CN109223722A - 黄体酮纳米晶注射剂及其制备方法 - Google Patents

黄体酮纳米晶注射剂及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及制药领域，具体而言，涉及一种黄体酮纳米晶注射剂及其制备方法。黄体酮纳米晶注射剂的制备方法，包括以下步骤：将黄体酮原料进行乳化得到水包油型乳液，而后将水包油型乳液直接进行冷冻干燥，复溶后形成纳米晶。制备过程简单，无菌操作过程容易，能耗低，可通过控制乳滴大小控制纳米晶粒径。

Description

黄体酮纳米晶注射剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及制药领域，具体而言，涉及一种黄体酮纳米晶注射剂及其制备方法。
背景技术
黄体酮(Progesterone)，别名孕酮、助孕素、孕烯二酮，化学名为右旋-孕-4-烯-3,20-二酮，分子式为C21H3O2,其在三氯甲烷中极易溶解，在乙醇、乙醚或植物油中溶解，在水中不溶。现有技术中采用的黄体酮注射剂吸收慢、药液容易在组织内堆积，副作用较大。
发明内容
本发明提供了一种黄体酮纳米晶注射剂的制备方法，制备过程简单，能耗低，可通过控制乳滴大小控制颗粒粒径。
本发明提供了一种黄体酮纳米晶注射剂，其粒径均匀、具有较高ζ-电位，稳定性良好。
本发明是这样实现的：
一种黄体酮纳米晶注射剂的制备方法，包括以下步骤：
将黄体酮原料进行乳化得到水包油型乳液，而后将水包油型乳液直接进行冷冻干燥，复溶后形成纳米晶。
一种黄体酮纳米晶注射剂，其通过上述黄体酮纳米晶注射剂的制备方法制备得到。
本发明的有益效果是：本发明制备水包油型乳液，并通过控制乳滴的大小，继而控制后续制备得到的黄体酮纳米晶注射剂的颗粒粒径，保证后续制备得到的注射液的稳定性。同时相比于油注射剂，冻干注射剂在稳定性方面具有显著优势。另外，纳米晶注射液的溶剂为水而非油溶剂，避免了因油分子表面张力大难以被溶解，组织吸收慢，长时间大剂量注射，导致注射部位皮肤红肿、疼痛及硬结的现象产生，能够提高患者顺应性。制备过程简单，无菌操作过程容易，能耗低，可通过控制乳滴大小控制颗粒粒径。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，以下将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1为实施例1的结构表征的差示扫描量热分析扫描图；
图2为黄体酮原料的SEM扫描图；
图3为实施例1制备得到的黄体酮纳米晶注射剂SEM扫描图谱；
图4为实施例2制备得到的注射剂X射线粉末衍射分析图谱；
图5为SD大鼠体内的血药浓度曲线图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明实施例的黄体酮纳米晶注射剂及其制备方法进行具体说明。
一种黄体酮纳米晶注射剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、制备水包油型乳液；
现有技术中的黄体酮注射剂采用油作溶剂，而油分子表面张力大，组织吸收慢，易造成药液在组织内堆积。长时间大剂量注射给药后易造成注射部位皮肤红肿、疼痛及产生硬结，患者顺应性差。
因此，本发明提供一种以水为分散介质的注射液，减少给药后对注射部位造成的不良反应，提高用药安全性，改善病人耐受性。
具体地，将所述黄体酮原料与乳化剂、油相、水相混合后进行超声乳化，黄体酮原料为难溶性的药物，其在水中溶解度差，因此，采用油相溶解黄体酮，继而便于形成水包油型乳液。
进一步地，油相为取代烷烃类物质和醇类物质或酯类物质的混合物，采用取代烷烃类物质和醇类物质的混合物或者取代烷烃类物质和酯类物质的混合物作为油相，更有利于提升乳化效果。
取代烷烃类物质为卤素取代烷烃类物质，更优选为C1-C4二氯取代烷烃，最优选为二氯甲烷。最优选为二氯甲烷其极性低，并对黄体酮原料溶解性良好，且二氯甲烷的毒性小，能够降低卤素取代烷烃的毒副作用。例如采用三氯甲烷，遇光会发生分解，产生有毒的光气，因此，不利于乳液的制备，降低注射剂的稳定性，同时增加注射剂的毒副作用。同时，本发明实施例采用冷冻干燥去除油相，因此，要采用低沸点的油相，而三氯甲烷的沸点较高，也不利于溶剂的去除，也容易增加药物的副作用。
醇类物质为醇类物质，优选为一元醇，更优选为C1-C8一元醇，最优选为正丁醇，采用正丁醇能够更有效地减小乳液的粒径，缩窄粒径分布，使乳滴更均一，同时提高乳液的稳定性。
酯类物质为乙酸乙酯或碳酸酯，优选乙酸乙酯，采用上述酯类物质有利于减小乳液的粒径，缩窄粒径分布，使乳滴更均一，同时提高乳液的稳定性。
进一步地，取代烷烃类物质和水相的体积比例为1:3-15，醇类物质或酯类物质的添加量为0-50％，该百分比为醇类物质或酯类物质在油相中的质量百分比。油相中各物质采用上述比例能够保证制备得到的乳液的粒径和ζ-电位为最优，继而保证乳液的性能和稳定性。
进一步地，乳化剂为非离子型表面活性剂，优选为聚山梨酯，更优选为采用的是吐温80，采用吐温80能够保证制备得到的乳液的粒径更小，粒径分布更窄，乳滴粒径更均一，同时具备更高的ζ-电位，乳液更稳定。但是换成其他乳化剂，例如泊洛沙姆F68和卵磷脂，则会造成制备得到的乳液的粒径大、粒径分布宽、乳滴粒径均一性差。
但是由于吐温80具有一定的溶血性，因此，其用量不易过高，若用量过高，增加了黄体酮纳米晶注射剂的副作用，但是若吐温80用量过低也不能达到良好的乳化效果，因此，乳化剂的添加量为0.1-0.5％，该百分比为乳化剂在乳液中的质量百分比。
进一步地，黄体酮原料的浓度为1-30mg/mL，采用上述比例范围的黄体酮原料，能够保证制备得到的乳液具有良好的粒径分布，若浓度过高或过低都会造成乳液粒径增加，ζ-电位降低，不利于乳液的稳定。
而后进行超声乳化，超声乳化是将探头侵入所述混合物的液面8-12毫米，超声过程中，超声的探头侵入液面太深或太浅，会无法使液体各部分均化效果一致，也容易损坏仪器，探头侵入液面8-12毫米能够发挥最佳的超声效果，使得各部分均化效果一致。
同时，超声过程中极容易产生热量，影响乳液稳定性，所以超声过程应该控制温度，因此，超声时混合物的温度为0-5℃，保证制备得到的乳液的结构不会被超声破坏，提升其稳定性。
超声结束后将行成的乳剂冻干保护剂溶液混匀，为避免复溶后制备得的纳米晶注射液的粒径大且粒径分布范围大，可添加适当稳定剂。
进一步对，稳定剂为乙烯类聚合物或者为大分子物质，所述乙烯类聚合物为聚乙烯吡咯烷酮；乙烯类聚合物，优选为聚乙烯吡咯烷酮；大分子物质为糖类大分子物质或蛋白质类大分子物质；
优选，所述糖类大分子为乳糖或者蔗糖；
蛋白质类大分子为白蛋白。
适当稳定剂的存在，可以使制备的纳米晶更加稳定，粒径更均匀，实验中采用本专利方法，不添加稳定剂也可以制得黄体酮纳米晶。当稳定剂的添加量为1-10mg/mL。采用上述稳定剂能够发挥更好的助悬效果，有利于冻干后形成的黄体酮颗粒的均匀分散和稳定。同样更改稳定剂的添加量，会导致复溶后的混悬剂粒径变大，电位降低，稳定剂用量低，助悬效果差，而稳定剂用量增加，多余的稳定剂分散在溶剂中，起到桥连的作用，促使相邻颗粒聚集合并，从而导致混悬剂粒径的增大。
或者超声结束后将混合物与冻干保护剂混合得到水包油型乳液。即不采用稳定剂也可制备上述水包油型乳液。
进一步地，冻干保护剂可以保证水包油型乳液经过冷冻干燥后可以得到疏松多孔，复溶后分散良好的冻干产品。
进一步地，采用的冻干保护剂为多元醇，优选为C1-C10多元醇，更优选为甘露醇，且甘露醇的添加量为乳液质量的5-10％，采用其他冻干保护剂例如乳糖、葡萄糖、海藻糖、山梨糖醇等会造成复溶得到的注射液内有肉眼可见的悬浮物，不能进行注射。
S2、冷冻干燥；
将制备好的乳液过0.22μ滤膜，过滤除菌，将过滤后的乳液分装至西林瓶，5mL/瓶。
冷冻干燥是以100-120℃/h的速率将所述水包油型乳液的温度降至负60℃-负25℃，而后预冻5-7小时；采用上述降温速率，使得形成的晶体颗粒小，同时，采用上述预冻时间和温度，保证后续制品的体积、形状和成品最初晶格。
而后再以8-10℃/h的速率将所述水包油型乳液的温度升至负20℃至负15℃，而后升华20-26小时；此阶段能够去除油相，而控制升温速率和加热时间和温度，不仅仅可以快速去除油相，还可以防止样品的熔化和塌陷，保证产品结构的完整性。
再以20-25℃/h的速率将所述水包油型乳液的温度升至20-25℃，并干燥4-6小时。该阶段去除的水分是通过范德华力、氢键等分子力吸附在药品上的结合水，采用上述条件能够快速去除结合水又能保证产品的质量。
而后将上述冷冻干燥后的冻干物与复溶剂复溶后形成纳米晶。
本发明实施例还提供一种黄体酮纳米晶注射剂，其通过上述黄体酮纳米晶注射剂的制备方法制备得到。
本发明实施例还提供一种复合黄体酮纳米晶注射液，其包括上述黄体酮纳米晶注射剂。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供一种黄体酮纳米晶注射剂的制备方法，包括以下步骤：
S1、制备水包油型乳液；
将所述黄体酮原料与吐温80、二氯甲烷和正丁醇混合得到混合物，其中，二氯甲烷和水的体积比例为1:10，正丁醇的添加量为5％，吐温80的添加量为0.2％，黄体酮的浓度为5mg/mL。
超声乳化是将探头侵入所述混合物的液面10毫米，超声时混合物的温度为4℃，超声功率为最大超声功率的30％，超声时间为10分钟。
而后将超声后的液体与稳定剂、冻干保护剂混合均匀。稳定剂为聚乙烯吡咯烷酮，其添加量为10mg/mL，冻干保护剂为甘露醇，其添加量为5％。
S2、冷冻干燥；
将制备好的乳液过0.22μ滤膜，过滤除菌，将过滤后的乳液分装至西林瓶，5mL/瓶。
以120℃/h的速率将所述水包油型乳液的温度降至负40℃，而后预冻6小时；
而后再以10℃/h的速率将所述水包油型乳液的温度升至负20℃，而后升华24小时；
再以20℃/h的速率将所述水包油型乳液的温度升至20℃，并干燥4小时。
而后将上述冷冻干燥后的冻干物与生理盐水复溶后形成纳米晶。
本实施例还提供一种黄体酮纳米晶注射剂，其通过上述黄体酮纳米晶注射剂的制备方法制备得到。
本实施例还提供一种黄体酮纳米晶注射液，其包括上述黄体酮纳米晶注射剂。
实施例2-3
实施例2-3提供的黄体酮纳米晶注射剂的制备方法与实施例1提供的黄体酮纳米晶注射剂的制备方法操作基本一致，区别在于具体地操作条件发生变化。
实施例2：
二氯甲烷和水的体积比例为1:15，正丁醇的添加量为50％，吐温80的添加量为0.1％，黄体酮的浓度为30mg/mL。
超声乳化是将探头侵入所述混合物的液面8毫米，超声时混合物的温度为0℃，超声功率为最大超声功率的25％，超声时间为15分钟。
不含稳定剂，甘露醇的添加量为10％。
S2、冷冻干燥；
将制备好的乳液过0.22μ滤膜，过滤除菌，将过滤后的乳液分装至西林瓶，5mL/瓶。
以100℃/h的速率将所述水包油型乳液的温度降至负60℃，而后预冻5小时；
而后再以8℃/h的速率将所述水包油型乳液的温度升至负15℃，而后升华20小时；
再以25℃/h的速率将所述水包油型乳液的温度升至25℃，并干燥6小时。
本实施例还提供一种黄体酮纳米晶注射剂，其通过上述黄体酮纳米晶注射剂的制备方法制备得到。
本实施例还提供一种复合黄体酮纳米晶注射液，其包括上述黄体酮纳米晶注射剂。
实施例3
二氯甲烷和水的体积比例为1:3，乙酸乙酯的添加量为25％，吐温80的添加量为0.5％，黄体酮的浓度为1mg/mL。
超声乳化是将探头侵入所述混合物的液面12毫米，超声时混合物的温度为5℃，超声功率为最大超声功率的35％，超声时间为20分钟。
聚乙烯吡咯烷酮的添加量为9mg/mL，甘露醇的添加量为8％。
S2、冷冻干燥；
将制备好的乳液过0.22μ滤膜，过滤除菌，将过滤后的乳液分装至西林瓶，5mL/瓶。
以110℃/h的速率将所述水包油型乳液的温度降至负25℃，而后预冻7小时；
而后再以9℃/h的速率将所述水包油型乳液的温度升至负18℃，而后升华26小时；
再以22℃/h的速率将所述水包油型乳液的温度升至23℃，并干燥5小时。
本实施例还提供一种黄体酮纳米晶注射剂，其通过上述黄体酮纳米晶注射剂的制备方法制备得到。
本实施例还提供一种复合黄体酮纳米晶注射液，其包括上述黄体酮纳米晶注射剂。
实施例4
其配方与操作与实施例1一致，区别在于油相中仅有二氯甲烷，而无醇类物质和酯类物质。
表征：
对实施例1得到的注射剂、黄体酮原料、辅料(甘露醇，PVP)进行差示扫描量热分析。结果参见图1，A表示为实施例1的注射剂，B为辅料，C为黄体酮原料。
根据图1可知，黄体酮原料药在129.40℃左右有一个吸热峰，与文献报道的黄体酮的吸热份位置基本一致。黄体酮冻干样品的DSC图谱可见有两个吸收峰，其中129℃处的吸收峰与黄体酮原料药一致，表明冻干样品中的黄体酮与原料药同为结晶状态。而166.87℃处的吸收峰与辅料吸收峰相一致，应为甘露醇吸收峰，说明实施例1内含有结晶状态的黄体酮。
对实施例1制备得到的黄体酮纳米晶注射液以15000rpm的转速离心10min，弃去上清液，将下层的纳米颗粒粉末于红外灯下烘干后，取少量粉末平铺于样品盘的导电胶上，再进行真空喷金处理，用扫描电子显微镜下观察样品的表面和形态，同时检测黄体酮原料的表面和形态，检测结果参见图2和图3。图2为黄体酮原料的SEM扫描图，图3为实施例1制备得到的黄体酮纳米晶注射剂SEM扫描图谱，A为8000X，B为12000X，C为45000X。
根据图2和图3可知，黄体酮原料药呈不规则的块状结晶，晶体的平均尺寸约在5μm以上，且晶体间的尺寸差别较大，晶体断面显示出许多断层。黄体酮纳米晶颗粒呈规则的方块状结晶，晶体表面光滑平整，形态均一。晶体的平均尺寸在1μm以下，晶体间的尺寸差异较小。黄体酮纳米晶XRD图谱显示的结果与用粒径仪测量的结果相吻合。
对实施例2制备得到的注射剂进行X射线粉末衍射分析，具体参见图4，图4中，A为实施例2的注射剂的检测结果，B为黄体酮原料药的检测结果。
将XRD图谱与XRD卡片库对比可知，黄体酮纳米晶属斜方晶系(正交晶系)，XRD卡片库是由美国ICDD(International Centre for Diffraction Data)公司收录的各种天然矿物、人工化合物(有机及无机)、元素及合金等的X射线粉末衍射数据，是目前国际上最完整的X射线粉末衍射数据集。晶胞参数列在表1。
表1晶胞参数
文献报道显示黄体酮以两种多晶型形式存在：形式1(稳态)和形式2(亚稳态)，属多晶型药物。不同的晶型在溶解度，溶解速率，稳定性和生物利用度上通常存在差异。根据表1和图4，实施例2的注射剂与黄体酮原料药具有相同的衍射峰，二者晶型一致，同为稳定的形式1晶型。这表明黄体酮纳米晶在制备过程中晶型稳定，未发生改变。
对比例1；按照实施例1提供的制备方法，制备黄体酮纳米晶注射剂，区别在于，取代烷烃类物质和水相的比例为1:1。
对比例2：按照实施例1提供的制备方法，制备黄体酮纳米晶注射剂，区别在于，取代烷烃类物质和水相的比例为1:20。
对比例3：按照实施例1提供的制备方法，制备黄体酮纳米晶注射剂，区别在于，正丁醇的添加量为80％。
对比例4：按照实施例1提供的制备方法，制备黄体酮纳米晶注射剂，区别在于，稳定剂的添加量为20mg/mL。
对比例5：市面购买的黄体酮市售油注射剂
对实施例1和对比例1-3制备得到的水包油型乳液进行粒径、粒径分布以及ζ-电位(mV)的检测，检测结果参见表2。
表2检测结果
根据表2可知，更改水相和油相的比例、助乳剂会导致制备得到的乳液的粒径增大、粒度分布不均匀且电位发生变化，乳液的稳定性也降低。
对实施例1和对比例4制备得到的注射剂测量粒径，粒径分布和ζ-电位。结果参见表3。
表3检测结果
根据表3可知，更改稳定剂的比例，会导致复溶后的粒径增加、粒径分布不均匀，且电位降低明显，说明复溶后的溶剂稳定性降低，不利于产品的使用。
体外溶出度试验
根据2015版《中国药典》的配方配制溶出介质溶液：含0.1％SDS的PBS缓冲液,pH＝7.4。选用《中国药典》第四部“0931”项下的溶出度测定方法中的桨法进行溶出度试验。分别将10mg的黄体酮原料药、实施例1、对比例1、2和3的注射液(每个例子相当于黄体酮为10mg)用生理盐水分散于装有500mL溶出介质的溶出杯中，于37±0.5℃，50rpm的条件下进行溶出试验。溶出试验满足漏槽条件。分别于0、0.083、0.25、0.5、1、2、4、6、8h，取1mL样品，同时再补充1mL新鲜溶出介质回去。将取出的样品过0.22μm微孔滤膜后，取续滤液进HPLC仪分析，并计算累积释放度。释放度计算公式为：释放度(％)＝释放药量/总药量*100％，结果参见表4-表8。
表4黄体酮原料体外溶出结果
表5实施例1提供的注射液的体外溶出结果
表6为对比例1提供的注射液的体外溶出结果
表7为对比例2提供的注射液的体外溶出结果
表8为对比例3提供的注射液的体外溶出结果
根据表4和表5可知，实施例1提供的注射液在0.1％SDS的pH7.4的PBS缓冲液中的溶出速度显著高于黄体酮原料药，在0.083h就释放94％以上，接近释放完全。而黄体酮原料药释放较为缓慢，在2h时才接近释放完全。
根据表5-表8可知，更改油相和水相的比例均会导致制备得到的注射液的总溶出量降低，溶出速度也明显降低。
对实施例2和对比例4制备得到的注射剂利用胜利盐水复溶后，进行稳定性检测，于复溶后的0,1,2,4,6,8,10,12天，将纳米晶注射液摇匀后取样测量粒径，粒径分布和ζ-电位，检测结果参见表9-10。
表9实施例2复溶得到的注射液的稳定检测结果(n＝5)
表10对比例4复溶得到的注射液的稳定检测结果(n＝5)
根据表9可知，黄体酮纳米晶注射液在复溶后的6天内基本维持稳定，6天后纳米粒逐渐聚集增大，同时失去稳定性，发生沉降。
而根据表9-表10可知，更改稳定剂用量会导致最初的粒径增大，且稳定性明显降低。
对实施例1和对比例5的注射液进行SD大鼠体内的药动学研究
将12只雄性SD大鼠平均分为2组，分别为黄体酮市售油注射剂组—对比例7实验组，黄体酮纳米晶注射液组—实施例1实验组，每组6只大鼠。实验前后及整个实验过程，照常供应食物和水给大鼠。每只大鼠按1.8mg/kg的给药剂量，通过大鼠后肢外侧肌肉注射给药，分别于给药后0.25,0.5，1，2，4，6，8，12，24，48h,从大鼠眼眶后静脉丛取0.5mL血液装于肝素化的2mLEP管中，以4000rpm离心10min，取上层血浆至另一干净EP管中，于-80℃冰箱冻存备用。而后制备血浆样品，并进行检测，按照当天的随行标曲计算各个血浆样品的浓度。采用DAS2.0药动学数据处理软件，应用二房室模型-非静脉给药的方式(肌肉注射)对所获得的药时曲线数据进行处理，得到相应的药动学参数，结果见图5和表11-13。其中，图5中A为对比例7实验组，B为实施例1实验组。
表11实施例1实验组血药浓度(n＝6)
(“-”:浓度过低未能检测到)
表12对比例5实验组血药浓度(n＝6)
表13药动学参数(n＝6，)
根据表11-表13和图5可知，对比例5的注射剂的达峰时间为1.17±0.41h，达峰浓度为24.81±7.95ng/mL，实施例1注射液的达峰时间为0.5±0.39h，达峰浓度为93.35±28.28ng/mL，本实施例1提供的黄体酮纳米晶注射液的达峰时间显著短于市售黄体酮油注射剂，Cmax和AUC 0-∞分别是后者的3.76倍和1.85倍，本实施例提供的黄体酮纳米晶注射液的生物利用度高于市售黄体酮油注射剂。
综上所述，本发明制备水包油型乳液，并通过控制乳滴的大小，继而控制后续制备得到的黄体酮纳米晶注射剂的颗粒粒径，保证后续制备得到的注射液的稳定性。同时相比于油注射剂，冻干注射剂在稳定性方面具有显著优势。另外，纳米晶注射液的溶剂为水而非油溶剂，避免了因油分子表面张力大难以被溶解，组织吸收慢，长时间大剂量注射，导致注射部位皮肤红肿、疼痛及硬结的现象产生，能够提高患者顺应性。
以上所述仅为本发明的优选实施方式而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种黄体酮纳米晶注射剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将黄体酮原料进行乳化得到水包油型乳液，而后将水包油型乳液直接进行冷冻干燥，复溶后形成纳米晶。
2.根据权利要求1所述的黄体酮纳米晶注射剂的制备方法，其特征在于，所述水包油型乳液是将所述黄体酮原料与乳化剂、油相、水相混合得到混合物，对所述混合物进行乳化后再与冻干保护剂混合得到的液体。
3.根据权利要求1所述的黄体酮纳米晶注射剂的制备方法，其特征在于，所述水包油型乳液是将所述黄体酮原料与乳化剂、油相、水相混合得到混合物，对所述混合物进行乳化后再与稳定剂和冻干保护剂混合得到的液体。
4.根据权利要求3所述的黄体酮纳米晶注射剂的制备方法，其特征在于，所述油相为取代烷烃类物质和醇类物质或酯类物质的混合物，
取代烷烃类物质为卤素取代烷烃类物质，更优选为C1-C4二氯取代烷烃，最优选为二氯甲烷。
5.根据权利要求4所述的黄体酮纳米晶注射剂的制备方法，其特征在于，所述醇类物质为一元醇，更优选为C1-C8一元醇，最优选为正丁醇；
所述酯类物质为乙酸乙酯或碳酸酯，优选乙酸乙酯。
6.根据权利要求4所述的黄体酮纳米晶注射剂的制备方法，其特征在于，取代烷烃类物质和水相的体积比例为1:3-15，所述稳定剂的添加量为1-10mg/mL，所述黄体酮原料的浓度为1-30mg/mL，所述乳化剂的添加量为0.1-0.5％，所述醇类物质或酯类物质的添加量为0-50％。
7.根据权利要求3所述的黄体酮纳米晶注射剂的制备方法，其特征在于，所述稳定剂为乙烯类聚合物或者为大分子物质，所述乙烯类聚合物为聚乙烯吡咯烷酮；
大分子物质为糖类大分子物质或蛋白质类大分子物质；
优选，所述糖类大分子为乳糖或者蔗糖；
蛋白质类大分子为白蛋白。
8.根据权利要求2所述的黄体酮纳米晶注射剂的制备方法，其特征在于，所述乳化剂为非离子型表面活性剂，优选为聚山梨酯，更优选为吐温80。
9.根据权利要求1所述的黄体酮纳米晶注射剂的制备方法，其特征在于，冷冻干燥是以100-120℃/h的速率将所述水包油型乳液的温度降至负60℃-负25℃，而后预冻5-7小时；
而后再以8-10℃/h的速率将所述水包油型乳液的温度升至负20℃至负15℃，而后升华20-26小时；
再以20-25℃/h的速率将冻干物的温度升至20-25℃，并干燥4-6小时。
10.一种黄体酮纳米晶注射剂，其特征在于，其通过权利要求1-8任意一项所述的黄体酮纳米晶注射剂的制备方法制备得到。
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