CN109260302A - 治疗气血不足的复方西洋参蜂王浆口服液及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了治疗气血不足的复方西洋参蜂王浆口服液及其制备方法,包括以下步骤:(1)将以质量份数计的西洋参1.5份~2.5份和五味子0.5份~1.5份粉碎,用65%~85%的乙醇浸泡24~45h后渗漉,收集生药7‑10倍量的渗漉液将渗漉液减压回收乙醇后得到浓缩液,即为西洋参五味子提取物;(2)将蜂王浆0.62份~1.86份研磨乳化,加水稀释,过滤,得到蜂王浆组分;(3)将所述西洋参五味子提取物和所述蜂王浆组分混合,静置24h~72h即得到复方西洋参蜂王浆口服液。本发明提供的复方西洋参蜂王浆口服液能够预防和/或治疗气血不足引起的免疫力低下,体虚乏力等问题。
Description
技术领域
本发明属于口服中药制剂领域,特别涉及治疗气血不足的复方西洋参蜂王浆口服液及其制备方法。
背景技术
气血不足即中医学中的气虚和血虚。气血不足的结果会导致脏腑功能的减退,引起早衰。气虚即脏腑功能衰退抗病能力差,表现为畏寒肢冷、自汗、头晕耳鸣、精神萎靡、疲倦无力、心悸气短、发育迟缓。血虚可见面色无华萎黄、皮肤干燥、毛发枯萎、指甲干裂、视物昏花、手足麻木、失眠多梦、健忘心悸、精神恍惚。
气血不足属气血同病。气血亏虚则会形体失养,以神疲乏力、气短懒言、面色淡白或萎黄、头晕目眩、唇甲色淡、心悸失眠、舌淡脉弱等为常见证候。
现有的用于治疗气血不足的中药制剂配方较复杂,其制备方法也较为繁琐。
发明内容
针对现有技术中的不足,本发明提供了治疗气血不足的复方西洋参蜂王浆口服液及其制备方法,本发明提供的复方西洋参蜂王浆口服液能够预防和/或治疗气血不足引起的免疫力低下,体虚乏力等。
本发明采用的技术方案为:
本发明提供了复方西洋参蜂王浆口服液的制备方法。
本发明所提供的复方西洋参蜂王浆口服液的制备方法,包括以下步骤:
(1)将以质量份数计的西洋参1.5份~2.5份和五味子0.5份~1.5份粉碎,用65%~85%的乙醇浸泡24h~45h后渗漉,收集生药7~10倍量的渗漉液,将渗漉液减压回收乙醇后得到浓缩液,即为西洋参五味子提取物;
(2)将蜂王浆0.62份~1.86份研磨乳化,加水稀释,过滤,得到蜂王浆组分;
(3)将所述西洋参五味子提取物和所述蜂王浆组分混合,静置24h~72h,即得到复方西洋参蜂王浆口服液。
步骤(1)中,所述乙醇的质量与所述西洋参和五味子的质量比为10~12:1。
步骤(1)中,所述减压回收乙醇是在60℃~75℃进行。
步骤(2)中,所述水为无菌水,所述蜂王浆与水的质量比为1:56~68.5。
步骤(2)中,所述过滤是用10μm无菌滤膜进行过滤。
所述步骤(3)中,所述混合后,还包括搅拌和过滤步骤,搅拌15min~30min,120目筛过滤。
所述步骤(1)还包括以下步骤:得到西洋参五味子提取物之后,将所述西洋参五味子提取物与柠檬酸、山梨酸钾、蜂蜜混合,煮沸30min,冷却后,备用。
用所述制备方法制备得到的复方西洋参蜂王浆口服液也属于本发明的保护范围。
所述复方西洋参蜂王浆口服液在制备预防和/或治疗人气血不足的产品中的应用也属于本发明的保护范围。
所述复方西洋参蜂王浆口服液在制备增强免疫力的产品中的应用也属于本发明的保护范围。
用本发明的制备方法,西洋参的有效成分皂苷和五味子的有效成分五味子素均能比较好的溶于65%~85%的乙醇,尤其是75%的乙醇,用冷渗漉方法提取有效成分,提取率高,杂质少,有效成分损失少,节约能源;经申请人实验,乙醇浓度过高或者过低都会影响有效成分的提取效果及杂质的干扰。
《本草备要》云:“西洋参苦甘凉,味厚气薄,补肺降火,生津液,除烦倦,虚阴有火者相宜”。《中药大辞典》记载:“甘微苦凉,益肺阴,清虚火,生津止渴。治肺虚久嗽,失血,咽干口渴,虚热烦倦。”自《本草备要》依赖,历代医籍均对西洋参的药用价值给予极高的评价。
五味子敛肺,滋肾,生津,收汗,涩精,安神保肝。蜂王浆味甘酸,性平;具滋补,强壮,益肝,健脾之功效。
综合全方,本文公开的复方西洋参蜂王浆口服液与传统人参类产品相比,除具有滋补强壮,养血生津,宁神益智等功效外,尚有性味平和,不燥不热的特点。正如《医学衷中参西录》所云:“西洋参性凉而补,凡欲用人参而不受人参之温补者,皆可以此代之”。因而该口服液成为老幼皆宜,保健功能独特,应用广泛的疗效型产品。
该口服液经检测含有如下成分:西洋参总皂苷,10-羟基-2-癸烯酸,五味子素和五味子仁醇,多种微量元素和氨基酸,还有白蛋白和球蛋白等,经过动物试验,对失血性血虚小鼠有促进红细胞生成,补气血的作用,同时具有增强免疫力的作用。
混合搅拌后静置24~72h是为了使得搅拌时产生的机械泡沫上浮,便于装瓶前除去。
使用75%的乙醇对五味子和西洋参进行提取一方面是为了提取其中的有效成分,另一方面还杀灭了其中的细菌,因为众所周知该浓度范围的乙醇的杀菌能力最强。
本发明具有以下的优势:
1、制备步骤简单,西洋参与五味子在一起提取,简化了工艺流程;
2、按照本文所述的方法制备得到的口服液对于气血不足引起的免疫力低下,体虚乏力,有明显的改善作用,该口服液的功效成分,其中总皂苷(以人参皂苷Re计)≥30.7mg/100g,10-羟基-2-癸烯酸≥16.1mg/100g。
3、按照本发明所述的方法制备得到的口服液由于是水溶性的溶液,其生物利用度高。
具体实施方式
下面结合具体的实施方式来对本发明的技术方案做进一步的限定,但要求保护的范围不仅局限于所作的描述。
试剂来源:
西洋参,五味子,蜂王浆:购自浙江省新昌县医药药材有限公司;
乙醇溶液用食用酒精与净化水勾兑而成,食用酒精,购自浙江省新昌县医药药材有限公司,优质食用酒精含量95%,符合GB10343-1989食用酒精标准。
实施例1、复方西洋参蜂王浆口服液的制备方法1
复方西洋参蜂王浆口服液的制备方法,包括以下步骤:
(1)将以质量份数计的西洋参2份和五味子1份粉碎成60目的粉末,常温的75%的乙醇浸泡24h后渗漉,以30~50d/min的速度,收集生药7倍量渗漉液,将渗漉液减压回收乙醇后得到浓缩液,即为西洋参五味子提取物;乙醇的质量与所述西洋参和五味子的质量比为10:1,减压回收乙醇是在60℃、真空度为0.06~0.1MPa的条件下进行;
(2)将蜂王浆1.24份用胶体磨研磨3min,加无菌水稀释,过滤,得到蜂王浆组分;其中蜂王浆与水的质量比为1:62.9,过滤使用孔径为10μm(截留分子量≤7万)的中空纤维超滤机过滤,滤液置于无菌容器中备用;
(3)将西洋参五味子提取物和蜂王浆组分混合搅拌15分钟,120目筛过滤,静置24h,即得到复方西洋参蜂王浆口服液。
西洋参总皂苷按照《保健食品检验与评价技术规范》中总皂苷的测定方法进行测定,10-羟基-2-癸烯酸按照GB/T9697-2002蜂王浆通用标准的测定方法测定,经测定总皂苷含量30.7mg/100g,10-羟基-2-癸烯酸含量16.1mg/100g。
实施例2、复方西洋参蜂王浆口服液的制备方法2
复方西洋参蜂王浆口服液的制备方法,包括以下步骤:
(1)将以质量份数计的西洋参1.5份和五味子0.5份粉碎成60目的粉末,用常温的65%的乙醇浸泡36h后渗漉,以30~50d/min的速度,收集生药8倍量渗漉液,将渗漉液减压回收乙醇后得到浓缩液,即为西洋参五味子提取物;乙醇的质量与所述西洋参和五味子的质量比为11:1,减压回收乙醇是在70℃、真空度为0.06~0.1MPa的条件下进行;
(2)将蜂王浆0.62份用胶体磨研磨3min,加无菌水稀释,过滤,得到蜂王浆组分;其中蜂王浆与水的质量比为1:56,过滤使用孔径为10μm(截留分子量≤7万)的中空纤维超滤机过滤,滤液置于无菌容器中备用;
(3)将西洋参五味子提取物和蜂王浆组分混合搅拌30分钟,120目筛过滤,静置36h,即得到复方西洋参蜂王浆口服液。
西洋参总皂苷按照《保健食品检验与评价技术规范》中总皂苷的测定方法进行测定,10-羟基-2-癸烯酸按照GB/T9697-2002蜂王浆通用标准的测定方法测定,经测定总皂苷含量30.8mg/100g,10-羟基-2-癸烯酸含量16.3mg/100g。
实施例3、复方西洋参蜂王浆口服液的制备方法3
复方西洋参蜂王浆口服液的制备方法,包括以下步骤:
(1)将以质量份数计的西洋参2.5份和五味子1.5份粉碎成60目的粉末,用常温的85%的乙醇浸泡45h后渗漉,以30~50d/min的速度,收集生药10倍量渗漉液,将渗漉液减压回收乙醇后得到浓缩液,即为西洋参五味子提取物;乙醇的质量与所述西洋参和五味子的质量比为12:1,减压回收乙醇是在75℃、真空度为0.06~0.1MPa的条件下进行;
(2)将蜂王浆1.86份用胶体磨研磨3min,加无菌水稀释,过滤,得到蜂王浆组分;其中蜂王浆与水的质量比为1:68.5,过滤使用孔径为10μm(截留分子量≤7万)的中空纤维超滤机过滤,滤液置于无菌容器中备用;
(3)将西洋参五味子提取物和蜂王浆组分混合搅拌30分钟,120目筛过滤,静置72h,即得到复方西洋参蜂王浆口服液。
西洋参总皂苷按照《保健食品检验与评价技术规范》2003年版中总皂苷的测定方法进行测定,10-羟基-2-癸烯酸按照GB/T9697-2002蜂王浆通用标准的测定方法测定,经测定总皂苷含量31.2mg/100g,10-羟基-2-癸烯酸含量16.8mg/100g。
实验例1、毒理实验(以下的试验用样品均为实施例1所示的口服液,其成人推荐日摄入量为20mL/60kgbw)
一、试验方法:
1、小鼠急性毒性试验(最大耐受剂量法):选用18~22g健康昆明种小鼠20只,雌雄各10只,以30.00g/kgbw的剂量(推荐摄入量的100倍),间隔4小时,分三次灌胃后,连续观察14天,如不引起小鼠死亡,确定最大耐受剂量(MTD)。
2、大鼠急性毒性试验(最大耐受剂量法):选用180g~220g健康Wistar大鼠(购自南京君科生物工程有限公司)20只,雌雄各10只进行试验,以30.00g/kgbw的剂量(推荐摄入量的100倍),大鼠灌胃容量20mL/kgbw,间隔4小时,分三次灌胃后,连续观察14天,如不引起大鼠死亡,确定最大耐受剂量(MTD)。
3、小鼠精子畸形实验:用体重25~30g的性成熟雄性小鼠25只,随机分为5组,以40mg/kgbw的剂量的环磷酰胺(腹腔注射)为阳性对照,样品溶剂为阴性对照,按一次最大灌胃容量,实验用样品设2.50,5.00,10.00g/kgbw3个剂量组,试验用样片使用时新鲜配制。每日灌胃一次,连续5天,末次灌胃后30天处死动物,取附睾制片,伊红染色,每组计数5只动物,每只动物计数1000个结构完整的精子,计算畸变精子发生率(以百分率计),并进行统计处理。
二、检验结果:
1、小鼠最大耐受量试验:由表1可见,试验用样品以30.00g/kgbw的剂量,间隔4小时,分三次灌胃给予两种性别的小鼠,观察14天。灌胃后动物略有腹胀,24小时后恢复正常,无死亡。实验用样品对两种性别的小鼠的经口最大耐受剂量(MTD)均大于30.00g/kgbw。根据急性毒性分级标准,试验用样品属无毒物质。
表1小鼠最大耐受量试验结果
2、大鼠最大耐受量试验:由表2可见,试验用样品以30.00g/kgbw的剂量,间隔4小时,分三次灌胃给予两种性别的小鼠,观察14天。灌胃后动物略有腹胀,24小时后恢复正常,无死亡。实验用样品对两种性别的大鼠的经口最大耐受剂量(MTD)均大于30.00g/kgbw。根据急性毒性分级标准,试验用样品属无毒物质。
表2大鼠最大耐受量试验结果
3、小鼠精子畸形试验:由表3可见,实验用样品各剂量组小鼠精子畸形发生率与样品溶剂对照组比较,无显著性差异(P>0.05);二环磷酰胺组小鼠精子畸形发生率与样品溶剂组比较,有显著性差异(P<0.05)。未见试验用样品对雄性小鼠生殖细胞有明显损伤作用。
表3小鼠精子畸形试验
上述实验证明,以实施例1的复方西洋参蜂王浆口服液制备方法制备出的口服液对小鼠和大鼠均未发现急性毒性,属于无毒物质,且对雄性小鼠生殖细胞没有生殖毒性。
实施例2-3的复方西洋参蜂王浆口服液制备方法制备出的口服液均与实施例1的产品的毒理实验结果无显著差异,即对小鼠和大鼠均未发现急性毒性,属于无毒物质,且对雄性小鼠生殖细胞没有生殖毒性。
实验例2、补气血动物实验
本实验是为了测定西洋参蜂王浆对失血性血虚小鼠Hb含量RBC数的影响。取雄性体20-24g昆明种小鼠50只,随机分为5组,每鼠眼眶采血约0.6mL。同时,测试Hb和RBC。失血24小时后,再取血测Hb和RBC,并随即菅胃给药(按照实施例1的复方西洋参蜂王浆口服液制备方法制备出的口服液),剂量见表4,连续给药10天,于第10天采血测Hb及RBC。失血前与失血后比较及服药组与空白对照组比较,进行统计学处理,比较其差异显著性。
试验表明,各剂量的口服西洋参蜂王浆对失血性血虚小鼠的Hb含量有提高作用,相应RBC数有增加P<0.001。
表4西洋参蜂王浆对失血性血虚小鼠Hb含量RBC数的影响
实验证明,以实施例1的复方西洋参蜂王浆口服液制备方法制备出的口服液对失血性血虚小鼠有促进红细胞生成,补气血的作用。
实施例2-3的复方西洋参蜂王浆口服液制备方法制备出的口服液均与实施例1的产品补气血动物实验结果无显著差异,即对失血性血虚小鼠有促进红细胞生成,补气血的作用。
实验例3、增强免疫力功能动物实验
该实验依据《保健食品检验与评价技术规范》2003年版;
依据标准对检验结果进行判定如下:在本实验室条件下,以18~22g昆明种雄性小鼠为实验动物,实施例1的复方西洋参蜂王浆口服液制备方法制备出的口服液分为0.60g/kgbw,0.40g/kgbw,0.20g/kgbw三个实验组和样品溶剂对照组,每日灌胃一次,连续30天后,测定各项免疫指标。
实验结果:
1、脏器/体重比值测定结果:由表5可见,各实验组的胸腺/体重比值,腺脏/体重比值与样品溶剂对照组比较,差异无显著(P>0.05)。
表5小鼠脏器/体重比值测定结果单位mg/g
2、ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验结果:由表6可见,各实验组初始体重、试验末体重,体重增重与样品溶剂对照组比较,差异无显著(P>0.05);由表7可见,各实验组的光密度差值与样品溶剂对照组比较,差异显著(P<0.05)。
表6 ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验体重测量结果单位:g
表7诱导的小鼠脾淋巴细胞试验光密度值测定结果
3、DNFB诱导小鼠DTH试验结果
由表8可见,各实验组初始体重,试验体重,体重增重与样品溶剂对照组比较,差异无显著(P>0.05);由表9可见,各实验组小鼠左右耳重量差与样品溶剂对照组比较,差异显著(P<0.05)。
表8 DNFB诱导小鼠DTH试验体重结果
表9 DNFB诱导小鼠DTH试验左右耳重量差测量结果
4、抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)
由表10可见,各实验组初始体重,试验体重,体重增重与样品溶剂对照组比较,差异无显著(P>0.05);由表11可见,各实验组的溶血斑数与样品溶剂对照组比较,差异显著(P<0.05)。
表10小鼠抗体生成细胞检测体重测量结果
表11小鼠抗体生成细胞检测空斑数测定结果
5、小鼠血清溶血素测定结果(血凝法)
由表12可见,各实验组初始体制,实验末体重,体重增重与样品溶剂对照组比较,差异无显著(P>0.05);由表13可见,各实验组的抗体积数与样品溶剂对照组比较,差异显著(P<0.05)。
表12小鼠血清溶血素试验体重测量结果
表13小鼠血清溶血素试验积数测定结果
6、小鼠碳廓清试验结果
由表14可见,各实验组初始体制,实验末体重,体重增重与样品溶剂对照组比较,差异无显著(P>0.05);由表15可见,各实验组的吞噬指数与样品溶剂对照组比较,差异显著(P<0.05)。
表14小鼠碳廓清试验体重测量结果
表15小鼠碳廓清试验吞噬指数测定结果
7、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验结果(半体内法)
由表16可见,各实验组初始体制,实验末体重,体重增重与样品溶剂对照组比较,差异无显著(P>0.05);由表17可见,各实验组的吞噬百分率,吞噬指数与样品溶剂对照组比较,差异显著(P<0.05)。
表16小鼠血清溶血素试验体重测量结果
表17小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验吞噬百分率,吞噬指数测定结果
8、小鼠NK细胞活性测定结果
由表18可见,各实验组初始体制,实验末体重,体重增重与样品溶剂对照组比较,差异无显著(P>0.05);由表19可见,各实验组的NK细胞活性与样品溶剂对照组比较,差异显著(P<0.05)。
表18小鼠NK细胞活性试验体重测量结果
表19小鼠NK细胞活性测定结果
剂量g/kgbw | 动物数/只 | NK细胞活性% | P |
0.60 | 10 | 9.6±1.2 | 0.02 |
0.40 | 10 | 9.4±1.2 | 0.02 |
0.20 | 10 | 8.9±1.4 | 0.03 |
溶剂对照 | 10 | 7.4±1.2 | - |
试验结果表明:以实施例1的复方西洋参蜂王浆口服液制备方法制备出的口服液对各项试验的实验动物体重,体重增重,胸重/体重比值,脾重/体重比值无明显影响。各实验组能增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力;各实验组能提高小鼠血球凝集程度;各实验组能增强诱导小鼠的淋巴细胞增殖能力,能提高抗体生成细胞数量,各实验组能促进二硝基氟苯(DNFB)诱导小鼠迟发型变态反应(DTH)形成,各实验组能增强小鼠碳廓清能力,能显示小鼠NK细胞活性;由此判定,本发明实施例1制备的产品具有增强免疫力的作用。
实施例2-3的复方西洋参蜂王浆口服液制备方法制备出的口服液经试验具有与实施例1产品的结果无显著差异,即对各项试验的实验动物体重,体重增重,胸重/体重比值,脾重/体重比值无明显影响。各实验组能增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力;各实验组能提高小鼠血球凝集程度;各实验组能增强诱导小鼠的淋巴细胞增殖能力,能提高抗体生成细胞数量,各实验组能促进二硝基氟苯(DNFB)诱导小鼠迟发型变态反应(DTH)形成,各实验组能增强小鼠碳廓清能力,能显示小鼠NK细胞活性;由此判定,本发明实施例2-3制备的产品具有增强免疫力的作用。
Claims (10)
1.复方西洋参蜂王浆口服液的制备方法,包括以下步骤:
(1)将以质量份数计的西洋参1.5份~2.5份和五味子0.5份~1.5份粉碎,用65%~85%的乙醇浸泡24h~45h后渗漉,收集生药7~10倍量的渗漉液,将渗漉液减压回收乙醇后得到浓缩液,即为西洋参五味子提取物;
(2)将蜂王浆0.62份~1.86份研磨乳化,加水稀释,过滤,得到蜂王浆组分;
(3)将所述西洋参五味子提取物和所述蜂王浆组分混合,静置24h~72h,即得到复方西洋参蜂王浆口服液。
2.根据权利要求1所述的复方西洋参蜂王浆口服液的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)中,所述乙醇的质量与所述西洋参和五味子的质量比为10~12:1。
3.根据权利要求1所述的复方西洋参蜂王浆口服液的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)中,所述减压回收乙醇是在60℃~75℃进行。
4.根据权利要求1所述的复方西洋参蜂王浆口服液的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中,所述水为无菌水,所述蜂王浆与水的质量比为1:56~68.5。
5.根据权利要求1所述的复方西洋参蜂王浆口服液的制备方法,其特征在于:所述步骤(2)中,所述过滤是用10μm无菌滤膜进行过滤。
6.根据权利要求1所述的复方西洋参蜂王浆口服液的制备方法,其特征在于:步骤(3)中,所述混合后,还包括搅拌和过滤步骤,搅拌15min~30min,120目筛过滤。
7.根据权利要求1所述的复方西洋参蜂王浆口服液的制备方法,其特征在于:所述步骤(1)还包括以下步骤:得到西洋参五味子提取物之后,将所述西洋参五味子提取物与柠檬酸、山梨酸钾、蜂蜜混合,煮沸30min,冷却后,备用。
8.权利要求1-7中任一所述的方法制备得到的复方西洋参蜂王浆口服液。
9.权利要求8所述的复方西洋参蜂王浆口服液在制备预防和/或治疗人气血不足的产品中应用。
10.权利要求8所述的复方西洋参蜂王浆口服液在制备增强免疫力的产品中的应用。
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