CN109197779A - 一种豁眼自别雌雄肉鹅配套系的育种方法 - Google Patents

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于金成
赵辉
李喆
于宁
杨姝
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    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; CARE OF BIRDS, FISHES, INSECTS; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New breeds of animals
    • A01K67/02—Breeding vertebrates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
    • C12Q1/6827—Hybridisation assays for detection of mutation or polymorphism
    • C12Q1/683—Hybridisation assays for detection of mutation or polymorphism involving restriction enzymes, e.g. restriction fragment length polymorphism [RFLP]

Abstract

本发明公开了一种豁眼自别雌雄肉鹅配套系的育种方法，它属于禽畜育种技术领域。一种豁眼自别雌雄肉鹅配套系的育种方法，它包括FREM1基因变异位点的检测，突变群体的扩繁，父本纯系的选育，鹅豁眼性状自别雌雄配套系的建立。本发明培育方法利用鹅上眼睑部分缺失的伴性性状设计父母本基因型和杂交流程，在培育过程中能够根据杂交F1代的表现型直接鉴别雌雄,鉴别正确率能够达到90%以上。本发明鹅豁眼性状自别雌雄配套系的培育方法简便，易操作，不需要培训专门的鉴别人员,节省大量的人工翻肛鉴别雏鹅雌雄环节的成本，且鉴别的速度快，准确率高，极大的降低了对雏鹅不造成任何伤害，提高了雏鹅的成活率，有利于疾病的防控。

Description

一种豁眼自别雌雄肉鹅配套系的育种方法
技术领域
本发明涉及一种豁眼自别雌雄肉鹅配套系的育种方法，它属于禽畜育种技术领域。
背景技术
中国是鹅生产和消费的大国，随着中国养鹅业的不断发展和壮大，1日龄雏鹅性别鉴定的难题日益突出，目前，不论父母代还是商品代都需要对刚孵化的雏鹅进行雌雄鉴别，并根据各自的生产用途分别处理，以降低饲养成本，提高经济效益。
雏鹅雌雄鉴别的方法很少，总的来说可以分为以下几类：1、形体鉴别法， 公雏和母雏在出雏时就存在着一定的差异，一般来说，雄雏体格较大，喙长宽，身较长，头较大，颈较长，站立的姿势较直；雌雏的体格较小，喙短而窄，身体形圆，腹部稍向下，站立的姿势稍斜，同－品种的雏鹅，待出壳鹅仔的绒毛干后，毛色较深者多为母鹅，毛色稍淡者多为公鹅，科研及生产技术人员依靠经验采用对公雏和母形体辨别进行鉴别准确率较低；2、根据雌雄鹅生殖器官结构的不同，通过对泄殖腔生殖突起或性腺的直接观察来鉴别，1日龄雏鹅性别鉴定一直采用传统翻肛鉴别等，这种鉴别方法，不但对雏鹅造成应激和损伤，也不利于疾病的防控，还增加成本；3、应用伴性遗传原理，使用特定的品种或品系进行杂交，通过鉴别雏鹅的外貌性状达到区分雏鹅雌雄的目的，但此方法在我国鹅生产中还没有应用，需要相应性状遗传规律的研究以待应用。
目前，国内外鹅生产基本上没有成型的雏鹅性别自别育种技术。因此，研发快速、高效、不伤害雏鹅的性别自别育种方法称为本领域技术人员急需解决的技术难题。
发明内容
本发明的目的是提供一种豁眼自别雌雄肉鹅配套系的育种方法，它目解决了目前在肉鹅生产中，雏鹅1日龄性别翻肛鉴别法对雏鹅造成应激和损伤的问题，此自别雌雄肉鹅配套系的育种方法对雏鹅不造成任何伤害，提高了雏鹅的成活率，其鉴别速度快、准确率高、成本低、利于实际生产应用。
为了达到上述目的，本发明是通过下述技术方案实现的：
一种豁眼自别雌雄肉鹅配套系的育种方法，它包括以下步骤：
（1）FREM1基因变异位点的检测：对豁眼母鹅与大型公鹅的杂交后代进行豁眼性状观察，对后代公雏为豁眼的以及半同胞为豁眼鹅的母鹅全部进行PCR-RFLP检测；
（2）突变群体的扩繁：对上述杂交后代中FREM1基因突变纯合型个体以及部分杂合型个体进行扩繁；
（3）父本纯系的选育：对步骤（2）扩繁所得的后代进行FREM1基因变异位点进行PCR-RFLP检测,保留所有FREM1基因变异纯合缺个体并在此基础上进行纯系的选育，得到父本纯系个体群；
（4）豁眼自别雌雄肉鹅配套系的建立：使步骤（3）所得的父本纯系与正常眼睑母鹅品种进行杂交,后代母雏均为豁眼,公雏均为正常眼睑,即得到鹅豁眼性状自别雌雄配套系。
上述步骤（1）中所述FREM1基因变异位点是指位于鹅Z染色体FREM1基因4515bp:T>C的变异。
上述步骤（1）中对后代公雏为豁眼的以及半同胞为豁眼鹅的母鹅全部进行PCR-RFLP检测的具体方法如下：采集待测鹅的血液并提取DNA，根据FREM1基因变异位点设计引物，进行PCR扩增，根据HindIII限制性内切酶进行酶切，酶切产物进行琼脂糖检测，如果仅出现一条180bp左右的条带，判定待测鹅为FREM1基因突变纯合型，如果出现180bp和250bp两条条带，判定待测鹅为FREM1基因突变杂合型，如果仅出现一条250bp的条带，判定待测鹅为FREM1基因野生纯合型。
由于采用上述技术方案，使得本你发明具有如下优点和效果：
本发明提供了一种能够自别雌雄肉鹅配套系的培育方法，它包括FREM1基因变异位点的检测，突变群体的扩繁，父本纯系的选育，所述培育方法利用鹅上眼睑部分缺失的伴性性状设计父母本基因型和杂交流程，在培育过程中能够根据杂交F1代的表现型直接鉴别雌雄,鉴别正确率能够达到90%以上。本发明鹅豁眼性状自别雌雄配套系的培育方法简便，易操作，不需要培训专门的鉴别人员, 节省大量的人工翻肛鉴别雏鹅雌雄环节的成本，且鉴别的速度快，准确率高，极大的降低了对雏鹅不造成任何伤害，提高了雏鹅的成活率，有利于疾病的防控。
附图说明
图1是本发明一种豁眼自别雌雄肉鹅配套系的育种方法示意图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明进行进一步描述。以下实施例仅为本发明的几个具体实施例，但本发明的设计构思并不局限于此，凡利用此构思对本发明进行非实质性的改动，均应属于侵犯本发明保护范围的行为。
下述实施例中的方法，如无特别说明，均为常规方法。
实施例
鹅豁眼性状自别雌雄配套系的培育方法，如图1所示，它包括以下步骤：
（1）FREM1基因变异位点的检测：对豁眼母鹅与大型公鹅的杂交后代进行豁眼性状观察，对后代公雏为豁眼的以及半同胞为豁眼鹅的母鹅全部进行PCR-RFLP检测；具体方法如下：采集待测鹅的血液并提取DNA，根据FREM1基因变异位点设计引物，进行PCR扩增，根据HindIII限制性内切酶进行酶切，酶切产物进行琼脂糖检测，如果仅出现一条180bp左右的条带，判定待测鹅为FREM1基因突变纯合型，如果出现180bp和250bp两条条带，判定待测鹅为FREM1基因突变杂合型，如果仅出现一条250bp的条带，判定待测鹅为FREM1基因野生纯合型；
（2）突变群体的扩繁：对上述杂交后代中FREM1基因突变纯合型个体以及部分杂合型个体进行扩繁；
（3）父本纯系的选育：对步骤（2）扩繁所得的后代进行FREM1基因变异位点进行PCR-RFLP检测,保留所有FREM1基因变异纯合缺个体并在此基础上进行纯系的选育，得到父本纯系个体群；
（4）豁眼自别雌雄肉鹅配套系的建立：使步骤（3）所得的父本纯系与正常眼睑母鹅品种进行杂交,后代母雏均为豁眼,公雏均为正常眼睑,即得到鹅豁眼性状自别雌雄配套系。
上述FREM1基因变异位点是指位于鹅Z染色体FREM1基因4515bp:T>C的变异。
为了进一步说明本发明的原理及特点，下面结合试验数据进一步进行说明。
试验例
为了检验豁眼性状在鹅杂交实验中，雏鹅自别雌雄的成功鉴别率。实验选用豁眼鹅（6只♂，30只♀）和百子鹅（6只♂，30只♀）为亲本，正交产生F1代。公母比为1:5，每组中母鹅单栏饲养。鹅在同一栋舍内分组饲养，自由采食、饮水。按常规方法进行饲养管理及免疫。出雏时即测定实验鹅的豁眼性状情况。记录资源群中每代不同性状个体数量，Excel软件进行统计分析。
杂交结果显示，豁眼鹅与百子鹅的正交F1代群体中公雏100%为正常眼睑，而母雏有90%的豁眼表型，10%的正常表型，豁眼与正常眼睑的比值为 9:1。反交F1代群体中公雏和母雏全部为正常眼睑。结果表明，豁眼性状的伴性遗传在豁眼鹅杂交利用中可用于雏鹅的自别雌雄，有着非常广阔的开发利用前景。
表1 豁眼鹅与百子鹅杂交F1群体中豁眼性状分离比。
。

Claims (3)

1.一种豁眼自别雌雄肉鹅配套系的育种方法，其特征在于它包括以下步骤：
（1）FREM1基因变异位点的检测：对豁眼母鹅与大型公鹅的杂交后代进行豁眼性状观察，对后代公雏为豁眼的以及半同胞为豁眼鹅的母鹅全部进行PCR-RFLP检测；
（2）突变群体的扩繁：对上述杂交后代中FREM1基因突变纯合型个体以及部分杂合型个体进行扩繁；
（3）父本纯系的选育：对步骤（2）扩繁所得的后代进行FREM1基因变异位点进行PCR-RFLP检测，保留所有FREM1基因变异纯合缺个体并在此基础上进行纯系的选育，得到父本纯系个体群；
（4）豁眼自别雌雄肉鹅配套系的建立：使步骤（3）所得的父本纯系与正常眼睑母鹅品种进行杂交,后代母雏均为豁眼,公雏均为正常眼睑,即得到鹅豁眼性状自别雌雄配套系。
2.根据权利要求1所述的一种豁眼自别雌雄肉鹅配套系的育种方法，其特征在于步骤（1）所述FREM1基因变异位点是指位于鹅Z染色体FREM1基因4515bp:T>C的变异。
3.根据权利要求1所述的一种豁眼自别雌雄肉鹅配套系的育种方法，其特征在于所述步骤（1）中对后代公雏为豁眼的以及半同胞为豁眼鹅的母鹅全部进行PCR-RFLP检测的具体方法如下：采集待测鹅的血液并提取DNA，根据FREM1基因变异位点设计引物，进行PCR扩增，根据Hind III限制性内切酶进行酶切，酶切产物进行琼脂糖检测，如果仅出现一条180bp左右的条带，判定待测鹅为FREM1基因突变纯合型，如果出现180bp和250bp两条条带，判定待测鹅为FREM1基因突变杂合型，如果仅出现一条250bp的条带，判定待测鹅为FREM1基因野生纯合型。
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