CN109298130A - 一种高糖肉松中淀粉的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种高糖肉松中淀粉的检测方法，其特点是，包括去脂肪、除去可溶性糖类、洗糖效果验证、酸水解、沉淀蛋白质、测定工艺步骤；在过滤时使用抽滤的方式可以加快过滤效率，洗糖过程中，乙醇浸泡反复煮沸有助于样品中可溶性糖的溶出，使洗糖更快更彻底，而且能节省乙醇的消耗，洗糖完毕后，利用Molish反应对洗糖效果进行验证，能保证洗糖效果，使得结果更准确、更可靠。
Description
技术领域：
本发明涉及食品中淀粉的检测技术领域，具体地讲是一种高糖肉松中淀粉的检测方法。
背景技术：
《GB 5009.9-2016 食品安全国家标准 食品中淀粉的测定》规定淀粉检测分三种方法，分别为酶水解法、酸水解法和肉制品中淀粉含量测定；酶水解法的原理为试样经去除脂肪及可溶性糖后，淀粉用淀粉酶水解成小分子糖，再用盐酸水解成单糖，最后按还原糖测定，并折算成淀粉含量；酸水解法的原理是试样经除去脂肪及可溶性糖后，其中淀粉用酸水解成具有还原性的单糖，然后按还原糖测定，并折算成淀粉；肉制品中淀粉含量测定的原理为试样中加入氢氧化钾-乙醇溶液,在沸水浴上加热后，滤去上清液，用热乙醇洗涤沉淀除去脂肪和可溶性糖，沉淀经盐酸水解后，用碘量法测定形成的葡萄糖并计算淀粉含量。
由此可见，现行的多种测定方法均要进行酸水解，水解前把试样用热乙醇（80%）洗涤数次除可溶性糖，但对于含糖量高的肉松来说数次洗涤不足以彻底除去可溶性糖，残留的可溶性糖参与酸水解反应后产生还原性糖，使测试结果偏高。
发明内容：
本发明的目的是克服上述已有技术的不足，提供一种高糖肉松中淀粉的检测方法；主要解决现有的淀粉检测方法洗糖不彻底导致测试结果偏高的问题。
本发明的技术方案是：一种高糖肉松中淀粉的检测方法，其特殊之处在于，包括如下工艺步骤：
a去脂肪：将试样加入90℃±2℃热氢氧化钾-乙醇溶液，搅匀后在90℃水浴上加热1-2h，不断搅拌，然后将沉淀完全转移到布氏漏斗上进行抽滤；
b除去可溶性糖类：将a步骤中所得到的除脂样品用85%的50℃-70℃的热乙醇抽滤洗涤至滤液澄清，将滤渣转移到容器中，加入85%的乙醇溶液，在沸水浴中加热20-30min，然后将混合液进行抽滤，如此重复2次，然后用85%的50℃-70℃的热乙醇洗涤沉淀6-8次，得到除糖样品；
c洗糖效果验证：取最后一次抽滤的滤液于试管中，加入Molish试剂，摇匀，将试管倾斜，沿管壁慢慢加入浓硫酸，然后小心竖直试管，使滤液和浓硫酸清楚的分为两层，观察交界处颜色变化，若交界处颜色为黄色或黄绿色，说明样品中的可溶性糖类已洗净；若交界处颜色为粉色或紫色，重复步骤b的操作，直至交界处颜色为黄色或黄绿色；
d酸水解：将a、b步骤中得到的除脂除糖样品用水转移到容器中，加入50%的盐酸，接好冷凝管，置沸水浴中回流2h；待水解液冷却后，用浓度为400g/L的氢氧化钠和50%的盐酸调节pH为6；
e沉淀蛋白质：加浓度为200g/L的乙酸铅溶液，摇匀，放置10-15 min；再加浓度为100g/L的硫酸钠溶液，以除去过多的铅；摇匀后将全部溶液及残渣转入容器中，洗液合并入容器中,加水稀释；过滤,弃去初滤液，滤液供测定用；
f测定：1）葡萄糖标准溶液配制：准确称取1g经过98℃-100℃干燥2h的D-无水葡萄糖,加水溶解后加入5mL盐酸,并以水定容至1000mL，得葡萄糖标准溶液；此溶液每毫升相当于1.0mg葡萄糖；
2）标定碱性酒石酸铜溶液：吸取5.00mL碱性酒石酸铜甲液及5.00mL 碱性酒石酸铜乙液,置于150mL 锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠两粒，从滴定管滴加9mL葡萄糖标准溶液,控制在2min内加热至沸，保持溶液呈沸腾状态，以每两秒一滴的速度继续滴加葡萄糖，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积，同时做三份平行，取消耗葡萄糖标准溶液总体积的平均值，计算每10mL碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，所述的每10mL碱性酒石酸铜溶液为甲、乙液各5mL；
3）样品溶液滴定：吸取5.00mL 碱性酒石酸铜甲液及5.00mL 碱性酒石酸铜乙液，置于150mL 锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠两粒，控制在2min内加热至沸，保持沸腾，先以每秒两滴的速度，从滴定管中滴加试样溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变为浅蓝色后，以每两秒一滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录试样溶液的消耗体积；同时做试剂空白；
4）按如下公式计算淀粉含量：
式中：X—试样中淀粉含量，单位为克每百克（g/100g）；
m—试样质量，单位为克（g）；
A—10mL碱性酒石酸铜溶液消耗标准质量,单位为毫克（mg）；
V—滴定10mL碱性酒石酸铜溶液消耗试样溶液平均体积，单位为毫升（mL）。
本发明所述的一种高糖肉松中淀粉的检测方法与已有技术相比具有突出的实质性特点和显著进步，1、在过滤时使用抽滤的方式可以加快过滤效率；2、洗糖过程中，乙醇浸泡反复煮沸有助于样品中可溶性糖的溶出，使洗糖更快更彻底，而且能节省乙醇的消耗；3、洗糖完毕后，利用Molish反应对洗糖效果进行验证，能保证洗糖效果，使得结果更准确、更可靠。
具体实施方式：
为了更好地理解与实施，下面结合实施案例详细说明本发明；所举实施例仅用于解释本发明，并非用于限制本发明的范围。
对比例1：采用国标法对某品牌不添加淀粉的肉松粉中淀粉的含量进行检测：
称取样品20g（精确到0.01g）于500ml烧杯中，加入300ml氢氧化钾-乙醇溶液，置于90℃水浴中，水浴1h后进行洗糖，用80%的热乙醇洗涤沉淀数次，将洗糖完毕的样品进行酸水解、调节pH、沉淀蛋白、定容过滤，最后对样品溶液进行滴定。按照下式进行计算：
式中：X—试样中淀粉含量，单位为克每百克（g/100g）；
m—试样质量，单位为克（g）；
A—10mL碱性酒石酸铜溶液消耗标准质量,单位为毫克（mg）；
V—滴定10mL碱性酒石酸铜溶液消耗试样溶液平均体积，单位为毫升（mL）；
计算结果显示：该肉松粉中淀粉含量为2.23 g/100g；不符合标签的标示。
实施例1：采用本发明方法对某品牌不添加淀粉的肉松粉中淀粉的含量进行检测：
首先进行葡萄糖标准溶液配制：1）准确称取1g经过98℃-100℃干燥2h的D-无水葡萄糖，加水溶解后加入5mL盐酸，并以水定容至1000mL，得葡萄糖标准溶液；此溶液每毫升相当于1.0mg葡萄糖；
2）标定碱性酒石酸铜溶液：吸取5.00mL碱性酒石酸铜甲液及5.00mL 碱性酒石酸铜乙液，置于150mL 锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠两粒，从滴定管滴加9mL葡萄糖标准溶液，控制在2min内加热至沸，保持溶液呈沸腾状态，以每两秒一滴的速度继续滴加葡萄糖,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积,同时做三份平行，取其平均值，计算每10mL碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，每10mL碱性酒石酸铜溶液为甲、乙液各5mL；
准确称取样品20g（精确到0.01g）于500ml烧杯中，加入300ml、90℃氢氧化钾-乙醇溶液，搅匀后置于90℃水浴中，水浴1.5h，不断搅拌，然后将沉淀完全转移到布氏漏斗上抽滤，进行洗糖；用85%的60℃热乙醇洗涤至滤液澄清，将滤渣转移到烧杯中，加入85%乙醇溶液，在沸水浴中加热25min，然后将混合液进行抽滤，如此重复2次，然后用85%的60℃的热乙醇洗涤沉淀7次，得到除糖样品；取最后一次抽滤的滤液1ml（约15滴）于试管中，加入Molish试剂2滴，摇匀，将试管倾斜，沿管壁慢慢加入浓硫酸1ml，然后小心竖直试管，使滤液和浓硫酸清楚的分为两层，观察交界处颜色变化，若交界处颜色为黄色或黄绿色，说明样品中的可溶性糖类已洗净，若交界处颜色为粉色或紫色，重复上述操作，直至交界处颜色为黄色或黄绿色；将除脂除糖完毕的样品用水转移到容器中，加入50%的盐酸30ml，接好冷凝管，置沸水浴中回流2h；待水解液冷却后，用浓度为400g/L的氢氧化钠和50%的盐酸调节pH约为6；再加浓度为200g/L的乙酸铅溶液20ml，摇匀，放置12.5 min；再加浓度为100g/L的硫酸钠溶液20ml，以除去过多的铅；摇匀后将全部溶液及残渣转入容器中，洗液合并入容器中，加水稀释；过滤，弃去初滤液，滤液供测定用；吸取5.00mL 碱性酒石酸铜甲液及5.00mL 碱性酒石酸铜乙液，置于150mL 锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠两粒，控制在2min内加热至沸，保持沸腾，先以每秒两滴的速度，从滴定管中滴加试样溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变为浅蓝色后，以每两秒一滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录试样溶液的消耗体积；同时做试剂空白；按照下式进行计算：
式中：X—试样中淀粉含量，单位为克每百克（g/100g）；
m—试样质量，单位为克（g）；
A—10mL碱性酒石酸铜溶液消耗标准质量,单位为毫克（mg）；
V—滴定10mL碱性酒石酸铜溶液消耗试样溶液平均体积，单位为毫升（mL）；
计算结果显示：该肉松粉不含有淀粉；符合标签的标示。
实施例2，葡萄糖标准溶液配制同实施例1，采用本发明方法对某品牌不添加淀粉的肉松粉中淀粉的含量进行检测：
称取样品20g（精确到0.01g）于500ml烧杯中，加入92℃的热氢氧化钾-乙醇溶液，置于90℃水浴中，水浴1h后得到除脂样品；用85%的70℃的热乙醇抽滤洗涤至滤液澄清，将滤渣转移到容器中，加入85%乙醇溶液，在沸水浴中加热20min，然后将混合液进行抽滤，如此重复2次，然后用85%的70℃的热乙醇洗涤沉淀6-8次，得到除糖样品；取最后一次抽滤的滤液1ml（约15滴）于试管中，加入Molish试剂2滴，摇匀，将试管倾斜，沿管壁慢慢加入浓硫酸1ml，然后小心竖直试管，使滤液和浓硫酸清楚的分为两层，观察交界处颜色变化，若交界处颜色为黄色或黄绿色，说明样品中的可溶性糖类已洗净，若交界处颜色为粉色或紫色，重复上述操作，直至交界处颜色为黄色或黄绿色；将得到的除脂除糖样品用水转移到容器中，加入50%的盐酸30ml，接好冷凝管，置沸水浴中回流2h；待水解液冷却后，用浓度为400g/L的氢氧化钠和50%的盐酸调节pH约为6；加浓度为200g/L的乙酸铅溶液20ml，摇匀，放置15 min，沉淀蛋白质，再加浓度为100g/L的硫酸钠溶液20ml，以除去过多的铅；按实施例1方法摇匀转移、定容；过滤，弃去初滤液，滤液供测定用，然后对样品溶液进行滴定。按照下式进行计算：
式中：X—试样中淀粉含量，单位为克每百克（g/100g）；
m—试样质量，单位为克（g）；
A—10mL碱性酒石酸铜溶液消耗标准质量,单位为毫克（mg）；
V—滴定10mL碱性酒石酸铜溶液消耗试样溶液平均体积，单位为毫升（mL）；
计算结果显示：该肉松粉不含有淀粉；符合标签的标示。
实施例3，葡萄糖标准溶液配制同实施例1，采用本发明方法对某品牌不添加淀粉的肉松粉中淀粉的含量进行检测：
称取样品20g（精确到0.01g）于500ml烧杯中，加入88℃的热氢氧化钾-乙醇溶液，置于90℃水浴中，水浴2h后得到除脂样品；用85%的50℃的热乙醇抽滤洗涤至滤液澄清，将滤渣转移到容器中，加入85%乙醇溶液，在沸水浴中加热30min，然后将混合液进行抽滤，如此重复2次，然后用85%的50℃的热乙醇洗涤沉淀6-8次，得到除糖样品；取最后一次抽滤的滤液1ml（约15滴）于试管中，加入Molish试剂2滴，摇匀，将试管倾斜，沿管壁慢慢加入浓硫酸1ml，然后小心竖直试管，使滤液和浓硫酸清楚的分为两层，观察交界处颜色变化；若交界处颜色为黄色或黄绿色，说明样品中的可溶性糖类已洗净，若交界处颜色为粉色或紫色，重复上述操作，直至交界处颜色为黄色或黄绿色；将得到的除脂除糖样品用水转移到容器中，加入50%的盐酸30ml，接好冷凝管，置沸水浴中回流2h；待水解液冷却后，用浓度为400g/L的氢氧化钠和50%的盐酸调节pH约为6；加浓度为200g/L的乙酸铅溶液20ml,摇匀,放置10min，沉淀蛋白质，再加浓度为100g/L的硫酸钠溶液20ml，以除去过多的铅；按实施例1方法摇匀转移、定容；过滤，弃去初滤液，滤液供测定用；对样品溶液进行滴定。按照下式进行计算：
式中：X—试样中淀粉含量，单位为克每百克（g/100g）；
m—试样质量，单位为克（g）；
A—10mL碱性酒石酸铜溶液消耗标准质量,单位为毫克（mg）；
V—滴定10mL碱性酒石酸铜溶液消耗试样溶液平均体积，单位为毫升（mL）；
计算结果显示：该肉松粉不 含有淀粉；符合标签的标示。
本发明上述实施例的结果与国标方法的结果比对表明：本发明能克服已有技术的不足能够解决现有的淀粉检测方法洗糖不彻底导致测试结果偏高的问题。
Claims (1)
1.一种高糖肉松中淀粉的检测方法，其特征在于，包括如下工艺步骤：
a去脂肪：将试样加入90℃±2℃热氢氧化钾-乙醇溶液，搅匀后在90℃水浴上加热1-2h，不断搅拌，然后将沉淀完全转移到布氏漏斗上进行抽滤；
b除去可溶性糖类：将a步骤中所得到的除脂样品用85%的50℃-70℃的热乙醇抽滤洗涤至滤液澄清，将滤渣转移到容器中，加入85%的乙醇溶液，在沸水浴中加热20-30min，然后将混合液进行抽滤，如此重复2次，然后用85%的50℃-70℃的热乙醇洗涤沉淀6-8次，得到除糖样品；
c洗糖效果验证：取最后一次抽滤的滤液于试管中，加入Molish试剂，摇匀，将试管倾斜，沿管壁慢慢加入浓硫酸，然后小心竖直试管，使滤液和浓硫酸清楚的分为两层，观察交界处颜色变化，若交界处颜色 为黄色或黄绿色，说明样品中的可溶性糖类已洗净；若交界处颜色为粉色或紫色，重复步骤b的操作，直至交界处颜色为黄色或黄绿色；
d酸水解：将a、b步骤中得到的除脂除糖样品用水转移到容器中，加入50%的盐酸，接好冷凝管，置沸水浴中回流2h；待水解液冷却后，用浓度为400g/L的氢氧化钠和50%的盐酸调节pH为6；
e沉淀蛋白质：加浓度为200g/L的乙酸铅溶液，摇匀，放置10-15 min；再加浓度为100g/L的硫酸钠溶液，以除去过多的铅；摇匀后将全部溶液及残渣转入容器中，洗液合并入容器中,加水稀释；过滤,弃去初滤液，滤液供测定用；
f测定：1）葡萄糖标准溶液配制：准确称取1g经过98℃-100℃干燥2h的D-无水葡萄糖,加水溶解后加入5mL盐酸,并以水定容至1000mL，得葡萄糖标准溶液；此溶液每毫升相当于1.0mg葡萄糖；
2）标定碱性酒石酸铜溶液：吸取5.00mL碱性酒石酸铜甲液及5.00mL 碱性酒石酸铜乙液,置于150mL 锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠两粒，从滴定管滴加9mL葡萄糖标准溶液,控制在2min内加热至沸，保持溶液呈沸腾状态，以每两秒一滴的速度继续滴加葡萄糖，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积，同时做三份平行，取消耗葡萄糖标准溶液总体积的平均值，计算每10mL碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量，所述的每10mL碱性酒石酸铜溶液为甲、乙液各5mL；
3）样品溶液滴定：吸取5.00mL 碱性酒石酸铜甲液及5.00mL 碱性酒石酸铜乙液，置于150mL 锥形瓶中，加水10mL，加入玻璃珠两粒，控制在2min内加热至沸，保持沸腾，先以每秒两滴的速度，从滴定管中滴加试样溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变为浅蓝色后，以每两秒一滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录试样溶液的消耗体积；同时做试剂空白；
4）按如下公式计算淀粉含量：
式中：X—试样中淀粉含量，单位为克每百克（g/100g）；
m—试样质量，单位为克（g）；
A—10mL碱性酒石酸铜溶液消耗标准质量,单位为毫克（mg）；
V—滴定10mL碱性酒石酸铜溶液消耗试样溶液平均体积，单位为毫升（mL）。
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|---|---|
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111220604A (zh) * | 2019-12-06 | 2020-06-02 | 东北农业大学 | 一种肉制品中总淀粉含量的测定方法 |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102608258A (zh) * | 2012-02-24 | 2012-07-25 | 泸州品创科技有限公司 | 糟醅淀粉含量的测定方法 |
| CN104215737A (zh) * | 2014-09-01 | 2014-12-17 | 梁山正大菱花生物科技有限公司 | 一种还原糖检测方法 |
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2018
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