CN109350649A - 一种中药提取物、其制备方法及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种中药提取物、其制备方法及应用。本发明公开的中药提取物，其制备方法包括以下步骤：(1)将滤液A2浓缩，用滤液A1进行置换得提取液；(2)将步骤(1)中提取液在2～6℃陈化，过滤得滤液；(3)将步骤(2)中滤液在30～50℃下过滤即可。本发明提供的中药提取物无防腐剂、安全，抗炎止痒效果好。

Description

一种中药提取物、其制备方法及应用
技术领域
本发明涉及药品和化妆品护肤领域，具体是一种中药提取物、其制备方法及应用。
背景技术
涉及炎症和瘙痒性疾病包括湿疹，荨麻疹和蚊虫叮咬等多种皮肤病。
湿疹又名特应性皮炎、遗传过敏性皮炎、异位性皮炎等，是一种与遗传过敏素质有关的特发性炎症性皮肤疾病，湿疹表现为瘙痒、红斑、水肿、糜烂及渗出、粗糙肥厚、苔鲜样变等。目前研究发现，湿疹发病率在不同年龄阶段湿疹发病率不同，0.5～3岁湿疹发病率达到13％，其中1～6月龄婴幼儿湿疹发病率高达73.96％，而且湿疹发病率逐年呈现升高的趋势。
湿疹主要发病机理复杂，主要涉及到炎症、免疫和微生物因素等，是一种T细胞介导的疾病，在急性发作期表现为以Th2细胞免疫反应占主导地位，慢性期则转为Th1细胞免疫反应，具体免疫机理包括：抗原通过朗格汉斯细胞递呈抗原到淋巴细胞，刺激辅助性T(Th)淋巴细胞的浸润，急性发作期Th0向Th2淋巴细胞分化，Th2淋巴细胞分泌多种促炎症细胞因子，包括白介素-2，3，4，5，13；在疾病的慢性阶段，Th0向Th1淋巴细胞分化，引起了包括干扰素γ，白介素-11，12，18，粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和肿瘤生长因子β等多种促炎症细胞因子的发生，其中钙调磷酸酶抑制剂/钙调磷酸酶(CaN)-NF-AT通路可以抑制Th0向Th2淋巴细胞分化，Th0向Th1淋巴细胞分化，从前期就可以控制免疫和炎症的发生；湿疹最大的不适感是瘙痒，这是由于在疾病的过程中，肥大细胞释放组胺等引起，所以降低瘙痒症状也是治疗和舒缓湿疹不适感的重要方面。
荨麻疹称“风疹块”，是由于皮肤、黏膜小血管扩张及渗透性增加出现的一种局限性水肿反应。临床表现为大小不等的风团伴瘙痒。慢性荨麻疹是指上述风团伴瘙痒几乎每天发生，并持续6周以上者。研究发现2-6岁儿童荨麻疹的发病高达8.54％，而且儿童患病率随年龄增长呈增高趋势。目前荨麻疹的治疗主要有抗炎治疗，拮抗组胺及其受体及抑制肥大细胞释放的介质。
蚊虫叮咬是夏季每个人都会遇到的问题，但处于安全的考虑，婴幼儿和孕妇并不愿意使用花露水，所以开发一款安全的用于蚊虫叮咬引起的瘙痒和肿胀的产品很重要。
乳酸作为经典的感觉刺激剂，会引起皮肤瘙痒，刺痛等刺激反应，一直被认为是评价敏感皮肤最有效的方法，同时也作为皮肤瘙痒，刺痛等刺激的造模剂。
现有治疗湿疹等皮肤病大多以糖皮质激素、他克莫司和吡美莫司等为主，长期使用存在烧灼、刺激、产生依赖等副作用大、不宜长期大量使用。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是克服现有技术中长期使用西药治疗湿疹等皮肤病存在烧灼、刺激、产生依赖等缺陷，而提供一种中药提取物，其无防腐剂、安全。
本发明通过以下技术方案解决上述技术问题。
本发明提供一种中药提取物的制备方法，按重量份数计，所述的中药提取物的原料组分包括薰衣草5～15份、青蒿35～45份、女贞子5～15份和紫草35～45份；
所述的制备方法包括以下步骤：
(1)用滤液A1对滤液A2进行浓缩置换除去滤液A2的溶剂，得提取液；
(2)将步骤(1)中提取液进行陈化，过滤得滤液；所述的陈化的温度为2～6℃；
(3)过滤步骤(2)中滤液即可；所述的过滤的温度为30～50℃；
所述的滤液A1的制备步骤包括：
S1：将所述的薰衣草用酯类溶剂提取，过滤得滤液；所述的提取的温度为80～100℃；
S2：将步骤S1滤液提取所述的青蒿，过滤得滤液A1；所述的提取的温度为30～50℃；
所述的滤液A2的制备步骤包括：
S3：将所述的女贞子、所述的紫草以85％v/v～95v/v％乙醇的水溶液回流法提取，过滤得滤液；
S4：将步骤S3的滤液和1wt％壳聚糖絮凝剂水溶液混合，静置，过滤得滤液A2；所述的混合的温度为30～50℃；所述的壳聚糖的使用量为所述S3滤液的2％～4％，所述百分比为质量百分比。
所述的浓缩置换是指所述的滤液A2进行减压浓缩除去溶剂后加入所述的滤液A1。
本发明的一优选实施方案中，所述的滤液A1和所述的滤液A2的制备步骤先后顺序不限。
本发明的一优选实施方案中，按重量份数计，所述的中药提取物的原料组分由所述的薰衣草、所述的青蒿、所述的女贞子和所述的紫草组成。
本发明的一优选实施方案中，按重量份数计，所述的中药提取物的原料组分由薰衣草5份、青蒿35份、女贞子15份和紫草45份组成。
本发明的一优选实施方案中，按重量份数计，所述的中药提取物的原料组分由薰衣草15份、青蒿45份、女贞子5份和紫草35份组成。
本发明的一优选实施方案中，按重量份数计，所述的中药提取物的原料组分由薰衣草10份、青蒿40份、女贞子10份和紫草40份组成。
本发明的中药提取物中，作为活性组分的原料的拉丁名及其加工方法可参见《中药大辞典》(1977年7月，第一版，上海科学技术出版社)和《中国药典》(2015年版，中国医药科技出版社)。
所述的薰衣草为中药领域常规入药的薰衣草，为唇形科植物狭叶薰衣草(Lavandula angustifolia Mill.)的干燥地上部分。夏季采摘，阴干。
所述的女贞子为中药领域常规入药的女贞子，为木犀科植物女贞(Ligustrumlucidum Ait.)的干燥成熟果实。冬季果实成熟时采收,除去枝叶，稍蒸或置沸水中略烫后，干燥；或直接干燥。
所述的青蒿为中药领域常规入药的青蒿，为菊科植物黄花蒿(Artemisia annuaL.)的干燥地上部分。秋季花盛开时采割，除去老茎，阴干。
所述的紫草为中药领域常规入药的紫草，为紫草科植物新疆紫草Arnebiaeuchroma(Royle)Johnst.或内蒙紫草Arrabia guttata Bunge的干燥根。春、秋二季采挖，除去泥沙，干燥。
步骤S1中，所述的酯类溶剂为本领域常规，较佳地为辛酸/癸酸甘油三酯。所述的酯类溶剂倍量为本领域常规，较佳地为所述薰衣草的8倍，其中，所述的薰衣草与所述的酯类溶剂的用量均以质量计。所述的提取的温度优选为95℃。所述的提取的时间为本领域常规，较佳地为1.5小时。所述的过滤为本领域常规，较佳地为纱布过滤。
步骤S2中，所述的提取的温度优选为40℃。所述的提取的时间为本领域常规，较佳地为1小时。所述的过滤为本领域常规，较佳地为先纱布过滤，再用孔径1.2～5μm滤膜过滤。所述的滤膜的孔径优选为3μm。
步骤S3中，所述的乙醇的百分比优选为95％。所述的回流的温度为85℃。所述的乙醇的水溶液的倍量为本领域常规，较佳地为所述女贞子和紫草的10倍，其中，所述的女贞子和紫草与所述的乙醇的水溶液的用量均以质量计。所述的提取的时间为本领域常规，较佳地为1～3小时，更佳地为2小时。所述的过滤为本领域常规，较佳地为纱布过滤。
步骤S4中，所述的混合的温度优选为40℃。所述的壳聚糖的使用量为所述S3滤液的3％，所述百分比为质量百分比。所述的静置的时间为本领域常规，较佳地为10～20分钟，更佳地为15分钟。所述的过滤为本领域常规，较佳地为纱布过滤。
步骤(1)中，所述的浓缩为本领域常规，较佳地为减压浓缩。
步骤(2)中，所述的陈化的温度优选为4℃。所述的陈化的时间为本领域常规，较佳地为3～5天，更佳地为4天。所述的过滤为本领域常规，较佳地为使用孔径0.65～1.2μm滤膜过滤。所述的滤膜的孔径优选为0.8μm。
步骤(3)中，所述的过滤的温度优选为40℃。所述的过滤为本领域常规，较佳地为使用孔径0.22～0.65μm滤膜过滤。所述的滤膜的孔径优选为0.45μm。
本发明还提供一种中药提取物，其按照上述的制备方法制得。
本发明还提供上述中药提取物在制备抗炎止痒外用药或化妆品中的应用。
本发明还提供一种中药组合物，其包括以下重量份数的组分：薰衣草5～15份、青蒿35～45份、女贞子5～15份和紫草35～45份。
本发明的一优选实施方案中，按重量份数计，所述的中药组合物的组分由薰衣草5～15份、青蒿35～45份、女贞子5～15份和紫草35～45份组成。
本发明的一优选实施方案中，按重量份数计，所述的中药组合物的组分由薰衣草10份、青蒿40份、女贞子10份和紫草40份组成。
本发明的一优选实施方案中，按重量份数计，所述的中药组合物的组分由薰衣草15份、青蒿45份、女贞子5份和紫草35份组成。
本发明的一优选实施方案中，按重量份数计，所述的中药组合物的组分由薰衣草10份、青蒿40份、女贞子10份和紫草40份组成。
在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。
本发明所用试剂和原料均市售可得。
本发明的积极进步效果在于：
(1)本发明中药提取物除了对湿疹具有良好的功效外，对具有炎症和瘙痒等症状的皮肤病均有较好的疗效。
(2)本发明中药提取物中，四位中药协同复配，从多个靶点抑制了炎症和瘙痒的发生，如钙调磷酸酶(CaN)-NF-AT通路，乳酸刺激引起的炎症、瘙痒等。
(3)本发明提取的中药提取物有效成分高，安全性高，不使用防腐剂的优点，克服了传统中药提取工艺中有效成分低，有刺激性，对防腐剂产生的毒副作用担忧的缺陷。
(4)本发明提取中药过程中使用的溶剂可以回收循环利用，不产生废液，克服了传统工艺中使用的提取溶剂不环保、能耗大的问题。
具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
实施例1
S1：将薰衣草5份用8倍薰衣草重量的辛酸/癸酸甘油三酯在95℃下提取1.5小时，纱布过滤得滤液；
S2：将步骤S1过滤后的滤液在40℃条件下提取35份青蒿1小时，纱布过滤，然后使用1.2μm滤膜过滤；
S3：将女贞子15份，紫草45份用10倍女贞子和紫草重量的95％v/v的乙醇回流法提取2小时，过滤得滤液；
S4：将步骤S3的滤液冷却至40℃，用1wt％壳聚糖絮凝剂水溶液絮凝，然后静置15分钟，过滤得滤液；所述的壳聚糖絮凝剂的使用量为所述提取液的3％，所述百分比为质量百分比；
S5：将步骤S4所得滤液进行减压浓缩除去溶剂，用步骤S2所得滤液进行置换；
S6：将步骤S5提取液在4℃进行陈化4天；
S7：将步骤S6提取液用滤膜过滤，滤膜孔径是0.8μm；
S8：将步骤S7提取液加热至40℃，用孔径较小的滤膜过滤，滤膜孔径是0.45μm。
实施例2
S1：将薰衣草15份用8倍薰衣草重量的辛酸/癸酸甘油三酯在95℃下提取1.5小时，纱布过滤得滤液；
S2：将步骤S1过滤后的滤液在40℃条件下提取45份青蒿1小时，纱布过滤，然后使用5μm滤膜过滤；
S3：将女贞子5份，紫草35份用10倍女贞子和紫草重量的95％v/v的乙醇回流法提取2小时，过滤得滤液；
S4：将步骤S3的滤液冷却至40℃，用1wt％壳聚糖絮凝剂水溶液絮凝，然后静置15分钟，过滤得滤液；所述的壳聚糖絮凝剂的使用量为所述提取液的3％，所述百分比为质量百分比；
S5：将步骤S4所得滤液进行减压浓缩除去溶剂，用步骤S2所得滤液进行置换；
S6：将步骤S5提取液在4℃进行陈化4天；
S7：将步骤S6提取液用滤膜过滤，滤膜孔径是0.8μm；
S8：将步骤S7提取液加热至40℃，用孔径较小的滤膜过滤，滤膜孔径是0.45μm。
实施例3
S1：将薰衣草10份用8倍薰衣草重量的辛酸/癸酸甘油三酯在95℃下提取1.5小时，纱布过滤得滤液；
S2：将步骤S1过滤后的滤液在40℃条件下提取40份青蒿1小时，纱布过滤，然后使用3μm滤膜过滤；
S3：将女贞子10份，紫草40份用10倍女贞子和紫草重量的95％v/v的乙醇回流法提取2小时，过滤得滤液；
S4：将步骤S3的滤液冷却至40℃，用1wt％壳聚糖絮凝剂水溶液絮凝，然后静置15分钟，过滤得滤液；所述的壳聚糖絮凝剂的使用量为所述提取液的3％，所述百分比为质量百分比；
S5：将步骤S4所得滤液进行减压浓缩除去溶剂，用步骤S2所得滤液进行置换；
S6：将步骤S5提取液在4℃进行陈化4天；
S7：将步骤S6提取液用滤膜过滤，滤膜孔径是0.8μm；
S8：将步骤S7提取液加热至40℃，用孔径较小的滤膜过滤，滤膜孔径是0.45μm。
实施例4
S1：将薰衣草10份用8倍薰衣草重量的辛酸/癸酸甘油三酯在85℃下提取1.5小时，纱布过滤得滤液；
S2：将步骤S1过滤后的滤液在35℃条件下提取40份青蒿1小时，纱布过滤，然后使用1.2μm滤膜过滤；
S3：将女贞子10份，紫草40份用10倍女贞子和紫草重量的85％v/v的乙醇回流法提取1小时，过滤得滤液；
S4：将步骤S3的滤液冷却至40℃，用1wt％壳聚糖絮凝剂水溶液絮凝，然后静置15分钟，过滤得滤液；所述的壳聚糖絮凝剂的使用量为所述提取液的2％，所述百分比为质量百分比；
S5：将步骤S4所得滤液进行减压浓缩除去溶剂，用步骤S2所得滤液进行置换；
S6：将步骤S5提取液在2℃进行陈化3天；
S7：将步骤S6提取液用滤膜过滤，滤膜孔径是0.65μm；
S8：将步骤S7提取液加热至40℃，用孔径较小的滤膜过滤，滤膜孔径是0.22μm。
实施例5
S1：将薰衣草10份用8倍薰衣草重量的辛酸/癸酸甘油三酯在90℃下提取1.5小时，纱布过滤得滤液；
S2：将步骤S1过滤后的滤液在50℃条件下提取40份青蒿1小时，纱布过滤，然后使用5μm滤膜过滤；
S3：将女贞子10份，紫草40份用10倍女贞子和紫草重量的90％v/v的乙醇回流法提取3小时，过滤得滤液；
S4：将步骤S3的滤液冷却至40℃，用1wt％壳聚糖絮凝剂水溶液絮凝，然后静置15分钟，过滤得滤液；所述的壳聚糖絮凝剂的使用量为所述提取液的4％，所述百分比为质量百分比；
S5：将步骤S4所得滤液进行减压浓缩除去溶剂，用步骤S2所得滤液进行置换；
S6：将步骤S5提取液在6℃进行陈化5天；
S7：将步骤S6提取液用滤膜过滤，滤膜孔径是1.2μm；
S8：将步骤S7提取液加热至40℃，用孔径较小的滤膜过滤，滤膜孔径是0.65μm。
对比实施例1
S1：将薰衣草100份用8倍薰衣草重量的辛酸/癸酸甘油三酯在95℃下提取1.5小时，纱布过滤得滤液；
S2：使用3μm滤膜过滤；
S3：将步骤S2提取液在4℃进行陈化4天；
S4：将步骤S3提取液用滤膜过滤，滤膜孔径是0.8μm；
S5：将步骤S4提取液加热至40℃，用孔径较小的滤膜过滤，滤膜孔径是0.45μm。
对比实施例2
S1：用辛酸/癸酸甘油三酯在40℃条件下提取100份青蒿1小时，纱布过滤，然后使用3μm滤膜过滤；
S2：将步骤S1提取液在4℃进行陈化4天；
S3：将步骤S2提取液用滤膜过滤，滤膜孔径是0.8μm；
S4：将步骤S3提取液加热至40℃，用孔径较小的滤膜过滤，滤膜孔径是0.45μm。
对比实施例3
S1：将女贞子100份用10倍女贞子的95％v/v的乙醇回流法提取2小时，过滤得滤液；
S2：将步骤S1的滤液冷却至40℃，用1wt％壳聚糖絮凝剂水溶液絮凝，然后静置15分钟，过滤得滤液；所述的壳聚糖絮凝剂的使用量为所述提取液的3％，所述百分比为质量百分比；
S3：将步骤S2所得滤液进行减压浓缩除去溶剂，用步骤S2所得滤液进行置换；
S4：将步骤S3提取液在4℃进行陈化4天；
S5：将步骤S4提取液用滤膜过滤，滤膜孔径是0.8μm；
S6：将步骤S5提取液加热至40℃，用孔径较小的滤膜过滤，滤膜孔径是0.45μm。
对比实施例4
S1：将紫草100份用10倍紫草重量的95％v/v的乙醇回流法提取2小时，过滤得滤液；
S2：将步骤S1的滤液冷却至40℃，用1wt％壳聚糖絮凝剂水溶液絮凝，然后静置15分钟，过滤得滤液；所述的壳聚糖絮凝剂的使用量为所述提取液的3％，所述百分比为质量百分比；
S3：将步骤S2所得滤液进行减压浓缩除去溶剂，用步骤S2所得滤液进行置换；
S4：将步骤S3提取液在4℃进行陈化4天；
S5：将步骤S4提取液用滤膜过滤，滤膜孔径是0.8μm；
S6：将步骤S5提取液加热至40℃，用孔径较小的滤膜过滤，滤膜孔径是0.45μm。
效果实施例1
中药提取物对钙调磷酸酶通路的影响
1.1材料和方法
(1)实验细胞：稳定转染NFAT报告基因的细胞系NFAT K562Reporter Stable CellLine。
(2)实验分组：分别为溶剂对照组，模型组，阳性对照组，实施例1组，实施例2组，实施例3组，实施例4组，实施例5组，对比实施例1组，对比实施例2组，对比实施例3组，对比实施例4组。
(3)实验药物：PMA(蛋白激酶C PKC激活剂)，A23187(钙通道激活剂)。
(4)实验方法：稳定转染NFAT报告基因的K562细胞常规传代培养于含10％肽牛血清的RPMI-1640培养基中，实验采用生长健康、处于对数增长期的细胞，将上述细胞按2×105/孔接种于24孔细胞培养板，加入1mg/ml待测样品，孵育1小时，加入PMA和A23187(通路刺激剂)，刺激18小时，收集细胞，采用荧光素酶检测试剂盒按说明书操作，测定荧光强度lum值(反映细胞内反应钙调磷酸酶通路活化水平)。
1.2实验结果
表1、中药提取物抑制CaN-NF-AT通路量效关系
表1的结果表明：实施例1～3组说明在不同药物比例，相同提取条件下对CaN-NF-AT通路的抑制结果，实施例3～5组说明在相同药物比例，不同提取条件下对CaN-NF-AT通路的抑制结果，结果发现实施例3组对CaN-NF-AT通路的抑制结果最好，说明实施例3组的提取物比例和提取物条件最佳。
对比实施例1～4组分别是使用薰衣草、青蒿、女贞子和紫草时对CaN-NF-AT通路的抑制结果，发现单独使用效果均比实施例3组的效果差，说明5～15份薰衣草、35～45份青蒿、5～15份女贞子和35～45份紫草复配使用具有协同抑制CaN-NF-AT通路的作用。
效果实施例2
中药提取物对人体乳酸刺激的影响
1.1材料和方法
(1)实验人群：20名志愿者，年龄在20～50岁，手臂皮肤健康、无破损，没有会影响测试结果的疤痕。
(2)实验样品：空白乳液组，实施例1组，实施例2组，实施例3组，实施例4组，实施例5组，对比实施例1组，对比实施例2组，对比实施例3组，对比实施例4组。其中空白乳液的成分为水，甘油，辛酸/癸酸三甘油酯，碳酸二辛酯，聚二甲基硅氧烷，聚二甲基硅氧烷硬脂醇聚醚-21，硬脂醇聚醚-2鲸蜡硬脂醇，丙烯酸羟乙酯/丙烯酰二甲基牛磺酸钠共聚物(和)异十六烷(和)聚山梨醇酯-60，苯氧乙醇，黄原胶，乙基己基甘油。实施例1-5组及对比实施例1-4组的中药提取物的质量百分数为2％，溶剂为空白乳液。
(3)实验方法：10％乳酸刺激手臂产生刺激(瘙痒，刺痛)反应后，涂抹中药提取物，观察30分钟内刺激强度以及改善刺激时间的变化。
1.2实验结果
(1)中药提取物对刺激强度的影响
使用药提取物后，消费者评估刺激的强度，刺激感等级为：1极轻微，2轻微，3中度，4重度，实验结果见下：
表2、使用中药提取物后刺激强度的变化
表2的结果表明：实施例1～3组说明在不同药物比例，相同提取条件下皮肤刺激强度的影响，实施例3～5组说明在相同药物比例，不同提取条件下对皮肤刺激强度的影响，结果发现实施例3组对皮肤刺激的抑制结果最好，说明实施例3的提取物比例和提取物条件最佳。
对比实施例1～4组分别是使用薰衣草、青蒿、女贞子和紫草时对皮肤刺激强度的影响，发现单独使用效果均比实施例3组的效果差，说明5～15份薰衣草、35～45份青蒿、5～15份女贞子和35～45份紫草复配使用具有协同作用。
(2)中药提取物对刺激的影响
10％乳酸刺激手臂产生刺激反应后，使用中药提取物，观察刺激明显降低/消失的时间，实验结果见下。
表3、使用中药提取物后刺激改善时间的变化
组别 使用后刺激改善时间(分钟)
空白乳液组 11.9
实施例1组 7.5
实施例2组 7.5
实施例3组 5.5
实施例4组 8.0
实施例5组 8.5
对比实施例1组 10
对比实施例2组 10.5
对比实施例3组 10.5
对比实施例4组 10
表3的结果表明：实施例1～3组说明在不同药物比例，相同提取条件下刺激明显降低/消失的时间，实施例3～5组说明在相同药物比例，不同提取条件下刺激明显降低/消失的时间，结果发现实施例3组对刺激开始减轻的时间最短，说明实施例3组的提取物比例和提取条件最佳。
对比实施例1～4组分别是使用薰衣草、青蒿、女贞子和紫草时刺激开始减轻的时间，发现单独使用效果均比实施例3组的效果差，说明5～15份薰衣草、35～45份青蒿、5～15份女贞子和35～45份紫草复配使用具有协同作用。
安全实施例1
中药提取物对鸡胚绒毛尿囊膜刺激的影响
1.1材料和方法
(1)实验蛋种：SPF受精鸡胚
(2)实验材料：照蛋器、手捻钻、不锈钢牙科工具、种蛋托
(3)实验仪器：孵化器
(4)鸡胚孵育：SPF鸡胚购回后气室端朝上置于孵化器中，在温度为37.0℃±0.5℃、相对湿度为60％±1％的条件下孵育。孵化至第10天时用于试验。
(5)实验方法：将鸡胚自孵育箱中取出，于照蛋器上观察气室位置，用记号笔标记，置于蛋托上，气室端朝上，用手捻钻轻轻钻破蛋壳后用镊子小心夹除气室端蛋壳，完整暴露蛋壳膜，加0.3mL生理盐水于蛋壳膜上使其润湿，吸去生理盐水，用弯镊小心剥去蛋壳膜，暴露出绒毛尿囊膜(CAM)，肉眼观察其完整性，如有破损则不用于实验。取0.3mL中药提取物小心滴于绒毛尿囊膜上，5分钟后观察血管反应，记录。
(6)刺激评分：每个样品均用6个鸡胚试验。最后，根据每个鸡胚所得的ES计算平均刺激积分，并按表4所示对样品的眼刺激性进行分级评价。
表4、终点评分法结果评价
1.2实验结果
表5、中药提取物对鸡胚绒毛尿囊膜刺激的影响评价表
由表5可以看出，该中药提取物对鸡胚绒毛尿囊膜终点评分积分总体较低，刺激分类为无/轻刺激性。特别是实施例3，HET-CAM积分最低，说明此提取物安全性最高。

Claims (10)

1.一种中药提取物的制备方法，其特征在于，按重量份数计，所述的中药提取物的原料组分包括薰衣草5～15份、青蒿35～45份、女贞子5～15份和紫草35～45份；
所述的制备方法包括以下步骤：
(1)用滤液A1对滤液A2进行浓缩置换，得提取液；
(2)将步骤(1)中提取液进行陈化，过滤得滤液；所述的陈化的温度为2～6℃；
(3)过滤步骤(2)中滤液即可；所述的过滤的温度为30～50℃；
所述的滤液A1的制备步骤包括：
S1：将所述的薰衣草用酯类溶剂提取，过滤得滤液；所述的提取的温度为80～100℃；
S2：将步骤S1滤液提取所述的青蒿，过滤得滤液A1；所述的提取的温度为30～50℃；
所述的滤液A2的制备步骤包括：
S3：将所述的女贞子、所述的紫草以85％v/v～95v/v％乙醇的水溶液回流法提取，过滤得滤液；
S4：将步骤S3的滤液和1wt％壳聚糖絮凝剂水溶液混合，静置，过滤得滤液A2；所述的混合的温度为30～50℃；所述的壳聚糖的使用量为所述S3滤液的2％～4％，所述百分比为质量百分比。
2.如权利要求1所述的中药提取物的制备方法，其特征在于，按重量份数计，所述的中药提取物的原料组分由所述的薰衣草、所述的青蒿、所述的女贞子和所述的紫草组成；
和/或，所述的中药提取物的原料组分为组分B1、B2或B3，其中，所述的B1包括薰衣草10份、青蒿40份、女贞子10份和紫草40份；所述的B2包括薰衣草15份、青蒿45份、女贞子5份和紫草35份；所述的B3包括薰衣草10份、青蒿40份、女贞子10份和紫草40份。
3.如权利要求1或2所述的中药提取物的制备方法，其特征在于，
步骤S1中，所述的酯类溶剂为辛酸/癸酸甘油三酯；和/或，所述的酯类溶剂倍量为所述薰衣草的8倍，其中，所述的薰衣草与所述的酯类溶剂的用量均以质量计；和/或，所述的提取的温度为95℃；和/或，所述的提取的时间为1.5小时；和/或，所述的过滤为纱布过滤；
和/或，步骤S2中，所述的提取的温度为40℃；和/或，所述的提取的时间为1小时；和/或，所述的过滤为先纱布过滤，再用孔径1.2～5μm滤膜过滤；
和/或，步骤S3中，所述的乙醇的百分比为95％；和/或，所述的乙醇的水溶液的倍量为所述女贞子和紫草的10倍，其中，所述的女贞子和紫草与所述的乙醇的水溶液的用量均以质量计；和/或，所述的提取的时间为1～3小时；和/或，所述的过滤为纱布过滤；
和/或，步骤S4中，所述的混合的温度为40℃；和/或，所述的壳聚糖的使用量为所述S3滤液的3％，所述百分比为质量百分比；和/或，所述的静置的时间为10～20分钟；和/或，所述的过滤为纱布过滤。
4.如权利要求3所述的中药提取物的制备方法，其特征在于，
步骤S2中，所述的滤膜的孔径为3μm；
和/或，步骤S3中，所述的提取的时间为2小时；
和/或，步骤S4中，所述的静置的时间为15分钟。
5.如权利要求1或2所述的中药提取物的制备方法，其特征在于，
步骤(1)中，所述的浓缩为减压浓缩；
和/或，步骤(2)中，所述的陈化的温度为4℃；和/或，所述的陈化的时间为3～5天；和/或，所述的过滤为孔径0.65～1.2μm滤膜过滤；
和/或，步骤(3)中，所述的过滤的温度为40℃；和/或，所述的过滤为孔径0.22～0.65μm滤膜过滤。
6.如权利要求5所述的中药提取物的制备方法，其特征在于，
步骤(2)中，所述的陈化的时间为4天；和/或，所述的滤膜的孔径为0.8μm；
和/或，步骤(3)中，所述的滤膜的孔径为0.45μm。
7.一种中药提取物，其特征在于，其由权利要求1～6任一项所述的中药提取物的制备方法制得。
8.一种如权利要求7所述的中药提取物在制备抗炎止痒外用药或化妆品中的应用。
9.一种中药组合物，其特征在于，其包括以下重量份数的组分：薰衣草5～15份、青蒿35～45份、女贞子5～15份和紫草35～45份。
10.如权利要求9所述的中药组合物，其特征在于，按重量份数计，所述的中药组合物的组分由所述的薰衣草、所述的青蒿、所述的女贞子和所述的紫草组成；
和/或，所述的中药组合物的组分为组分B4、B5或B6，其中，所述的B4包括薰衣草10份、青蒿40份、女贞子10份和紫草40份；所述的B5包括薰衣草15份、青蒿45份、女贞子5份和紫草35份；所述的B6包括薰衣草10份、青蒿40份、女贞子10份和紫草40份。
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