CN109453294B - 心脉安在促进毛发生长的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了心脉安的新用途,心脉安用于促进毛发生长,在制备预防或治疗脱发药物中的应用,安全有效,解决了现有治疗脱发的药物米诺地尔和非那雄胺因潜在的副作用和治疗效率低下的问题。
Description
技术领域:
本发明涉及心脉安在促进毛发生长的应用。
背景技术:
毛发作为皮肤的一种附属器官具有美容装饰效果。脱发是指头发脱落的现象。正常脱落的头发都是处于退行期及休止期的毛发,由于进入退行期与新进入生长期的毛发不断处于动态平衡,故能维持正常数量的头发。病理性脱发是指头发异常或过度的脱落,其原因很多,包括激素性脱发、神经性脱发、内分泌脱发、营养性脱发、物理性脱发、化学性脱发、感染性脱发、症状性脱发、先天性脱发、季节性脱发等。
虽然脱发并不会影响身体健康,但却会给脱发者带来严重精神压力。
目前治疗脱发的药物主要为米诺地尔和非那雄胺,但其潜在的副作用和治疗效率的低下限制了它们的应用,如米诺地尔溶液临床上常见的不良反应是头皮的过敏及皮炎;非那雄胺的不良反应有性欲减退、阳痿等。因此急需开发出新的安全有效的治疗脱发的药物。
心脉安包括人参、黄芪、丹参、赤芍、麦冬、冰片,临床用于心悸气阴两虚兼心血瘀阻证(轻中度冠心病室性早搏),症见心悸、气短、胸闷胸痛、疲怠乏力、舌红苔少、脉结、代或促。CN100536890C公开了配方为人参40-200份,黄芪100-500份,丹参400-650份,赤芍50-400份,麦冬50-450份和冰片1.5-4.5份的中药组合物在治疗冠心病心率失常的应用。
心脉安在促进毛发生长的应用目前并没有报导过。
发明内容:
本发明的目的是提供心脉安的新用途,在促进毛发生长的新应用。
本发明是通过以下技术方案予以实现的:
本发明保护心脉安的用途,心脉安在促进毛发生长的应用。
本发明选用器官培养的小鼠触须毛囊作为评价心脉安对毛发生长影响的一个指标,结果显示心脉安促进毛囊中毛干的延长。
由于DPCs(毛乳头细胞)在毛囊的周期循环中起着关键作用,因此我们又从细胞水平检测了心脉安中药组合物对DPCs生长的影响,MTT结果显示心脉安中药组合物可提高DPCs活性,明显促进DPCs的生长。
虽然通过体外实验能够确定心脉安可通过促进DPCs的途径而促进毛干延长,但由于体外实验中的心脉安是通过直接接触DPCs而发挥作用,但尚不清楚心脉安是否能够于体内作用于DPCs进而影响毛囊在体内的生长情况。由于C57BL/C小鼠被毛在8W龄时均处于休止期,脱毛后能统一进入生长期,又因小鼠体表颜色的变化依赖于毛囊中黑色素细胞的变化,且这些黑色素细胞仅仅在毛囊生长期具有促进黑色素颗粒分泌的的作用,因此C57BL/C小鼠是一种理想的检测影响毛发生长药物的动物模型。所以在本发明中我们也选用8w龄的C57BL/C小鼠作为评价中药组合物对毛发生长影响的动物模型。在小鼠背部脱毛后连续灌胃10天,结果显示心脉安可明显促进毛发的生长,同对照组相比,不但能促进毛发的生长速度,同时也增加了再生毛囊的密度。结果说明心脉安可以改善毛周血液循环促进毛发的生长和毛囊的再生,能促进毛母质细胞的增殖。
心脉安在制备预防或治疗脱发药物中的应用。
在制备预防或治疗脱发药物时,还包括药学上可以接受的载体,制备成需要的剂型。特别是心脉安片。
所述心脉安包括人参、黄芪、丹参、赤芍、麦冬、冰片。
优选地,按重量份数,人参40-200份,黄芪100-500份,丹参400-650份,赤芍50-400份,麦冬50-450份和冰片1.5-4.5份。
本发明的有益效果如下:本发明意外发现了心脉安的新用途,促进毛发生长且安全有效,解决了现有治疗脱发的药物米诺地尔和非那雄胺因潜在的副作用和治疗效率低下的问题。
附图说明:
图1是本发明实施例1小鼠触须毛囊的分离和培养实验中不同组别对小鼠触须毛囊中毛干延长的的影响示意图;其中,A、心脉安中药组合物组,B、人参提取物组,C、不含药物组、D、CN 101249140A公开的生发剂组。
图2是实施例2不同组别对DPCs活性的影响示意图,其中,A、心脉安中药组合物组,B、人参提取物组,C、不含药物组。
图3是实施例3不同组别对C57BL/6小鼠背部毛囊的影响示意图;其中,左、人参提取物组,右、心脉安中药组合物组。
具体实施方式:
以下是对本发明的进一步说明,而不是对本发明的限制。
实施例1:对小鼠触须毛囊的分离和培养
心脉安中药组合物促进毛干的延长
心脉安中药组合物、人参提取物组和CN 101249140A公开的生发剂分别制成10mg/ml的储备液存于-20℃备用。参照Philpott(Philpott MP,Green MR,Kealey T.Human hairgrowth in vitro.Cell Sci,1990,97(1):471-476.)的方法进行Williams E无血清培养基的配置,即在Williams E培养基中添加L-谷氨酰胺2mmol/L,HEPES 2mmol/L,氢化可的松10μg/L,牛胰岛素10mg/L,转铁蛋白10mg/L,亚硒酸钠10mg/L,青、链霉素100U/L。将6周龄小鼠处死后取其触须毛囊,在体视镜下将其分离,挑选完好无损的毛囊进行器官培养,从中挑选40根毛囊,随机平分为4组。将毛囊移入24孔培养板中,每孔1根,并加添加配置好的1mlWilliams E无血清培养基,分别添加心脉安中药组合物、人参提取物、CN 101249140A公开的生发剂和空白对照组。将24孔板置于37℃、5%CO2孵箱中悬浮培养5天,48h换液1次。5天后分别测量各组毛囊中毛干的延长长度。
培养第5天,四组毛囊中的毛干均有延长,其中心脉安中药组合物组(A)毛囊中毛干延长长度(0.69±0.09mm)明显大于人参提取物组(B)毛囊中毛干延长长度(0.62±0.01mm)、不含药物组(C)毛囊中毛干延长长度(0.60±0.083mm)和CN 101249140A公开的生发剂组(D)毛囊中毛干延长长度(0.63±0.12mm),统计学比较存在显著性差异(P<0.05),人参提取物组、不含药物和CN 101249140A公开的生发剂组组间毛干延长的长度不存在显著性差异(P>0.05)(图1)。
由此可见,心脉安中药组合物可以促进毛干的延长,效果优于人参提取物和CN101249140A公开的生发剂。
实施例2:心脉安中药组合物对DPCs活性的影响
参照Williams等(Williams D,Profeta K,Stenn KS.Isolation and cultureoffollicular papillae from murine vibrissae:an introductory approach.Brit JDermatol,1994,130(3):290-297)所描述的方法进行DPCs(毛乳头细胞)的分离和培养。简言之,在40倍放大的体视镜下进行毛乳头的显微解剖分离,用30G针头将所分的毛乳头转移至35-mm培养皿中,用针尖将毛乳头周围的包膜划破,每皿放置5个,并添加2ml DMEM+20%FBS,待DPCs迁出后每3d换液1次。细胞融合后采用含有0.25%胰酶消化并1:3传代。传代后的DPC均采用DMEM+10%FBS培养,选取P4DPCs进行后继实验。在接种96孔板前,将P4DPCs的细胞浓度调整为2.5×104/ml,每孔200ul DMEM培养基,实验共分3组,每组6个复孔。24h后给各组换液,分别添加心脉安中药组合物组,人参提取物组和空白对照组,48h换液1次,培养72h后采用ELISA酶标仪在490nm波长条件下读取吸光度OD值。
参照Mosmann(Mosmann T.Rapid colorimetric assay for cellular growthand survival:application to proliferation and cytotoxicity assays.J ImmunolMethods.1983.65(1-2):55–63.)所描述的方法通过MTT法检测心脉安中药组合物对小鼠触须DPCs活性的影响。
结果如图2所示,三组DPCs培养72h后心脉安中药组合物组(A)中DPCs的吸光度OD值(1.02±0.12)明显大于人参提取物组(B)的吸光度OD值(0.90±0.12)和不含药物组(C)的吸光度OD值(0.84±0.02),统计学比较存在显著性差异(P<0.05),说明心脉安有提高DPCs活性作用。
实施例3:心脉安中药组合物对对C57BL/6小鼠背部毛发生长的影响
依照Müller-等(Müller- S,Handjiski B,Eichmüller S,et al.Acomprehensive guide for the accurate classification of murine hair folliclesin distinct hair cycle stages.J Invest Dermatol.2001.117(3):3-15)的方法对36只C57BL/6小鼠背部毛发进行脱毛,随机将脱毛小鼠分为3组。脱毛24h后分别灌胃心脉安中药组合物,人参提取物和不灌胃空白对照,每天2次,连续10天,观察小鼠背部皮肤及被毛变化。停药10天后分别从每只小鼠背部皮肤中随机拔除5根毛干测量其长度,同时对背部皮肤行HE染色观察各组毛囊的生长情况。
脱毛的第5天,可观察到中药组中小鼠背部皮肤开始发暗,以后皮肤颜色逐渐增黑,至第15天就可观察到小鼠背部长出浓密的毛发;在脱毛的第10天可观察到人参提取物组中小鼠皮肤开始发暗,至第20天才可见到长出稀疏的毛发。脱毛第20天,随机从各组小鼠受试区拔下60根毛发,比较各组毛发的长度,其中人参提取物组毛发生长长度(5.53±1.78mm)明显小于心脉安中药组合物组(7.05±0.21mm),统计学比较存在显著性差异(P<0.05)。组织学观察显示(参见图3),心脉安中药组合物中毛囊密度远远高于人参提取物组。这说明心脉安中药组合物可增加毛囊密度,促进毛发生长。
Claims (4)
1.心脉安的用途,其特征在于,心脉安在制备促进毛发生长药物的应用,所述心脉安组分及重量份如下:人参40-200份,黄芪100-500份,丹参400-650份,赤芍50-400份,麦冬50-450份和冰片1.5-4.5份。
2.根据权利要求1所述的用途,其特征在于,心脉安在制备预防或治疗脱发药物中的应用。
3.根据权利要求2所述的用途,其特征在于,在制备预防或治疗脱发药物时,所述药物加入药学上可以接受的载体,制备成需要的剂型。
4.根据权利要求3所述的用途,其特征在于,制备成心脉安片。
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