CN109142322A - 一种农产品农药残留物检测方法 - Google Patents

一种农产品农药残留物检测方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种农产品农药残留物检测方法，获得检样，由分析的整批物料的各个部分采集的少量物料成为检样，随机再抽取其中一部分供分析检验用，在样品上详细填写采样的单位、地址、日期以及采样条件和采样时的包装情况；本发明通过固有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯的试纸，根据有机磷类农药对丁酰胆碱酯酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此可判断出样品中是否有过量有机磷类农药的存在，检测过程中，通过两批检测卡同时进行检定可以降低酶失效而导致检测失效的概率，对检测液进行灼烧处理，进行焰色反应，可以对有机氯农药进行检测，在提高了检测速度，节省检测时间和步骤的同时，提高的检测范围，具有很好的推广价值。

Description

一种农产品农药残留物检测方法
技术领域
本发明属于农产品检测技术领域，具体涉及一种农产品农药残留物检测方法。
背景技术
农药是把“双刃剑”，对促进农业增产有极其重要的作用。但由于农药本身固有的化学属性和对其使用不当，导致农产品农药残留严重超标，严重危害到广大人民群众的健康，在我国农药中，70％为有机磷农药，而在我国生产使用的有机磷农药中，70％为剧毒、高毒类，而且较多是禁止在蔬菜作物上使用的。
然而现有农产品检测采用色谱检测法虽然检测较为准确，但是检测周期较长，且成本较高，而果蔬上市需要实时出货，针对速测方法的测量误差大，测量范围也相对较窄的问题；为此本发明提供一种农产品农药残留物检测方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种农产品农药残留物检测方法，以解决上述背景技术中提出的现有农产品检测采用色谱检测法虽然检测较为准确，但是检测周期较长，且成本较高，而果蔬上市需要实时出货，针对速测方法的测量误差大，测量范围也相对较窄问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种农产品农药残留物检测方法，
步骤一：获得检样，由分析的整批物料的各个部分采集的少量物料成为检样，随机再抽取其中一部分供分析检验用，在样品上详细填写采样的单位、地址、日期以及采样条件和采样时的包装情况；
步骤二：检测材料准备，pH7.5缓冲液溶液：分别取15.0g磷酸氢二钠与1.59g无水磷酸二氢钾用500mL蒸馏水溶解待用，取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取2g放入带盖瓶中，加入10mL缓冲溶液，震摇50次，静置2min以上放置待用，准备两种不同批次和生产日期的速测卡待用；
步骤三：取两个批次的两片速测卡，分别用白色药片沾取提取液，放置10min以上进行预反应，预反应后的药片表面必须保持湿润；
步骤四：将速测卡对折，使红色药片与白色药片叠合反应，维持反应三分钟，每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡；
步骤五：结果与空白对照卡比较，结果分为阳性和阴性，白色药片不变色或略浅蓝色均为阳性结果，白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同，为阴性结果，对阳性结果的样品，可用其他分析方法进一步确定具体衣药品种和含量；
步骤六：进行有机氯检测，取铜小勺在煤气灯或酒精灯上灼烧，直至铜勺表面覆盖一层黑色氧化铜为止；取少量步骤二中的检测液，用乙醚混合振摇；
步骤七：将滤液逐滴加在铜勺表面蒸发，然后进行灼烧；
作为本发明的一种农产品农药残留物检测方法优选的技术方案，所述步骤三中预反应条件保持在37°放置10min。
作为本发明的一种农产品农药残留物检测方法优选的技术方案，所述步骤五中酶被有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制则表示为阳性，酶未被有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制则表示为阴性，速测卡为固有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯的试纸。
作为本发明的一种农产品农药残留物检测方法优选的技术方案，所述步骤七中若灼烧火焰呈绿色，说明检测物被有机氯农药污染，若样品中农药含量很低未显色，可将乙醚混合液浓缩蒸干，用少量混合溶解残留物，然后按上法检验，可最低检出范围为1ug有机氯。
作为本发明的一种农产品农药残留物检测方法优选的技术方案，所述步骤二中对样品的前处理包括擦去表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，在擦去表面泥土过程中不可使用湿润的纸张去除，要保持干燥。
作为本发明的一种农产品农药残留物检测方法优选的技术方案，在对样品进行剪成1cm左右见方碎片时，边剪裁边用试纸吸取剪裁留下的汁液。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明通过固有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯的试纸，通过有机磷类农药对丁酰胆碱酯酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此可判断出样品中是否有过量有机磷类农药的存在，检测过程中，通过两批检测卡同时进行检定可以降低酶失效而导致检测失效的概率，针对有机磷实现了快速的农药残留物的检测，并且对检测液进行灼烧处理，进行焰色反应，可以对有机氯农药进行检测，在提高了检测速度，节省检测时间和步骤的同时，提高的检测范围，具有很好的推广价值。
具体实施方式
实施例1
一种农产品农药残留物检测方法，
步骤一：获得检样，由分析的整批物料的各个部分采集的少量物料成为检样，随机再抽取其中一部分供分析检验用，在样品上详细填写采样的单位、地址、日期以及采样条件和采样时的包装情况；通过五点采样法采集种植基地的样品，从采集的样品中平均随机抽取一部分作为样品，采集过程中注意标注采集的时间、条件并注意样品的包装状况，从而提供个更好的结果误差分析数据；
步骤二：检测材料准备，配置pH7.5缓冲液溶液，先称取磷酸二氢钾9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1000m1容量瓶内，再稀释至刻度1000m1；然后称取无水磷酸氢二钠9.47g用蒸馏水溶解后，放入1000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度1000ml，通过表1进行配制成pH7.0～pH7.8的缓冲液溶液，取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，擦去泥土时不可通过湿润的纸张进行擦拭，可以使用毛刷进行去除，然后使用剪刀剪成1cm左右见方碎片，进行裁剪时，使用滤纸放置在剪裁缝处，对汁液进行吸取，将剪裁后的样本放置在滤纸上，然后使用天平取2g放入带盖瓶中，加入10mL缓冲溶液，震摇50次，静置2min以上放置待用，准备两种不同批次和生产日期的速测卡待用可以降低因单批次速测卡保存不当而发生的酶变性失效。
步骤三：取两个批次的速测卡，取其中一批次的一片检测卡，撕去上盖膜，用白色药片沾取提液，放置10min以上进行预反应，并放置在准备好的37℃恒温箱装置中放置10min，在此过程中，在药片的表面滴一滴缓冲溶液，保证预反应后的药片表面是湿润的，分别用白色药片沾取不同PH值的提取液，放置10min以上进行预反应。
步骤四：将速测卡对折，使红色药片与白色药片叠合反应，并将对折后的速测卡再次放置到37℃恒温箱装置维持反应三分钟，每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡；
步骤五：结果与空白对照卡比较，结果分为阳性和阴性，白色药片不变色或略浅蓝色均为阳性结果，白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同，为阴性结果，对阳性结果的样品，检测可以在PH为6.0～7.0范围内进行，保证了酶在不同PH条件下，且在最适宜的温度下进行催化反应，一定程度上可以获得较为准确的试验结果，当通过速测卡完成对样品有机磷的毒性检测后，可用其他分析方法进一步确定具体衣药品种和含量；
步骤六：进行有机氯检测，取铜小勺在煤气灯或酒精灯上灼烧，直至铜勺表面覆盖一层黑色氧化铜为止；取1ml步骤二中的检测液于10mL具塞试管中，加4mL丙酮，振摇1min，加4mL石油醚，振摇1min，静置分层，将上层石油醚溶液移到另一25mL具塞试管中，再加1mL石油醚于原试管中，不摇，取出上层石油醚合并于25mL试管中，重复2次，再加与石油醚等体积的硫酸钠溶液(20g/L)，摇混，分层，将上层石油醚溶液取出经无水硫酸钠滤入10mL具塞试管中，再加1mL石油醚于原25mL试管中，不摇，取出上层液合并于10mL试管中，重复两次，提取液定容至4.0mL，获得有机氯提取液。
步骤七：使用滴管将有机氯提取液吸出，将提取液逐滴加在铜勺表面蒸发，然后进行灼烧，灼烧若产生绿色火焰，则表面提取液含有有机氯成分。
具体的，步骤三中预反应条件保持在37°放置10min，可以保持胆碱酯酶反应过程中的活性，从而最大程度的保证反应进行，提高试验现象。
具体的，步骤五中酶被有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制则表示为阳性，酶未被有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制则表示为阴性，速测卡为固有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯的试纸，由于种植普遍使用的敌敌畏、甲拌磷、乐果、对氧磷、对硫磷、喹硫磷、优杀硫磷、敌百虫、氧化乐果、磷胺、甲基嘧啶磷、马拉硫磷、辛硫磷、亚胺硫磷、甲胺磷、地亚农、甲基毒死蜱、毒死蜱、倍硫酸、杀扑磷、乙酰甲胺磷、巴胺磷、甲基对硫磷、杀螟硫磷、异柳磷、异柳磷等农药中普遍含有的有机磷或氨基甲酸脂对胆碱酯酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色)，有机磷或氨基甲酸脂类农药对胆碱酯酶有抑制作用，使催化、水解、变色的过程发生改变，由此可判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
具体的，步骤七中若灼烧火焰呈绿色，说明检测物被有机氯农药污染，若样品中农药含量很低未显色，可将步骤六中的提取液进行浓缩蒸干，用少量混合溶解残留物，然后按上法检验，可最低检出范围为1ug有机氯。
具体的，步骤二中对样品的前处理包括擦去表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，在擦去表面泥土过程中不可使用湿润的纸张去除，要保持干燥，防止在擦去表面泥土时，由于水分的原因将样品表面残留的农药去除或者影响了样品表面农药的浓度。
具体的，在对样品进行剪成1cm左右见方碎片时，边剪裁边用试纸吸取剪裁留下的汁液，可以防止在剪裁过程中，样品中流出的汁液对样品表面的农药残留物进行洗刷，造成了农药成分的减少，并且样品中流出的汁液可能影响检测环境的PH值，对试验的检定造成误差。
实施例2
一种农产品农药残留物检测方法，
步骤一：获得检样，由分析的整批物料的各个部分采集的少量物料成为检样，随机再抽取其中一部分供分析检验用，在样品上详细填写采样的单位、地址、日期以及采样条件和采样时的包装情况；通过五点采样法采集种植基地的样品，从采集的样品中平均随机抽取一部分作为样品，采集过程中注意标注采集的时间、条件并注意样品的包装状况，从而提供个更好的结果误差分析数据；
步骤二：取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，擦去泥土时不可通过湿润的纸张进行擦拭，可以使用毛刷进行去除，在擦去表面泥土过程中不可使用湿润的纸张去除，要保持干燥，防止在擦去表面泥土时，由于水分的原因将样品表面残留的农药去除或者影响了样品表面农药的浓度，然后使用剪刀剪成4cm左右见方碎片，进行裁剪时，使用滤纸放置在剪裁缝处，对汁液进行吸取，可以防止在剪裁过程中，样品中流出的汁液对样品表面的农药残留物进行洗刷，造成了农药成分的减少，并且样品中流出的汁液可能影响检测环境的PH值，对试验的检定造成误差，将剪裁后的样本放置在滤纸上，准备两种不同批次和生产日期的速测卡待用可以降低因单批次速测卡保存不当而发生的酶变性失效，滴2～3滴洗脱液在4cm左右见方碎片的蔬菜表面,用另一片蔬菜在滴液处轻轻摩擦。
步骤三：取两个批次的速测卡，取其中一批次的一片检测卡，撕去上盖膜，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上，并放置在准备好的37℃恒温箱装置中放置10min，在此过程中，在药片的表面滴一滴洗脱液，保证预反应后的药片表面是湿润的。
步骤四：将速测卡对折，使红色药片与白色药片叠合反应，并将对折后的速测卡再次放置到37℃恒温箱装置维持反应三分钟，每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡；
步骤五：结果与空白对照卡比较，结果分为阳性和阴性，白色药片不变色或略浅蓝色均为阳性结果，白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同，为阴性结果，对阳性结果的样品，当通过速测卡完成对样品有机磷的毒性检测后，可用其他分析方法进一步确定具体衣药品种和含量；
步骤六：进行有机氯检测，取铜小勺在煤气灯或酒精灯上灼烧，直至铜勺表面覆盖一层黑色氧化铜为止；将步骤二中两片样品摩擦产生的滴液逐滴加滴在铜勺表面蒸发，然后进行灼烧，灼烧若产生绿色火焰，则表面提取液含有有机氯成分。
具体的，步骤六中若灼烧火焰呈绿色，说明检测物被有机氯农药污染，然后按上法检验，可最低检出范围为1ug有机氯。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
PH 磷酸二氢钾/MOL/L 无水磷酸氢二钠/MOL/L
6.4 27.8 72.2
6.6 38.1 61.9
6.8 49.7 50.3
7.0 61.5 38.5
7.2 71.7 28.3
7.4 80.2 19.8
7.6 86.6 13.4
7.8 90.8 9.2
表1

Claims (6)

1.一种农产品农药残留物检测方法，其特征在于：
步骤一：获得检样，由分析的整批物料的各个部分采集的少量物料成为检样，随机再抽取其中一部分供分析检验用，在样品上详细填写采样的单位、地址、日期以及采样条件和采样时的包装情况；
步骤二：检测材料准备，pH7.5缓冲液溶液：分别取15.0g磷酸氢二钠与1.59g无水磷酸二氢钾用500mL蒸馏水溶解待用，取有代表性的蔬菜样品，擦去表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取2g放入带盖瓶中，加入10mL缓冲溶液，震摇50次，静置2min以上放置待用，准备两种不同批次和生产日期的速测卡待用。
步骤三：取两个批次的两片速测卡，分别用白色药片沾取提取液，放置10min以上进行预反应，预反应后的药片表面必须保持湿润。
步骤四：将速测卡对折，使红色药片与白色药片叠合反应，维持反应三分钟，每批测定应设一个缓冲液的空白对照卡；
步骤五：结果与空白对照卡比较，结果分为阳性和阴性，白色药片不变色或略浅蓝色均为阳性结果，白色药片变为天蓝色或与空白对照卡相同，为阴性结果，对阳性结果的样品，可用其他分析方法进一步确定具体衣药品种和含量；
步骤六：进行有机氯检测，取铜小勺在煤气灯或酒精灯上灼烧，直至铜勺表面覆盖一层黑色氧化铜为止；取少量步骤二中的检测液，用乙醚混合振摇。
步骤七：将滤液逐滴加在铜勺表面蒸发，然后进行灼烧。
2.根据权利要求1所述的一种农产品农药残留物检测方法，其特征在于：所述步骤三中预反应条件保持在37°放置10min。
3.根据权利要求1所述的一种农产品农药残留物检测方法，其特征在于：所述步骤五中酶被有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制则表示为阳性，酶未被有机磷或氨基甲酸酯类农药抑制则表示为阴性，速测卡为固有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯的试纸。
4.根据权利要求1所述的一种农产品农药残留物检测方法，其特征在于：所述步骤七中若灼烧火焰呈绿色，说明检测物被有机氯农药污染，若样品中农药含量很低未显色，可将乙醚混合液浓缩蒸干，用少量混合溶解残留物，然后按上法检验，可最低检出范围为1ug有机氯。
5.根据权利要求1所述的一种农产品农药残留物检测方法，其特征在于：所述步骤二中对样品的前处理包括擦去表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，在擦去表面泥土过程中不可使用湿润的纸张去除，要保持干燥。
6.根据权利要求5所述的一种农产品农药残留物检测方法，其特征在于：在对样品进行剪成1cm左右见方碎片时，边剪裁边用试纸吸取剪裁留下的汁液。
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