WO2010135569等。

所述索磷布韦粗品可以包括任何固体形态，如已知的无定形，或在本发明背景技术中提到的形式1～7等晶型，或其它现有技术中晶型；也可以为各种纯度，纯度可以在80％以上，在90％以上较好，在95％以上更好，在99％以上最好。

本发明另一方面还提供一种药物组合物，包含上述索磷布韦β晶型及药学上可接受的载体，任选地，所述药物组合物还可存在其它治疗组分。

当所述药物组合物包含上述β晶型及药学上可接受的载体时，可将其制成口服制剂，可以为固体制剂，如片剂、胶囊、颗粒剂，也可以为液体制剂，如口服液、混悬液；也可将其制成注射制剂，如水针、粉针剂或冷冻干燥制剂等。这些制剂可采用本领域一般技术人员公知的相应辅料，采用相应公知的药物制剂的制备技术制得。

所述其它治疗组分能与索磷布韦产生协同作用，在抗丙肝病毒感染治疗时特别有利。

本发明另一方面还提供上述索磷布韦β晶型或包含其的药物组合物在制备抗丙肝病毒感染药物中的应用。

本发明的索磷布韦β晶型的有益效果在于：

1、本技术获得的晶型产品堆密度高，流动性好，更有利于干法制粒操作。

2、避免含水体系中析晶过程，无粘稠胶状物及结块现象出现，而是形成均匀的分散体系，不堵塞反应釜下料口。

3、制备工艺条件温和，能耗低，操作简单，质量稳定可控，工艺成本低，适合产业化生产：

1)操作时间：本发明技术方案描述的转晶操作时间短，更利于高效的工业生产。

2)溶剂用量：本发明所描述的结晶体系为有机溶剂体系，溶剂用量相比于现有技术方案偏少。

3)干燥条件：产品从有机溶剂中析出，相比于水中析出的物料易干燥，干燥温度低，干燥时间短。

4、工艺稳定性良好，可持续稳定获得索磷布韦晶型，并经过工业化级别验证。

附图说明

图1：本发明的实施例1的索磷布韦β晶型的粉末X-射线衍射图。

图2：本发明的实施例4的索磷布韦β晶型的粉末X-射线衍射图。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或者按照制造厂商所建议的条件。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域技术人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

以下实施例中，粉末X-射线衍射谱附图的检测条件如下：

仪器：德国BRUKER D2PHASER粉末X射线衍射仪

条件：Cu辐射，Ni单色器，管压30kV，管流10mA，2θ扫描范围3-50°，扫描速度4°/分，步长0.02°。

制备例：索磷布韦形式1的制备(参照CN102858790A)

将20kg索磷布韦(参照CN102858790A公开方法进行制备，下同)溶于100L 二氯甲烷，然后将溶液在5℃蒸发，干燥后获得形式1的索磷布韦18kg，HPLC 纯度99.4％。

实施例1：索磷布韦β晶型的制备

将100g索磷布韦形式1投入200ml丙酮中，加热至35～45℃，5分钟内缓慢加入异丙醚400ml，搅拌0.5小时后加入200ml异丙醚，冰水浴冷却混合液至 5～10℃继续搅拌1小时后过滤，滤饼用异丙醚洗涤，35～50℃真空干燥4～5小时得索磷布韦β晶型，重量90g，收率90％，XRD检测图谱见附图1，其X射线衍射数据如表1所示：

表1实施例1的索磷布韦β晶型X射线衍射数据

实施例2：索磷布韦β晶型的制备

将112g索磷布韦形式1投入600ml异丙醇中，加热至25～40℃，搅拌下加入约0.6g实施例1制备得到的索磷布韦β晶型作为晶种，继续搅拌0.5小时后缓慢加入正庚烷600ml，搅拌1小时后继续加入正庚烷2400ml，继续搅拌1小时后过滤，滤饼用异丙醇：正庚烷＝1:5洗涤，35～50℃真空干燥7～8小时得索磷布韦β晶型，重量102g，收率91％，其X射线衍射数据如表2所示：

表2实施例2的索磷布韦β晶型X射线衍射数据

2θ(°)	相对强度(％)
		8.046	100.0
10.338	37.4
		12.371	75.2
13.432	15.8
		16.172	10.7
16.762	26.3
		17.162	13.9
18.653	10.0
		19.346	37.1
19.953	29.9
		20.785	29.3

实施例3：索磷布韦β晶型的制备

将164g索磷布韦形式1投入410ml乙醇中，加热至25～40℃，搅拌1小时后缓慢加入正庚烷410ml，保持温度搅拌至体系粘稠时继续加入正庚烷1640ml，加毕继续搅拌1小时，过滤，滤饼用乙醇：正庚烷＝1:2洗涤，35～50℃真空干燥 7～8小时得索磷布韦β晶型，重量154g，收率94％。，其X射线衍射数据如表2 所示：

表3实施例3的索磷布韦β晶型X射线衍射数据

2θ(°)	相对强度(％)
		8.160	100.0
10.438	47.7
		12.457	70.1
13.531	15.3
		16.255	11.0
16.927	17.2
		17.245	27.0
18.755	14.5
		19.443	55.7
20.077	43.5
		20.869	41.0

实施例4：索磷布韦β晶型的制备

将8Kg索磷布韦形式1与25L甲醇加入至溶解罐中，开启搅拌，控制转速 600±100r/min，搅拌30±5min，待固体全部溶解后，开启结晶进料阀门，将反应液通过精制微孔过滤器压滤至结晶罐。控制温度25～35℃，转速600±100r/min，开始滴加25L正庚烷，1小时内滴加完毕，搅拌析晶1小时，加入80L正庚烷，加毕，保温析晶搅拌1小时。料液放入离心机脱干母液，用20L甲醇/正庚烷为 1:5的混合溶液分两次淋洗滤饼，离心甩干20min。将滤饼转移至双锥真空干燥机中控制温度在40～50℃，真空干燥7～8小时，得白色至类白色粉末索磷布韦β晶型7.31Kg，收率91.4％，XRD检测图谱见附图2，其X射线衍射数据如表4 所示：

表4实施例4的索磷布韦β晶型X射线衍射数据

2θ(°)	相对强度(％)
		8.052	100.0
10.345	34.6
		12.363	79.9
13.421	13.2
		16.164	11.1
16.831	19.7
		17.158	26.0
18.645	15.9
		19.351	48.0
19.996	35.4
		20.791	27.7

对比例1：索磷布韦形式6的制备(参照CN102858790A)

将500g索磷布韦形式1加入20L去离子水，加热至50℃，剧烈搅拌1h，在这一过程中，固体开始从溶液中沉淀，形成稀薄的浆状物。历经1.5h将浆状物冷却至20℃，并在20℃保持16小时，接着历经0.5h进一步冷却至0～5℃，并在0～5℃保持2.5h。将浆状物在中等孔度的玻璃烧结漏斗上过滤，并用5L冰冷过的水洗涤。将湿饼抽吸干燥2h，然后在50℃下真空干燥23h，分离得到白色固体440g，HPLC纯度99.5％。

对比例2：索磷布韦晶型6的制备(参照CN105801645A)

将100g索磷布韦形式1溶解于1L甲醇中，将该溶液加入到预热至45℃的 3L纯水中，滴加完成后降温至-15℃搅拌2～3小时，过滤，滤饼在60℃真空干燥至恒重，得白色固体90g，HPLC纯度99.7％

对比例3：索磷布韦晶型6的制备(参照CN106496295A)

10～15℃，在单口烧瓶中将索磷布韦(无定形，参照CN102858790A制备) 100g完全溶解于500mL乙醇中，将所得索磷布韦乙醇溶液转入恒压滴液漏斗中，备用。

向配有机械搅拌的三口烧瓶中加入2L水中，开启机械搅拌，搅拌速度260 转/分钟，10～35℃下，将索磷布韦的乙醇溶液通过恒压滴液漏斗缓慢滴入水溶液中，耗时约15分钟，滴毕得乳白色混悬液，10～35℃下搅拌析晶12h，用中速滤纸过滤，滤饼用15mL水淋洗一次，45-50℃真空干燥16小时(真空度-0.008MPa)，得白色固体90g，HPLC纯度99.7％

对比例4：索磷布韦晶型6的制备(参照CN104829673A)

将100g索磷布韦形式1与1L环戊基甲醚及100mL苯甲醚混合，加热此混合物至75±3℃并于20转/分钟下搅拌使固体完全溶解，接着在90分钟内冷却至 10±3℃并在此温度下静置48h，未能析出晶体，得到油状物，粘壁。

对比例5：索磷布韦晶型7的制备(参照CN105873593A)

将100g索磷布韦粗品溶解于四氢呋喃/乙酸异丙酯(2/1)混合溶液300mL 中，混合液在外浴80℃下进行蒸馏，共沸去除四氢呋喃直至四氢呋喃含量不超过4％，反应液浓缩至5倍体积，再添加700mL的乙酸异丙酯，温度调节至约 60-70℃并保持4小时直到形成浆液。浆液经至少10小时冷却至约15-25℃，并保持至少8小时。然后，以均匀速率经至少1小时加入450mL正庚烷。过滤，用乙酸异丙酯和庚烷的混合物清洗。在温度不超过40℃的的真空炉中干燥，得白色固体89g，纯度99.3％。

将本发明的索磷布韦β晶型与对比例的晶型的制备工艺进行对比，结果见下表：

表5本发明索磷布韦β晶型与对比例晶型的制备工艺对比结果

可以看出，本发明索磷布韦β晶型结晶体系为有机溶剂体系，溶剂用量相比于现有技术方案偏少；产品从有机溶剂中析出，相比于水中析出的物料易干燥，干燥温度低，干燥时间短；无胶状物出现，不堵塞出料口，操作时间短，更利于高效的工业生产。

实施例5：粉体学实验

对本发明的索磷布韦晶型及对比例的索磷布韦晶型，采用智能粉体特性测试仪进行粉体学性质测定，并采用干法制粒工艺进行进一步加工，实验方法如下：

智能粉体特性测试仪：型号：BT-1001，厂家：丹东市百特仪器有限公司。

休止角：在静平衡状态下，粉体堆积斜面与底部水平面所夹锐角叫做休止角。它是通过特定方式使粉体自然下落到特定平台上形成的。休止角大小直接反映粉体的流动性，休止角越小，粉体的流动性越好。选择休止角测试界面，设定参数：测试次数：2，计算方法：边界拟合法，进料速度：4，进料时间：200s，进行加料测定。

堆密度：粉体在特定容器中处于自然充满状态后的密度。

粒径测定：

马尔文激光粒度测定仪：型号：Mastersizer 3000，厂家：Malvern Panalytical。

取样品约0.25g，置激光粒度仪样品盘中，设置振荡进样速率为50％，分散压力为4.0bar，遮光度为0.5-6％，颗粒折射率为1.744，颗粒吸收率为0.01，按干法测定。

干法制粒方法：

干法制粒机：型号：GZL100-25L，厂家：石家庄科源机械设备有限公司。

表6索磷布韦干法制粒处方

组分	用量(g)	比例(％)
			索磷布韦	60.0	33.33
微晶纤维素	53.4	29.67
			甘露醇	54.0	30.0
交联羧甲基纤维素钠	9.0	5.0
			胶态二氧化硅	0.9	0.5
硬脂酸镁	2.7	1.5
			总计	180	100

将处方量的索磷布韦与各种辅料进行混合，然后通过干法制粒机进行制粒：垂直送料速度10-15rpm，水平送料速度50-70rpm，挤压速度5-7rpm，挤压压力 13-18bar，制粒筛网24目。将干法制粒后物料过60目筛，60目筛以上物料占干法制粒后物料的比例即为一次制粒颗粒收率。

表7本发明索磷布韦β晶型与对比例晶型的粉体学特征比较结果

可以看出，本发明的索磷布韦β晶型的粒径D₉₀在5～20μm、堆密度在 0.25～0.35、休止角在42～46°，无需特殊的粉碎整粒，有效改善了索磷布韦的干法制粒性能，在干法制粒机上可实现持续顺畅给料，压制得到连续的带状物，一次制粒收率高，更有利于制剂工艺的开发。

Claims (10)

1.一种索磷布韦晶型，其特征在于，使用Cu-Kα辐射，其具有基本上如附图1或2所示的粉末X-射线衍射图谱。

2.一种权利要求1所述的索磷布韦晶型的制备方法，包括如下步骤：将索磷布韦粗品溶解于溶剂1中，控温25～45℃，任选加入晶种，向索磷布韦的上述溶液中缓慢加入部分溶剂2，搅拌析晶0.5～1小时，再加入剩余的溶剂2，任选降温至5～10℃，继续搅拌析晶1～2小时，分离固体，35～50℃真空干燥得索磷布韦β晶型，其中，溶剂1选自乙醇、异丙醇、正丁醇、丙酮，溶剂2选自正庚烷、异丙醚。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：粗品与溶剂量的质量体积比(w/v)为粗品:溶剂1:溶剂2＝1:2～3:10～15。

4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：粗品与溶剂量的质量体积比(w/v)为粗品:溶剂1:溶剂2＝1:2.5～3:12～15。

5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：溶剂2首次加入量与溶剂1加入量的体积比为1～2:1。

6.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：溶剂2首次加入量与溶剂1加入量的体积比为1:1。

7.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述干燥步骤的压力为真空度＞0.090Mpa，干燥时间为4～10h。

8.一种药物组合物，包含如权利要求1所述的索磷布韦晶型及药学上可接受的载体，任选地，所述药物组合物还可存在其它治疗组分；所述药物组合物剂型为口服制剂。

9.如权利要求8所述药物组合物，剂型为片剂。

10.权利要求1所述的索磷布韦晶型或权利要求8所述的药物组合物在制备抗丙肝病毒感染药物中的应用。

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