CN109142747A - 一种同型半胱氨酸检测试剂盒 - Google Patents

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吕崇翔
曹春梅
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Abstract

本发明涉及一种同型半胱氨酸检测试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括试剂R1：哌嗪‑1,4‑二乙磺酸缓冲液50mmol/L，S‑腺苷甲硫氨酸(SAM)0.1mmol/L，还原辅酶(NADH)0.2mmol/L，三(2羧乙基)膦氯化氢(TCEP)0.5mmol/L，α‑酮戊二酸5.0mmol/L，其溶剂为纯化水；试剂R2：哌嗪‑1,4‑二乙磺酸缓冲液50mmol/L，Hcy甲基转移酶(HMTase)5.0KU/L，谷氨酸脱氢酶(GLDH)10KU/L，S‑腺苷同型半胱氨酸(SAH)水解酶(SAHase)3.0KU/L，腺苷脱氨酶5.0KU/L，其溶剂为纯化水。本发明的试剂盒测定方便，双试剂无需配制，为液态试剂，可以直接使用，且检测速度快，灵敏度高，准确度高，稳定性好，线性范围广，储存时间长，可以达到在4℃下至少保存1年以上，另外原料成本较低，完全满足临床检验的需要。

Description

一种同型半胱氨酸检测试剂盒
技术领域
本发明属于临床体外检测技术领域，尤其涉及一种同型半胱氨酸检测试剂盒。
背景技术
同型半胱氨酸(C4H9NO2S)是蛋氨酸去甲基后形成的一种含硫氨基酸，属于蛋氨酸循环的中间产物，血浆同型半胱氨酸是一个总称，包括还原型同型半胱氨酸，双硫同型半胱氨酸，混合双硫半胱氨酸和混合双硫蛋白质，正常情况下游离同型半胱氨酸较少，主要以蛋白质形式存在。
相关临床资料显示同型半胱氨酸是冠心病的一个新的独立危险因素，可作为心脑血管病、肾脏病、老年痴呆与帕金森症、妊娠合并症、先兆子痫与不良事件的预测指标，是近年来医学研究的新热点。
同型半胱氨酸的检测方法很多，主要有：1.同位素检测法，该法灵敏度高，特异性强，由于操作繁琐且有放射污染，虽经改良也未能推广使用；2.气相色谱一质谱测定t-同型半胱氨酸色谱检测法，该方法测定精度和分析速度能用于大量样本分析，但是成本较高；3.免疫学法和酶法，这两种方法具有方法简单、准确度与精密度高的优点，相对于免疫学法，酶法成本更低，使用更方便，能结合全自动生化分析仪，随着目前酶法试剂中酶类提纯水平的提高，该法检测试剂的成本进一步降低，而酶法检测血清同型半胱氨酸又分为两种方法，一种是使用S-腺苷同型半胱氨酸水解酶，因此叫水解酶法，而另一种是使用胱硫醚β合成酶(CBS)，也叫胱硫醚法，前者成本较高，而后者酶成本较低，更利于推广，其检测原理为同型半胱氨酸(氧化形式)被还原成游离的同型半胱氨酸，在胱硫醚β合成酶(C BS)的催化下和丝氨酸反应生成L-胱硫醚，L-胱硫醚被胱硫醚β裂解酶分解成间型半胱氨酸和丙酮酸，丙酮酸参与烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的显色反应，生成的同型半胱氨酸再次参与第一步反应，如此循环进行。但是由于胱硫醚循环酶法检测血清同型半胱氨酸需要加入烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、胱硫醚β合成酶、胱硫醚β裂解酶等酶或者辅酶，这些酶类在液态的情况下容易衰减，尤其是在温度偏高的环境下，非常容易衰减，因此市面上多为冻干粉的试剂，这给临床使用带来了很大的不便。针对这一情况，本发明提供一种血清同型半胱氨酸试剂盒及其检测方法，本品在试剂中加入一套另外的缓冲体系，以保证试剂开口稳定性能30天测试同型半胱氨酸浓度值的精度在1％以内。本品具有灵敏度高，准确度高，特异性强，稳定性好等优点。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术中存在的上述问题，提出了一种灵敏度高、热稳定性好、储存时间长的稳定的同型半胱氨酸检测试剂盒。
为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：
一种同型半胱氨酸检测试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：
试剂R1：
其溶剂为纯化水
试剂R2：
其溶剂为纯化水。
进一步地，所述缓冲液为哌嗪-1,4-二乙磺酸缓冲液。
进一步地，所述表面活性剂为曲拉通系列、吐温系列、brij-35、二月桂甘油硫酸酯中的一种或多种。
进一步地，所述防腐剂为叠氮钠、proclin300、MIT、硫酸庆大霉素、硫柳汞中的一种或多种。
通过采用上述技术方案，本发明稳定的同型半胱氨酸检测试剂盒测定方便，双试剂无需配制，为液态试剂，可以直接使用，且检测速度快，灵敏度高，准确度高，稳定性好，线性范围广，储存时间长，可以达到在4℃下至少保存1年以上，另外原料成本较低，完全满足临床检验的需要。
具体实施方式
为了使本领域的技术人员可以更好地理解本发明，下面结合实施例对本发明技术方案进一步说明。
一种同型半胱氨酸检测试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：
试剂R1：
其溶剂为纯化水
试剂R2：
其溶剂为纯化水。
进一步地，所述缓冲液为哌嗪-1,4-二乙磺酸缓冲液。
进一步地，所述表面活性剂为曲拉通系列、吐温系列、brij-35、二月桂甘油硫酸酯中的一种或多种。
进一步地，所述防腐剂为叠氮钠、proclin300、MIT、硫酸庆大霉素、硫柳汞中的一种或多种。
以上所述实施例仅表达了本发明的优选实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形、改进及替代，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (4)

1.一种同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：
试剂R1：
试剂R2：
2.如权利要求1所述的同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲液为哌嗪-1,4-二乙磺酸缓冲液。
3.如权利要求1所述的同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于，所述表面活性剂为曲拉通系列、吐温系列、brij-35、二月桂甘油硫酸酯中的一种或多种。
4.如权利要求1所述的同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于，所述防腐剂为叠氮钠、proclin300、MIT、硫酸庆大霉素、硫柳汞中的一种或多种。
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