CN109321622B - 一种三七多肽的制备方法及其用途 - Google Patents

一种三七多肽的制备方法及其用途 Download PDF

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Abstract

本发明公开一种三七多肽的制备方法，1)将干燥的三七粉碎，加入蒸馏水，加热至沸腾，维持10分钟；2)将步骤1)所得料液冷却至常温，调整pH至5.0‑9.0，加入复合酶，在50℃‑60℃下持续搅拌酶解2h‑4h；再加入木瓜蛋白酶，在50℃‑60℃下持续搅拌酶解2‑4h，再加热至80℃‑90℃，灭酶5min‑10min；3)由步骤2)所得料液经过离心、膜过滤、浓缩、喷雾干燥，得到三七多肽成品。本发明工艺简单，对生产设备的要求低，不采用任何有机试剂，不但能把三七中大部分多肽成分提取出来，而且操作过程简单并有效的降低生产成本。

Description

一种三七多肽的制备方法及其用途
技术领域
本发明涉及药物领域，具体为一种三七多肽的制备方法及其用途。
背景技术
三七为我国传统名贵中药材，四十种大宗大药材品种之一，距今已有400多年的应用历史，在国内外久负盛名，三七自古就有“止血神药”的美称。由于三七独特明显的功效，不断被拓展用途，保健、化工、医疗用量持续上升，尤其是我国进入心脑血管疾病高发期，相关研发产品层出不穷，且需求量巨大。
发明内容
本发明所解决的技术问题在于提供一种三七多肽的制备方法及其用途，以解决上述背景技术中的缺点。
本发明所解决的技术问题采用以下技术方案来实现：一种三七多肽的制备方法，1)将干燥的三七粉碎，加入蒸馏水，加热至沸腾，维持10分钟；2)将步骤1)所得料液冷却至常温，调整pH至5.0-9.0，加入复合酶，在50℃-60℃下持续搅拌酶解2h-4h；再加入木瓜蛋白酶，在50℃-60℃下持续搅拌酶解2-4h，再加热至80℃-90℃，灭酶5min-10min；3)由步骤2)所得料液经过离心、膜过滤、浓缩、喷雾干燥，得到三七多肽成品。三七多肽在抑菌方面作用明显。
本发明中，进一步的，步骤2)中所述复合酶为纤维素酶和果胶酶按照1:1-1:4进行复配而成。
本发明中，进一步的，步骤2)中所述复合酶的添加量为添加三七重量的0.3-1.0％。
本发明中，进一步的，步骤2)中所述木瓜蛋白酶添加量为添加三七重量的0.3-1.0％。
本发明的有益效果：
1.工艺简单，对生产设备的要求低，不采用任何有机试剂，不但能把三七中大部分多肽成分提取出来，而且操作过程简单并有效的降低生产成本。
2.预处理方法对提取收率的提升明显，通过加热的方法提升了预处理的浸提效果，增加了物料中可溶性物质的溶解程度。
3.采用复合酶酶解三七的方法，提取收率在35％以上，蛋白水解度为90％以上。酶解纯度高，极大地减少对环境的污染并简化操作工序。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。
三七多肽的制备方法
实施例1：准确称取干东北三七100g，粉碎至40目，室温下加水至完全浸泡三七，加热至沸腾，持续搅拌10分钟，测定并调节pH值为6.0。加入0.6g复合酶，复合酶为纤维素酶、果胶酶按照1∶1进行复配而成，匀速搅拌，在55℃下酶解3小时；加入0.5g木瓜蛋白酶，匀速搅拌，在55℃下酶解2小时再经90℃，10分钟灭酶，再经离心、膜过滤，浓缩，喷雾干燥，得39g三七多肽成品，提取率为39％，成品呈白色，复水时间短，水溶性好。
实施例2：准确称取干东北三七100g，粉碎至40目，室温下加水至完全浸泡三七，加热至沸腾，持续搅拌10分钟，测定并调节pH值为5.5。加入0.3g复合酶，复合酶为纤维素酶、果胶酶按照1∶2进行复配而成，匀速搅拌，在55℃下酶解4小时；加入0.3g木瓜蛋白酶，匀速搅拌，在55℃下酶解3小时再经90℃，10分钟灭酶，再经离心、膜过滤，浓缩，喷雾干燥，得38g三七多肽成品，提取率为38％，成品呈白色，复水时间短，水溶性好。
实施例3：准确称取干东北三七100g，粉碎至40目，室温下加水至完全浸泡三七，加热至沸腾，持续搅拌10分钟，测定并调节pH值为6.5。加入0.6g复合酶，复合酶为纤维素酶、果胶酶按照1∶4进行复配而成，匀速搅拌，在55℃下酶解3小时；加入0.5g木瓜蛋白酶，匀速搅拌，在55℃下酶解3小时再经90℃，10分钟灭酶，再经离心、膜过滤，浓缩，喷雾干燥，得40g三七多肽成品，提取率为40％，成品呈白色，复水时间短，水溶性好。
抑菌实验
1、实验材料
实验菌株：大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，制成1×108cfu/mL左右的菌悬液
三七多肽粉，按照实施例1方法一制备。
肉汤培养基
2、实验方法：
肉汤培养基中加入三七多肽粉，制成含有多肽浓度为0.2g/mL、0.1g/mL、0.05g/mL，0.025g/mL的培养基各10mL，接入金黄色葡萄球菌和大肠杆菌菌悬液0.1mL，放入37℃培养箱培养24h，观察结果。
3、实验结果
Figure BDA0001367066310000031
注：有菌体生长“+”，无菌体生长“－”
实验结果表明三七多肽有体外抑菌的作用，对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌有抑制作用。
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征及本发明的优点，本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内，本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

Claims (2)

1.一种三七多肽的用途，其特征是：所述三七多肽的用途是在体外抑制金黄色葡萄球菌、大肠杆菌，
所述三七多肽的制备步骤如下：
1）将干燥的三七粉碎，加入蒸馏水，加热至沸腾，维持10分钟；
2）将步骤1）所得料液冷却至常温，调整pH至5.0-9.0，加入复合酶，在50℃-60℃下持续搅拌酶解2h-4h；再加入木瓜蛋白酶，在50℃-60℃下持续搅拌酶解2-4h，再加热至80℃-90℃，灭酶5min-10min，所述复合酶为纤维素酶和果胶酶按照1:1-1:4进行复配而成，所述复合酶的添加量为添加三七重量的0.3-1.0%，所述木瓜蛋白酶添加量为添加三七重量的0.3-1.0%，
3）由步骤2）所得料液经过离心、膜过滤、浓缩、喷雾干燥，得到三七多肽成品。
2.根据权利要求1所述的一种三七多肽的用途，其特征是：所述三七多肽的抑菌浓度为0.2g/ml。
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