CN109280057B

CN109280057B - 海兰地嗪制备方法

Info

Publication number: CN109280057B
Application number: CN201710593337.1A
Authority: CN
Inventors: 秦立玙; 姚连琦; 聂丽
Original assignee: Yujie Biotechnology Shanghai Co ltd
Current assignee: Yujie Biotechnology Shanghai Co ltd
Priority date: 2017-07-19
Filing date: 2017-07-19
Publication date: 2022-03-04
Anticipated expiration: 2037-07-19
Also published as: CN109280057A; WO2019015545A1

Abstract

本发明涉及海兰地嗪的制备方法。本发明公开了一种由5‑溴汉防己甲素制备海兰地嗪的制备方法。本发明还公开了一种通过以汉防己甲素为原料，经过溴代、甲氧基化制备海兰地嗪的制备方法。本发明所公开的制备方法采用汉防己甲素为原料，反应收率高，中间体和产物易于纯化，可以用于海兰地嗪的工业制备。

Description

海兰地嗪制备方法

技术领域

本发明属于药物化学技术领域，更具体地，本发明涉及一种海兰地嗪制备方法。

背景技术

海兰地嗪(Hernandezine)，又名金丝马尾连碱甲，鹤氏唐松草碱。分子式为C₃₉H₄₄N₂O₇，分子量为652.79，是一种双苄基异喹啉生物碱。主要存在于毛莨科唐松草属植物中。药理研究表明，海兰地嗪具有多种生物活性。徐承熊等人从金丝马尾连提取的总生物碱及其主要成分碱甲(heritandezine)对P388白血病小鼠、腹水型S180及C 26结肠癌小鼠有一定的治疗作用。在体外，海兰地嗪明显地抑制小鼠白血病L1210细密及人口腔癌KB细胞的生长，对小鼠正常造血细胞(CFU-GM)的抑制作用较弱。(药学学报Pharmaceutica Sinica1990；25(5)：330～335)。马丽娟等人报道了海兰地嗪具有良好的抗血小板聚集作用(马丽绢，尹钟沫，刘干中；海兰地嗪对血小板聚集的影响及机理探讨。中国药理学与毒理学杂志，1991；5(1)：41)。郭景珍等人发现海兰地嗪具有和维拉帕米相似的钙离子通道阻滞作用。(中药临床与药理1995(5))。Vincent Kam Wai Wong和Liang Liu等人报道了海兰地嗪作为一种有效的AMPK激动剂，可以诱导耐药的肿瘤细胞凋亡(Oncotarget，Vol.7，No.7)。并申请相关专利(AU2015101613；US20150190392)。Chung-Pu Wu等人报道了海兰地嗪是一种有效的肿瘤多药耐药逆转剂，能夠与临床上的多种抗肿瘤药物，如阿霉素、长春碱以及秋水仙碱等联用，在纳摩尔极浓度下，能夠有效的逆转多药耐药。该研究表明海兰地嗪选择性作用于ABCB1耐药基因，毒性很低，有望开发为高效低毒的肿瘤化疗药物增敏剂。(J.Nat.Prod.2016，79，2135-2142)。

经过文献检索，目前尚未发现海兰地嗪的合成方法。中国专利CN201210363078公开了一种海兰地嗪的提取方法。该方法将金丝马尾连原料粉碎，加盐酸或硫酸溶液提取，通过阳离子交换树脂分离，萃取，然后采用高速逆流色谱和制备液相色谱分离，经过低温干燥得到产物，纯度98％以上。该方法并未报道海兰地嗪的回收率，提取过程产生大量废酸，纯化过程过于复杂，采用制备液相色谱分离将大大增加成本，难以实现工业化生产。

发明内容

本发明提供了一种海兰地嗪的合成方法，该方法反应收率高，中间体和产物易于纯化，克服了现有技术的缺陷。

本发明涉及海兰地嗪的制备方法，本发明公开了一种由5-溴汉防己甲素制备海兰地嗪的制备方法。本发明还公开了一种通过以汉防己甲素为原料，经过溴代、甲氧基化制备海兰地嗪的制备方法。本发明所公开的制备方法采用汉防己甲素为原料，反应收率高，中间体和产物易于纯化，可以用于海兰地嗪的工业制备。

本发明公开了如下方法：

一种海兰地嗪的制备方法，其特征在于，5-溴汉防己甲素在催化剂的作用下经甲氧基化反应制得海兰地嗪。

如上所述的海兰地嗪的制备方法，其特征在于，所述的5-溴汉防己甲素由汉防己甲素经过溴代反应制得。

如上所述的海兰地嗪的制备方法，其特征在于，所述汉防己甲素在酸性溶剂条件下进行溴代反应，溴代试剂为N-溴代丁二酰亚胺、1，3-二溴-5，5-二甲基海因、溴单质。

如上所述的海兰地嗪的制备方法，其特征在于，所述的酸性溶剂为甲酸、乙酸、三氟乙酸。

如上所述的海兰地嗪的制备方法，其特征在于，所述的甲氧基化反应是在N，N-二甲基甲酰胺和甲醇中，在催化剂作用下与甲醇钠或甲醇钾进行取代反应，制得海兰地嗪。

如上所述的海兰地嗪的制备方法，其特征在于，所述的催化剂为一价铜盐或者其复合物。

如上所述的海兰地嗪的制备方法，其特征在于，所述的一价铜盐为氯化亚铜、溴化亚铜、碘化亚铜、Cu₂Cl₂-DMF复合物、Cu₂Cl₂-CO₂复合物。

一种海兰地嗪的制备方法，其特征在于，以汉防己甲素为原料，在三氟乙酸中，用N-溴代丁二酰亚胺进行溴代反应，得到5-溴汉防己甲素；所述5-溴汉防己甲素在N，N-二甲基甲酰胺和甲醇中，在催化剂作用下与甲醇钠进行取代反应，制得海兰地嗪。

一种海兰地嗪的制备方法包括步骤：以汉防己甲素为原料，在溶剂1中，用溴代试剂进行反应，得到5-溴汉防己甲素。5-溴汉防己甲素N，N-二甲基甲酰胺和甲醇中，在催化剂作用下与甲醇钠或甲醇钾进行取代反应，得到海兰地嗪。

如上所述，以汉防己甲素为原料，在溶剂1中，用溴代试剂进行反应，得到5-溴汉防己甲素；其中溶剂1为酸性溶剂，常温常压下为液态，这些溶剂可以单独使用，或2种以任意比例混合使用；溴代试剂为N-溴代丁二酰亚胺、1，3-二溴-5，5-二甲基海因、溴单质；5-溴汉防己甲素在N，N-二甲基甲酰胺和甲醇中，在催化剂作用下与甲醇钠或甲醇钾进行取代反应，得到海兰地嗪；催化剂为一价铜盐或者其复合物，如氯化亚铜、溴化亚铜、碘化亚铜、Cu₂Cl₂-DMF复合物、Cu₂Cl₂-CO₂复合物等。

如上所述，由5-溴汉防己甲素制备海兰地嗪的过程中，5-溴汉防己甲素与甲醇钠或甲醇钾的摩尔比为1∶1至1∶100；5-溴汉防己甲素与催化剂的摩尔比为1∶0.001至1∶0.1；反应温度为零上60摄氏度至零上250摄氏度；反应时间为1分钟至20小时。

如上所述，海兰地嗪的纯化步骤包括：将海兰地嗪粗品进行重结晶，重结晶溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇、四氢呋喃、丙酮、乙腈、乙酸乙酯、石油醚、正已烷、水、N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、二氧六环中的一种或多种。

附图说明

图1、5-溴汉防己甲素制备海兰地嗪的合成流程图

图2、汉防己甲素制备海兰地嗪的合成流程图

图3、5-溴汉防己甲素¹H-NMR图谱

图4、5-溴汉防己甲素¹³C-NMR图谱

图5、5-溴汉防己甲素ESI-MS图谱

图6、海兰地嗪¹H-NMR图谱

图7、海兰地嗪¹³C-NMR图谱

图8、海兰地嗪ESI-MS图谱。

具体实施方式

下面通过具体实施例说明本发明。应该理解的是，本发明的实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。在不违背本发明的精神和原则的前提下，对发明个别技术步骤进行的任何改动和改变都属于本发明要求保护的范围。

实施例1：5-溴汉防己甲素的制备

以汉防己甲素为原料以汉防己甲素为原料，在溶剂1中，用溴代试剂进行反应，制备获得5-溴汉防己甲素。其中溶剂1为酸性溶剂，常温常压下为液态，这些溶剂可以单独使用，或2种以任意比例混合使用；溴代试剂为N-溴代丁二酰亚胺、1，3-二溴-5，5-二甲基海因、溴单质。

表1中反应1至3为使用不同的溴代试剂，获得的反应收率；反应4和反应5为使用N-溴代丁二酰亚胺作为溴代试剂的十克及以上放大反应收率：

表1、不同溴代试剂的溴代反应

反应编号	汉防己甲素用量(克)	溴代试剂	收率(％)
				1	0.5	N-溴代丁二酰亚胺	82
2	0.5	1，3-二溴-5，5-二甲基海因	78
				3	0.5	溴单质	72
4	10	N-溴代丁二酰亚胺	83
				5	50	N-溴代丁二酰亚胺	83

实验方法：在反应瓶中加入三氟乙酸，0摄氏度下加入汉防己甲素，分批加入1.1倍量溴代试剂，加完后自然升温至20摄氏度，继续搅拌20分钟，减压浓缩至20ml，将此反应液滴加至饱和碳酸氢钠中，析出大量固体。过滤，滤饼水洗，减压干燥。粗品经重结晶得产物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.43(dd，J＝8.2，2.1Hz，1H)，7.18(dd，J＝8.2，2.5Hz，1H)，6.94(d，J＝7.1Hz，1H)，6.86(dd，J＝12.6，5.3Hz，2H)，6.61(s，1H)，6.48(d，J＝1.6Hz，1H)，6.33(dd，J＝8.3，2.1Hz，1H)，6.07(s，1H)，4.38(dd，J＝11.3，5.0Hz，1H)，3.99(s，1H)，3.93(s，3H)，3.90-3.80(m，1H)，3.75(s，3H)，3.69-3.55(m，2H)，3.45(s，3H)，3.42-3.34(m，1H)，3.24(d，J＝9.2Hz，3H)，3.20-3.05(m，3H)，2.92(s，3H)，2.90-2.77(m，3H)，2.71(d，J＝15.5Hz，1H)，2.57(d，J＝14.3Hz，1H)，2.42(s，3H).¹³C NMR(101MHz，CDCl₃)δ163.02(s)，162.67(s)，154.65(s)，149.77(s)，149.38(s)，149.29(s)，147.71(s)，147.04(s)，144.02(s)，142.91(s)，132.58(s)，131.65(s)，130.51(s)，127.53(s)，125.24(s)，123.38(s)，122.47(s)，122.40(s)，120.43(s)，118.20(s)，115.84(s)，113.13(s)，112.03(s)，111.75(s)，63.84(s)，61.64(s)，60.58(s)，60.40(s)，56.12(s)，55.51(s)，44.41(s)，44.22(s)，42.12(s)，40.96(s)，40.985(s)，38.25(s)，23.38(s)，22.98(s).ESI-MS m/z：701.21(M+H)，703.22(M+H)。

重结晶产物5-溴汉防己甲素经¹H-NMR、¹³C-NMR及ESI-MS检测，其检测结果如图3、图4、图5所示。

实施例2：海兰地嗪的制备

以5-溴汉防己甲素为原料制备海兰地嗪，反应流程如图1所示。

5-溴汉防己甲素在N，N-二甲基甲酰胺和甲醇中，在催化剂作用下与甲醇钠或甲醇钾进行取代反应，得到海兰地嗪；催化剂为一价铜盐或者其复合物，如氯化亚铜、溴化亚铜、碘化亚铜、Cu₂Cl₂-DMF复合物、Cu₂Cl₂-CO₂复合物等。

表2中反应1至3为使用不同的催化剂，以5-溴汉防己甲素制备海兰地嗪获得的反应收率；反应4和5为克级放大反应收率：

表2、不同催化剂的甲氧基化反应

反应编号	5-溴汉防己甲素用量(克)	催化剂	收率(％)
				1	0.5	溴化亚铜	85
2	0.5	碘化亚铜	75
				3	0.5	Cu<sub>2</sub>Cl<sub>2</sub>-DMF复合物	76
4	5	溴化亚铜	85
				5	10	溴化亚铜	86

在反应瓶加入5-溴汉防己甲素，5％摩尔比的催化剂，10倍量甲醇钠，甲醇和DMF，氮气置换3次，氮气保护下油浴加热，120摄氏度搅拌反应5小时，减压浓缩，加水和乙酸乙酯分层，水相萃取2次，有机相用饱和食盐水洗2次，干燥，浓缩，粗品经重结晶得产物。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.34(dd，J＝8.2，2.1Hz，1H)，7.14(dd，J＝8.2，2.5Hz，1H)，6.86(d，J＝0.6Hz，2H)，6.80(dd，J＝8.3，2.5Hz，1H)，6.56(s，1H)，6.51(s，1H)，6.31(dd，J＝8.3，2.1Hz，1H)，6.00(s，1H)，3.93(s，3H)，3.89(dd，J＝10.9，5.6Hz，1H)，3.81(s，3H)，3.79-3.73(m，4H)，3.51-3.37(m，2H)，3.36(d，J＝9.6Hz，3H)，3.29-3.18(m，4H)，3.02-2.84(m，3H)，2.83-2.68(m，4H)，2.63(s，3H)，2.56-2.45(m，2H)，2.30(s，3H).¹³C NMR(101MHz，CDCl₃)δ153.70(s)，149.39(s)，148.34(s)，147.08(s)，145.53(s)，144.39(s)，144.393(s)，143.74(s)，142.37(s)，135.20(s)，134.79(s)，132.62(s)，130.13(s)，128.42(s)，127.79(s)，125.61(s)，122.76(s)，121.96(s)，121.88(s)，121.71(s)，120.21(s)，116.12(s)，112.69(s)，111.49(s)，77.37(s)，77.05(s)，76.73(s)，63.77(s)，61.40(s)，60.87(s)，60.53(s)，60.50(s)，56.14(s)，55.67(s)，45.22(s)，43.57(s)，42.65(s)，42.31(s)，41.73(s)，37.77(s)，25.39(s)，16.48(s).ESI-MS m/z：653.42(M+H)，327.63(1/2M+H)。

重结晶产物海兰地嗪经¹H-NMR、¹³C-NMR及ESI-MS检测，其检测结果如图6、图7、图8所示。

Claims

1.一种海兰地嗪的制备方法，其特征在于，以汉防己甲素为原料，在三氟乙酸中，用N-溴代丁二酰亚胺进行溴代反应，得到5-溴汉防己甲素；所述5-溴汉防己甲素在N,N-二甲基甲酰胺和甲醇中，在催化剂溴化亚铜作用下与甲醇钠进行取代反应，制得海兰地嗪。