CN1377702A - 灵芝破壁孢子粉胶囊 - Google Patents

Abstract

本发明为一种灵芝破壁孢子粉胶囊,由灵芝破壁孢子粉和灵芝精粉配制而成,灵芝破壁孢子粉为70～80份,灵芝精粉为30～20份,两者混合在自动胶囊机中装胶囊,然后在板放入γ－辐照中心灭菌,本产品有广泛的药理活性,能提高机体免疫力,提高机体耐缺氧能力,消除自由基,抑制肿瘤,抗放射,提高肝脏骨髓血流合成DNA、BAN蛋白质能力等。

Description

灵芝破壁孢子粉胶囊

(一)技术领域

本发明涉及一种灵芝破壁孢子粉胶囊，其主要成分为灵芝破壁孢子粉及灵芝精粉，为一种以灵芝为主成分的保健品。

(二)背景技术

灵芝自古被誉为保健珍品，内含灵芝多糖、氨基酸、三萜类、脂类，生物碱及有机锗等多种有效成分，这些有效成分对人体有一定的保健作用，但未破壁孢子粉，不易被人体吸收，不能有效地发挥其保健作用，所以利用率不高，造成浪费。

(三)发明内容

本发明将灵芝孢子粉放入破壁机中破壁，以灵芝破壁孢子粉与灵芝精粉以一定比例配成本发明的灵芝破壁孢子粉胶囊。

1、原料准备

a、灵芝破壁孢子粉：灵芝子实体成熟后即释放孢子粉，必需适当采集，采集时应避免杂质的混入，将采集的孢子粉筛选去杂，送进烘干室烘干，烘干温度75-81℃，时间2-4小时，烘干后水份控制±7-9％，将烘干后的灵芝孢子粉放进破壁机中破壁，破壁温度40℃以下，孢子破壁率大于95％，破壁率＝破壁后孢子个数：孢子总个数×100％；

b、灵芝精粉准备：将灵芝子实体用破碎机破碎至粒度为0.5～1.0厘

米，将粉碎的子实体加入不锈钢提取锅中，加去离子水，水量为灵芝重量的14倍，用蒸汽加热至沸腾，并保持沸腾2-3小时，用80目筛过滤得一煎提取液，将滤渣再加入12倍量的去离子水，再煎煮2-3小时，仍用80目筛过滤得二煎提取液，将两次提取液合并置于贮液槽中，静止沉淀12小时，取上清液，弃去底部泥浆状物，得到的上清液为热水提取液，将灵芝热水提取液在60℃-70℃减压蒸发浓缩至热侧密度1∶1.35-1.38，使之成为膏状，即灵芝浸膏，灵芝浸膏干燥粉碎后即为灵芝精粉。

2、配方及工艺

配方：灵芝破壁孢子粉70～80份(重量)

      灵芝精粉30～20份(重量)

工艺方法：将灵芝破壁孢子粉和灵芝精粉按配方比例精确称取并放入混合机中，搅拌均匀输入自动胶囊机装胶囊，并将胶囊送到压板机中压制成产品，将产品放入γ-辐照中心灭菌，辐照量为8-10Kgy。

本产品有广泛的药理活性，能提高机体免疫力，提高机体耐缺氧能力，消除自由基，抑制肿瘤，抗放射，提高肝脏骨髓血流合成DNA、BAN蛋白质能力，延长寿命等，灵芝的多种药理活性大多和灵芝多糖有关。生物碱是灵芝中具有重要活性的物质，能改善冠状动脉血流量，降低心肌耗氧量，增强心肌及机体对缺氧的耐受性和降胆固醇的作用，灵芝中也含有锗元素，锗调整人体不正常电位的功能，在癌细胞电位剧烈上升时，锗元素含夺取癌细胞的电子，使主点位下降，抑制癌症恶化。

本发明经大量实例作为保健品服用，证实了其上述效果，与未破壁的相似保健品对比，效果更好，已经省级评审委员会评审通过，

评审意见如下

1、认为此产品申报材料齐全，完整，符合保健食品申报与受理的基本要求，出具检验报告的单位符合规定的资格条件。

2、认为该产品的配方符合卫生要求，生产工艺合理，稳定性试验及对比产品卫生学检测结果显示，产品质量稳定，符合国家有关标准和企业产品质量标准的规定。

3、申报的保健功能为免疫调节，保健功能实验证实，该产品具有申报的保健作用。

4、毒理学安全性评价报告结果表明，该产品具有食用安全性。

5、该产品的质量标准符合标准编制的有关原则，所确定的各项指标符合《保健功能食品通用标准》的规定。

6、该产品的设计包装和产品说明书符合《保健食品的标识规定》基于以上评价参加评审的全体评审委员，全体通过评审并负有保密责任。技术要求1、感官指标

                         表1

项目	指标
		色泽	内容物为深褐色
形态	内容物为粉末状
		滋味及气味	有灵芝独有的气味，无霉变味及其它异味

2、理化指标理化指标应符合表2规定。

                         表2

项目	指标
		单件包装净含量允许负偏差(％)	≤5.0
单粒胶囊净含量(mg)	250±10
		崩解时限(min)	≤30
水分(％)	≤8.0
		砷(mg/kg，以As计)	≤1.0
铅(mg/kg，以Pb计)	≤1.0
		汞(mg/kg，以Hg计)	≤0.3

3、功效成分功效成分应符合表3的规定

                         表3

项目	指标
		多糖(mg/g)	≥35.0

4、保健功能本品具有免疫调节作用。5、微生物指标微生物指标应符合表4的规定

                         表4

项目	指标
		菌落总数(Cfu/g)	≤1000
大肠菌群(MPN/100g)	≤40
		霉菌(Cfu/g)	≤25
酵母(Cfu/g)	≤25
		致病菌(指肠道致病菌和致病性球菌)	不得检出

灵芝破壁孢子粉胶囊毒理学试验报告

1材料和方法

1.1样品：由泰安市中信灵芝科技开发有限公司提供，人体推荐量为每人每日3.6g。

1.2试验动物：二级昆明种小鼠(合格证书：医动字第01-3001号)和二级Wistar大鼠(合格证书：医动字第01-3008号)，均由中国医学科学院医学实验动物研究所实验动物繁育场提供。

1.3小鼠急性毒性试验：选择体重18-22g小鼠20只，雌雄各半。受试物剂量为20g/kg.bw，分两次灌胃给予实验动物，观察14d，记录动物中毒表现及死亡情况。

1.4遗传毒性试验：

1.4.1Ames试验：试验菌株为经鉴定符合要求的鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100、TA102，体外活化系统为多氯联苯诱导的大鼠肝匀浆制备的S-9混合液。根据毒性试验结果，试验设312，625，1250，5000μg/ml 5个剂量，同时设立自发回变组、溶剂对照组和阳性对照组。试验按照平板掺入法在加S-9与不加S-9混合液的条件下进行，每个组别设三个平皿。若受试物的回变菌落数为自发回变菌落数的2倍以上，并具有剂量-反应关系者则判定为阳性。整套试验在相同条件下重复做两次。

1.4.2小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验：选择体重25-30g小鼠50只，随机分为5组，每组10只，雌雄各半。3个实验组中受试物剂量分别为2.5、5.0、10.0g/kg.bw，另设蒸馏水阴性对照组和环磷酰胺阳性对照组(40mg/kg.bw)。灌胃给予受试物，共两此，间隔24h，末次与给受试物后6h处死动物，常规制片。每只动物镜检1000个嗜多染红细胞，记录微核细胞数，计算微核率(以千分率表示)。

1.4.3小鼠精子畸形试验：选择体重25-35g雄性小鼠25只，随机分为5组。每组5只，3个实验组中受试物剂量分别为2.5、5.0、10.0g/kg.bw，另设蒸馏水阴性对照组和环磷酰胺阳性对照组(40mg/kg.bw)。灌胃给予受试物，连续5d，首次灌胃后第35d处死动物，常规制片。每只动物计数1000个结构完整的精子，记录畸变类型和数量，计算精子畸形率(以百分率表示)。

1.4.4小鼠睾丸染色体畸变试验：选择体重25-35g雄性小鼠25只，随机分为5组。每组5只，3个实验组中受试物剂量分别为2.5、5.0、10.0g/kg.bw，另设蒸馏水阴性对照组和环磷酰胺阳性对照组(40mg/kg.bw)。灌胃给予受试物，连续5d，首次灌胃后第13d处死动物，常规制片。每只动物计数100个中期分裂相，记录畸变类型和数量，计算染色体畸形率(以百分率表示)。

1.5.大鼠30d喂养试验：

1.5.1试验方法：选择体重50-60g断乳大鼠80只，随机分为4组，每组20只，雌雄各半。3个实验组中受试物剂量分别为1.5、3.0、6.0g/kg.bw(分别相当于人推荐量的25、50、100倍)，将受试物按大鼠体重的10％计算食物摄入量掺入普通饲料中喂食实验动物，同时设立对照组。单笼喂养，自由饮食，每周称重一次并记录大鼠进食量、体重，连续观察30d。

1.5.2观察指标：

1.5.2.1动物的一般表现、体重、食物利用率。

1.5.2.2血常规及生化指标：血红蛋白。红细胞计数、白细胞总数及其分类、转氨酶、尿素氮、肌酐、胆固醇、甘油三脂、血糖、总蛋白、白蛋白等。

1.5.2.3病理解剖：脏器系数、大体观察及病理组织检查(肝、肾、脾、胃、十二指肠、睾丸或卵巢)。

2、结果

2.1急性毒性试验：灌胃给予受试物后，两种性别的小鼠均未见明显中毒症状，14d内动物无死亡(见表1)。因此认为该受试物对两种性别小鼠的急性毒性LD50均大于20g/kg.bw。根据急性毒性分级标准，该样品属无毒物质。

               表1、小鼠急性毒性实验结果

动物品种	性别	途径	LD50(g/kg.bw)
				小鼠	雄	经口	＞20
小鼠	雌	经口	＞20

2.2遗传毒性试验：

2.2.1Ames试验：由表2-1、表2-2可见，两次试验中受试物各剂量组回变菌数均未超过自发回变菌落数的2倍，亦无剂量-反应关系，说明在加与不加S-9时该样品对鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100、TA102四株试验菌株均未呈现遗传毒性。

                   表2-1、Ames试验结果(第一次)(X±S)

剂量(μg/皿)	TA97-S-9         +S-9	TA98-S-9    +S-9	TA100-S-9       +S-9	TA102-S-9       +S-9
					5000	135±15.5    151±13.4	28±1.4  26±1.4	124±4.2  136±9.8	242±25.4   258±22.6
2500	140±10.5    160±8.4	29±4.2  29±1.4	127±10.5 130±8.4	258±24.0   269±15.5
					1000	153±15.5    165±15.5	28±1.4  31±2.8	136±5.6  142±11.3	244±9.8    260±14.1
500	147±14.1    167±9.8	31±2.8  32±2.8	139±11.3 150±15.5	268±12.7   277±15.5
					250	160±12.7    161±11.3	33±2.8  32±5.6	144±11.3 158±19.7	273±16.9   287±21.2
自发回变	130±9.8     136±10.5	30±2.8  34±4.2	136±14.8 134±14.8	278±16.9   285±29.6
					溶剂对照	138±2.8     147±9.8	35±4.2  38±2.8	135±12.7 139±14.1	273±25.4   282±14.1
阳性对照*	830(1)       907(2)	854(3)  ＞2000(2)	＞2000(4) 1194(2)	＞2000(5)   1202(2)

                   表2-2、Ames试验结果(第一次)(X±S)

剂量(μg/皿)	TA97-S-9      +S-9	TA98-S-9    +S-9	TA100-S-9     +S-9	TA102-S-9     +S-9
					5000	137±14.1 159±12.7	25±2.8 29±2.8	127±4.2  139±11.3	256±22.6 269±28.3
2500	141±12.0 164±8.4	30±5.6 30±1.4	135±12.7 138±14.1	266±17.6 274±19.7
					1000	157±9.8  165±9.8	30±4.2 32±5.6	137±14.1 146±5.6	265±24.0 277±9.8
500	154±9.8  171±5.6	32±1.4 32±2.8	141±11.3 150±9.8	272±11.3 283±28.3
					250	163±12.0 169±16.9	36±1.4 34±2.8	151±12.7 159±9.8	282±18.3 279±14.1
自发回变	141±10.5 150±9.1	34±5.6 37±2.8	143±12.7 141±14.1	283±18.3 298±22.6
					溶剂对照	140±2.8 154±9.8	33±2.8 38±4.2	140±16.9 146±15.5	280±15.5 295±15.5
阳性对照*	830(1)    907(2)	854(3) ＞2000(2)	＞2000(4) 1194(2)	＞2000(5) 1202(2)

灵芝破壁孢子粉胶囊免疫调节实验

1、材料与方法：

1.1样品：由泰安市中信灵芝开发有限公司提供，为褐色粉末。

1.2实验动物：购自中国军事医学科学院动物中心，健康昆明种小鼠，雌性，体重18-22g。准文号为医动字8707M01号。

1.3剂量选择：中信牌灵芝破壁孢子粉胶囊人体推荐量为每天2.70-3.60g/60kg体重，按3.60g/60kg体重计算，扩大10倍作为中剂量，即0.60g/kg。上、下各设一个剂量组：1.80g/kg(高)和0.30g/kg(低)。用蒸馏水将样品配至所需浓度，同时设立水对照组，连续经口灌胃天后，测各项免疫指标。

1.4仪器与试剂：

紫外可见分光光度计、电子天平、数显游标卡尺(精密度0.01mm)、微量注射器(50μl)、CO₂培养箱、恒温水浴箱、离心机、玻片架、200目筛网、手术器械、秒表、一次性定量取血管、SRBC、补体(豚鼠血清)、Hanks液、SA缓冲液、琼脂糖、印度墨汁、Na₂CO₃溶液。

1.5实验方法：

1.5.1迟发型变态反应(DTH)(足跖增厚法)

小鼠腹腔注射2％(V/V)SRBC，致敏后4天测量左后足跖厚度，然后在测量部位皮下注射20％(V/V)SRBC，每鼠注射20μl，注射后24小时测量左后足跖部厚度，同一部位测量三次，取均值。以攻击前后足跖厚度差值(足跖肿胀度)来表示DTH的程度。

1.5.2小鼠碳廓清试验

小鼠尾静脉注射1∶3稀释的印度墨汁，待墨汁注入立即计时，注入墨汁后2、10min，分别从内呲静脉丛取血20μl，并将其加到2mlNa₂CO₃溶液中，用紫外可见分光光度计在600nm波长处测光密度值(OD)，以Na₂CO₃溶液作空白对照，将小鼠处死，取肝和脾脏称重，计算吞噬指数。

1.5.3小鼠脏器/体重比值

小鼠腹腔注射SRBC五天后处死，取胸腺、脾脏称重，计算脏器/体重比值。同时制备脾细胞悬液，进行抗体生成细胞测定。

1.5.4抗体生成细胞检测(Jeme改良玻片法)

取脾，制成细胞悬液。将表层培养基加热溶解后与等量双倍Hanks液混合，分装小试管，每管0.5ml，再向管内加50μl，10％SRBC(V/V，用SA液配制)、20μl，脾细胞悬液，迅速混匀后倾倒于已刷琼脂糖薄层的玻片上，待琼脂凝固后，将玻片水平扣放在玻片架上，放入CO₂培养箱温育1.5h，然后用SA液稀释的补体(1∶10)加入到玻片架凹槽内，继续温育1.5h后，计数溶血空斑数。

1.6实验数据用Foxprow软件建立数据库，用EPI软件进行数据分析。

2.结果

2.1中信牌灵芝破壁孢子粉胶囊对小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响表1中信牌灵芝破壁孢子粉胶囊对小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响

组别(g/kg)	动物数(只)	足跖肿胀度(mm)	P值
				0.00	14	0.23±0.08
0.30	14	0.31±0.06	＜0.05
				0.60	14	0.30±0.10	＞0.05
1.80	14	0.33±0.15	＜0.05

(四)具体实施方式

按以下方法准备原料

A、灵芝破壁孢子粉，在灵芝子实体成熟后，立即采集孢子粉，将采取的孢子粉筛选、去掉杂质，入烘干室在75-81℃烘干，烘3小时，水份控制在7-9％，烘干后放进破壁机中破壁，破壁温度40℃，孢子破壁率应大于95％，达不到95％应增加破壁时间。

B灵芝精粉的准备

把灵芝子实体用破碎机破碎至粒度为0.5～1.0厘米，加入不锈钢提取锅中，加入去离子水，加水量为灵芝重量的14倍，用蒸汽加热至沸腾，并保持2.5小时，用80目筛过滤得一煎提取液，将滤渣再加入12倍量的去离子水，再煎煮2.5小时，仍用80目筛过滤得二煎提取液，将两次提取液合并置于贮液槽中，静止沉淀12小时，取上清液为热水提取液，在60℃-70℃减压蒸发浓缩至热侧密度1∶1.35-1.38，为灵芝浸膏，经干燥粉碎后即为灵芝精粉。

按以下配方及方法制造产品

配方  灵芝破壁孢子粉70～80份(重量)

      灵芝精粉30～20份(重量)

按上述配方称取灵芝破壁孢子粉和灵芝精粉放入混合机中，搅拌均匀，将混合物输入自动胶囊机装胶囊，并将胶囊送到压板机中压板成为产品，将成品放在γ-辐照中心灭菌，辐照量为8-10Kgy。

Claims (4)

1、一种灵芝破壁孢子粉胶囊，其特征是由下述重量配比的原料和方法制成的胶囊，

                 灵芝破壁孢子粉70～80份

                 灵芝精粉30～20份

将灵芝破壁孢子粉和灵芝精粉按配方比例精确称取并放入混合机中，搅拌均匀输入自动胶囊机装胶囊，并将胶囊送到压板机中压板制成产品，将产品放入γ-辐照中心灭菌，辐照量为8-10Kgy。

2、根据权利要求1所述的灵芝破壁孢子粉胶囊，其特征是以下述重量配比的原料制成的胶囊，

                 灵芝破壁孢子粉70份

                 灵芝精粉30份

3、根据权利要求1所述的灵芝破壁孢子粉胶囊，其特征是所述的灵芝破壁孢子粉是从成熟的灵芝子实体上采集的灵芝孢子粉经去杂，在75-81℃炉中烘干，时间2-4小时，烘干到含水份7-9％，将烘干的灵芝孢子粉放进破壁机破壁，破壁温度40℃以下，孢子破壁率大于95％。

4、根据权利要求1所述的灵芝破壁孢子粉胶囊，其特征是所述的灵芝破壁孢子粉是将灵芝子实体用破碎机破碎至粒度为0.5～1.0厘米，将粉碎的子实体加入不锈钢提取锅中，加去离子水，水量为灵芝重量的14倍，用蒸汽加热至沸腾，并保持沸腾2-3小时，用80目筛过滤得一煎提取液，将滤渣再加入12倍量的去离子水，再煎煮2-3小时，仍用80目筛过滤得二煎提取液，将两次提取液合并置于贮液槽中，静止沉淀12小时，取上清液为热水提取液，将灵芝热水提取液在60℃-70℃减压蒸发浓缩至热侧密度1∶1.35-1.38，使之成为膏状，即灵芝浸膏，灵芝浸膏干燥粉碎后即为灵芝精粉。