CN103301201B

CN103301201B - 一种提高免疫力辅助抗肿瘤的中草药复方

Info

Publication number: CN103301201B
Application number: CN201310267576.XA
Authority: CN
Inventors: 贾利忠
Original assignee: SUZHOU PUYUN BIOTECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: Huzhou Liuying Biological Technology Co.,Ltd.
Priority date: 2013-06-28
Filing date: 2013-06-28
Publication date: 2015-02-18
Anticipated expiration: 2033-06-28
Also published as: CN103301201A

Abstract

本发明公开了一种提高免疫力辅助抗肿瘤的中草药复方，其特征在于，包含灵芝破壁孢子粉2～4份、西洋参2～4份、冬虫夏草3～5份、桑葚3～5份，灵芝破壁孢子粉为灵芝菌丝体和子实体的破壁孢子粉混合物比例为1∶1。该产品具有增强免疫力辅助抗肿瘤的保健功能。

Description

一种提高免疫力辅助抗肿瘤的中草药复方

技术领域

本发明涉及保健品，特别涉及一种中草药保健品。

背景技术

免疫力是指机体抵抗外来侵袭，维护机体内部环境稳定性的一种能力。不管是何种原因引起的“亚健康”，不管是那种表现的“亚健康”，最主要、最本质的是人体自身免疫功能下降。只要提高自身免疫功能，“亚健康”就会远离。据世界卫生组织调查，全球约有35％以上的人处于疲劳状态，男性人群疲劳状态者更高达60-70％。疲劳正成为现代人尤其是男性健康的大敌。有统计显示：我国大约有2亿人处于亚健康的疲劳状态，疲劳综合症在我国城市发病率为10-20％，而需要提前预防疲劳的人群就更加广泛。专家们指出，持续过度疲劳、长期睡眠不佳后果严重，会引发慢性咽喉炎、颈部或腋窝淋巴结肿痛、肌肉酸痛、多发性非关节炎性关节疼痛、头晕、头痛等病症，并最终导致免疫力下降。

肿瘤(Tumor)是机体在各种致癌因素作用下产生的，提高抵抗力对治疗肿瘤有一定帮助。

因此，如何让人们在现代节奏及压力越来越大的生活环境下增强身体免疫力，缓解人们的体力疲劳，对辅助病患对抗肿瘤，保护人类的正常身体机能和提高人类的生存质量，是保健食品的研发者所要解决的问题。

发明内容

本发明的一个目的是提供具有增强免疫力、辅助抗肿瘤等保健功能的一种提高免疫力辅助抗肿瘤的复方中草药复方，其由以下重量份原料制成：灵芝破壁孢子粉2～4份、西洋参2～4份、冬虫夏草3～5份、桑葚3～5份，所述灵芝破壁孢子粉为灵芝菌丝体和子实体的破壁孢子粉混合物重量比例为1∶1。

原料中桑葚(Mulberry)又名桑果具有很高的药用价值。中医学认为桑果具有滋阴补血、生津润燥、清肝明目、润肠通便、安神镇魄等功效。《本草纲目》等中医名著均有记载。近年来研究者对桑葚进行了安全评价和功能检验。研究证明桑葚具有增强机体免疫功能、抗衰老、降糖、降脂、护肝及抗肝炎病毒、抗诱变的作用，桑葚含多种活性成分，临床副作用小，长期毒性试验证明其可长期服用，尤其它可以调节和促进免疫功能，无疑会对预防某些老年病和延缓衰老有益。

灵芝孢子粉富含多种对人体有益的物质，其中中灵芝多糖可增强免疫系统的机能，预防和治疗肿瘤及癌症；消除体内自由基。三萜类的灵芝酸改善微循环。天然有机锗能增强人体血液供养量，促进血液新陈代谢，消除体内自由基。

本发明优选了组成成分和配比能够起到提高免疫力的效果，可以帮助患者提高免疫力来对抗癌症。

根据本发明的一方面，对本复方进行了优选，灵芝破壁孢子粉优选含量为3份、西洋参优选含量为3份、冬虫夏草优选含量为4份、桑葚优选含量为4份(含量都为重量份)。优选的配比能提供良好的提高免疫力效果。

根据本发明提供的一种提高免疫力及辅助抗肿瘤的中草药复方，其制剂可按相应需求加入辅料制成颗粒冲剂或口服溶液或者胶囊等剂型。选用这些优选的剂型有利于患者服用。

本产品经过功能实验，本发明对小鼠的迟发型变态反应和ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化增殖试验的结果均为阳性，表明本发明具有增强细胞免疫功能的作用；绵羊红细胞免疫受试动物后血清溶血素检测结果阳性，绵羊红细胞免疫受试动物后脾细胞抗体生成试验结果阳性，表明本发明具有增强体液免疫功能作用，并且本发明具有增强NK细胞活性作用，本品具有增强免疫力功能作用。

具体实施方式

实施例1基本制剂制备

制剂A：取灵芝破壁孢子粉300g(灵芝破壁孢子粉为灵芝菌丝体和子实体的破壁孢子粉混合物比例为1∶1，以下所用的灵芝孢子粉皆为所述的混合物)；干西洋参粉末(＜300目)300g；干冬虫夏草粉末(＜300目)400g；桑葚果实冻干粉末400g。将上面个原料经机械分散混合得到制剂A。

制剂B：取灵芝破壁孢子粉200g；干西洋参粉末(＜300目)200g；干冬虫夏草粉末(＜300目)300g；桑葚果实冻干粉末300g。将上面个原料经机械分散混合得到制剂B。

制剂C：取灵芝破壁孢子粉400g；干西洋参粉末(＜300目)400g；干冬虫夏草粉末(＜300目)500g；桑葚果实冻干粉末500g。将上面个原料经机械分散混合得到制剂C。

实施例2颗粒剂制粒

取上述制备的任意一种基本制剂，以制剂A为例，混入一定量的蔗糖、麦芽糊精，比列为：蔗糖45～60％，麦芽糊精6～10％。混合均匀后进行真空干燥，使之水分含量达到2～6％。真空干燥工艺：60～65℃，4～5小时，真空度-0.06Mp～0.08Mp。

造粒：将干燥后的混粉粉碎、过40目筛，并混合均匀，用干法制粒机进行制粒，颗粒直径1.0mm～1.5mm，长度1.5mm～2.0mm。

分装：取造好的颗粒，装量为3～15g/袋，以复合膜分装。

胶囊制造

选取实施例1的产品为原料。

填充胶囊：用胶囊填充机填装胶囊。

抛光、筛选：用抛光机清除粘附在胶囊表面的细粉，筛选去不合格品。

毒理试验

检验结果与评价

一、三十天喂养试验

对健康SPF级SD种大鼠每天给予1、2、4g/kg本发明制剂A，为人体推荐量的25、50、100，试验时间共30天，终期结果：

(1)、大鼠一般生理体征、行为、大小便、皮毛等均无异；

(2)、体重、摄食量和食物利用率指标正常；

(3)、血液常规指标下常；

(4)、生化指标正常；

(5)、各脏器重量、脏/体比值正常；

(6)、病理学检查未发现与受试物有关的特殊病理学改变。

二、小鼠经口急性毒性、微核试验、精子畸变、Ames试验

(1)、小鼠经口急性毒性试验

雌雄小鼠经口急性毒性最大耐受量(MTD)＞20.0g/kg BW，根据急性毒性分级，受试物制剂A属无毒级物质。

(2)、小鼠骨髓微核试验

2.50～10.0g/kg BW剂量的微核试验结果为阴性，受试物对体细胞无诱变作用。

(3)、小鼠精子畸形试验

2.50～10.0g/kg BW剂量的精子畸变试验结果为阴性，受试物对生殖细胞无诱变作用。

(4)、Ames试验

用浓度为8～5000μg/皿的受试物对鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型菌株TA97、TA98、TA100、TA102进行平皿掺入试验，无论在加入不加S9混合液时，各剂量组均未引起试验菌株的回复突变菌落数显著增加，Ames试验结果为阴性，受试物无直接或间接的致突变作用。

功能学试验

1.试验准备

样品：本发明制剂A。样品推荐日服量为40mg/kg BW。

剂量与分组：将动物分为I、II、III、IV批，每批48只动物随机分为四组，分别给予纯净水和低、中、高三个剂量，剂量如表1

表1各组剂量

组别
			低剂量	0.2g/kg BW	相当于推荐剂量的5倍
中剂量	0.4g/kg BW	相当于推荐剂量的10倍
			高剂量	1.2g/kg BW	相当于推荐剂量的30倍

样品处理：实验时称量样品用纯净水配置成1ml的样液，分别供低、中、高三个剂量组动物灌胃使用。

动物：SPF级NIH种雌性小白鼠，6-8周龄(体重：18-22g)，由苏州大学医学部实验动物中心提供，颗粒饲料由苏州大学医学部实验动物中心提供。

动物实验室：SPF级，室温22±2℃；湿度60-80％。

给予受试物途径：每天按相应量灌胃动物给予受试物。

2.试验方法：

动物在实验室条件下检疫三天后，以下每个实验均随机将48只鼠分成四，每组12只，每日灌胃给予受试物，给样量根据每周体重增减调整，实验时间为4周。

2.1小鼠迟发型变态反应试验(足跖厚度增加法)使用I批

试验结束前第4天免疫动物，用2％(v/v)的绵羊红细胞腹腔注射0.2ml致敏动物，5天后测定左后足跖部厚度，接着于该处皮下注射20％(v/v)的绵羊红细胞20ul/鼠，注射后24小时测定左后足跖部厚度三次，得平均值.

2.2ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验(MTT法)

脾细胞悬液制备：无菌取脾，置于盛有适量无菌Hanks液的小平皿中，用嵌子轻轻将脾撕碎，制成单个细胞悬液。经200目筛网过滤，Hanks液洗3次，每次离心10mins(1000r/min)。然后将细胞悬浮于2ml的完全培养液中，用细胞计数仪计数脾细胞，调整细胞浓度3×10⁶个/ml。

淋巴细胞增殖反应：将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔1ml，一孔75ulConA液(相当于7.5ug/ml)，另一孔作为对照，置5％CO₂，37℃培养72h。培养结束前4小时，每孔吸去上清液0.7ml，加入0.7ml无血清RPMI1640培养液，同时加入MTT(5mg/ml)50ul/孔，继续培养4h。培养结束后，每孔加入1ml酸性异丙醇，吹打混匀，使紫色结晶溶解，分加于96孔培养板中，作3个孔的平行样，以570nm波长测定光密度值。

2.2NK细胞活性测定(LDH法)使用II批

脾细胞悬液的制备(效应细胞)：无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank’s液小平皿中，用镊子轻轻将脾撕碎，制备单细胞悬液。经200目筛网过滤，Hank’s液洗3次，每次离10min(1000r/min)，然后将细胞悬浮于2ml的完全培养中，用细胞计数仪计数脾细胞，最后用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为2×10⁷个/ml。NK细胞活性检测：取浓度为4×10⁵个/ml的YAC-1靶细胞和效应细胞各100ul(效靶比50∶1)，加入U型96孔培养板；靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100μl，靶细胞自然释放孔加靶细胞和1％NP40各100μl；上述各项均设三个复孔，于37℃、5％CO₂培养箱中培养4h，然后将96也培养板以1500r/min离心5min。每孔吸取上清100ul置平底96孔培养板中，同时加入LDH基质液100μl，反应3min，每孔加入1mol/L HC130μl，在酶联仪492nm处测定光密度值。

3.实验结果

本发明对小鼠的迟发型变态反应的影响：中、高剂量组足跖增厚值与对照组比较，差异有显著性意义(见表2)。表明本发明对小鼠的迟发型变态反应试验结果为阳性。

表2本发明对小鼠迟发型变态反应的影响(x±s)

组别	剂量	动物数	足趾增厚(mm)
				对照组		12	0.44±0.11
低剂量组	0.2g/kg BW	12	0.50±0.12
				中剂量组	0.4g/kg BW	12	0.52±0.12
高剂量组	1.2g/kg BW	12	0.56±0.11

本发明对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化反应：高剂量组光密度差值高于对照组，差异有显著性意义(见表3)，表明脾淋巴细胞转化试验结果为阳性。

表3对小鼠脾淋巴细胞转化反应的影响(x±s)

组别	剂量	动物数	OD差值
				对照组		12	0.299±0.067
低剂量组	0.2g/kg BW	12	0.310±0.061
				中剂量组	0.4g/kg BW	12	0.314±0.066
高剂量组	1.2g/kg BW	12	0.323±0.045

本发明对受试动物NK细胞活性的影响见表4，高剂量组的NK细胞活性与对照组比较差异有显著性意义，表明本发明对受试动物NK细胞活性试验结果为阳性。

表4对小鼠NK细胞活性的影响(n＝12，x±s)

组别	剂量	NK细胞活性％	NK细胞活性转换值
				对照组		8.02±0.98	0.30±0.02
低剂量组	0.2g/kg BW	8.32±0.63	0.30±0.01
				中剂量组	0.4g/kg BW	8.75±0.61	0.31±0.02
高剂量组	1.2g/kg BW	9.03±0.95	0.32±0.02

动物实验结论

对SPF级NIH种小鼠经口每日分别给予本发明0.2g/kg BW、0.4g/kgBW、1.2g/kg BW的剂量。结果显示：绵羊红细胞诱导的小鼠迟发型变态反应试验(足跖增厚法)阳性，ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化增殖试验阳性，受试样品具有增强细胞免疫功能的作用；受试动物NK细胞活性试验阳性，受试样品具有增强NK细胞活性作用。

跟踪200名免疫力低下的早期癌症患者，男100，女100年龄分布在30～50岁；在进行常规治疗时按推荐剂量服用本发明的A制剂，其中104名患者服用本发明1个月后，效果显著；23人好转；剩余患者没有明显改善，无效。

效果评定标准：

显效：体质明显增强，四肢有力，精力和脸色均有所好转，睡眠和消化等方面的状态明显改善；

好转：体质有所增强，四肢较有力，精力充沛，脸色改善，睡眠和消化等方面的状态也有所改善；

无效：症状及各项检查未见改善。

综合上述实施例，本产品无毒安全，具有提高免疫力的功能，能够辅助癌症患者与癌症抗争。

Claims

1.一种提高免疫力辅助抗肿瘤的中草药复方，其特征在于，由灵芝破壁孢子粉重量份2～4份、西洋参重量份2～4份、冬虫夏草重量份3～5份、桑葚重量份3～5份组成，所述灵芝破壁孢子粉为灵芝菌丝体和子实体的破壁孢子粉混合物重量比例为1：1。

2.根据权利要求1所述的一种提高免疫力辅助抗肿瘤的中草药复方，其特征在于，所述灵芝破壁孢子粉优选含量为3份、西洋参优选含量为3份、冬虫夏草优选含量为4份、桑葚优选含量为4份。

3.根据权利要求1～2任意一项所述的一种提高免疫力辅助抗肿瘤的中草药复方，其特征在于，所述复方制剂形态为颗粒冲剂或胶囊。