CN109260076A - 一种樱桃发酵液及其制备方法和在化妆品中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种樱桃发酵液及其制备方法和在化妆品中的应用。本发明发酵液的制备方法具体实现如下：以樱桃与水的混合物为发酵底物，以乳酸菌为发酵菌种，于恒温条件下进行发酵，获取发酵产物；取发酵产物，离心收集上清液；乳酸菌和樱桃配比为106‑109cfu：20‑60g鲜果重；乳酸菌发酵条件为：T＝30‑40℃，20‑30小时；发酵体系为：0.1‑0.4g乳酸菌菌粉、5‑10mg果胶酶、10‑30mg纤维素酶、20‑60g去核樱桃果肉、150‑250mL无菌水；离心参数为：3000‑6000rpm，5‑25min，具体为4000rpm，15min。本发明发酵用乳酸菌可产生很多种酶如蛋白酶等；得到的发酵液中多糖和氨基酸含量高，皮肤易吸收。利用发酵工艺得到樱桃乳酸菌发酵液，在低温下可长期有效的保持其生物活性。

Description

一种樱桃发酵液及其制备方法和在化妆品中的应用
技术领域
本发明属于生物发酵技术领域，具体涉及一种樱桃发酵液及其制备方法与和化妆品中的应用。
背景技术
樱桃Cerasus pseudocerasus，世界上主要分布于美国、智利等地，中国主要分布于山东、江苏、浙江等地。其果实为红皮浆果，常用于作为果酱，果酒等的风味剂。果实富含果实富含糖、蛋白质、维生素及微量元素等，是化妆品的优秀原料。
近年来，发酵技术在化妆品植物活性原料开发上有着很好的应用前景，微生物不仅能够有效富集植物活性成分、提高功效，还可以降低来自植物中其他物质的毒副作用。同时，微生物发酵还能降低有机试剂的使用，减少污染及能耗，已然成为化妆品工业上的研究热点之一。本发明利用乳酸菌发酵樱桃果肉，发酵液具有抗氧化、抗衰老等多种功效。
发明内容
本发明的目的是提供一种樱桃发酵液及其制备方法和在化妆品中的应用。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下：
一种樱桃发酵液，为浅黄至黄色液体，pH＝3.6-3.9。
一种樱桃发酵液的制备方法，具体实现如下：
以樱桃与水的混合物为发酵底物，以乳酸菌为发酵菌种，于恒温条件下进行发酵，获取发酵产物。
进一步的，乳酸菌和樱桃配比为106-109cfu：20-60g鲜果重，具体为107cfu:40g；
进一步的，乳酸菌包括保加利亚乳酸菌、嗜热链球菌、乳酸乳球菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌中的一种或几种。
进一步的，乳酸菌发酵条件为：T＝30-40℃，20-30小时，具体为37℃，24小时；
进一步的，发酵体系为0.1-0.4g乳酸菌菌粉、5-10mg果胶酶、10-30mg纤维素酶、20-60g去核樱桃果肉、150-250mL无菌水，具体为0.2g乳酸菌菌粉、8mg果胶酶、20mg纤维素酶、40g去核樱桃果肉、200mL无菌水；
取发酵产物，离心收集上清液。
所述离心参数为：3000-6000rpm，5-25min，具体为4000rpm，15min；
本发明制备的樱桃发酵液其具有保湿和抗氧化功效，在抗衰老和保湿化妆品中的应用。所述化妆品包括但不限于：面膜、护肤霜或爽肤水。
本发明有益效果如下：
本发明特点是：发酵用乳酸菌可产生很多种酶如蛋白酶等；得到的发酵液中多糖和氨基酸含量高，皮肤易吸收。利用发酵工艺得到樱桃乳酸菌发酵液，在低温下可长期有效的保持其生物活性。
樱桃乳酸菌发酵液作为化妆品原料及其制备工艺。樱桃经发酵，制备成化妆品原料，它所有物料主要包括樱桃果肉、乳酸菌、果胶酶、纤维素酶及无菌水。本发明采用发酵法制备化妆品原料，制备时不添加任何有机试剂，可确保产品对皮肤的安全性。产品中富含多糖、微量元素和氨基酸，其具有抗衰老、抗氧化等功效。
本发明利用微生物发酵技术，通过选择合适的微生物及其发酵条件，充分利用微生物的降解及转化作用。此外，发酵过程中不添加其他有机试剂，提高了安全性和环保性，得到的发酵液具有保湿和抗氧化能力，可作为原料添加至化妆品中。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作更进一步的说明，以便本领域的技术人员更了解本发明，但并不因此限制于本发明。下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为常规生化试剂商店购买得到的。
樱桃产自山东烟台。
其他试剂均为普通市售品。
实施例一
步骤一、称取40g鲜樱桃与200mL灭菌蒸馏水混合，于打浆机中打至浆状，倒入发酵容器中。
步骤二、称取8mg果胶酶和20mg纤维素酶加入到发酵容器中，摇匀搅拌使其充分溶解后静置15min。
步骤三、将0.2g乳酸菌冻干粉与步骤1中的发酵液混合，然后置于37℃静置发酵24h，然后收集整个发酵体系，即为发酵产物。
步骤四、取步骤三的产物，4000rpm离心15min，收集上清液，即为樱桃乳酸菌发酵。发酵液为浅黄色至黄色液体，pH至为3.85。
步骤五、樱桃乳酸菌发酵液多糖含量检测，参照SN/T 4260-2015，采用苯酚硫酸法进行检测。具体步骤如下：准确吸取1.0mL样品溶液/纯水到10mL比色管中。加入1mL的5％苯酚溶液，然后快速加入5.0mL浓硫酸，静置10min。样品溶液振荡混匀后，将比色管放置于30℃水浴锅中水浴20min。以加纯水的试剂为空白，测定样品在490nm处的吸光值，代入标准曲线计算得到多糖含量；
步骤六、樱桃乳酸菌发酵液自由基清除率检测
DPPH溶液为溶解于无水乙醇、浓度为6×10-5mol/L的DPPH溶液。
樱桃乳酸菌发酵液的稀释溶剂为无水乙醇。
1.0mL的4％樱桃乳酸菌发酵液与5.0mL DPPH溶液混合(实验组)；1.0mL无水乙醇与5.0mL DPPH溶液混合(空白组)；室温避光静置30min后，测定三个组别的A518。DPPH自由基清除率计算公式：清除率％＝(实验组-空白组)/空白组。
经测定，樱桃乳酸菌发酵液的多糖含量为19.7g/L，自由基清除率为46％。
实施例二、
步骤一、称取40g鲜樱桃与200mL灭菌蒸馏水混合，于打浆机中打至浆状，倒入发酵容器中。
步骤二、称取8mg果胶酶和20mg纤维素酶加入到发酵容器中，摇匀搅拌使其充分溶解后静置15min。
步骤三、称取0.06g酿酒酵母EC1118干粉于10mL无菌蒸馏水中溶解，后加入10mL发酵液，置于35℃下活化20min。把酵母菌悬液全部接种于发酵液中。然后置于25℃静置发酵24h，然后收集整个发酵体系，即为发酵产物。
步骤四、取步骤三的产物，4000rpm离心15min，收集上清液，即为樱桃酵母菌发酵。发酵液为浅黄色至黄色液体，pH至为3.76。
步骤五、樱桃酵母菌发酵液多糖含量检测，参照SN/T 4260-2015，采用苯酚硫酸法进行检测。具体步骤如下：准确吸取1.0mL样品溶液/纯水到10mL比色管中。加入1mL的5％苯酚溶液，然后快速加入5.0mL浓硫酸，静置10min。样品溶液振荡混匀后，将比色管放置于30℃水浴锅中水浴20min。以加纯水的试剂为空白，测定样品在490nm处的吸光值，代入标准曲线计算得到多糖含量
步骤六、樱桃酵母菌发酵液自由基清除率检测
DPPH溶液为溶解于无水乙醇、浓度为6×10-5mol/L的DPPH溶液。
樱桃酵母菌发酵液的稀释溶剂为无水乙醇。
1.0mL的4％樱桃酵母菌发酵液与5.0mL DPPH溶液混合(实验组)；1.0mL无水乙醇与5.0mL DPPH溶液混合(空白组)；室温避光静置30min后，测定三个组别的A518。DPPH自由基清除率计算公式：清除率％＝(实验组-空白组)/空白组。
经测定，樱桃乳酸菌发酵液的多糖含量为4.3g/L，自由基清除率为32％。
实施例三、
步骤一、称取10g鲜樱桃与200mL灭菌蒸馏水混合，于打浆机中打至浆状，倒入发酵容器中。
步骤二、称取2mg果胶酶和5mg纤维素酶加入到发酵容器中，摇匀搅拌使其充分溶解。
步骤三、将0.2g乳酸菌冻干粉与步骤1中的发酵液混合，然后置于30℃静置发酵48h，然后收集整个发酵体系，即为发酵产物。
步骤四、取步骤三的产物，3000rpm离心10min，收集上清液，即为樱桃乳酸菌发酵A。发酵液为浅黄色至黄色液体，pH至为3.83。
步骤五、樱桃乳酸菌发酵液多糖含量检测，参照SN/T 4260-2015，采用苯酚硫酸法进行检测。具体步骤如下：准确吸取1.0mL样品溶液/纯水到10mL比色管中。加入1mL的5％苯酚溶液，然后快速加入5.0mL浓硫酸，静置10min。样品溶液振荡混匀后，将比色管放置于30℃水浴锅中水浴20min。以加纯水的试剂为空白，测定样品在490nm处的吸光值，代入标准曲线计算得到多糖含量
步骤六、樱桃乳酸菌发酵液自由基清除率检测
DPPH溶液为溶解于无水乙醇、浓度为6×10-5mol/L的DPPH溶液。
樱桃乳酸菌发酵液的稀释溶剂为无水乙醇。
1.0mL的4％樱桃乳酸菌发酵液与5.0mL DPPH溶液混合(实验组)；1.0mL无水乙醇与5.0mL DPPH溶液混合(空白组)；室温避光静置30min后，测定三个组别的A518。DPPH自由基清除率计算公式：清除率％＝(实验组-空白组)/空白组。
经测定，樱桃乳酸菌发酵液的多糖含量为10.9g/L，自由基清除率为40％。

Claims (7)

1.一种樱桃发酵液，其特征在于外观为浅黄至黄色液体，pH＝3.6-3.9。
2.根据权利要求1所述的一种樱桃发酵液，其特征在于该发酵液的制备方法具体实现如下：
以樱桃与水的混合物为发酵底物，以乳酸菌为发酵菌种，于恒温条件下进行发酵，获取发酵产物；
取发酵产物，离心收集上清液；
乳酸菌和樱桃配比为106-109cfu：20-60g鲜果重；
乳酸菌发酵条件为：T＝30-40℃，20-30小时；
发酵体系为：0.1-0.4g乳酸菌菌粉、5-10mg果胶酶、10-30mg纤维素酶、20-60g去核樱桃果肉、150-250mL无菌水；
离心参数为：3000-6000rpm，5-25min，具体为4000rpm，15min。
3.根据权利要求2所述的一种樱桃发酵液，其特征在于乳酸菌和樱桃配比为107cfu:40g。
4.根据权利要求3所述的一种樱桃发酵液，其特征在于乳酸菌包括保加利亚乳酸菌、嗜热链球菌、乳酸乳球菌、嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌中的一种或几种。
5.根据权利要求4所述的一种樱桃发酵液，其特征在于乳酸菌发酵条件为：T＝37℃，24小时。
6.根据权利要求5所述的一种樱桃发酵液，其特征在于发酵体系为：0.2g乳酸菌菌粉、8mg果胶酶、20mg纤维素酶、40g去核樱桃果肉、200mL无菌水。
7.根据权利要求6所述的一种樱桃发酵液，其特征在于该樱桃发酵液其具有保湿和抗氧化功效，能够应用在抗衰老和保湿化妆品中。
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SE01 Entry into force of request for substantive examination
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RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20190125

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