CN109289036A - 复方制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种复方制剂及其制备方法。所述复方制剂为结肠溶制剂，其特征在于，所述复方制剂包括如下重量份的组分：黄瓜籽多肽：1.5‑2.5份；骨肽：0.8‑1.2份；填充剂：5‑7份；湿润剂：1.5‑2.5份；润滑剂：0.05‑0.15份。该复方制剂通过黄瓜籽多肽和骨肽在该重量份的范围内的协同作用，对防治骨质疏松、骨性关节炎和增加骨密度具有很好的疗效。

Description

复方制剂及其制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种复方制剂及其制备方法。

背景技术

黄瓜籽为葫芦科一年生草本植物，含有蛋白质、多种游离氨基酸、食物纤维、矿物质、维生素C、维生素B1、维生素B2、糖类、磷、铁等营养成分，能促进人体的新陈代谢。黄瓜籽是我国民间接骨壮骨验方，对骨质疏松、腿脚抽筋、风湿病、关节炎具有较好的食疗效果。

优质的黄瓜籽含有23％以上的蛋白质，经过酶解，控制其反应条件(温度、时间、pH值等因素)，可以制备低分子量黄瓜籽多肽。黄瓜籽多肽在服用和食用过程中，受胃液强酸和蛋白酶作用会被降解，特别是低分子量黄瓜籽多肽，更易被酶降解成氨基酸，因此容易失去生物活性。直接服用黄瓜籽时，对适应症的治疗效率不是很理想。

因此，现有技术有待改进。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的上述不足，提供一种复方制剂，旨在解决现有黄瓜籽多肽服用时效果不理想的技术问题。

为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明一方面提供一种复方制剂，所述复方制剂为结肠溶制剂，所述复方制剂包括如下重量份的组分：

黄瓜籽多肽：1.5-2.5份；

骨肽：0.8-1.2份；

填充剂：5-7份；

湿润剂：1.5-2.5份；

润滑剂：0.05-0.15份。

本发明提供的复方制剂为一种结肠溶制剂，该复方制剂通过将黄瓜籽多肽和骨肽复合在结肠定位崩解释放，然后结肠内丰富的淋巴组织将其吸收，这样避免了胃液、消化道内蛋白酶水解多肽的作用，从而充分发挥了黄瓜籽多肽和骨肽的生物活性作用；该复方制剂中的填充剂、湿润剂和润滑剂作为辅料在该重量份范围内，可以更好地辅助制剂的制备以及黄瓜籽多肽和骨肽的释放，同时，通过黄瓜籽多肽和骨肽在该重量份的范围内的协同作用，对防治骨质疏松、骨性关节炎和增加骨密度具有很好的疗效。

本发明另一方面提供一种上述复方制剂的制备方法，包括如下步骤：

用第一蛋白酶水溶液酶解黄瓜籽粉，得到含有所述黄瓜籽多肽的黄瓜籽酶解液；

用第二蛋白酶水溶液酶解动物骨粉，得到含有所述骨肽的动物骨粉酶解液；

将所述黄瓜籽酶解液和所述动物骨粉酶解液混合后，浓缩得到浓缩液；

将所述浓缩液与所述填充剂、湿润剂和润滑剂混合后，制备成结肠溶制剂，得到所述复方制剂。

本发明提供的复方制剂的制备方法工艺简单易行，成本低，该制备方法中先通过酶解工艺分别提取黄瓜籽多肽和骨肽，然后将其与填充剂、湿润剂和润滑剂混合后，利用剂型工艺制备成结肠溶制剂。最终得到的复方制剂通过黄瓜籽多肽和骨肽在该重量份的范围内的协同作用，对防治骨质疏松、骨性关节炎、增加骨密度具有很好的疗效。

附图说明

图1为本发明实施例1中提取到的黄瓜籽多肽的凝胶层析峰图；

图2为本发明实施例2中浓度为150mg/L的复方制剂对SD大鼠颅骨成骨细胞矿化结节的作用效果图；

图3为本发明实施例2中浓度为25mg/L的复方制剂对SD大鼠颅骨成骨细胞矿化结节的作用效果图；

图4为本发明实施例2中浓度为5mg/L的复方制剂对SD大鼠颅骨成骨细胞矿化结节的作用效果图；

图5为本发明实施例2中阳性对照图；

图6为本发明实施例2中空白对照图。

具体实施方式

为了使本发明要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

本发明实施例中，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以是明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。

一方面，本发明实施例提供了一种复方制剂，所述复方制剂为结肠溶制剂，所述复方制剂包括如下重量份的组分：

黄瓜籽多肽：1.5-2.5份；

骨肽：0.8-1.2份；

填充剂：5-7份；

湿润剂：1.5-2.5份；

润滑剂：0.05-0.15份。

本发明实施例提供的复方制剂为一种结肠溶制剂，该复方制剂通过将黄瓜籽多肽和骨肽复合在结肠定位崩解释放，然后结肠内丰富的淋巴组织将其吸收，这样避免了胃液、消化道内蛋白酶水解多肽的作用，从而充分发挥了黄瓜籽多肽和骨肽的生物活性作用；该复方制剂中的填充剂、湿润剂和润滑剂作为辅料在该重量份范围内，可以更好地辅助制剂的制备以及黄瓜籽多肽和骨肽的释放，同时，通过黄瓜籽多肽和骨肽在该重量份的范围内的协同作用，对防治骨质疏松、骨性关节炎和增加骨密度具有很好的疗效。

进一步地，本发明实施例提供的复方制剂中，包括：黄瓜籽多肽：2份；骨肽：1份；填充剂：6份；湿润剂：2份；润滑剂：0.1份。含有该重量份的复方制剂对防治骨质疏松、骨性关节炎和增加骨密度的效果最佳。

进一步地，本发明实施例提供的复方制剂中，所述黄瓜籽多肽的相对分子质量为167-812。该低分子量的黄瓜籽多肽生物活性更高，防治骨质疏松和骨性关节炎，以及增加骨密度的作用更强。

进一步地，本发明实施例提供的复方制剂中，所述骨肽为动物骨肽，可以是动物四肢骨骨粉中提取的骨肽，具体包括马骨粉提取的骨肽、驴骨粉提取的骨肽、猪骨粉提取的骨肽、牛骨粉提取的骨肽、羊骨粉提取的骨肽和鹿骨粉提取的骨肽中的至少一种。

更进一步地，所述填充剂包括淀粉、乳糖、糊精和微晶纤维素中的至少一种；所述湿润剂包括吐温和司盘中的至少一种，其中，吐温又称聚山梨酯，优选吐温80，司盘又称失水山梨醇脂肪酸酯司盘，优选司盘85；所述润滑剂包括硬脂酸镁和滑石粉中的至少一种。

进一步地，本发明实施例提供的复方制剂中，所示复方制剂为pH依赖型结肠溶胶囊。结肠部位的pH值呈弱碱性，蛋白水解酶的含量较低，通过对复方制剂制成pH依赖型结肠溶胶囊，更好地定位于结肠部位。

另一方面，本发明实施例还提供了上述复方制剂的制备方法，包括如下步骤：

S01：用第一蛋白酶水溶液酶解黄瓜籽粉，得到含有所述黄瓜籽多肽的黄瓜籽酶解液；

S02：用第二蛋白酶水溶液酶解动物骨粉，得到含有所述骨肽的动物骨粉酶解液；

S03：将所述黄瓜籽酶解液和所述动物骨粉酶解液混合后，浓缩得到浓缩液；

S04：将所述浓缩液与所述填充剂、湿润剂和润滑剂混合后，制备成结肠溶制剂，得到所述复方制剂。

本发明实施例提供的复方制剂的制备方法工艺简单易行，成本低，该制备方法中先通过酶解工艺分别提取黄瓜籽多肽和骨肽，然后将其与填充剂、湿润剂和润滑剂混合后，利用剂型工艺制备成结肠溶制剂。最终得到的复方制剂通过黄瓜籽多肽和骨肽在该重量份的范围内的协同作用，对防治骨质疏松、骨性关节炎、增加骨密度具有很好的疗效。

进一步地，在上述步骤S01和S02中，所述第一蛋白酶水溶液和所述第二蛋白酶水溶液中的蛋白酶分别独立选自胰蛋白酶、胃蛋白酶、糜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶和木瓜蛋白酶中的至少一种，即用上述任一种酶分别对黄瓜籽粉和动物骨粉进行酶解，得到对应的多肽。而所述第一蛋白酶水溶液和所述第二蛋白酶水溶液的加入重量分别为0.1％。

对于黄瓜籽多肽的提取，可以在黄瓜籽粉中加入5倍重量的纯净水，然后加热至50℃，搅拌调节pH值为5.5-6.1，再加0.1％蛋白酶水溶液(即占黄瓜籽粉重量的0.1％)，酶解4h。如此，可以得到含有相对分子质量为167-812的黄瓜籽多肽的黄瓜籽酶解液。

上述黄瓜籽多肽的提取，采用生物酶水解工艺，黄瓜籽粉经酶解、精制、真空干燥而成的低分子多肽，其中总氮含量约15％，产品回收率可达38％，而黄瓜籽多肽的回收率可达49％。

对于骨肽的工艺，可以在动物骨粉中加入6倍重量的纯净水，然后加热至56℃，搅拌调节pH值为5.5-6.1，再加0.1％蛋白酶水溶液(即占动物骨粉重量的0.1％)，酶解5h。如此，可以得到含有相应的动物骨肽的动物骨粉酶解液。最后，所述黄瓜籽酶解液和所述动物骨粉酶解液混合后，浓缩得到浓缩液，以便制备剂型。

优选地，所述浓缩液的相对密度为1.20-1.22(20℃时)。该相对密度的浓缩液，既能有效保证浓缩液不粘壁，又能保证其含水量足够低，以利于后续剂型的制备。本发明实施例中，相对密度即为相对水的密度。

本发明先后进行过多次试验，现举一部分试验结果作为参考对发明进行进一步详细描述，下面结合具体实施例进行详细说明。

实施例1

含有黄瓜籽多肽和骨肽的复方制剂的制备方法，步骤如下：

1.1原料前处理：

黄瓜籽：除去沙石，杂物，常水洗净，蒸馏水冲洗，60℃以下恒温干燥，粉碎成黄瓜籽粉。

动物骨：取(马、驴、猪、牛、羊、鹿等动物)四肢骨：常水洗净，蒸馏水冲洗，60℃以下恒温干燥，采用破骨机破碎四肢骨至20-40目骨粉。

1.2酶解：

黄瓜籽多肽提取：

在黄瓜籽粉中加入5倍重量的纯净水，加热至50℃，搅拌，调节pH值至5.5-6.1，搅拌20min；再加0.1％蛋白酶水溶液(蛋白酶：胰蛋白酶、胃蛋白酶、糜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶或木瓜蛋白酶)搅拌，搅拌速度为120r/min，酶解二次，每次4h；最后经SephadexG25(Fine)凝胶层析，得到单一的层析峰，其相对分子质量分布167-812，如图1所示。

骨肽提取：

在骨粉中加入6倍重量纯净水，加热至56℃，搅拌，调节pH值至5.5-6.1，搅拌20min；再加0.1％蛋白酶水溶液(蛋白酶：胰蛋白酶、胃蛋白酶、糜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶或木瓜蛋白酶)搅拌，搅拌速度为120r/min，酶解二次，每次5h。

1.3浓缩：

将上述含有黄瓜籽多肽的黄瓜籽酶解液和含有骨肽的骨粉酶解液合并，减压浓缩，浓缩至相对密度为1.20-1.22。

1.4制粒：

将浓缩液与配方规定的填充剂、湿润剂、润滑剂(即黄瓜籽多肽：骨肽：填充剂：湿润剂：润滑剂：湿润剂＝2:1:6:2:0.1)置于混合器内混匀，机械制粒，70℃恒温干燥。

1.5填充胶囊：

采用pH依赖型结肠溶胶囊壳，将上述制粒用填充机填装胶囊，每粒胶囊内容物450mg；如此可以控制黄瓜籽多肽分子量及含量，分子量在1KDa以下，多肽含量至少10％以上。最终得到的复方制剂为pH依赖型结肠溶胶囊。

实施例2

实施例1制备的复方制剂对新生SD大鼠颅骨成骨细胞矿化结节的作用验证。

通过用不同浓度的复方制剂对成骨细胞培养观察，说明实施例1制备的复方制剂对大鼠成骨细胞培养矿化结节的作用较强，矿化结节的数量较多。通过浓度为150mg/L、25mg/L、5mg/L的复方制剂对成骨细胞培养，以及阳性对照和阴性对照，结果如图2-6所示，矿化结节的数量及面积与其配比浓度呈剂量依赖关系。说明复方制剂具有预防骨质疏松、增加骨密度作用。

实施例3

实施例1制备的复方制剂对SD大鼠增加骨密度实验验证。

选用健康三月龄SD雌性大鼠54只，随机分为六组，包括假手术组(Sham)；去卵巢组(OVX)；雌激素阳性对照组(E₂)；结肠溶胶囊低剂量组(GYP-L 5.0mg.kg^-1.d^-1)、结肠溶胶囊中剂量组(GYP-M 20.0mg.kg^-1.d^-1)、结肠溶胶囊高剂量组(GYP-H 80.0mg.kg^-1.d^-1)。除假手术组外，全部SD大鼠实施手术去除双侧卵巢，造成骨质疏松症模型。试验周期为三个月。表1为结肠溶胶囊对去卵巢大鼠骨密度的影响表1的实验结果数据表明：该结肠溶胶囊可以明显提高骨质疏松大鼠骨密度。

表1

注：V与OVX组比较，^△P<0.05。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种复方制剂，所述复方制剂为结肠溶制剂，其特征在于，所述复方制剂包括如下重量份的组分：

黄瓜籽多肽：1.5-2.5份；

骨肽：0.8-1.2份；

填充剂：5-7份；

湿润剂：1.5-2.5份；

润滑剂：0.05-0.15份。

2.如权利要求1所述的复方制剂，其特征在于，所述复方制剂包括：黄瓜籽多肽：2份；骨肽：1份；填充剂：6份；湿润剂：2份；润滑剂：0.1份。

3.如权利要求1所述的复方制剂，其特征在于，所述黄瓜籽多肽的相对分子质量为167-812。

4.如权利要求1所述的复方制剂，其特征在于，所述骨肽包括马骨粉提取的骨肽、驴骨粉提取的骨肽、猪骨粉提取的骨肽、牛骨粉提取的骨肽、羊骨粉提取的骨肽和鹿骨粉提取的骨肽中的至少一种。

5.如权利要求1所述的复方制剂，其特征在于，所述填充剂包括淀粉、乳糖、糊精和微晶纤维素中的至少一种；和/或

所述湿润剂包括吐温和司盘中的至少一种；和/或

所述润滑剂包括硬脂酸镁和滑石粉中的至少一种。

6.如权利要求1-5任一项所述的复方制剂，其特征在于，所示复方制剂为pH依赖型结肠溶胶囊。

7.一种如权利要求1-6任一项所述的复方制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

用第一蛋白酶水溶液酶解黄瓜籽粉，得到含有所述黄瓜籽多肽的黄瓜籽酶解液；

用第二蛋白酶水溶液酶解动物骨粉，得到含有所述骨肽的动物骨粉酶解液；

将所述黄瓜籽酶解液和所述动物骨粉酶解液混合后，浓缩得到浓缩液；

将所述浓缩液与所述填充剂、湿润剂和润滑剂混合后，制备成结肠溶制剂，得到所述复方制剂。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述第一蛋白酶水溶液和所述第二蛋白酶水溶液中的蛋白酶分别独立选自胰蛋白酶、胃蛋白酶、糜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶和木瓜蛋白酶中的至少一种。

9.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述第一蛋白酶水溶液和所述第二蛋白酶水溶液的加入重量分别为0.1％。

10.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述浓缩液的相对密度为1.20-1.22。