CN109212064A - 一种植物生长调节剂残余量的检测方法 - Google Patents

一种植物生长调节剂残余量的检测方法 Download PDF

Info

Publication number
CN109212064A
CN109212064A CN201811093246.2A CN201811093246A CN109212064A CN 109212064 A CN109212064 A CN 109212064A CN 201811093246 A CN201811093246 A CN 201811093246A CN 109212064 A CN109212064 A CN 109212064A
Authority
CN
China
Prior art keywords
plant growth
detection method
detection
growth regulators
residual volume
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201811093246.2A
Other languages
English (en)
Inventor
骆书娜
张季
王奥
向丽萍
王兰兰
任道援
卢叶
肖仕勇
刘建松
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
ZUNYI INSTITUTE OF PRODUCTION QUALITY ANALYSIS
Original Assignee
ZUNYI INSTITUTE OF PRODUCTION QUALITY ANALYSIS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ZUNYI INSTITUTE OF PRODUCTION QUALITY ANALYSIS filed Critical ZUNYI INSTITUTE OF PRODUCTION QUALITY ANALYSIS
Priority to CN201811093246.2A priority Critical patent/CN109212064A/zh
Publication of CN109212064A publication Critical patent/CN109212064A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Abstract

本发明公开一种植物生长调节剂残余量的检测方法，属于检测分析领域。本发明的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，包括将待检测样经样品前处理后，通过超高效液相色谱‑串联三种四级杆质谱检测，得到植物生长调节剂残余物质浓度的步骤。本发明的一种植物生长调节剂残余量的检测方法具有基于超高效液相色谱‑串联三重四级杆质谱联用检测技术，得出了一种同时检测6‑苄基腺嘌呤、4‑氯苯氧乙酸钠、2.4‑二氯苯氧乙酸残留量的检测方法，该仪器条件灵敏度高，没有干扰峰，能够保证检测结果的准确可靠，同时前处理简单操作便捷，适合各检测机构，可作为常规检测方法的特点。

Description

一种植物生长调节剂残余量的检测方法
技术领域
本发明涉及一种检测方法，具体来说涉及一种植物生长调节剂残余量的检测方法。
背景技术
植物生长调节剂是一类具有天然植物激素活性的人工合成物质，具有提高农作物品质和产量与的作用，在实际的农业生产中已被广泛应用。植物生长调节剂应用的历史可以追溯到基督时代，那时人们即知道把橄榄油滴在无花果树上可以促进无花果的发育，后来人们知道高温使橄榄油分解，释放出的乙烯影响无花果的发育。然而，在为农业生产带来巨大经济收益的同时，有关植物生长调节剂滥用与使用不当的事件却频繁发生，在食物中的过量残留会严重威胁到人类健康，已俨然成为影响我国居民食品安全的主要因素之一。随意加大植物生长调节剂用量或使用浓度，反而会使其生长受到抑制，严重的甚至导致叶片畸形、干枯脱落、整株死亡。
目前，我国围绕植物生长调节剂的多组分残留检测方法只能逐一检测，操作步骤繁琐且消耗时间较长，不适用于大批量检测。例如，已知的国家标准中并没有一种方法同时提取豆芽中6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、2.4-二氯苯氧乙酸残留量。只有分别检测豆芽中某一指标的检测方法。6-苄基腺嘌呤已有国家标准方法，如《GB/T 23381-2009食品中6-苄基腺嘌呤的测定高效液相色谱法》；4-氯苯氧乙酸钠和2.4-二氯苯氧乙酸只有地方标准方法，如《DB11/T 379-2006豆芽中4-氯苯氧乙酸钠6-苄基腺嘌呤、2,4-滴、赤霉素、福美双的测定》和《DB33/T 625.3-2007无公害豆芽第3部分：6-苄基腺嘌呤残留量和4-氯苯氧乙酸钠残留量的测定》。这些方法大多需要使用预活化的C18等固相萃取小柱，在实际检测工作中严重影响检测周期、更不适用于相关突发事件处理。《GB/T 23381-2009食品中6-苄基腺嘌呤的测定高效液相色谱法》中需要用浓磷酸调pH至2.5，调节pH的过程不容易掌握，且耗时耗力。在《DB33T 625.3-2007无公害豆芽第3部分：6-苄基腺嘌呤残留量和4-氯苯氧乙酸钠残留量的测定》中4-氯苯氧乙酸钠残留量的测定，需要使用50mL乙醚萃取3次，每次振摇1min，还需用5.0mL氯化钠酸性溶液洗涤，该方法溶剂耗费量大且过程繁琐，容易影响回收率。
而现有公开的发明中，检测植物生长调节剂残余量的手段通常采用高效液相法，如申请号CN201610554091.2，发明名称一种植物生长调节剂残留的检测方法，中公开的一种检测方法，采用的是高效液相色谱法进行检测的，该方法进行检测时，前处理复杂，需要将样品与乙腈混合后调节至较强酸性后经过超声、离心后，再与无水硫酸镁、N-丙基乙二胺和C18混合后再经过净化；在进行检测时，需要经过大量的重复测定，检测过程非常复杂，相对于国标，并未有明显的进步。
另一类现有技术采用液相色谱-串联质谱法进行检测，如申请号CN201611118686.X，发明名称一种测定蔬菜和水果中生长调节剂残留量的方法，中公开了一种检测方法，采用的液相色谱-串联质谱法进行检测，但是其检测精度较差，平均回收率为76.6％～119.0％，跨度较大，同时，检出限较高，例如其公开的2，4-二氯苯氧乙酸的检出限为1.32μg/kg，这一检出限在实际应用中，实用性并不大。
因此，现有技术在对植物生长调节剂残余量的检测时，为了保证检测结果的精度和有效性，仍然采用国标进行单一物质单次检测，极大的影响检测效率。
发明内容
本发明的发明目的在于：针对上述存在的问题，提供一种基于超高效液相色谱-串联三重四级杆质谱联用检测技术，得出了一种同时检测6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、2.4-二氯苯氧乙酸残留量的检测方法，该色谱和质谱条件灵敏度高，没有干扰峰，能够保证检测结果的准确可靠，同时前处理简单操作便捷，适合各检测机构可作为常规检测方法的植物生长调节剂残余量的检测方法。
本发明采用的技术方案如下：
一种植物生长调节剂残余量的检测方法，包括将待检测样经样品前处理后，通过超高效液相色谱-串联三种四级杆质谱检测，得到植物生长调节剂残余物质浓度的步骤，
所述检测的流动相为乙腈和水，所述流动相的洗脱方式为梯度洗脱；
所述检测包括正离子采集模式检测和负离子采集模式检测，所述检测的标
准系列溶液包括正离子采集模式标准液和负离子采集模式标准液。
本发明采用乙腈和水相作为流动相，主要区别在于截止波长，用甲醇做，紫外波长须设在大于230nm，乙腈则大于210nm即可。色谱峰形的区别，乙腈粘度较甲醇小，从速率方程角度说，流动相传质阻抗小，有利于柱效提高，峰款较窄，峰形较好，能够避免由流动相带来的干扰，从而保证检测出峰干净无干扰峰，从而提高检测精度。
通过正离子采集模式能够对6-苄基腺嘌呤进行检测，通过负离子模式进行采集能够对4-氯苯氧乙酸钠和/或2，4-二氯苯氧乙酸进行检测，从而解决了6-苄基腺嘌呤，与4-氯苯氧乙酸钠和/或2，4-二氯苯氧乙酸不能同时进行检测的问题，每次检测仅需配制一次检测样，大大节约了检测所需时间，提高了检测效率。
本发明的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，所述样品前处理的方法如下，将待检测样经乙腈溶解后，将待检测样经乙腈溶解后，除水后固相分散净化，取提取液。
由于采用了上述技术方案，样品的前处理方式极为简单，仅需溶解、除水、净化即可，不需要经过复杂的“准确调节pH”“准确称量各除水剂和杂质吸附剂”。由于分析领域对于精度的要求极高，数值取值通常为小数点后4位，准确称量、调节pH的过程极其容易成为引入误差的来源，由此出现检测员不同时，得到的结果大相径庭，其原因也在于各检测员在“准确称量、调节”过程中引入的误差。因此，减少了“称量、调节”的步骤，对于分析过程中，能够极大的避免由于操作而引入的误差，从而保证不同的检测员都能够简单快速的进行前处理操作，并保证最后结果的准确性。
优选地，本发明中除水采用无水硫酸镁，加入量过量即可，由于在净化过程中可将过量的无水硫酸镁一同除去，因此其用量不需要“准确称量”，能够极大的减小误差。除无水硫酸镁外，也可采用其他常规除水剂或其混合物。
本发明的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，所述固相分散净化采用C18吸附。
本发明的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，所述溶解的条件为弱酸性条件。
由于采用了上述技术方案，弱酸性条件能够加快溶解速度，而本申请所指的弱酸性条件并不需要精确将pH定义在某一范围，该“弱酸性条件”指代的是化学领域中常规说法，通常为4-6.5的范围均可。其酸性条件的作用仅仅为加快溶解速率，而不对检测的过程产生任何的影响，实际上，本发明所称的“弱酸性”在实际操作用，通常用胶头滴管向样品中滴入1～2滴甲酸即可。
本发明的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，所述水相流动相中，添加有浓度为0.1％的甲酸。
由于采用了上述技术方案，在水相中添加甲酸，能够改善峰形，避免目标峰拖尾。
本发明的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，所述梯度洗脱共4个梯度，其中第一梯度的流动相比与第四梯度的流动相比相同，第二梯度的流动相比与第三梯度的流动相比相同；所述第一梯度流动相比与第二梯度流动相比呈负相关。
本发明的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，所述第一梯度流动相比(水相：乙腈)为90±5：10±5。
本发明的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，所述第二梯度流动相比(水相：乙腈)为15±5：85±5。
本发明的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，所述正离子采集模式标准液和负离子采集模式标准液均分别包括浓度为5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL和10μg/mL的标准系列溶液。
其中，10μg/mL的为标准储备液，5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的为标准工作液。
本发明的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，所述植物生长调节剂残余物质为4-氯苯氧乙酸钠和/或2，4-二氯苯氧乙酸，与6-苄基腺嘌呤。
在本发明中，进行液相色谱上样前，对色谱柱进行活化，活化的操作如下：采用100％甲醇1mL/min冲洗60min后，再用95％甲醇-4％乙腈-1％N,N-二甲基甲酰胺1mL/min冲洗30min，将完成冲洗的色谱柱在85±3℃的温度下烘干，即完成活化。在分析化学领域，通常不会对色谱柱进行活化，色谱柱为统一耗材，由厂家完成活化。但在本发明中，由于流动相采用极性非常低，容易导致样品中的分配系数接近，使得待检测物质在两相中作相对运动时，不易被色谱柱吸附-解吸，导致检测精度收到影响，因此，对色谱柱进行特定的活化作用，能够进一步提高检测精度，保证分析结果的准确性。
综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
1、基于超高效液相色谱-串联三重四级杆质谱联用检测技术，得出了一种同时检测6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、2.4-二氯苯氧乙酸残留量的检测方法，该色谱和质谱条件灵敏度高，没有干扰峰，能够保证检测结果的准确可靠，同时前处理简单操作便捷，适合各检测机构可作为常规检测方法；
2、样品的前处理方式极为简单，仅需溶解、除水、净化即可，不需要经过复杂的“准确调节pH”“准确称量各除水剂或杂质吸附剂”。由于分析领域对于精度的要求极高，数值取值通常为小数点后4位，准确称量、调节pH的过程极其容易成为引入误差的来源，由此出现检测员不同时，得到的结果大相径庭，其原因也在于各检测员在“准确称量、调节”过程中引入的误差。因此，减少了“称量、调节”的步骤，对于分析过程中，能够极大的避免由于操作而引入的误差，从而保证不同的检测员都能够简单快速的进行前处理操作，并保证最后结果的准确性；
3、数据说明方法可靠，稳定。其中6-苄基腺嘌呤的r2＝0.9996，f(x)＝921.14x–1249，回收率在82.49-103.44％之间，十次平行的RSD为0.11-3.92％；2.4-二氯苯氧乙酸的r2＝0.9986，f(x)＝150.04x+74.49，回收率在72.25-89.69％之间，十次平行的RSD为0.88-4.50％；4-氯苯氧乙酸钠的r2＝0.9991，f(x)＝162.7x+83.64；线性范围：5-100ng/mL。回收率在70.53-76.63％之间，十次平行的RSD为0.04-2.47％，最低检测限：6-苄基腺嘌呤为0.11ng/mL；2.4-二氯苯氧乙酸为1.14ng/mL；4-氯苯氧乙酸钠为0.18ng/mL；最低定量限：6-苄基腺嘌呤为0.35ng/mL；2.4-二氯苯氧乙酸为3.81ng/mL，4-氯苯氧乙酸钠为0.59ng/mL。
附图说明
图1是100ng/mL 6-苄基腺嘌呤二级质谱图；
图2是100ng/mL 2,4-苄基腺嘌呤二级质谱图；
图3是100ng/mL 4-氯苯氧乙酸钠二级质谱图。
具体实施方式
下面结合附图，对本发明作详细的说明。
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
一种植物生长调节残余量的检测方法，以检测豆芽中的4-氯苯氧乙酸钠，2，4-二氯苯氧乙酸和6-苄基腺嘌呤为例，包括以下步骤：
(1)样本前处理：准确称取试样2g(精确至0.0001g)于50mL离心管中，加入15mL2％甲酸-乙腈溶液，加入2g无水硫酸镁，涡旋1min，超声10min后以6000r/min离心3min，取上清液1.5mL，放入装有0.1g C18的离心管中，涡旋，静置，取上清液过滤膜，上机检测；
(2)色谱条件：a)色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18柱，2.1mm(内径)×100mm，粒径1.7μm，或同等效能色谱柱；b)进样量为2μL；
c)流速为0.2mL/min；d)柱温为40±0.5℃；e)流动相：
步骤 分析时间(min) 流速(μL/min) ％甲酸水 ％乙腈
1 1 200 95 5
2 3 200 10 90
3 4 200 10 90
4 5 200 95 5
(3)质谱条件：UPLC-MS/MS工作参数：毛细管电压：3.72kV；锥孔电压：27kV；脱溶剂气温度：200℃；脱溶剂气流速：800L/Hr；碰撞器气体流速：0.15mL/min；分辨力：0.37u；信噪比18；峰面积重复性：0.37％；；离子丰度比重复性：1.05％。定量定性离子，离子电离条件：
标曲：6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、2.4-二氯苯氧乙酸标准物质均采购于德国Dr.Ehrenstorfer公司，6-苄基腺嘌呤逐级稀释到100ng/mL后配制成5ng/mL、10ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的标准溶液系列。4-氯苯氧乙酸钠和2.4-二氯苯氧乙酸逐级稀释到100ng/mL后混合配制成5ng/mL、10ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的标准溶液系列。其中6-苄基腺嘌呤的r2＝0.9996，f(x)＝921.14x–1249；2.4-二氯苯氧乙酸的r2＝0.9986，f(x)＝150.04x+74.49；4-氯苯氧乙酸钠的r2＝0.9991，f(x)＝162.7x+83.64；线性范围：5-100ng/mL。
回收率：在豆芽样品中加入一定量的6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、2.4-二氯苯氧乙酸标液后，进行添加回收实验，提取检测得到数据，计算后得到回收率，6-苄基腺嘌呤回收率在82.49-103.44％之间；4-氯苯氧乙酸钠回收率在70.53-76.63％之间，2.4-二氯苯氧乙酸回收率在72.25-89.69％之间。
色谱分析的定性检出限定义为响应值为三倍基线噪音时所需的样品量；
色谱分析的定量检出限定义为响应值为十倍基线噪音时所需的样品量。
计算公式：
式中D――检出限，μg/kg
N——基线噪音，pA
S——仪器灵敏度，pA.μg/kg
h噪音——基线噪音的峰高，pA
h试样——试样的峰高，pA
c——被检物质的含量，μg/kg
6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、2.4-二氯苯氧乙酸的浓度为5.0ng/mL，在相同条件下进样六次，分别测得六次进样的信噪比。
最低检测限：6-苄基腺嘌呤为0.11ng/mL；2.4-二氯苯氧乙酸为1.14ng/mL；4-氯苯氧乙酸钠为0.18ng/mL；最低定量限：6-苄基腺嘌呤为0.35ng/mL；2.4-二氯苯氧乙酸为3.81ng/mL，4-氯苯氧乙酸钠为0.59ng/mL。
实施例2
一种植物生长调节残余量的检测方法，以检测豆芽中的4-氯苯氧乙酸钠，2，4-二氯苯氧乙酸和6-苄基腺嘌呤为例，包括以下步骤：
(1)样本前处理：准确称取试样2g(精确至0.0001g)于50mL离心管中，加入15mL2％甲酸-乙腈溶液，加入2g无水硫酸镁，涡旋1min，超声10min后以6000r/min离心3min，取上清液1.5mL，放入装有0.1g C18的离心管中，涡旋，静置，取上清液过滤膜，上机检测；
(2)色谱条件：a)色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18柱，2.1mm(内径)×100mm，粒径1.7μm，或同等效能色谱柱，采用100％甲醇1mL/min冲洗60min后，再用95％甲醇-4％乙腈-1％N,N-二甲基甲酰胺1mL/min冲洗30min，将完成冲洗的色谱柱在85±3℃的温度下烘干；b)进样量为2μL；c)流速为0.2mL/min；d)柱温为40±0.5℃；e)流动相：
步骤 分析时间(min) 流速(μL/min) ％甲酸水 ％乙腈
1 1 200 90 10
2 3 200 15 85
3 4 200 15 85
4 5 200 90 10
(3)质谱条件：UPLC-MS/MS工作参数：毛细管电压：3.72kV；锥孔电压：27kV；脱溶剂气温度：200℃；脱溶剂气流速：800L/Hr；碰撞器气体流速：0.15mL/min；分辨力：0.37u；信噪比18；峰面积重复性：0.37％；；离子丰度比重复性：1.05％。定量定性离子，离子电离条件：
标曲：6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、2.4-二氯苯氧乙酸标准物质均采购于德国Dr.Ehrenstorfer公司，6-苄基腺嘌呤逐级稀释到100ng/mL后配制成5ng/mL、10ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的标准溶液系列。4-氯苯氧乙酸钠和2.4-二氯苯氧乙酸逐级稀释到100ng/mL后混合配制成5ng/mL、10ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的标准溶液系列。其中6-苄基腺嘌呤的r2＝0.9973，f(x)＝918.29x–1247；2.4-二氯苯氧乙酸的r2＝0.9990，f(x)＝152.18x+74.36；4-氯苯氧乙酸钠的r2＝0.9951，f(x)＝164.8x+84.07；线性范围：5-100ng/mL。
回收率：在豆芽样品中加入一定量的6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、2.4-二氯苯氧乙酸标液后，进行添加回收实验，提取检测得到数据，计算后得到回收率，6-苄基腺嘌呤回收率在81.07-100.24％之间；4-氯苯氧乙酸钠回收率在71.80-79.21％之间，2.4-二氯苯氧乙酸回收率在73.82-86.94％之间。
实施例3
一种植物生长调节残余量的检测方法，以检测豆芽中的4-氯苯氧乙酸钠，2，4-二氯苯氧乙酸和6-苄基腺嘌呤为例，包括以下步骤：
(4)样本前处理：准确称取试样2g(精确至0.0001g)于50mL离心管中，加入15mL2％甲酸-乙腈溶液，加入2g无水硫酸镁，涡旋1min，超声10min后以6000r/min离心3min，取上清液1.5mL，放入装有0.1g C18的离心管中，涡旋，静置，取上清液过滤膜，上机检测；
(5)色谱条件：a)色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18柱，2.1mm(内径)×100mm，粒径1.7μm，或同等效能色谱柱；b)进样量为2μL；
c)流速为0.2mL/min；d)柱温为40±0.5℃；e)流动相：
步骤 分析时间(min) 流速(μL/min) ％甲酸水 ％乙腈
1 1 200 85 15
2 3 200 20 80
3 4 200 20 80
4 5 200 85 15
(6)质谱条件：UPLC-MS/MS工作参数：毛细管电压：3.72kV；锥孔电压：27kV；脱溶剂气温度：200℃；脱溶剂气流速：800L/Hr；碰撞器气体流速：0.15mL/min；分辨力：0.37u；信噪比18；峰面积重复性：0.37％；；离子丰度比重复性：1.05％。定量定性离子，离子电离条件：
标曲：6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、2.4-二氯苯氧乙酸标准物质均采购于德国Dr.Ehrenstorfer公司，6-苄基腺嘌呤逐级稀释到100ng/mL后配制成5ng/mL、10ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的标准溶液系列。4-氯苯氧乙酸钠和2.4-二氯苯氧乙酸逐级稀释到100ng/mL后混合配制成5ng/mL、10ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的标准溶液系列。其中6-苄基腺嘌呤的r2＝0.9938，f(x)＝915.24x–1252；2.4-二氯苯氧乙酸的r2＝0.9971，f(x)＝153.14x+72.71；4-氯苯氧乙酸钠的r2＝0.9985，f(x)＝167.2x+81.96；线性范围：5-100ng/mL。
回收率：在豆芽样品中加入一定量的6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、2.4-二氯苯氧乙酸标液后，进行添加回收实验，提取检测得到数据，计算后得到回收率，6-苄基腺嘌呤回收率在86.27-110.06％之间；4-氯苯氧乙酸钠回收率在68.37-75.13％之间，2.4-二氯苯氧乙酸回收率在75.25-92.75％之间。
实施例4
一种植物生长调节残余量的检测方法，以检测豆芽中的4-氯苯氧乙酸钠，2，4-二氯苯氧乙酸和6-苄基腺嘌呤为例，包括以下步骤：
(4)样本前处理：准确称取试样2g(精确至0.0001g)于50mL离心管中，加入15mL2％甲酸-乙腈溶液，加入2g无水硫酸镁，涡旋1min，超声10min后以6000r/min离心3min，取上清液1.5mL，放入装有0.1g C18的离心管中，涡旋，静置，取上清液过滤膜，上机检测；
(5)色谱条件：a)色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18柱，2.1mm(内径)×100mm，粒径1.7μm，或同等效能色谱柱，采用100％甲醇1mL/min冲洗60min后，再用95％甲醇-4％乙腈-1％N,N-二甲基甲酰胺1mL/min冲洗30min，将完成冲洗的色谱柱在85±3℃的温度下烘干；b)进样量为2μL；c)流速为0.2mL/min；d)柱温为40±0.5℃；e)流动相：
步骤 分析时间(min) 流速(μL/min) ％甲酸水 ％乙腈
1 1 200 93 7
2 3 200 12 88
3 4 200 12 88
4 5 200 93 7
(6)质谱条件：UPLC-MS/MS工作参数：毛细管电压：3.72kV；锥孔电压：27kV；脱溶剂气温度：200℃；脱溶剂气流速：800L/Hr；碰撞器气体流速：0.15mL/min；分辨力：0.37u；信噪比18；峰面积重复性：0.37％；；离子丰度比重复性：1.05％。定量定性离子，离子电离条件：
标曲：6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、2.4-二氯苯氧乙酸标准物质均采购于德国Dr.Ehrenstorfer公司，6-苄基腺嘌呤逐级稀释到100ng/mL后配制成5ng/mL、10ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的标准溶液系列。4-氯苯氧乙酸钠和2.4-二氯苯氧乙酸逐级稀释到100ng/mL后混合配制成5ng/mL、10ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的标准溶液系列。其中6-苄基腺嘌呤的r2＝0.9980，f(x)＝926.19x–1239；2.4-二氯苯氧乙酸的r2＝0.9998，f(x)＝149.30x+75.62；4-氯苯氧乙酸钠的r2＝0.9997，f(x)＝164.9x+83.55；线性范围：5-100ng/mL。
回收率：在豆芽样品中加入一定量的6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、2.4-二氯苯氧乙酸标液后，进行添加回收实验，提取检测得到数据，计算后得到回收率，6-苄基腺嘌呤回收率在79.20-104.97％之间；4-氯苯氧乙酸钠回收率在68.03-78.11％之间，2.4-二氯苯氧乙酸回收率在77.04-83.15％之间。
实施例5(与实施例2进行对比)
一种植物生长调节残余量的检测方法，以检测豆芽中的4-氯苯氧乙酸钠，2，4-二氯苯氧乙酸和6-苄基腺嘌呤为例，包括以下步骤：
(7)样本前处理：准确称取试样2g(精确至0.0001g)于50mL离心管中，加入15mL2％甲酸-乙腈溶液，加入2g无水硫酸镁，涡旋1min，超声10min后以6000r/min离心3min，取上清液1.5mL，放入装有0.1g C18的离心管中，涡旋，静置，取上清液过滤膜，上机检测；
(8)色谱条件：a)色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18柱，2.1mm(内径)×100mm，粒径1.7μm，或同等效能色谱柱；b)进样量为2μL；
c)流速为0.2mL/min；d)柱温为40±0.5℃；e)流动相：
步骤 分析时间(min) 流速(μL/min) ％甲酸水 ％乙腈
1 1 200 90 10
2 3 200 15 85
3 4 200 15 85
4 5 200 90 10
(9)质谱条件：UPLC-MS/MS工作参数：毛细管电压：3.72kV；锥孔电压：27kV；脱溶剂气温度：200℃；脱溶剂气流速：800L/Hr；碰撞器气体流速：0.15mL/min；分辨力：0.37u；信噪比18；峰面积重复性：0.37％；；离子丰度比重复性：1.05％。定量定性离子，离子电离条件：
标曲：6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、2.4-二氯苯氧乙酸标准物质均采购于德国Dr.Ehrenstorfer公司，6-苄基腺嘌呤逐级稀释到100ng/mL后配制成5ng/mL、10ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的标准溶液系列。4-氯苯氧乙酸钠和2.4-二氯苯氧乙酸逐级稀释到100ng/mL后混合配制成5ng/mL、10ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、100ng/mL的标准溶液系列。其中6-苄基腺嘌呤的r2＝0.9969，f(x)＝930.47x–1262；2.4-二氯苯氧乙酸的r2＝0.9966，f(x)＝148.71x+76.05；4-氯苯氧乙酸钠的r2＝0.9985，f(x)＝166.1x+81.07；线性范围：5-100ng/mL。
回收率：在豆芽样品中加入一定量的6-苄基腺嘌呤、4-氯苯氧乙酸钠、2.4-二氯苯氧乙酸标液后，进行添加回收实验，提取检测得到数据，计算后得到回收率，6-苄基腺嘌呤回收率在87.42-109.25％之间；4-氯苯氧乙酸钠回收率在79.16-85.46％之间，2.4-二氯苯氧乙酸回收率在74.22-88.93％之间。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种植物生长调节剂残余量的检测方法，其特征在于：包括将待检测样经样品前处理后，通过超高效液相色谱-串联三种四级杆质谱检测，得到植物生长调节剂残余物质浓度的步骤，
所述检测的流动相为乙腈和水，所述流动相的洗脱方式为梯度洗脱；
所述检测包括正离子采集模式检测和负离子采集模式检测，所述检测的标准系列溶液包括正离子采集模式标准液和负离子采集模式标准液。
2.如权利要求1所述的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，其特征在于：所述样品前处理的方法如下，将待检测样经乙腈溶解，除水后利用固相分散净化，取提取液。
3.如权利要求2所述的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，其特征在于：所述固相分散净化采用C18吸附。
4.如权利要求2所述的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，其特征在于：所述溶解的条件为弱酸性条件。
5.如权利要求1所述的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，其特征在于：所述水相流动相中，添加有浓度为0.1％的甲酸。
6.如权利要求1或5所述的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，其特征在于：所述梯度洗脱共4个梯度，其中第一梯度的流动相比与第四梯度的流动相比相同，第二梯度的流动相比与第三梯度的流动相比相同；所述第一梯度流动相比与第二梯度流动相比呈负对应负相关。
7.如权利要求6所述的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，其特征在于：所述第一梯度流动相比(水相：乙腈)为90±5：10±5。
8.如权利要求6所述的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，其特征在于：所述第二梯度流动相比(水相：乙腈)为15±5：85±5。
9.如权利要求1所述的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，其特征在于：所述正离子采集模式标准液和负离子采集模式标准液均分别包括浓度为5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL和10μg/mL的标准系列溶液。
10.如权利要求1所述的一种植物生长调节剂残余量的检测方法，其特征在于：所述植物生长调节剂残余物质为4-氯苯氧乙酸钠和/或2，4-二氯苯氧乙酸，与6-苄基腺嘌呤。
CN201811093246.2A 2018-09-19 2018-09-19 一种植物生长调节剂残余量的检测方法 Pending CN109212064A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811093246.2A CN109212064A (zh) 2018-09-19 2018-09-19 一种植物生长调节剂残余量的检测方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811093246.2A CN109212064A (zh) 2018-09-19 2018-09-19 一种植物生长调节剂残余量的检测方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN109212064A true CN109212064A (zh) 2019-01-15

Family

ID=64984672

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811093246.2A Pending CN109212064A (zh) 2018-09-19 2018-09-19 一种植物生长调节剂残余量的检测方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109212064A (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109655555A (zh) * 2019-02-15 2019-04-19 中山出入境检验检疫局检验检疫技术中心 一种测定豆芽中6-苄基腺嘌呤的方法
CN110133125A (zh) * 2019-05-07 2019-08-16 曲阜师范大学 一种磁性固相萃取检测果蔬中植物生长调节剂的方法
CN113533543A (zh) * 2020-04-16 2021-10-22 江阴市食品安全检测中心 一种QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定食品中6-苄基腺嘌呤的方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103969363A (zh) * 2014-04-09 2014-08-06 温州市质量技术监督检测院 一种水果中植物生长调节剂残留检测方法
CN104535703A (zh) * 2015-01-06 2015-04-22 山东省分析测试中心 一种同时检测豆芽中6-苄基腺嘌呤和4-氯苯氧乙酸钠的方法
KR101605529B1 (ko) * 2014-09-15 2016-03-23 대한민국 3단 분리법을 이용한 에세폰의 분석방법
CN105929091A (zh) * 2016-06-30 2016-09-07 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心 一种豆芽中非法添加药物的高效检测方法
CN106053703A (zh) * 2016-08-17 2016-10-26 刘思洁 一种同时检测食品中多种植物生长调节剂的方法
CN107621498A (zh) * 2016-07-14 2018-01-23 罗牛山莱茵检测认证服务（海南）有限公司 一种植物生长调节剂残留的检测方法

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103969363A (zh) * 2014-04-09 2014-08-06 温州市质量技术监督检测院 一种水果中植物生长调节剂残留检测方法
KR101605529B1 (ko) * 2014-09-15 2016-03-23 대한민국 3단 분리법을 이용한 에세폰의 분석방법
CN104535703A (zh) * 2015-01-06 2015-04-22 山东省分析测试中心 一种同时检测豆芽中6-苄基腺嘌呤和4-氯苯氧乙酸钠的方法
CN105929091A (zh) * 2016-06-30 2016-09-07 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心 一种豆芽中非法添加药物的高效检测方法
CN107621498A (zh) * 2016-07-14 2018-01-23 罗牛山莱茵检测认证服务（海南）有限公司 一种植物生长调节剂残留的检测方法
CN106053703A (zh) * 2016-08-17 2016-10-26 刘思洁 一种同时检测食品中多种植物生长调节剂的方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
乐渊 等: "QuEChERS净化-超高效液相色谱-串联质谱法测定莲雾中植物生长调节剂", 《分析科学学报》 *
宗万里: "液相色谱-三重四级杆串联质谱法测定豆芽中4种植物生长调节剂残留量", 《农产品质量与安全》 *
王淼 等: "豆芽中6种植物生长调节剂残留的质谱检测", 《食品工业》 *
程爱华 等: "《环境测试实用技术》", 30 November 2017, 中国矿业大学 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109655555A (zh) * 2019-02-15 2019-04-19 中山出入境检验检疫局检验检疫技术中心 一种测定豆芽中6-苄基腺嘌呤的方法
CN110133125A (zh) * 2019-05-07 2019-08-16 曲阜师范大学 一种磁性固相萃取检测果蔬中植物生长调节剂的方法
CN113533543A (zh) * 2020-04-16 2021-10-22 江阴市食品安全检测中心 一种QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定食品中6-苄基腺嘌呤的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Turkelson et al. Separation of the citric acid cycle acids by liquid chromatography
CN106053638B (zh) 一种动物源食品中氨基糖苷类抗生素残留量的检测方法
CN109212064A (zh) 一种植物生长调节剂残余量的检测方法
CN102944636B (zh) 蒸馏酒中氨基甲酸乙酯的高效液相色谱-质谱检测方法
CN107941950B (zh) 超高效液相色谱-串联质谱法同时测定常山胡柚的不同部位中九种功能性成分的方法
CN107328872A (zh) 玄参药材hplc指纹图谱的构建方法及其标准指纹图谱
CN103226138B (zh) 快速检测水中苯氧羧酸类除草剂的方法
CN103123345B (zh) 一种快速检测土壤中的苯氧乙酸类除草剂的方法
CN107422053B (zh) 一种液质联用检测化妆品中三氯乙酸的方法
CN108020627B (zh) 一种超高效合相色谱-串联质谱法测定烟草中三种苯氧羧酸类农药残留量的方法
CN106645477A (zh) 一种检测氟苯尼考胺残留的方法及应用
CN110887911B (zh) 一种动物源食品中克霉唑残留的气相色谱-串联质谱检测方法
CN107345946B (zh) 用于法庭科学毒品检测的甲卡西酮标准物质的纯化制备方法
CN105424853A (zh) 一种lc-ms/ms检测唾液中尼古丁及其代谢物的试剂盒
CN105424832A (zh) 一种lc-ms/ms检测唾液中尼古丁及其代谢物的方法
CN108760920A (zh) 一种基于hplc-msms法测定氰霜唑及其代谢物残留量的方法
Jiang et al. Rapid determination of dimethoate in nanoliter of juice using surface desorption atmospheric pressure chemical ionization mass spectrometry
CN103558312B (zh) 一种测定卷烟主流烟气中苯并[a]芘含量的方法
CN108693286A (zh) 一种药物中基因毒性杂质硫酸二异丙酯的检测方法
CN115032318A (zh) 一种检测3-(n-亚硝基甲氨基)丙腈含量的液相色谱分析方法
CN115032310A (zh) 一种何首乌中6种二蒽酮类化合物的检测方法
CN109374771B (zh) 雪梨膏的指纹图谱检测方法
CN103091414B (zh) 阿胶中重金属铬(ⅵ)测定的离子色谱-在线预处理分析系统
Taylor et al. Determination of urinary placental estriol by reversed-phase liquid chromatography with fluorescence detection.
CN109507339A (zh) 液相色谱-高分辨质谱法用于人体尿液中甲基苯丙胺的测定方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20190115