CN109431911A

CN109431911A - 美白保湿晶露及其制备方法和酪氨酸酶抑制剂

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Publication number: CN109431911A
Application number: CN201811609228.5A
Authority: CN
Inventors: 杨登亮; 林盛杰; 刘德海; 戴嘉彬; 马静蓉; 张伟杰; 张楚标
Original assignee: Guangdong Dan Zi Group Co Ltd; GUANGZHOU BAIYUN LIANJIA FINE CHEMICALS FACTORY; Guangzhou Keneng Cosmetic Research Co Ltd
Current assignee: Guangdong Dan Zi Group Co Ltd; GUANGZHOU BAIYUN LIANJIA FINE CHEMICALS FACTORY; Guangzhou Keneng Cosmetic Research Co Ltd
Priority date: 2018-12-27
Filing date: 2018-12-27
Publication date: 2019-03-08

Abstract

本发明涉及一种美白保湿晶露及其制备方法和酪氨酸酶抑制剂。所述美白保湿晶露，其特征在于，包括酪氨酸酶抑制剂；以美白保湿晶露的总质量计，酪氨酸酶抑制剂的加入量为0.01‑15％；优选地，美白保湿晶露还包括保湿剂、增稠剂、pH调节剂、增溶剂、皮肤调理剂、防腐剂和芳香剂中的一种或两种以上的组合；其中，以美白保湿晶露的总质量计，保湿剂的加入量为0.01‑25％；增稠剂的加入量为0.02‑0.8％；pH调节剂的加入量为0.01‑1％；增溶剂的加入量为0.01‑0.2％；皮肤调理剂的加入量为：0.01‑10％；防腐剂的加入量为0.01‑1.5％；芳香剂的加入量为0.005‑0.5％。本发明的美白保湿晶露能够减少黑色素生成，美白效果优异。另外，美白保湿晶露还具有优异的保湿效果，且配方温和，对人体无副作用。

Description

美白保湿晶露及其制备方法和酪氨酸酶抑制剂

技术领域

本发明涉及一种美白保湿晶露及其制备方法和酪氨酸酶抑制剂，属于化妆品领域。

背景技术

黑色素(Melanin)主要由人体皮肤表皮基底层的黑色素细胞(Melanocyte)产生，它能减小紫外线对皮肤的伤害。黑色素的含量及分布决定了皮肤的颜色。然而，黑色素在基底层的异常蓄积会造成色素沉着过度引起黑斑病、雀斑、老年斑等，影响人们的生活质量。随着对黑色素生物合成研究的不断深入，研究者发现酪氨酸酶在黑色素生物合成中扮演重要角色，它是酪氨酸和多巴向黑色素转变过程中的主要限速酶，它的过量表达是导致色素沉着过度的主要原因。因此，抑制酪氨酸酶的活性可以阻断黑色素的生物合成反应链，减少黑色素的生成，实现美白的效果。

针对黑色素生成的途径和影响因素，皮肤美白和皮肤护理的主要途径包括以下几个方面：(1)通过抑制皮肤黑色素细胞增殖，减少黑色素细胞生成的数量；(2)通过抑制皮肤黑色素生成的关键酶-酪氨酸酶的催化活性，降低黑色素的生物合成，达到美白的目的；(3)通过防晒，防止阳光中紫外线对皮肤的伤害(晒黑和晒伤)，减缓皮肤老化；(4)是通过使用抗氧剂去除皮肤中的氧自由基，减缓黑色素生成和减缓皮肤老化。

现有技术中，为了防止皮肤变黑、斑点、雀斑等，保持皮肤本来的洁白，人们提出了混合有氢醌、曲酸、熊果苷等各种美白剂的美白保湿晶露。可是，如果大量混合这些物质，有时在使用感和安全性上产生问题。如氢醌对皮肤的刺激性非常大；曲酸易变色且对皮肤也有一定的刺激性；熊果苷作用单一和效果不佳等等。

随着人们对皮肤健康关注度的增高，开发具有安全稳定、效果明显且性价比高的天然美白剂，已成为当前医药和化妆品行业的主要研究方向之一，具有非常好的发展前景。

发明内容

发明要解决的问题

鉴于现有技术中，氢醌对皮肤的刺激性非常大；曲酸易变色且对皮肤也有一定的刺激性；熊果苷作用单一和效果不佳等问题，本发明首先提供一种美白保湿晶露，本发明的美白保湿晶露能够减少黑色素生成，美白效果优异。另外，美白保湿晶露还具有优异的保湿效果，且配方温和，对人体无副作用。

本发明还提供了一种酪氨酸酶抑制剂，该酪氨酸酶抑制剂具有优异的抑制酪氨酸酶活性的作用。

进一步地，本发明还提供一种操作简单，原料易于获取的美白保湿晶露的制备方法。

用于解决问题的方案

本发明首先提供一种美白保湿晶露，其包括酪氨酸酶抑制剂；以所述美白保湿晶露的总质量计，所述酪氨酸酶抑制剂的加入量为0.01-15％；优选地，

所述美白保湿晶露还包括保湿剂、增稠剂、pH调节剂、增溶剂、皮肤调理剂、防腐剂和芳香剂中的一种或两种以上的组合；其中，以所述美白保湿晶露的总质量计，所述保湿剂的加入量为0.01-25％；所述增稠剂的加入量为0.02-0.8％；所述pH调节剂的加入量为0.01-1％；所述增溶剂的加入量为0.01-0.2％；所述皮肤调理剂的加入量为：0.01-10％；所述防腐剂的加入量为0.01-1.5％；所述芳香剂的加入量为0.005-0.5％。

根据本发明的美白保湿晶露，其中，所述保湿剂包括甘油、双丙甘醇、甘油聚醚-26、高分子量透明质酸钠、小分子量透明质酸钠、泛醇、PEG/PPG-17/6共聚物、丁二醇、PEG-32、PEG-8、PCA钠、木糖醇、赤藓醇、甘油聚丙烯酸酯、丙二醇、甘露糖、海藻糖中的一种或两种以上的组合。

根据本发明的美白保湿晶露，其中，所述增稠剂包括卡波姆、黄原胶、小核菌胶、聚二甲基硅氧烷/乙烯基聚二甲基硅氧烷交联聚合物、山嵛醇、聚丙烯酰胺、PEG-100硬脂酸酯、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物中的一种或两种以上的组合。

根据本发明的美白保湿晶露，其中，所述pH调节剂包括氨甲基丙醇、精氨酸、柠檬酸、柠檬酸钠、氢氧化钠中的一种或两种以上的组合。

根据本发明的美白保湿晶露，其中，所述增溶剂包括聚山梨醇酯-20、PEG-40氢化蓖麻油和甘油醇醚-25PCA异硬脂酸脂中的一种或两种以上。

根据本发明的美白保湿晶露，其中，所述皮肤调理剂包括水解胶原蛋白、燕麦肽、神经酰胺3、三角褐指藻提取物、巨藻提取物、墨角藻提取物、小球藻发酵产物、绿藻提取物、红藻门藻提取物、褐藻提取物、北美金缕梅水、尿囊素、白果槲寄生叶提取物、白茅根提取物、丝氨酸、巨藻提取物、仙人掌提取物中的一种或两种以上的组合。

根据本发明的美白保湿晶露，其中，所述酪氨酸酶抑制剂包括人参提取物和复活草提取物；以所述酪氨酸酶抑制剂的总质量计，所述人参提取物的加入量为0.05-80％，所述复活草提取物的加入量为20-99.95％；优选地

所述人参提取物和所述复活草提取物的质量比为1：0.3～99，优选为1：0.4～90，更优选为1：0.5～80，进一步优选为1：1～70，更进一步优选为1：2～60，再进一步优选为1：3.5～50。

本发明还提供一种根据本发明的美白保湿晶露的制备方法，其包括将所述美白保湿晶露的各组分混合的步骤。

本发明又提供一种酪氨酸酶抑制剂，其包括人参提取物和复活草提取物；以所述酪氨酸酶抑制剂的总质量计，所述人参提取物的加入量为0.05-80％，所述复活草提取物的加入量为20-99.95％。

根据本发明的酪氨酸酶抑制剂，其中，所述人参提取物和所述复活草提取物的质量比为1：0.3～99，优选为1：0.4～90，更优选为1：0.5～80，进一步优选为1：1～70，更进一步优选为1：2～60，再进一步优选为1：3.5～50。

发明的效果

本发明的美白保湿晶露能够减少黑色素生成，美白效果优异。另外，美白保湿晶露还具有优异的保湿效果，且配方温和，对人体无副作用。

进一步地，本发明的制备方法的操作简单，原料易于获取。

进一步地，本发明的酪氨酸酶抑制剂具有优异的抑制酪氨酸酶活性的作用。

附图说明

图1示出了本发明对比例1-5的人参提取物的对数质量浓度-酪氨酸酶抑制率的关系图；

图2示出了本发明对比例6-9的复活草提取物的对数质量浓度-酪氨酸酶抑制率的关系图；

图3示出了本发明实施例1-7的酪氨酸酶抑制剂的对数质量浓度-酪氨酸酶抑制率的关系图。

图4示出了本发明实施例1-7的酪氨酸酶抑制剂中人参提取物的含量与相互作用系数的关系图。

图5示出了本发明应用实施例1-8以及应用对比例1-2的黑色素变化率的对比图。

具体实施方式

以下将详细说明本发明的各种示例性实施例、特征和方面。在这里专用的词“示例性”意为“用作例子、实施例或说明性”。这里作为“示例性”所说明的任何实施例不必解释为优于或好于其它实施例。

另外，为了更好地说明本发明，在下文的具体实施方式中给出了众多的具体细节。本领域技术人员应当理解，没有某些具体细节，本发明同样可以实施。在另外一些实例中，对于本领域技术人员熟知的方法、手段、器材和步骤未作详细描述，以便于凸显本发明的主旨。

第一实施方式

本发明的第一实施方式提供一种酪氨酸酶抑制剂，所述酪氨酸酶抑制剂包括：人参提取物和复活草提取物。本发明的酪氨酸酶抑制剂能够很好的抑制酪氨酸酶的活性，在化妆品中使用时，具有优异的美白效果。

人参(Panax ginseng C.A.Meyer)系五加科(Araliaceae)多年生草本植物，人参是长白山最具开发潜力的药用植物资源之一。

人参中含有多种化学成分，例如：人参皂苷、人参多糖、人参蛋白及多肽等。其中，人参皂苷(Ginsenoside)，为一种固醇类化合物，在化学结构上是具有达玛烷型的、以四环三萜为主要结构的三萜皂苷。人参皂苷是人参中的代表性活性成分之一，广泛存在在人参属植物中。人参多糖，是人参的另外一类有效活性成分，是良好的天然药效成分。人参多糖和小分子化学治疗药物联合应用，能够修复和降低化学治疗药物对人体免疫系统的破坏，发挥增效减毒的作用。

人参提取物可作为一种天然添加物用于化妆品生产。人参皂苷具有抗氧化、防紫外线、保护皮肤等作用，是人参中的生理活性物质之一。人参皂苷还可刺激皮肤成纤维细胞的活性，促进胶原蛋白合成，使皮肤趋于年轻化，从而延缓皮肤衰老的过程，发挥其抗衰老作用，并在一定范围内同时增加皮肤中SOD含量和活性。人参提取物中人参皂苷含量较高时，能够清除DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基。

复活草一般在极端干旱的情况下，它的枝叶会紧紧收缩成球状，牢牢锁住体内珍贵的最后一滴水，即使丧失自身高达98％的水分，仍可顽强生存数十年。一旦遇到难得的雨季，复活草体内蕴含丰富的糖基海藻糖就会发挥强大的锁水功能，然后再将蕴含生命活力的水畅顺自如地活导入体内每一个细胞中，并锁住相当于细胞自身质量460倍的水分，能够重新伸展枝叶，恢复生机盎然的绿色生命。

将复活草提取物应用在化妆品中，可调节皮肤的免疫功能，增强皮肤的抗病能力，消除炎症、预防过敏、清洁皮肤，同时还能解除化妆品及其它外界因素对皮肤的毒副作用。

另外，复活草还可以增强细胞活力和新陈代谢、激活再生皮肤细胞、增强皮肤细胞的抗氧化性、减轻皮肤发红，对抗红疹、有加速伤口愈合及组织修复的作用，还能减缓真皮层纤维细胞的老化进程，能将老化细胞中胶原蛋白生成量提高36％等。

本发明在酪氨酸酶抑制剂中使用人参提取物和复活草提取物的组合，两者具有协同作用，能够进一步起到抑制酪氨酸酶活性的作用。以所述酪氨酸酶抑制剂的总质量计，所述人参提取物的加入量为0.05-80％，所述复活草提取物的加入量为20-99.95％。

在本发明中，所述酪氨酸酶抑制剂中，所述人参提取物和所述复活草提取物的质量比为1：0.3～99，优选为1：0.4～90，更优选为1：0.5～80，进一步优选为1：1～70，更进一步优选为1：2～60，再进一步优选为1：3.5～50。当人参提取物和复活草提取物的质量比在上述范围内时，能够进一步具有协同作用，抑制酪氨酸酶活性的效果更加优异。

第二实施方式

本发明的第二实施方式提供了一种包含本发明的第一实施方式的酪氨酸酶抑制剂的美白保湿晶露。本发明的美白保湿晶露是水晶啫喱质地，延展性好，而且容易渗透，补水效果好，非常适合干燥皮肤。另外，本发明的美白保湿晶露中通过添加本发明的酪氨酸酶抑制剂，使得本发明的美白保湿晶露能够大幅度的减少黑色素的生成。

在本发明中，以所述美白保湿晶露的总质量计，所述酪氨酸酶抑制剂的加入量为0.01-15％，优选为0.1-14％，例如：所述酪氨酸酶抑制剂的加入量为0.5％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％等。当酪氨酸酶抑制剂的加入量在0.01-15％之间时，使用美白保湿精露的皮肤中黑色素含量降低。当酪氨酸酶抑制剂的加入量小于0.01％时，黑色素的含量降低少，不能起到美白的作用；当酪氨酸酶抑制剂的加入量大于15％时，酪氨酸酶抑制剂的含量过高，成本过高，且不能进一步增加美白的作用。

在本发明中，所述美白保湿晶露还包括保湿剂、增稠剂、pH调节剂、增溶剂、皮肤调理剂、防腐剂和芳香剂中的一种或两种以上的组合。本发明的美白保湿晶露的配方组成温和，可以使本发明的酪氨酸酶抑制剂的功效得到充分发挥。具体而言：

以所述美白保湿晶露的总质量计，所述保湿剂的加入量为0.01-25％。当保湿剂的加入量在0.01-25％时，能够起到保湿作用。为了使保湿剂的功效能够进一步发挥，本发明的保湿剂的加入量可以是1-24％，可以是3-22％，可以是5-20％，可以是6-19％，可以是8-18％等。

在本发明中，所述保湿剂包括甘油、双丙甘醇、甘油聚醚-26、高分子量透明质酸钠、小分子量透明质酸钠、泛醇、PEG/PPG-17/6共聚物、丁二醇、PEG-32、PEG-8、PCA钠、木糖醇、赤藓醇、甘油聚丙烯酸酯、丙二醇、甘露糖、海藻糖中的一种或两种以上的组合。其中，高分子量透明质酸钠的分子量范围为≥1000KDa；小分子量透明质酸钠的分子量范围为10KDa-小于1000KDa。

另外，保湿剂中，优选添加双丙甘醇、甘露糖、PEG-8、PEG-32、泛醇、甘油聚醚-26、PCA钠、甘油聚丙烯酸酯、木糖醇、赤藓醇、高分子量透明质酸钠、小分子量透明质酸钠等中的一种或两种以上的组合，可以使保湿效果更加优异。

以所述美白保湿晶露的总质量计，所述增稠剂的加入量为0.02-0.8％。通过添加增稠剂，可以使本发明的美白保湿晶露更有质感。作为优选，本发明的增稠剂的加入量可以是0.05-0.6％，可以是0.1-0.5％等。

在本发明中，所述增稠剂包括卡波姆、黄原胶、小核菌胶、聚二甲基硅氧烷/乙烯基聚二甲基硅氧烷交联聚合物、山嵛醇、聚丙烯酰胺、PEG-100硬脂酸酯、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物中的一种或两种以上的组合。

本发明可以适量添加小核菌胶，小核菌胶是真菌小核菌产生一种新型非离子型抗盐抗温生物多糖聚合物-硬葡聚糖。硬葡聚糖(Scleroglucah)是一种天然的胶囊状葡聚糖(Capsular polysarido)。硬葡聚糖的溶液在高温时也具有优异的稳定性，在广泛的pH值范围内有很好的适用性，对于存在溶液中的多种电解质有很大的耐受性。另外使用小核菌胶也可以使美白保湿晶露具有优异的补水作用。

以所述美白保湿晶露的总质量计，所述pH调节剂的加入量为0.01-1％。通过添加pH调节剂，使美白保湿晶露的pH值更适宜人体皮肤。作为优选，本发明的pH调节剂的加入量可以是0.03-0.8％，可以是0.06-0.5％，可以是0.1-0.3％等。当pH调节剂的加入量大于1％或者小于0.01％时，均不能获得pH值合适的美白保湿晶露。

在本发明中，所述pH调节剂包括氨甲基丙醇、精氨酸、柠檬酸、柠檬酸钠、氢氧化钠等中的一种或两种以上的组合。

以所述美白保湿晶露的总质量计，所述增溶剂的加入量为0.01-0.2％。通过添加增溶剂，可以使本发明的美白保湿晶露的原料更易溶解。作为优选，所述增溶剂的加入量为0.05-0.2％，0.1-0.2％等。在本发明中，所述增溶剂包括聚山梨醇酯-20、PEG-40氢化蓖麻油和甘油醇醚-25PCA异硬脂酸脂中的一种或两种以上。

为了进一步提高本申请的美白保湿晶露的功效，本发明的美白保湿晶露还包含有所述皮肤调理剂。通过添加皮肤调理剂，可以镇定皮肤，从而对脸部肌肤受伤红肿有一定舒缓作用，且可以减少皱纹的产生。另外，本发明的美白保湿晶露还可以改善肌肤出油状况，质地不油腻，可以调节水油平衡。

以所述美白保湿晶露的总质量计，所述皮肤调理剂的加入量为0.01-10％。作为优选，所述皮肤调理剂的加入量可以是0.1-8％，可以是0.3-5％，可以是0.5-4％等。当皮肤调理剂的加入量小于0.01％时，无法起到相应的功效。

在本发明中，所述皮肤调理剂包括水解胶原蛋白、燕麦肽、神经酰胺3、三角褐指藻提取物、巨藻提取物、小球藻发酵产物、红藻门藻提取物、褐藻提取物、北美金缕梅水、白茅根提取物、丝氨酸、仙人掌提取物中的一种或两种以上的组合。可以根据具体的需要，选用合适的皮肤调理剂。

皮肤调理剂中，本发明可以适量添加水解胶原蛋白，水解胶原蛋白能够在人体皮肤中补充适当的胶原蛋白，可以作用于真皮层，延缓衰老。还可以改善微循环，祛斑祛皱，紧致肌肤，修复细纹。另外，水解胶原蛋白还可以收缩毛孔，补水保湿。

本发明可以适量添加燕麦肽，燕麦肽是燕麦蛋白的片段和燕麦蛋白的组成部分。燕麦蛋白的功能独特，它的氨基酸种类均衡远胜其它谷物。燕麦蛋白分解后会产生质量较高的小分子肽，极易被皮肤吸收。燕麦肽具有抗氧化、增加肌肤活性、延缓肌肤衰老、保湿、减少皱纹、抗过敏等功效。

本发明可以适量添加少量的神经酰胺3，神经酰胺3是一种脂质物质，它和构成皮肤角质层的物质结构相近，能很快渗透进皮肤，帮助皮肤天然保护层的更新，能促进自然水合作用的平衡，和角质层中的水结合，形成一种网状结构，锁住水分。

本发明的美白保湿晶露还可以适当添加有抗氧化剂和螯合剂。一般而言，以所述美白保湿晶露的总质量计，所述抗氧化剂的加入量为0-2％；所述螯合剂的加入量为0-1％。所述抗氧化剂可以是维生素E、生育酚乙酸酯、丁羟甲苯、番茄红素等中的一种或两种以上的组合。所述螯合剂可以是EDTA-2Na和/或EDTA-4Na等。

另外，本发明的美白保湿晶露中还包含有防腐剂和芳香剂。以所述美白保湿晶露的总质量计，所述防腐剂的加入量为0.01-1.5％；所述芳香剂的加入量为0.005-0.5％。所述防腐剂可以包括苯氧乙醇、羟苯甲酯、羟苯丙酯、苯甲酸及其盐中的一种或两种以上的组合。所述芳香剂可以是香精等。

美白保湿晶露不仅能够起到美白的作用，还可以补水保湿，本发明的美白保湿晶露的水润度非常好。因此，本发明的美白保湿晶露可以大大改善肌肤状态，让肌肤白皙，并且水润有光泽。

第三实施方式

本发明的第三实施方式提供了一种美白保湿晶露的制备方法，其特征在于，包括将所述美白保湿晶露的各组分混合的步骤。

具体而言，本发明的美白保湿晶露的制备方法可以包括以下步骤：

1、将水、保湿剂、增稠剂、任选存在的螯合剂、部分防腐剂原料加入搅拌锅，搅拌并加热至75-85℃；

2、冷却至40-45℃，加入pH调节剂、增溶剂、酪氨酸酶抑制剂、任选存在的抗氧化剂、皮肤调理剂以及剩余的防腐剂搅拌均匀；

3、冷却至35-40℃，检验合格后出料，静置12-48小时；

4、检验合格后，分装、包装，再检验，成品入库。

实施例

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

对比例1-5

取人参提取物作为酪氨酸酶抑制剂。将人参提取物溶于5组不同体积的pH为6.8的磷酸缓冲液中，得到5组不同浓度的测试溶液。其中，人参提取物的对数质量浓度如下表2所示。

对比例6-9

取复活草提取物作为酪氨酸酶抑制剂。将复活草提取物溶于4组与对比例1-4对应体积的pH为6.8的磷酸缓冲液中，得到4组与对比例1-4对应浓度的测试溶液。其中，复活草提取物的对数质量浓度如下表2所示。

实施例1-7

取人参提取物和复活草提取物作为酪氨酸酶抑制剂。将人参提取物和复活草提取物按质量比2:1(实施例1)、1:1(实施例2)、1:2(实施例3)、15:85(实施例4)、7:68(实施例5)、5:95(实施例6)、2:98(实施例7)混合后，得到酪氨酸酶抑制剂。将实施例1-5的酪氨酸酶抑制剂分别溶于5组与对比例1-5对应体积的pH为6.8的磷酸缓冲液中，将实施例6-7的酪氨酸酶抑制剂分别溶于4组与对比例1-4对应体积的pH为6.8的磷酸缓冲液中。实施例1-7均可以得到5组(或4组)与对比例1-5(或对比例1-4)对应浓度的测试溶液。其中，酪氨酸酶抑制剂中，人参提取物和复活草提取物的含量(质量％)如下表1所示，酪氨酸酶抑制剂的对数质量浓度如下表4所示。

表1

体外测试

酪氨酸酶活性以催化L-多巴生成多巴醌的酪氨酸酶活力来衡量。具体为：

取1支试管，加入底物L-多巴溶液0.4mL(1.0mg/mL)，并添加pH为6.8的磷酸缓冲液2.4mL，30℃水浴保温10min后，然后加入酪氨酸酶的量为0.2mL(250U/mL)，得到反应液1。

取1支试管，加入酪氨酸酶的量为0.2mL(250U/mL)，并添加pH为6.8的磷酸缓冲液2.8mL，得到反应液2。

分别在42支试管中加入底物L-多巴溶液0.4mL(1.0mg/mL)，然后分别加入2.4mL的对比例1-9和实施例1-7的测试溶液，30℃水浴保温10min后，然后加入酪氨酸酶的量为0.2mL(250U/mL)，得到反应液3。

分别在42支试管中加入2.4mL的对比例1-9和实施例1-7的测试溶液，并添加pH为6.8的磷酸缓冲液0.4mL，30℃水浴保温10min后，然后加入酪氨酸酶的量为0.2mL(250U/mL)，得到反应液4。

酶促反应将L-多巴转化为红色产物多巴醌，在475nm处有最大吸收。读取从混匀开始1min时在475nm处的吸光度A₄₇₅，酶促反应的速度用每分钟A₄₇₅的增加值来表示。测定上述反应液在反应开始1min时在475nm处的吸光度A，并按如下公式计算酪氨酸酶活性的抑制率。其中，表中的酪氨酸酶抑制剂的质量浓度均为酪氨酸酶抑制剂在测试体系中的终质量浓度。

抑制率＝[1-(A₃-A₄)/(A₁-A₂)]×100％

式中：A₁为不添加酪氨酸酶抑制剂，仅含有底物时的吸光度；

A₂为不添加酪氨酸酶抑制剂，且不添加底物时的吸光度；

A₃为含有酪氨酸酶抑制剂与底物时的吸光度；

A₄为含有酪氨酸酶抑制剂，且不添加底物时的吸光度。

分别计算得到人参提取物(对比例1-5)和复活草提取物(对比例6-9)各自的对酪氨酸酶活性的抑制率。并结合对数质量浓度-酪氨酸酶抑制率的关系图，换算求得人参提取物的抑制率为50％时对应的质量浓度(IC_50A)和复活草提取物的抑制率为50％时对应的质量浓度(IC_50B)，结果如表2所示。

表2

然后测出实施例1-7的酪氨酸酶抑制剂的对酪氨酸酶活性的抑制率。并结合对数质量浓度-酪氨酸酶抑制率的关系图，换算求得人参提取物和复活草提取物复合作用产生等效抑制率(50％)时，人参提取物的质量浓度(IC_50a)，人参提取物和复活草提取物复合作用产生等效抑制率(50％)时，复活草提取物的质量浓度(IC_50b)，结果如表3所示。

人参提取物和复活草提取物的复合作用的效应，可以用相互作用系数γ来评价，具体结果如表3所示。

γ＝IC_50a/IC_50A+IC_50b/IC_50B

其中，IC_50A表示人参提取物的抑制率为50％时对应的质量浓度；

IC_50B表示复活草提取物的抑制率为50％时对应的质量浓度；

IC_50a表示人参提取物和复活草提取物复合作用产生等效抑制率(50％)时，人参提取物的质量浓度；

IC_50b表示人参提取物和复活草提取物复合作用产生等效抑制率(50％)时，复活草提取物的质量浓度。

其中，γ＝1，表示人参提取物和复活草提取物表现为简单相加效应；γ＜1为人参提取物和复活草提取物表现为协同效应，γ值越小，协同效应越强；γ＞1为人参提取物和复活草提取物表现为拮抗效应，γ值越大，拮抗效应越大。

表3

由表3可以看出，本发明的酪氨酸酶抑制剂中的相互作用系数小于1，且其相互作用系数值可以在0.65以下，因此人参提取物和复活草提取物可以表现为优异的协同效应。

应用实施例1-8

根据下表4-5中的应用实施例1-8的美白保湿晶露配方中各组分的含量(质量百分比)，并按照下述生产工艺步骤制备得到美白保湿晶露。生产工艺步骤如下：

1、将A相、B相及C相原料加入搅拌锅，搅拌并加热至82-85℃；

2、冷却至42℃，加入D相、E相、F相搅拌均匀；

3、冷却至37℃，检验合格后出料，静置24小时；

4、检验合格后，分装、包装，再检验，成品入库。

注：工艺中的A相、B相、C相、D相、E相、F相分别为，

A相：水；

B相：丁二醇、甘油、高分子量透明质酸钠、泛醇、双丙甘醇、赤藓醇、木糖醇、卡波姆、小核菌胶、小分子量透明质酸钠、甘油聚丙烯酸酯；

C相：羟苯甲酯、甘露糖、PEG-8、PEG-32、PCA钠、甘油聚醚-26、PEG/PPG-17/6共聚物；

D相：氨甲基丙醇；

E相：PEG-40氢化蓖麻油、香精；

F相：人参提取物、复活草提取物、水解胶原蛋白、燕麦肽、丝氨酸、神经酰胺3、苯氧乙醇。

表4应用实施例1-5

应用对比例1-2

根据下表5中的应用对比例1-2的保湿晶露配方中各组分的含量(质量百分比)，并按照与应用实施例1-8相同的方法，制备得到保湿晶露。

表5应用对比例1-2及应用实施例6-8

美白功效测试

皮肤黑色素变化率的测试方法：通过测定特定波长的光照在人体皮肤上后的反射量来确定皮肤中黑色素的含量。探头的发射器发出波长分别为568nm、660nm、和880nm三种波长的光照射在皮肤表面，接受器测得皮肤反射的光，并测定被皮肤吸收的光的量，从而可以得出皮肤黑色素的变化率。

皮肤黑色素变化率的测试采用德国CK公司的色素检测仪进行测试，其中，皮肤黑色素的测试探头MX 18由光源发射器和接收器组成，另有弹簧以保持检测时对皮肤的压力恒定。探头的测量范围是0-999，测量数值越高，可以说明皮肤中黑色素的含量越高。

受试者人数为33人，试验周期为4周，试验选取应用实施例1-8的美白保湿晶露以及应用对比例1-2的保湿晶露，每天早晚涂抹于前臂内侧的不同区域，分别测定实验前(Day1)和使用28天时(Day28)的受试区域的皮肤在特定波长的光照后的反射量以确定皮肤中黑色素的含量，进而表征黑色素的变化率，具体黑色素的变化率的结果如图5所示。

由图5可以看出，本申请的应用实施例1-8的黑色素的变化率较大，即黑色素含量降低，因此，使用人参提取物和复活草提取物作为酪氨酸酶抑制剂，能够有效美白皮肤。

另外，本申请的应用实施例6-8中，由于人参提取物的含量较高，其皮肤中的黑色素含量降低较少。

本申请的应用对比例1-2中，在单一使用人参提取物或者单一使用复活草提取物作为酪氨酸酶抑制剂时，其黑色素含量变化率小，黑色素含量降低少，美白效果较差。

本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。

Claims

1.一种美白保湿晶露，其特征在于，包括酪氨酸酶抑制剂；以所述美白保湿晶露的总质量计，所述酪氨酸酶抑制剂的加入量为0.01-15％；优选地，

2.根据权利要求1所述的美白保湿晶露，其特征在于，所述保湿剂包括甘油、双丙甘醇、甘油聚醚-26、高分子量透明质酸钠、小分子量透明质酸钠、泛醇、PEG/PPG-17/6共聚物、丁二醇、PEG-32、PEG-8、PCA钠、木糖醇、赤藓醇、甘油聚丙烯酸酯、丙二醇、甘露糖、海藻糖中的一种或两种以上的组合。

3.根据权利要求1或2所述的美白保湿晶露，其特征在于，所述增稠剂包括卡波姆、黄原胶、小核菌胶、聚二甲基硅氧烷/乙烯基聚二甲基硅氧烷交联聚合物、山嵛醇、聚丙烯酰胺、PEG-100硬脂酸酯、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/VP共聚物、丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物中的一种或两种以上的组合。

4.根据权利要求1-3任一项所述的美白保湿晶露，其特征在于，所述pH调节剂包括氨甲基丙醇、精氨酸、柠檬酸、柠檬酸钠、氢氧化钠中的一种或两种以上的组合。

5.根据权利要求1-4任一项所述的美白保湿晶露，其特征在于，所述增溶剂包括聚山梨醇酯-20、PEG-40氢化蓖麻油和甘油醇醚-25PCA异硬脂酸脂中的一种或两种以上。

6.根据权利要求1-5任一项所述的美白保湿晶露，其特征在于，所述皮肤调理剂包括水解胶原蛋白、燕麦肽、神经酰胺3、三角褐指藻提取物、巨藻提取物、墨角藻提取物、小球藻发酵产物、绿藻提取物、红藻门藻提取物、褐藻提取物、北美金缕梅水、尿囊素、白果槲寄生叶提取物、白茅根提取物、丝氨酸、巨藻提取物、仙人掌提取物中的一种或两种以上的组合。

7.根据权利要求1-6任一项所述的美白保湿晶露，其特征在于，所述酪氨酸酶抑制剂包括人参提取物和复活草提取物；以所述酪氨酸酶抑制剂的总质量计，所述人参提取物的加入量为0.05-80％，所述复活草提取物的加入量为20-99.95％；优选地

8.一种根据权利要求1-7任一项所述的美白保湿晶露的制备方法，其特征在于，包括将所述美白保湿晶露的各组分混合的步骤。

9.一种酪氨酸酶抑制剂，其特征在于，包括人参提取物和复活草提取物；以所述酪氨酸酶抑制剂的总质量计，所述人参提取物的加入量为0.05-80％，所述复活草提取物的加入量为20-99.95％。

10.根据权利要求9所述的酪氨酸酶抑制剂，其特征在于，所述人参提取物和所述复活草提取物的质量比为1：0.3～99，优选为1：0.4～90，更优选为1：0.5～80，进一步优选为1：1～70，更进一步优选为1：2～60，再进一步优选为1：3.5～50。