CN1094056C - 延衰片 - Google Patents

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Abstract

延衰片由熟地、枸杞子、北沙参、当归、桑椹子、鳖甲、菟丝子、柏子仁、麦冬、女贞子、西洋参、山药十二味中药配制而成。可升高体内超氧化物歧化酶SOD的含量，清除体内自由基，减少过氧化脂质LPO的产生，保护细胞膜，本发明具有延缓衰老的保健作用，对阴虚型更年期综合症效果最佳，对热盗汗，失眠健忘、面色潮红、烘热汗出、精神萎靡、烦燥易怒、性欲减退、寐多恶梦、咽干舌燥等症状缓解显著，服药后无不良反，可用于治疗早衰、男女更年期综合症，具有方便可靠、确实满意的效果。

Description

延衰片
本发明由纯天然中药材制成，属于绿色食品药品范畴，具体是指一种延缓衰老的延衰片剂。
随着全球人口日趋老龄化，特别是中国正进入老年化社会，中外医学界已把抗衰老尤其是抗衰老医药保健品作为人类生命科学的重大科研课题之一。据有关统计，仅中国大陆自然衰老人群就高达1亿人以上，还有大约两亿病理性早衰人群。由此可见，仅就国内市场而言，抗衰老医药保健品的科研意义重大，市场应用前景广阔。现代医学认为，人类随着年龄的增长，必然会出现一个老化的生物过程，老化包括生理性的“衰老”和病理性的“早衰”与“衰老”。老化主要表现为活动效能降低，思维和体劳减弱，协调功能丧失等。祖国医学认为，人的生长壮老等自然规律与肾中精气之盛衰密切相关，博大精深的中医药宝库有许多治疗早衰和抗衰老的经典方剂，为中华民族的繁衍生息发挥了久远巨大的效益。西医多以口服和注射素的方式延防衰老，激化体内活力。但是过量长期补充激素，会破坏人体平衡，产生药物依赖性甚至会导致一些不可知病变发生，应当慎用。现有的一些保健制品，如太阳神口服液、SOD口服液等等，所起的作用比较专一，或是补充SOD含量，或是调理人体某个脏器，缺少综合平衡协调功效。
本发明的目的是提供一种补肾养肾，综合协调平衡人体机能，提高人体超氧化物歧化酶SOD含量，清除体内自由基，减少过氧化脂质LPO的产生的延缓衰老的延衰片。祖国医学认为，早衰或衰老的各种人群由于肾气逐渐衰退，精血日趋不足，导致肾之阴阳失调，而肾阴肾阳乃各脏腑阴阳之根本，进而导致各脏腑功能的紊乱或退化，这就形成未老先衰以及男女更年期综合症等生理变化的基础条件。由于各种衰老人群的体质、劳逸、生活、环境、精神、疾病等因素影响，不能自身调节适应以肾虚为主的一系列脏腑功能紊乱的症候群，因而形成早衰、男女更年期综合症等生理性变化。机体早衰的青年人、中年人，特别是中年向老年过渡期会出现一系列的生理变化。主要是肾气渐衰，天癸日枯、精血不足、冲任衰退、阴阳平衡失调。肾阴亏损，经脉失于濡养温煦，导致心肝功能紊乱。特别在肾阴虚的影响下，髓海不足，元神易失常、神明易失守则出现心肾不交之证。肾阴不足导致水不涵木，致肝肾阴虚。因此，肝肾阴虚本症之主因。本发明所述延衰片为肝肾阴虚而设，方中以熟地滋阴养血、补精益髓为君药，枸杞子、女贞子、桑椹子补肝肾之阴，鳖甲滋阴潜阳，共为臣药。脾胃为后天之本，生化之源，故以西洋参、山药益气养阴补脾胃之气，菟丝子补阳益阴，北沙参、麦冬滋补肺胃之阴，当归补血；柏子仁养心安神为佐药；另桑椹子归肝肾之经，有滋阴补血之效，亦为使药。诸药合用，共奏滋补肝肾、调节阴阳养血安神的保健功能。本发明由12味中药材作为活性原料配制而成，在每单位延衰片中白糖占7.1％，滑石粉占2.0并含有微量食用石蜡和色素，其特征是：在每单位所述延衰片中，其配方配比如下：
熟  地    15.3％                     枸杞子    8.1％
北沙参    8.1％                      柏子仁    6.1％
当  归    8.1％                      麦  冬    6.1％
桑椹子    8.0％                      女贞子    6.1％
鳖  甲    7.6％                      西洋参    2.2％
菟丝子    7.6％                      山  药    7.6％
延衰片是根据传统保健理论，以北沙参、熟地、鳖甲、山药、枸杞子、桑椹子、女贞子、菟丝子、当归、西洋参、柏子仁、麦冬等原料制成。所述延衰片可升高体内超氧化物歧化酶SOD的含量，清除体内自由基，减少过氧化脂质LPO的产生，保护细胞膜，减缓机体衰老过程。经功能试验证明，本发明具有延缓衰老的保健作用；临床观察240例，对阴虚型更年期综合症效果最佳，对热盗汗，失眠健忘、面色潮红、烘热汗出、精神萎靡、烦燥易怒、性欲减退、寐多恶梦、咽干舌燥等症状缓解显著，服本品后无不良反应。本品用于治疗早衰、男女更年期综合症具有方便可靠、确实满意的效果。
附图1是本发明工艺流程图。
制成片剂的实施例按如下配方进行：
熟  地    15.3％                     白  糖    7.1％
枸杞子    8.1％                      柏子仁    6.1％
北沙参    8.1％                      麦  冬    6.1％
当  归    8.1％                      女贞子    6.1％
桑椹子    8.0％                      西洋参    2.2％
鳖  甲    7.6％                      滑石粉    2.0％
山  药    7.6％                      食用石蜡  0.01‰
菟丝子    7.6％                      食用色素  0.04‰
以下是支持本发明的各种实验报告，其中包括：保健功能评价报告、毒理学安全性评价报告、产品稳定性试验报告以及卫生学检测报告等。
一、毒理学安全性评价报告：
样品来源：受试物由武汉宏生保健品公司提供。绿色片剂。
样品处理：受试物经研磨粉碎后按1％、5％、10％不同比例加到基料中，制成块状共试验用。
1、急性毒性实验：
动物：昆明种小鼠18-20g，雌雄各半。
给予途径：受试物按10％比例加入到饲料中给予
方法：按体重的20％称取受试物+基料混合饲料供动物食用，记一天24小时内动物摄入总量，试验前禁食12h，不断水。观察一周，并记录动物中毒症状及死亡情况。结果见表1：表1                  对小鼠急性毒性试验结果动物数    死亡动物数    体重        24小时内摄入量       受试物摄入量(只)         (只)       (g)     饲料量(g)   受试物量(g)   (每千克体重)10           0      18.5±1.0  2.4±0.2    0.24±0.02     12.8±1.110           0      19.5±1.0  2.8±0.2    0.28±0.02     14.2±1.5
24小时内动物摄入受试物总量为12.8-14.2g/kg，一周内动物未见明显中毒症状及死亡发生。按急性毒性分级，该受试物属实际无毒级。
2、微核实验：
动物：昆明种小鼠，23-25g，雌雄兼有。
剂量分组：设置受试物1％、5％、10％三个剂量组，及空白对照组和阳性对照组。
实验方法：按体重20％定量称取受试物饲料，让其自由摄入30小时后，处死动物，取胸骨骨髓涂片，每只动物油镜下观察1000个嗜染红细胞，结果如下：
表2                 对小鼠微核试验结果受试物         剂  量  动物数   观察细胞数  出现微核细胞数   微核形成率
            (％)    (只)       (个)          (个)           (‰)阴性对照组       0       10      10×1000         22            2.2实验组           1.0     10      10×1000         28            2.8
             5.0     10      10×1000         25            2.5
             10      10      10×1000         24            2.4CP组(mg/kg)      60      10      10×1000         386           38.6
结论：各实验组与阴性对照组结果比较，差异无显翥生；表明该受试物骨髓微核试验结果为阴性。
3、小鼠精子畸形试验：
动物：昆明种雄性小鼠，23-25g。
实验方法：剂量分组同微核试验。连续给予受度物饲料五天后，再继续喂养30天基础饲料，处死动物，取两侧副睾涂片镜检。结果见表3：表3                  对小鼠精子畸形试验结果受试物      剂量     动物数     观察精子数    畸形精子数    精子畸形率
        (％)      (只)         (个)          (个)          (‰)阴性对照组    0        10       10×1000         151           1.51实验组       1.0       10       10×1000         178           1.78
         5.0       10       10×1000         183           1.83
         10        10       10×1000         175           1.75CP组(mg/kg)  60        10       10×1000         424           4.24
结论：各实验组与阴性对照组结果比较，差异无显著性，表明该受试物精子畸形试验结果为阴性。
4、Ames试验
采用经鉴定符合生物学要求的鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100、TA102四株菌株进行试验；采用多氯联苯(PCB)诱导的大鼠肝匀浆作为体外活化系统(+S9)。受试物分为三个剂量组，固体样品经溶解后稀释成不同浓度，灭菌后每皿加入0.5ml，浓度分别为0.2、200、5000μg/皿。采用平板掺入法记录三次重复的平行样品结果。表4                        Ames试验结果
                      回变菌落数(个)受试物          剂量
           (g/皿)              -S9                          +S9
                    TA97   TA98   TA100   TA102   TA97   TA98   TA100   TA102自发回变        0       108     25     162     240     119    28     156     246受试物          0.2     121     36     183     205     135    36     173     235
            200     189     29     195     258     163    35     198     283
            5000    163     32     198     256     145    43     183     256阳性对照        ＞5000  ＞5000     358      26        1660＞  5000  ＞3000   256注：-S9阳性对照组为2、4、7-TNFono，加入量为0.3μg/皿
+S9阳性对照为2-AF，加入量为10μg/皿
5 30天喂养试验：
5.1动物：采用3个月龄Wistar大鼠，共80只，雌雄各半，体重160-180克。动物由湖北省医学实验动物中心提供。
5.2剂量与分组：设三个剂量组和一个对照组，每组20只动物，雌雄各10只。按人群推荐日摄入量的1111倍即10％作为高剂量组，下设5％、1％为中、低剂量组。喂养一个月，按试验要求测定有关指标。
5.3观察指标
5.3.1临床检查：包括一般表现、行为、中毒及死亡情况。每周进食量及食物利用率。
5.3.2血液检查：试验结束时测定血红素(Hb)、红细胞计数、白细胞计数及分类。
5.3.3血液生化检查：包括谷丙转氨酶(ALT)、血清尿素氨(BUN)。
5.3.4脏器称重及脏器系数
5.3.5病理组织学检查：对所有动物进行大体解剖检查，及对心、肝、脾、肾、肺等主要脏器进行病理学检查。
5.4试验结果：
5.4.1临床检查：试验中，动物未发现任何中毒症状，食欲、毛色均正常。体重及食物利用率结果见表5：从表中可见，各种大鼠体重及食物利用率结果差异无显著性。表5                      对大鼠体重及食物利用率结果剂  量       动        重            量(g，M±SD)        食物利用率(％)        物(只)                                         (％)数           数       初重          第四周      增重♀对照组     10    162.4±12.6   245.8±26.6    83.4     13.7±0.6
1        10    157.9±21.1   239.3±23.6    81.4     13.4±0.8
5        10    160.1±13.9   233.0±27.8    72.9     13.2±0.110        10    165.6±10.1   241.0±23.6    75.4     13.6±0.3♀对照组     10    168.6±14.7   271.8±34.8    113.2    18.4±0.3
1        10    164.5±13.7   284.5±26.4    120.0    18.4±0.2
5        10    162.4±12.6   278.7±35.1    116.3    17.8±0.310        10    168.6±14.7   271.8±31.3    103.2    17.4±0.2
与对照组比较    差异无显著性
5.4.2血液学检查：Hb测定、RBC计数、WBC计数结果见表6；经检验，Hb含量、RBC计数、WBC计数结果各组间差异无显著性。表6               对大鼠Hb含量、RBC计数、WBC计数的影响剂  量    动物数    Hb含量       RBC计数      WBC计数(％)      (只)     (g/L)      (×1012个/L) (×109个/L对照组      10    130.2±3.8    7.16±0.34   14.8±1.601          10    136.5±4.5    7.65±0.46   16.4±1.535          10    127.8±5.6    6.90±0.57   18.3±1.4810         10    135.9±3.8    7.59±0.63   16.9±1.08
5.4.3血液生化检查：血清BUN、GPT含量测定见表7，经检验各组间差异无显著性。表7                    对大鼠BUN、ALT、AST的影响剂量(％)  动物数(只)  BUN(g/L)      ALT(U/L)      AST(U/L)对照组       10       19.6±1.35    61.8±5.3     226.8±35.01％         10       18.3±0.98    54.6±11.8    234.6±18.35％         10       21.9±1.08    62.3±9.5     215.6±43.210％         10       20.8±1.56    58.3±4.8     223.6±41.8
5.4.4脏器重量及系数：肝、肾、脾等脏器重量及系数，结果见表8；与对照组比较，各剂量组大鼠肝、肾、脾等脏器重量及系数差异无显著性。表8           对大鼠肝、肾、脾等脏器重量及系数结果剂  量    动              肝  脏                  肾  脏                     碑  脏(％)      物(只)
      数      重量(g)      系数(％)     重量(g)     系数(％)      重量(g)     系数(％)♀对照组  10    8.35±1.08    3.4±0.19   1.54±0.29   0.62±0.01   1.18±0.11   0.48±0.02
1     10    8.11±1.35    3.4±0.20   1.50±0.03   0.63±0.03   1.03±0.02   0.43±0.03
5     10    8.08±0.95    3.5±0.18   1.51±0.08   0.65±0.01   1.05±0.05   0.45±0.0110     10    8.28±1.18    3.4±0.23   1.52±1.03   0.63±0.04   1.08±0.03   0.45±0.02♀对照组  10    11.8±1.45    4.2±0.08   1.89±0.08   0.67±0.03   1.31±0.04   0.46±0.01
1     10    12.1±1.13    4.3±0.18   1.96±0.09   0.69±0.05   1.35±0.02   0.47±0.01
5     10    11.3±1.15    4.1±0.13   1.83±0.05   0.64±0.03   1.29±0.03   0.46±0.0210     10    10.9±1.63    3.9±0.12   1.80±0.03   0.66±0.02   1.28±0.02   0.47±0.01
与对照组比较  *P＜0.05
5.4.5病理组织学检查结果：对各受试物组和对照组部份动物的心、肝、肺、脾、肾等脏器进行了病理组织切片观察，未见异常病理病变。
6、致畸试验
6.1动物：采用Wistar大鼠，雌鼠250-270克，雄鼠300克，各48只。动物由湖北省医学实验动物中心提供。
6.2剂量分组：设置空白对照组及受试物低、中、高三个剂量组；受试物低、中、高剂量组分别以1％、5％、10％的受试物加入到基料中喂养动物，空白对照组喂养普通饲料。
2.3方法：动物以雌雄1∶1同笼交配，以查出阴栓或阴道涂片查到精子作为受孕零天。获得孕鼠38只，对照组9只、低、中、高剂量组分别为9、10、11只。在受孕的第1天开始给予受试物，第20天检查到孕鼠阴道有血性分泌物时，立即断头处死动物，检查孕鼠及胎鼠情况，记录：子宫重量、黄体数、吸收胎、死胎数、活胎数、胎鼠体重、身体、尾长；并逐一检查胎鼠有无畸形，如有无脑膨出、露脑、小头、小耳、小眼、唇裂、短肢、并肢、多肢、无肢；最后将每窝1/2胎鼠制作骨标本以检查骨胳异常，另1/2置Bouins液中固定作内脏病理检查。
6.4结果：见表9、10、11
与对照组比较，受试物各组受孕率、平均胎鼠数无差别；胎鼠外观未见畸形；受试物各组胎鼠体重、身长、尾长与对照组比较，差异无显著性；与对照组比较，各实验组的矢状缝及前囟的宽度均属正常，颅骨、胸骨、肋骨、脊柱及内脏检查均无异常发现。据上所述：各实验组对大鼠的胎鼠生长发育未产生影响，无致畸作用。表9                        对大鼠繁殖的影响剂量    交配数  孕鼠数  受孕率  胎鼠数  平均胎数数  死胎数  吸收胎(％)     (只)    (只)    (％)    (只)      (/只)     (只)     (只)对照组    12      9       75      51       5.63        0       31       12      9       75      53       5.89        0       05       12     10       83      68        6.8        0       110       12     10       83      64        6.4        0       4注：交配数系指发现有阴栓的雌鼠数    孕鼠数系指怀胎的雌鼠数表10                        对大鼠胎鼠的影响(M±SD)剂量(％)  胎鼠数(只)     体重(g)      身长(cm)      尾长(cm)对照组       51       2.948±0.236  3.108±0.238  1.436±0.1081          53       2.983±0.315  3.068±0.235  1.445±0.1155          68       2.846±0.513  3.042±0.432  1.421±0.11010          64       3.056±0.315  3.084±0.364  1.400±0.103表11               对大鼠胎鼠骨骼的影响剂   量   胸骨缺失及骨化不全     颅骨矢状缝宽度(％)     (胎鼠数/受检胎鼠数)    (毫米，平均值)对照组             5/20               0.241                7/25               0.235                7/30               0.2110               9/35               0.22注：矢状缝宽度在1.0毫米以下均属正常结果与判定(Results and Evaluation)
延衰片对两种性别的昆明种小鼠24小时经口摄入受试物总量为12.8-14.2g/kg，未发现中毒症状及死亡情况，按急性毒性分级，该受试物属实际无毒级类物质。三项致突变试验(小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验、小鼠精子畸形实验、Ames试验)结果均为阴性。30天喂养试验表明：该受试物1％、5％、10％剂量，对大鼠血液、生化、脏器病理组织学无明显影响。致畸试验结果表明：该受试物对大鼠无致畸胎作用。
二.保健功能评价报告：
1、样品处理：延衰片经研磨粉碎后，过80目筛，供果蝇生存实验用。动物实验时，受试物按不同的比例加入到基料中，制成块状喂养动物。
2、果蝇生存实验：
实验动物：黑腹果蝇(drosophila melanogaster)。
饲养方法：采用平底培养指管培养，每管25只，置25℃，相对湿度为65％的暗温箱中，四天换一次培养基。基础培养基配方如下：组份    玉米份  红  糖   琼  脂   苯甲酸   干酵母粉   水     合计含量(％)    10     13.5     1.5      0.15        1     73.85   100剂量：设1个空白对照组和受试物0.2％、1％、5％3个剂量组。实验方法：收集10h内孵出和处女蝇，用乙醚麻醉后称重分组，雌雄分养，每组雌雄果蝇各100只，给予掺入受试物的基础培养基，每24h统计果蝇的存活数和死亡数，直至全部死亡。
结果：见表12，从表12可见，0.2％、1.0％、5.0％剂量组可明显延长雌性果蝇的平均寿命，1.0％、5.0％剂量组可明显延长雄性果蝇的平均寿命；0.2％剂量组可明显延长雄性果蝇的最高寿命，5.0％剂量组可明显延长雄性果蝇的最高寿命，与对照组比较差异有显著性(P＜0.05＞。表12             对果绳生存实验的影响组  别      样本数     平均体重(ug)    T50(d) 平均寿命(d)    最高寿命(d)♀对照       100           883           45    47.6±13.6     74.5±3.10.2％        100           892           61    62.9±11.4*    78.6±5.34*1.0％        100           846           60    60.6±9.26*    74.5±2.885.0％        100           873           65    53.4±9.53*    69.7±5.03♀对照       100           736           49    50.8±12.9     74.5±13.40.2％        100           724           50    52.2±10.8     70.1±5.11.0％        100           732           50    61.3±11.5*    80.2±3.65.0％        100           740           65    65.2±12.7*    84.3±1.42**表示与对照组比较P＜0.05
注：T50表示半数死亡时间
3、生化指标检测
动物：16个月龄昆明种小鼠，共40只，3月龄小鼠10只。
      湖北省医学实验动物中心提供。
分组：根据生产厂家提供的人体推荐日摄入量0.09/kg.d，分别扩大10、20、30倍，即0.9、1.8、2.7/kg.d，作为受试物低、中、高剂量组剂量。受试物加入到饲料中供动物食用，动物进食量按体重的10％计算，另设老龄对照组及少龄对照组，以普通饲料代替；连续给予受试物一个月；然后采血、处死动物作血清、肝脏过氧化脂质(LPO)含量和肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活力的测定。
实验方式：
实验结束时，取尾血分离血清，测定血清SOD活性、LPO含量；然后处死动物，取肝脏，制备1％的肝匀浆作SOD活力测定。SOD测定采用亚硝酸盐法，LPO测定采用共轭双键法(试剂盒购自南京建成生物工程公司)。
结果：见表13与对照组比较，绿四季延衰片低、中、高剂量组可明显减少血清及10％肝匀浆LPO含量(P＜0.01)；低、中、高剂量组可明显升高血清及1％肝匀浆SOD活性(P＜0.01)。表13            对老龄小鼠肝脏和血清SOD、LPO的影响
      动        LPO(nmol.MDA/ml)             SOD(NU.mL)剂  量    物(只)(g/kg)    数      血清      10％肝匀浆       血清        1％肝匀浆老龄对照  10    41.3±4.7   262.5±37.3   173.6±61.0    259.4±58.80.9     10    27.8±4.6*  154.3±24.2*  338.8±49.8*   436.5±54.4*1.8     10    28.3±4.5*  183.4±31.3*  372.5±41.8*   399.3±35.7*2.7     10    29.6±4.0*  162.7±33.3*  260.1±53.9    383.3±49.1*少龄对照  10    28.2±4.0   149.3±41.4   364.7±61.0    461.6±50.0
与老龄对照组比较   *P＜0.01结果与判定(Results and Evaluation)
延缓衰老试验结果表明：绿四季延衰片(1)中、高剂量组可延长果蝇的平均寿命，低剂量组可延长雌性果蝇的最高寿命，高剂量组可延长雄性果蝇的最高寿命；(2)以相当于生产厂家提供的人体推荐日摄入量(4.5g/50kg)的10、20、30倍，即0.9、1.8、2.7g/kg，分别作为受试物低、中、高剂量组。低、中、高剂量组可明显减少血清及10％肝匀浆LPO含量；低、中、高剂量组可明显升高血清、1％肝匀浆SOD活力。依据延缓衰老作用评价程序规定，该受试物有延缓衰老作用。
三、产品稳定性试验报告：
结       时间   第0个月      第1个月     第2个月      第3个月项目    果        (97.04.08)   (97.05.08)  (97.06.08)   (97.07.08)水  分(％)           3.02         3.50        3.60         4.70蛋白质(％)           5.55         5.44        5.72         5.46砷(mg/Kg，以As计)    ＜0.3        ＜0.3       ＜0.3        ＜0.3铅(mg/Kg，以Pb计)    ＜0.5        ＜0.5       ＜0.5        ＜0.5汞(mg/Kg，以Hg计)    ＜0.3        ＜0.3       ＜0.3        ＜0.3细菌总数(个/g)       ＜10         ＜10        ＜10         ＜10大肠菌群(个/100g)    ＜30         ＜30        ＜30         ＜30致病菌               未检出       未检出      未检出       未检出霉  菌(个/g)         ＜10         ＜10        ＜10         ＜10酵  母(个/g)         ＜10         ＜10        ＜10         ＜10
四、卫生学检测报告：检验结果：
                970310             970315             970320水  分(％)           3.04               3.02               3.02蛋白质(％)           5.54               5.65               5.55砷(mg/Kg，以As计)    ＜0.3              ＜0.3              ＜0.3铅(mg/Kg，以Pb计)    ＜0.5              ＜0.5              ＜0.5汞(mg/Kg，以Hg计)    ＜0.3              ＜0.3              ＜0.3细菌总数(个/g)       ＜10               ＜10               ＜10大肠菌群(个/100g)    ＜30               ＜30               ＜30致病菌          未检出    未检出    未检出霉  菌(个/g)     ＜10      ＜10      ＜10酵  母(个/g)     ＜10      ＜10      ＜10

Claims (1)

1、一种延衰片，由十二味中药材作为活性原料配制而成，在每单位所述延衰片中白糖占7.1％，滑石粉占2.0并含微量食用色素和石蜡，其特征是：在每单位所述延衰片中，其配方配比如下：
熟  地    15.3％                      枸杞子    8.1％
北沙参    8.1％                       柏子仁    6.1％
当  归    8.1％                       麦  冬    6.1％
桑椹子    8.0％                       女贞子    6.1％
鳖  甲    7.6％                       西洋参    2.2％
菟丝子    7.6％                       山  药    7.6％
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