CN109212060A - 提取乳品中矿物油的方法以及检测乳品中矿物油的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提出了提取乳品中矿物油的方法以及检测乳品中矿物油的方法。所述提取乳品中矿物油的方法包括：(1)利用盐酸溶液对待测乳品进行水解处理，以便得到水解液；(2)将所述水解液、无水乙醇和正己烷进行混合处理及离心处理，以便得到上层液和下层液，收集上层液；(3)向所述下层液中加入正己烷，重复所述混合处理及离心处理，收集上层液，并将两次获得的上层液合并，以便得到萃取液；以及(4)将所述萃取液与水进行混合处理及离心处理，收集上层液，以便得到提取物。利用本发明的提取乳品中矿物油的方法能够充分提取出乳品中的矿物油，提取率高，操作简便，适于规模化应用。

Description

提取乳品中矿物油的方法以及检测乳品中矿物油的方法

技术领域

本发明涉及食品领域。具体地，本发明涉及提取乳品中矿物油的方法以及检测乳品中矿物油的方法。

背景技术

矿物油遍布人们生产和生活的许多领域。矿物油的化学成分可分为饱和烃和芳香烃矿物油两大类，呈低等到中等毒性，对人体健康产生危害。矿物油毒理学研究发现，饱和烃矿物油经膳食摄入后在体内蓄积，会导致淋巴结、脾脏和肝脏等器官产生肉芽肿和慢性炎症。芳香烃矿物油因其芳香烃结构可能有遗传毒性和致癌性。有研究发现，矿物油是人体内累积量最大的污染物，其主要来源是食品摄入。因此，食品中的矿物油污染物值得关注，欧洲食品安全局调查发现，儿童每天矿物油的膳食摄入量高于成人。奶粉是婴幼儿的主要膳食来源，因而，奶粉的矿物油污染物更值得关注。

然而，目前针对奶粉中矿物油的检测方法仍有待改进。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。

需要说明的是，本发明是基于发明人的下列发现而完成的：

乳品中通常含有大量蛋白质，部分矿物油与蛋白质紧密结合，常规的样品提取方法无法有效提取样品中的全部矿物油，从而无法对奶粉的矿物油进行完整的生产链检测。矿物油与脂肪相似相溶，常用的脂肪提取溶剂有乙醚、石油醚和正己烷等。然而，乙醚和石油醚具有纯度低、杂质多的缺点，自身含有大量的矿物油，会对分析结果造成干扰。并且沸点低，使用前的重蒸处理比较繁琐，不适用做矿物油分析的提取溶剂。

采用正己烷对乳品浸泡过夜，提取出的矿物油仅能得到标签含量的10％，采用更激烈的提取条件，例如60℃水浴正己烷浸泡过夜提取，也仅能得到标签含量25％的矿物油。该方法得到的矿物油污染物大多仅为外包装迁移到乳品中的矿物油，原材料及生产过程中引入的矿物油被蛋白质紧紧包裹，通过浸泡提取无法得到矿物油总量。并且，利用正己烷对乳品萃取之前，乳品需要在酸溶液或者碱溶液中进行水解处理，以便使得酪蛋白水解为氨基酸，释放包埋其中的矿物油。但是，正己烷在水相溶液中溶解度很低，易发生乳化，影响提取得率。

有鉴于此，发明人采用无水乙醇对经过水解处理所得到的水解液进行处理，可以使蛋白变性沉淀，释放包埋的矿物油。同时，由于乙醇具有均可与水相和正己烷互溶的特性，可以改善低分子量烃类的提取率，促进正己烷对矿物油的萃取，提高提取率。此外，正己烷是碳氢化合物提取的理想溶剂，容易提取过量的高分子量烃类(热熔胶、蜡等)，乙醇和正己烷的混合溶剂可以综合两种溶剂的优点，改善提取率。由此，利用本发明的提取乳品中矿物油的方法能够充分提取出矿物油，提取率高，操作简便。进一步地，对提取出的含有矿物油的提取物进行色谱法分析，以便确定乳品中的矿物油含量。因此，本发明的检测乳品中矿物油的方法准确性强、灵敏度高，操作简便，适于规模化应用。

为此，在本发明的一个方面，本发明提出了一种提取乳品中矿物油的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：(1)利用盐酸溶液对待测乳品进行水解处理，以便得到水解液；(2)将所述水解液、无水乙醇和正己烷进行混合处理及离心处理，以便得到上层液和下层液，收集上层液；(3)向所述下层液中加入正己烷，重复所述混合处理及离心处理，收集上层液，并将两次获得的上层液合并，以便得到萃取液；以及(4)将所述萃取液与水进行混合处理及离心处理，收集上层液，以便提取出矿物油。

发明人采用无水乙醇对水解液进行处理，可以使蛋白变性沉淀，释放包埋的矿物油。同时，由于乙醇具有均可与水相和正己烷互溶的特性，可以促进正己烷对矿物油的萃取，提高提取率。由此，利用本发明的提取乳品中矿物油的方法能够充分提取出矿物油，提取率高，操作简便。

根据本发明的实施例，所述提取乳品中矿物油的方法还可以具有下列附加技术特征：

根据本发明的实施例，所述盐酸溶液与所述待测乳品的体积比为1：(0.5～5)。

根据本发明的实施例，所述水解处理是在80～90℃下进行1～2小时。

根据本发明的实施例，所述待测乳品选自非液态乳制品，所述待测乳品预先与水按照1：(4～10)的质量比混合。

根据本发明的实施例，所述待测乳品选自乳粉。

根据本发明的实施例，步骤(2)中，所述无水乙醇、正己烷与水解液的体积比为1：1：(1～3)。

根据本发明的实施例，步骤(4)中，水的体积不低于无水乙醇体积的2倍

根据本发明的实施例，所述离心处理是在3000～6000r/min下进行10～20min。

在本发明的另一方面，本发明提出了一种检测乳品中矿物油的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：利用前面所述提取乳粉中矿物油的方法提取乳品中的矿物油，以便得到提取物；将所述提取物进行浓缩处理，以便得到浓缩液；以及利用色谱法对所述浓缩液进行检测，并基于检测结果确定所述乳品中矿物油含量。由此，根据本发明实施例的检测乳品中矿物油的方法准确性强、灵敏度高，操作简便，适于规模化应用。

根据本发明的实施例，所述色谱法是采用二维色谱仪进行的，所述二维色谱仪包括第一维液相色谱仪和第二维气相色谱仪，其中，所述浓缩液在所述第一维液相色谱仪中经洗脱液洗脱，使经过不同洗脱时间所得到的流分分别流入第二维气相色谱仪中进行分析；任选地，所述第一维液相色谱仪的检测条件如下：洗脱程序如下表所示；流速为0.3mL/min，所述第二维气相色谱仪的检测条件如下：起始温度为55℃，停留8min后，以25℃/min程序升温至360℃，恒温10min，载气为高纯氢气；压力为60kpa，进样量为450μL，检测器温度为370℃。

时间(min)	正己烷(％)	二氯甲烷(％)
			0	100	0
0.5	100	0
			0.6	70	30
6	70	30

在本发明的又一方面，本发明提出了一种提取乳粉中矿物油的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：准确称取1～2g样品于试管中，加入内标物和8mL水充分溶解，加入10mL浓盐酸，80℃水浴1～2小时直至试样完全水解；取出试管，加入10mL无水乙醇混合，冷却后，加入10mL正己烷，加塞振摇1min，放出气体，以4000r/min离心15min，取出上层萃取液；再向下层水相中加入10mL正己烷，振摇，以4000r/min离心15min，将上层萃取液取出；合并2次萃取液，加入20mL水，以4000r/min离心15min，将上层萃取液取出，以便提取出矿物油。由此，利用根据本发明实施例的提取乳粉中矿物油的方法能够充分提取乳品中的矿物油，提取率高，操作简便，适于规模化应用。

在本发明的又一方面，本发明提出了一种检测乳粉中矿物油的方法。根据本发明的实施例，所述方法包括：准确称取1～2g样品于试管中，加入内标物和8mL水充分溶解，加入10mL浓盐酸，80℃水浴1～2小时直至试样完全水解；取出试管，加入10mL无水乙醇混合，冷却后，加入10mL正己烷，加塞振摇1min，放出气体，以4000r/min离心15min，取出上层萃取液；再向下层水相中加入10mL正己烷，振摇，以4000r/min离心15min，将上层萃取液取出；合并2次萃取液，加入20mL水，以4000r/min离心15min，将上层萃取液取出，以便得到提取物。将提取物浓缩至0.5～1mL，以便得到浓缩液；采用二维色谱仪对所述浓缩液进行检测，所述二维色谱仪包括第一维液相色谱仪和第二维气相色谱仪，所述浓缩液在所述第一维液相色谱仪中经洗脱液洗脱，通过切换阀将经过不同洗脱时间所得到的流分分别转入第二维气相色谱仪中进行分析，所述第一维液相色谱仪的检测条件如下：洗脱程序如下表所示；流速为0.3mL/min，所述第二维气相色谱仪的检测条件如下：起始温度为55℃，停留8min后，以25℃/min程序升温至360℃，恒温10min，载气为高纯氢气；压力为60kpa，进样量为450μL，检测器温度为370℃。由此，根据本发明实施例的检测乳品中矿物油的方法准确性强、灵敏度高，操作简便，适于规模化应用。

时间(min)	正己烷(％)	二氯甲烷(％)
			0	100	0
0.5	100	0
			0.6	70	30
6	70	30

本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

附图说明

本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：

图1显示了根据本发明一个实施例的提取乳品中矿物油的方法的流程示意图；

图2显示了根据本发明一个实施例的检测乳品中矿物油的方法的流程示意图；

图3显示了根据本发明一个实施例的检测乳品中饱和烃矿物油的色谱图；以及

图4显示了根据本发明一个实施例的检测乳品中芳香烃矿物油的色谱图。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。

需要说明的是，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。进一步地，在本发明的描述中，除非另有说明，“多个”的含义是两个或两个以上。

本发明提出了提取乳品中矿物油的方法以及检测乳品中矿物油的方法，下面将分别对其进行详细描述。

提取乳品中矿物油的方法

在本发明的一个方面，本发明提出了一种提取乳品中矿物油的方法。根据本发明的实施例，参见图1，该方法包括：

S100利用盐酸溶液对待测乳品进行水解处理，得到水解液

在该实施例中，利用盐酸溶液对待测乳品进行水解处理，以便得到水解液。由于乳品中存在大量蛋白质，脂肪会包埋于蛋白质中，从而对脂肪的提取造成干扰。预先对乳品进行酸水解，使得酪蛋白水解为氨基酸，从而释放其包埋的矿物油，以便提高脂肪的提取率。之所以选择采用酸水解，是因为碱水解需要用到氨水、乙醚、石油醚、乙醇，还需要特殊的脂肪球提取装置，然而酸水解需要用到的溶剂种类少，不需要特殊提取装置，引入污染的机率更低。

需要说明的是，本发明对于乳品的种类不作严格限定，可以是生牛乳、生羊乳或者乳制品，具体可以根据实际情况灵活选择。例如，乳制品可以为乳粉、奶酪、调制乳、酸奶、奶油等。对于非液态乳制品，如乳粉、酸奶、奶油等，需要预先与水混合形成混合液，以便其充分与盐酸溶液发生水解反应。对于非液态乳制品与水的混合比例也不作严格限定，可以根据实际情况灵活选择。在一些实施例中，非液态乳制品与水按照1：(4～10)的质量比混合，由此，非液态乳制品能够充分溶解于水中，便于后续与盐酸溶液发生水解反应，而且也有利于乙醇和正己烷的萃取。在一些实施例中，待测乳品选自乳粉。

根据本发明的实施例，盐酸溶液与待测乳品的体积比为1：(0.5～5)。由此，以便充分发生水解反应，使得蛋白水解，释放其包埋的矿物油，从而提高提取率。

根据本发明的实施例，水解处理是在80～90℃下进行1～2小时。由此，以便充分发生水解反应，使得蛋白水解，释放其包埋的矿物油，从而提高提取率。

S200将水解液、无水乙醇和正己烷进行混合及离心处理，收集上层液

在该实施例中，将水解液、无水乙醇和正己烷进行混合处理及离心处理，以便得到上层液和下层液，收集上层液。

发明人发现，由于正己烷在水相溶液中溶解度很低，易发生乳化，若直接采用正己烷提取水解液中的矿物油，将影响提取率。发明人采用无水乙醇对水解液进行处理，可以使蛋白质、氨基酸变性沉淀，释放包埋的矿物油。同时，由于乙醇具有均可与水相和正己烷互溶的特性，可明显改善低分子量烃类的提取率，促进正己烷对矿物油的萃取，提高提取率。

需要说明的是，本发明采用无水乙醇提取矿物油，且该无水乙醇预先经过重蒸处理，由此，无水乙醇中杂质少，避免引入矿物油造成干扰。具体地，对于重蒸处理的原料乙醇浓度不作严格限定，可以为70％、95％，只要保证重蒸后的乙醇浓度为100％即可。

根据本发明的实施例，该步骤中，无水乙醇、正己烷与水解液的体积比为1：1：(1～3)。发明人经过大量实验得到上述较优配比，由此，以便提高矿物油的提取率。

S300向下层液中加入正己烷，重复混合及离心处理，得到萃取液

在该实施例中，向下层液中加入正己烷，重复混合处理及离心处理，收集上层液，并将两次获得的上层液合并，以便得到萃取液。

根据本发明的具体实施例，本发明所采用的正己烷选自色谱级正己烷、重蒸正己烷和农残级正己烷中任意一种。选用这几种级别的正己烷，杂质较少，不会引入矿物油干扰，最佳为农残级正己烷。

S400将萃取液与水进行混合及离心处理，提取出矿物油

在该步骤中，将萃取液与水进行混合处理及离心处理，收集上层液，以便提取出矿物油。相比于正己烷，乙醇在水中的溶解度更好，将萃取液与水进行混合后，大部分乙醇均溶解于水中，正己烷层中含有矿物油，通过离心处理以便收集上层的正己烷层，从而除去乙醇，避免其干扰后续检测。

根据本发明的实施例，离心处理是在3000～6000r/min下进行10～20min。由此，以进一步保证矿物油与其他杂质分离，从而避免杂质造成干扰。

根据本发明的实施例，水的体积不低于无水乙醇体积的2倍。发明人意外发现，当与萃取液混合的水体积大于等于无水乙醇体积的2倍时，无水乙醇充分溶解于水中，并与正己烷分离，由此，避免了上层液中存在水和乙醇，对后续检测造成干扰。

在本发明的另一方面，本发明提出了一种提取乳粉中矿物油的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：准确称取1～2g样品于试管中，加入内标物和8mL水充分溶解，加入10mL浓盐酸，80℃水浴1～2小时直至试样完全水解；取出试管，加入10mL无水乙醇混合，冷却后，加入10mL正己烷，加塞振摇1min，放出气体，以4000r/min离心15min，取出上层萃取液；再向下层水相中加入10mL正己烷，振摇，以4000r/min离心15min，将上层萃取液取出；合并2次萃取液，加入20mL水，以4000r/min离心15min，将上层萃取液取出，以便提取出矿物油。由此，利用根据本发明实施例的提取乳粉中矿物油的方法能够充分提取乳品中的矿物油，提取率高，操作简便，适于规模化应用。

检测乳品中矿物油的方法

在本发明的又一方面，本发明提出了一种检测乳品中矿物油的方法。根据本发明的实施例，参见图2，该方法包括：

S10提取乳品中的矿物油

在该实施例中，利用前面所述提取乳粉中矿物油的方法提取乳品中的矿物油，以便得到提取物。

S20浓缩处理

在该实施例中，将提取物进行浓缩处理，以便得到浓缩液。通过对提取物进行浓缩处理，除去溶剂，便于后续色谱法检测。

需要说明的是，本发明对于浓缩处理方式不作严格限定，可以根据实际情况灵活选择。根据本发明的具体实施例，采用真空旋转蒸发或氮吹方式进行浓缩处理，最快速度地在不损失挥发性组分情况下，浓缩到适当体积，例如浓缩至0.5～1mL。

S30色谱法检测

在该实施例中，利用色谱法对浓缩液进行检测，并基于检测结果确定乳品中矿物油含量。采用色谱法对浓缩液进行检测，能够充分提高检测结果的准确性和灵敏度，检测限可达0.2mg/kg。

根据本发明的实施例，色谱法是采用二维色谱仪进行的，二维色谱仪包括第一维液相色谱仪和第二维气相色谱仪，其中，浓缩液在第一维液相色谱仪中经洗脱液洗脱，使经过不同洗脱时间所得到的流分分别流入第二维气相色谱仪中进行分析。通过对浓缩液进行洗脱，使用硅胶柱或氧化铝硅胶混合色谱柱对浓缩液中饱和烃和芳香烃流分进行净化、分离，随后采用切换阀将不同洗脱时间的饱和烃和芳香烃流分分别转入气相色谱仪进行分析。

根据本发明的实施例，第一维液相色谱仪的检测条件如下：洗脱液为正己烷和二氯甲烷；洗脱程序如下表所示；流速为0.3mL/min，第二维气相色谱仪的检测条件如下：起始温度为55℃，停留8min后，以25℃/min程序升温至360℃，恒温10min，载气为高纯氢气；压力为60kpa，进样量为450μL，检测器温度为370℃。

时间(min)	正己烷(％)	二氯甲烷(％)
			0	100	0
0.5	100	0
			0.6	70	30
6	70	30

发明人经过大量实验得到上述较优检测条件，从而提高检测结果的准确性和灵敏度，检测限可达0.2mg/kg。

本领域技术人员能够理解的是，前面针对提取乳品中矿物油的方法所描述的特征和优点，同样适用于该检测乳品中矿物油的方法，在此不再赘述。

在本发明的又一方面，本发明提出了一种检测乳粉中矿物油的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：准确称取1～2g样品于试管中，加入内标物和8mL水充分溶解，加入10mL浓盐酸，80℃水浴1～2小时直至试样完全水解；取出试管，加入10mL无水乙醇混合，冷却后，加入10mL正己烷，加塞振摇1min，放出气体，以4000r/min离心15min，取出上层萃取液；再向下层水相中加入10mL正己烷，振摇，以4000r/min离心15min，将上层萃取液取出；合并2次萃取液，加入20mL水，以4000r/min离心15min，将上层萃取液取出，以便得到提取物。将提取物浓缩至0.5～1mL，以便得到浓缩液；采用二维色谱仪对浓缩液进行检测，二维色谱仪包括第一维液相色谱仪和第二维气相色谱仪，浓缩液在第一维液相色谱仪中经洗脱液洗脱，通过切换阀将经过不同洗脱时间所得到的流分分别转入第二维气相色谱仪中进行分析；第一维液相色谱仪的检测条件如下：洗脱程序如下表所示；流速为0.3mL/min，第二维气相色谱仪的检测条件如下：起始温度为55℃，停留8min后，以25℃/min程序升温至360℃，恒温10min，载气为高纯氢气；压力为60kpa，进样量为450μL，检测器温度为370℃。由此，根据本发明实施例的检测乳品中矿物油的方法准确性强、灵敏度高，检测限可达0.2mg/kg，操作简便，适于规模化应用。

时间(min)	正己烷(％)	二氯甲烷(％)
			0	100	0
0.5	100	0
			0.6	70	30
6	70	30

下面将结合实施例对本发明的方案进行解释。本领域技术人员将会理解，下面的实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

实施例1

在该实施例中，按照下列方法提取乳粉中矿物油：

准确称取1～2g样品于试管中，加入300～600ng内标，随后加入8mL水充分溶解，再加入10mL浓盐酸，80℃水浴1～2小时直至试样完全水解；取出试管，加入10mL无水乙醇混合，冷却后，加入10mL正己烷，加塞振摇1min，放出气体，以4000r/min离心15min，取出上层萃取液；再向下层水相中加入10mL正己烷，振摇，以4000r/min离心15min，将上层萃取液取出；合并2次萃取液，加入20mL水，以4000r/min离心15min，将上层萃取液取出，浓缩至0.5～1mL，转至烘箱中105℃烘干至恒重后，计算脂肪得率，结果如表1所示。

对比例1

在该实施例中，按照下列方法提取乳粉中矿物油：

准确称取1g样品于试管中，加入300～600ng适量内标，随后加入8mL水充分溶解，加入10mL浓盐酸，80℃水浴1～2小时直至试样完全水解；取出试管，加入10mL正己烷，振摇，静置后吸取上层萃取液到已称重的试管，再向下层水相中加入10mL正己烷，振摇，静置后取出上层萃取液，收集2次萃取液，浓缩至0.5～1mL，转至烘箱中105℃烘干至恒重后，计算脂肪得率，结果如表1所示。

由表1可以看出，本发明的方法对乳粉中矿物油的提取率较高。

表1不同提取方法的脂肪提取率

提取方法	第1个样品	第2个样品	第3个样品
				对比例1	4.2％	7.9％	3.9％
实施例1	90.2％	79.6％	84.8％

实施例2

在该实施例中，按照下列方法检测乳粉中矿物油含量：

(1)奶粉样品的预处理

准确称取1～2g样品于试管中，加入300～600ng内标，随后加入8mL水充分溶解，再加入10mL浓盐酸，80℃水浴1～2小时直至试样完全水解；取出试管，加入10mL无水乙醇混合，冷却后，加入10mL正己烷，加塞振摇1min，放出气体，以4000r/min离心15min，取出上层萃取液；再向下层水相中加入10mL正己烷，振摇，以4000r/min离心15min，将上层萃取液取出；合并2次萃取液，加入20mL水，以4000r/min离心15min，将上层萃取液取出，浓缩至0.5～1mL，得到浓缩液。

(2)试样分析

将浓缩液注入二维色谱仪测定，同时得到样品中饱和烃和芳香烃矿物油的气相色谱图。其中，第一维液相色谱仪，采用正己烷、二氯甲烷溶剂进行梯度洗脱(梯度洗脱程序见表2)，使用硅胶正相色谱柱净化、分离试样中饱和烃和芳香烃流分，流速0.3mL/min，随后采用切换阀将不同洗脱时间的饱和烃和芳香烃矿物油流分分别转入气相色谱仪进行同时分析，其中饱和烃矿物油流分转移时间为2～3.5min，芳香烃矿物油流分转移时间为4～5.5min；第二维气相色谱仪的色谱分析的条件为：起始温度为55℃，停留8min后，以25℃/min程序升温至360℃，恒温10min，载气为高纯氢气；压力为60kpa，进样量为450μL，检测器温度为370℃。

表2第一维液相色谱仪洗脱程序

时间(min)	正己烷(％)	二氯甲烷(％)
			0	100	0
0.5	100	0
			0.6	70	30
6	70	30

(3)含量计算：

对谱图(参见图3和4)中的宽峰进行积分，采用内标法分别计算出奶粉中饱和烃和芳香烃矿物油含量，即分别为10.8mg/kg饱和烃矿物油和4.2mg/kg芳香烃矿物油。其中，用于饱和烃矿物油定量的内标为联环己烷，用于芳香烃矿物油定量的内标为1-甲基萘。

(4)该方法的加标回收率达到80％以上，检出限为0.2mg/kg。

由此，表明本发明检测乳品中矿物油的方法准确性强、灵敏度高。

实施例3提取溶剂的纯度实验

分别量取30mL正己烷、乙醇、乙醚、石油醚，采用旋转蒸发方式浓缩近干，随后用正己烷定容至1mL，将浓缩液注入二维色谱仪，按照实施例2的步骤(2)进行分析，得到浓缩液中饱和烃和芳香烃矿物油含量，见表3。由表3可知，乙醚和石油醚中对目标物造成干扰的物质太多，不适合用于奶粉中矿物油提取实验。乙醇中杂质含量较少，可以用做提取蛋白沉淀剂以及促进正己烷提取的最佳溶剂。

表3浓缩液中矿物油含量

对比例2

按照实施例2的方法检测奶粉中矿物油的含量，区别在于，无水乙醇的用量为40mL。

经实验测试，乙醇：正己烷的比例为1:1时提取率最佳，当乙醇：正己烷比例为4:1时，矿物油提取率低。此外，无水乙醇的用量过多时，合并2次萃取液并加入水后，正己烷与水、乙醇互溶，无法分离除去水和乙醇，而残留的水会对HPLC的硅胶柱和气相色谱毛细管柱造成不可逆的损伤，降低HPLC柱效，改变饱和烃矿物油和芳香烃矿物油洗脱时间，甘油三酯提前到芳香烃矿物油流分时间内洗脱，对气相谱图积分造成严重干扰。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。

尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

Claims (10)

1.一种提取乳品中矿物油的方法，其特征在于，包括：

(1)利用盐酸溶液对待测乳品进行水解处理，以便得到水解液；

(2)将所述水解液、无水乙醇和正己烷进行混合处理及离心处理，以便得到上层液和下层液，收集上层液；

(3)向所述下层液中加入正己烷，重复所述混合处理及离心处理，收集上层液，并将两次获得的上层液合并，以便得到萃取液；以及

(4)将所述萃取液与水进行混合处理及离心处理，收集上层液，以便提取出矿物油。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述盐酸溶液与所述待测乳品的体积比为1：(0.5～5)。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述水解处理是在80～90℃下进行1～2小时。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述待测乳品选自非液态乳制品，所述待测乳品预先与水按照1：(4～10)的质量比混合，

任选地，所述待测乳品选自乳粉。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述无水乙醇、正己烷与水解液的体积比为1：1：(1～3)；

任选地，步骤(4)中，水的体积不低于无水乙醇体积的2倍。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述离心处理是在3000～6000r/min下进行10～20min。

7.一种检测乳品中矿物油的方法，其特征在于，包括：

利用权利要求1～6任一项所述提取乳粉中矿物油的方法提取乳品中的矿物油，以便得到提取物；

将所述提取物进行浓缩处理，以便得到浓缩液；以及

利用色谱法对所述浓缩液进行检测，并基于检测结果确定所述乳品中矿物油含量。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述色谱法是采用二维色谱仪进行的，所述二维色谱仪包括第一维液相色谱仪和第二维气相色谱仪，

其中，所述浓缩液在所述第一维液相色谱仪中经洗脱液洗脱，使经过不同洗脱时间所得到的流分分别流入第二维气相色谱仪中进行分析；

任选地，所述第一维液相色谱仪的检测条件如下：

洗脱程序如下表所示：

时间(min) 正己烷(％) 二氯甲烷(％) 0 100 0 0.5 100 0 0.6 70 30 6 70 30

流速为0.3mL/min，

所述第二维气相色谱仪的检测条件如下：

起始温度为55℃，停留8min后，以25℃/min程序升温至360℃，恒温10min，载气为高纯氢气；压力为60kpa，进样量为450μL，检测器温度为370℃。

9.一种提取乳粉中矿物油的方法，其特征在于，包括：

准确称取1～2g样品于试管中，加入内标物和8mL水充分溶解，加入10mL浓盐酸，80℃水浴1～2小时直至试样完全水解；取出试管，加入10mL无水乙醇混合，冷却后，加入10mL正己烷，加塞振摇1min，放出气体，以4000r/min离心15min，取出上层萃取液；再向下层水相中加入10mL正己烷，振摇，以4000r/min离心15min，将上层萃取液取出；合并2次萃取液，加入20mL水，以4000r/min离心15min，将上层萃取液取出，以便提取出矿物油。

10.一种检测乳粉中矿物油的方法，其特征在于，包括：

准确称取1～2g样品于试管中，加入内标物和8mL水充分溶解，加入10mL浓盐酸，80℃水浴1～2小时直至试样完全水解；取出试管，加入10mL无水乙醇混合，冷却后，加入10mL正己烷，加塞振摇1min，放出气体，以4000r/min离心15min，取出上层萃取液；再向下层水相中加入10mL正己烷，振摇，以4000r/min离心15min，将上层萃取液取出；合并2次萃取液，加入20mL水，以4000r/min离心15min，将上层萃取液取出，以便得到提取物；将提取物浓缩至0.5～1mL，以便得到浓缩液；

采用二维色谱仪对所述浓缩液进行检测，所述二维色谱仪包括第一维液相色谱仪和第二维气相色谱仪，所述浓缩液在所述第一维液相色谱仪中经洗脱液洗脱，通过切换阀将经过不同洗脱时间所得到的流分分别转入第二维气相色谱仪中进行分析；

所述第一维液相色谱仪的检测条件如下：

洗脱程序如下表所示：

时间(min) 正己烷(％) 二氯甲烷(％) 0 100 0 0.5 100 0 0.6 70 30 6 70 30

流速为0.3mL/min，

所述第二维气相色谱仪的检测条件如下：

起始温度为55℃，停留8min后，以25℃/min程序升温至360℃，恒温10min，载气为高纯氢气；压力为60kpa，进样量为450μL，检测器温度为370℃。