CN109106916B - 一种用于治疗风湿性关节炎的中药组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于中药技术领域,公开了一种用于治疗风湿性关节炎的中药组合物,该中药组合物是由以下述重量配比的原料制备而成:大血藤8‑90份、半枝莲8‑90份、赤芍8‑90份、川红花8‑90份、合欢皮6‑80份、松节6‑80份、香附6‑80份、威灵仙5‑60份、生南星5‑60份、土茯苓4‑60份、三棱4‑60份、川芎3‑50份、王不留行3‑50份、泽兰3‑50份、木鳖子3‑50份、川木香3‑50份、海桐皮3‑50份、鸡血藤3‑50份、莪术3‑50份、木瓜3‑50份、三七3‑50份、生川乌2‑40份、生草乌2‑40份、水蛭2‑40份。本发明采取纯中药通过科学配方,严谨的制造工艺,药味浓缩,制作而成。本发明中药组合物具有较强的止痛作用,可以应用于关节、筋骨疼痛、肢体肿胀、骨折或脱位后遗症,骨化性肌炎等。
Description
技术领域
本发明属于中药技术领域,尤其涉及一种治疗风湿性关节炎的中药组合物及其制备方法。
背景技术
风湿性关节炎(rheumatic arthritis)是一种常见的急性或慢性结缔组织炎症。通常所说的风湿性关节炎是风湿热的主要表现之一,临床以关节和肌肉游走性酸楚、红肿、疼痛为特征。现有研究表明本病与A组乙型溶血性链球菌感染有关,寒冷、潮湿等因素可诱发本病,下肢大关节如膝关节、踝关节最常受累。目前,水杨酸制剂是治疗急性风湿热的最常用药物,以阿司匹林为首选药物,用药后可解热、减轻炎症,使关节症状好转,血沉下降,但水杨酸制剂常可引起恶心、呕吐、食欲减退等胃部刺激症状,同时也不能去除风湿的基本病理改变,不能预防心脏损害及其他合并症。风湿性关节炎属于中医的痹症范畴,通过中医药辨证论治可明显改善相关症状,且具有毒副作用小的优势。
发明内容
针对现有技术存在的问题,本发明提供了一种用于治疗风湿性关节炎的中药组合物及其制备方法。
该中药组合物是由以下原料及重量比组成:大血藤8-90份、半枝莲8-90份、赤芍8-90份、川红花8-90份、合欢皮6-80份、松节6-80份、香附6-80份、威灵仙5-60份、生南星5-60份、土茯苓4-60份、三棱4-60份、川芎3-50份、王不留行3-50份、泽兰3-50份、木鳖子3-50份、川木香3-50份、海桐皮3-50份、鸡血藤3-50份、莪术3-50份、木瓜3-50份、三七3-50份、生川乌2-40份、生草乌2-40份、水蛭2-40份。
优选地,大血藤10-80份、半枝莲10-80份、赤芍10-80份、川红花10-80份、合欢皮8-60份、松节8-60份、香附8-60份、威灵仙6-50份、生南星6-50份、土茯苓6-50份、三棱6-50份、川芎5-40份、王不留行5-40份、泽兰5-40份、木鳖子5-40份、川木香5-40份、海桐皮5-40份、鸡血藤5-40份、莪术5-40份、木瓜5-40份、三七5-40份、生川乌3-30份、生草乌3-30份、水蛭3-30份。
优选地,大血藤20-60份、半枝莲20-60份、赤芍20-60份、川红花20-60份、合欢皮15-50份、松节15-50份、香附15-50份、威灵仙10-40份、生南星10-40份、土茯苓10-40份、三棱10-40份、川芎8-30份、王不留行8-30份、泽兰8-30份、木鳖子8-30份、川木香8-30份、海桐皮8-30份、鸡血藤8-30份、莪术8-30份、木瓜8-30份、三七8-30份、生川乌5-20份、生草乌5-20份、水蛭5-20份。
优选地,大血藤30-50份、半枝莲30-50份、赤芍30-50份、川红花30-50份、合欢皮20-40份、松节20-40份、香附20-40份、威灵仙15-30份、生南星15-30份、土茯苓15-30份、三棱15-30份、川芎10-20份、王不留行10-20份、泽兰10-20份、木鳖子10-20份、川木香10-20份、海桐皮10-20份、鸡血藤10-20份、莪术10-20份、木瓜10-20份、三七10-20份、生川乌8-15份、生草乌8-15份、水蛭8-15份。
优选地,大血藤9份、半枝莲9份、赤芍9份、川红花9份、合欢皮6份、松节6份、香附6份、威灵仙5.5份、生南星5份、土茯苓4份、三棱4份、川芎3.5份、王不留行3.5份、泽兰3.5份、木鳖子3.5份、川木香3.5份、海桐皮3.5份、鸡血藤3.5份、莪术3.5份、木瓜3份、三七3份、生川乌2份、生草乌2份、水蛭2份。
本发明的另一目的在于提供一种制备上述任一中药组合物的方法,它包括如下步骤:
S1:按重量比称取大血藤、半枝莲、赤芍、川红花、合欢皮、松节、香附、威灵仙、生南星、土茯苓、三棱、川芎、王不留行、泽兰、木鳖子、川木香、海桐皮、鸡血藤、莪术、木瓜、三七、生川乌、生草乌和水蛭,备用;
S2:将S1中的中药材混合,加入5~8倍药材重量的水浸泡0.5~1小时,煎煮2次,每次煎煮1~1.5小时,过滤两次水煎液,药渣弃去,药液备用;
S3:将s2步骤得到的药液加热浓缩成浸膏,然后将浸膏真空干燥得到干膏,将干膏粉碎得到干膏粉末;
S4:将S3步骤得到的干膏粉末加入药学上可接受的辅料制备成药学上常用的药物制剂。
为使上述剂型能够实现,需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料,例如:填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括:淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等;崩解剂包括:淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等;润滑剂包括:硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等;助悬剂包括:聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等;粘合剂包括,淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等;甜味剂包括:糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等;矫味剂包括:甜味剂及各种香精;防腐剂包括:尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等;基质包括:PEG6000,PEG4000,虫蜡等。
本发明的有益效果是:本发明中药组合物经过小鼠耳肿胀、小鼠腹腔毛细血管通透性、大鼠足肿胀、镇痛作用(扭体法、热板法),可以用于风湿、类风湿的治疗,同时也可以用于治疗脱位引起的疼痛,各种原因引起的肢体肿胀,骨化性肌炎,陈旧型组织病变,四肢远端水肿等。另外,在实验过程中发现,本发明药物组合物与现有上市品种相比,本发明药物组合物的作用持续时间更长,而且对慢性及陈旧性损伤所致的关节疼痛具有很好的治疗作用。另外,本发明药物组合物在外用时对皮肤的刺激性更小,对急性损伤导致的疼痛也有明显的止痛效果。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步详细描述本发明的技术方案,但本发明的保护范围不局限于以下所述。
实施例1
称取大血藤8g、半枝莲8g、赤芍8g、川红花8g、合欢皮6g、松节6g、香附6g、威灵仙5g、生南星5g、土茯苓4g、三棱4g、川芎3g、王不留行3g、泽兰3g、木鳖子3g、川木香3g、海桐皮3g、鸡血藤3g、莪术3g、木瓜3g、三七3g、生川乌2g、生草乌2g、水蛭2g。将上述药材研磨成粉,按常规工艺制成药膏。
实施例2
称取大血藤90g、半枝莲90g、赤芍90g、川红花90g、合欢皮80g、松节80g、香附80g、威灵仙60g、生南星60g、土茯苓60g、三棱60g、川芎50g、王不留行50g、泽兰50g、木鳖子50g、川木香50g、海桐皮50g、鸡血藤50g、莪术50g、木瓜50g、三七50g、生川乌40g、生草乌40g、水蛭40g。将上述药材研磨成粉,按常规工艺制成药膏。
实施例3
称取大血藤10g、半枝莲10g、赤芍10g、川红花10g、合欢皮8g、松节8g、香附8g、威灵仙6g、生南星6g、土茯苓6g、三棱6g、川芎5g、王不留行5g、泽兰5g、木鳖子5g、川木香5g、海桐皮5g、鸡血藤5g、莪术5g、木瓜5g、三七5g、生川乌3g、生草乌3g、水蛭3g。将上述药材研磨成粉,按常规工艺制成药膏。
实施例4
称取大血藤80g、半枝莲80g、赤芍80g、川红花80g、合欢皮60g、松节60g、香附60g、威灵仙50g、生南星50g、土茯苓50g、三棱50g、川芎40g、王不留行40g、泽兰40g、木鳖子40g、川木香40g、海桐皮40g、鸡血藤40g、莪术40g、木瓜40g、三七40g、生川乌30g、生草乌30g、水蛭30g。将上述药材研磨成粉,按常规工艺制成药膏。
实施例5
称取大血藤20g、半枝莲20g、赤芍20g、川红花20g、合欢皮15g、松节15g、香附15g、威灵仙10g、生南星10g、土茯苓10g、三棱10g、川芎8g、王不留行8g、泽兰8g、木鳖子8g、川木香8g、海桐皮8g、鸡血藤8g、莪术8g、木瓜8g、三七8g、生川乌5g、生草乌5g、水蛭5g。将上述药材研磨成粉,按常规工艺制成药膏。
实施例6
称取大血藤60g、半枝莲60g、赤芍60g、川红花60g、合欢皮50g、松节50g、香附50g、威灵仙40g、生南星40g、土茯苓40g、三棱40g、川芎30g、王不留行30g、泽兰30g、木鳖子30g、川木香30g、海桐皮30g、鸡血藤30g、莪术30g、木瓜30g、三七30g、生川乌20g、生草乌20g、水蛭20g。将上述药材研磨成粉,按常规工艺制成药膏。
实施例7
称取大血藤30g、半枝莲30g、赤芍30g、川红花30g、合欢皮20g、松节20g、香附20g、威灵仙15g、生南星15g、土茯苓15g、三棱15g、川芎10g、王不留行10g、泽兰10g、木鳖子10g、川木香10g、海桐皮10g、鸡血藤10g、莪术10g、木瓜10g、三七10g、生川乌8g、生草乌8g、水蛭8g。将上述药材研磨成粉,按常规工艺制成药膏。
实施例8
称取大血藤50g、半枝莲50g、赤芍50g、川红花50g、合欢皮40g、松节40g、香附40g、威灵仙30g、生南星30g、土茯苓30g、三棱30g、川芎20g、王不留行20g、泽兰20g、木鳖子20g、川木香20g、海桐皮20g、鸡血藤20g、莪术20g、木瓜20g、三七20g、生川乌15g、生草乌15g、水蛭15g。按常规方法制备成洗剂。
实施例9
称取大血藤9g、半枝莲9g、赤芍9g、川红花9g、合欢皮6g、松节6g、香附6g、威灵仙5.5g、生南星5g、土茯苓4g、三棱4g、川芎3.5g、王不留行3.5g、泽兰3.5g、木鳖子3.5g、川木香3.5g、海桐皮3.5g、鸡血藤3.5g、莪术3.5g、木瓜3g、三七3g、生川乌2g、生草乌2g、水蛭2g。按常规方法制备成洗剂。
实施例10
称取大血藤8g、半枝莲8g、赤芍8g、川红花8g、合欢皮6g、松节6g、香附6g、威灵仙5g、生南星5g、土茯苓4g、三棱4g、川芎3g、王不留行3g、泽兰3g、木鳖子3g、川木香3g、海桐皮3g、鸡血藤3g、莪术3g、木瓜3g、三七3g、生川乌2g、生草乌2g、水蛭2g。具体制备方法包括:S1:按重量比称取大血藤、半枝莲、赤芍、川红花、合欢皮、松节、香附、威灵仙、生南星、土茯苓、三棱、川芎、王不留行、泽兰、木鳖子、川木香、海桐皮、鸡血藤、莪术、木瓜、三七、生川乌、生草乌和水蛭,备用;S2:将S1中的中药材混合,加入5~8倍药材重量的水浸泡0.5~1小时,煎煮2次,1~1.5小时,过滤两次水煎液,药渣弃去,药液备用;S3:将步骤二步骤的药液加热浓缩成浸膏,然后将浸膏真空干燥得到干膏,将干膏粉碎得到干膏粉末;S4:将S3步骤得到的干膏粉末加入药学上可接受的辅料制备成药学上常用的药物制剂。
实施例11
称取大血藤90g、半枝莲90g、赤芍90g、川红花90g、合欢皮80g、松节80g、香附80g、威灵仙60g、生南星60g、土茯苓60g、三棱60g、川芎50g、王不留行50g、泽兰50g、木鳖子50g、川木香50g、海桐皮50g、鸡血藤50g、莪术50g、木瓜50g、三七50g、生川乌40g、生草乌40g、水蛭40g。具体制备方法包括:S1:按重量比称取大血藤、半枝莲、赤芍、川红花、合欢皮、松节、香附、威灵仙、生南星、土茯苓、三棱、川芎、王不留行、泽兰、木鳖子、川木香、海桐皮、鸡血藤、莪术、木瓜、三七、生川乌、生草乌和水蛭,备用;S2:将S1中的中药材混合,加入5~8倍药材重量的水浸泡0.5~1小时,煎煮2次,1~1.5小时,过滤两次水煎液,药渣弃去,药液备用;S3:将步骤二步骤的药液加热浓缩成浸膏,然后将浸膏真空干燥得到干膏,将干膏粉碎得到干膏粉末;S4:将S3步骤得到的干膏粉末加入药学上可接受的辅料制备成药学上常用的药物制剂。
实施例12
称取大血藤10g、半枝莲10g、赤芍10g、川红花10g、合欢皮8g、松节8g、香附8g、威灵仙6g、生南星6g、土茯苓6g、三棱6g、川芎5g、王不留行5g、泽兰5g、木鳖子5g、川木香5g、海桐皮5g、鸡血藤5g、莪术5g、木瓜5g、三七5g、生川乌3g、生草乌3g、水蛭3g。具体制备方法包括:S1:按重量比称取大血藤、半枝莲、赤芍、川红花、合欢皮、松节、香附、威灵仙、生南星、土茯苓、三棱、川芎、王不留行、泽兰、木鳖子、川木香、海桐皮、鸡血藤、莪术、木瓜、三七、生川乌、生草乌和水蛭,备用;S2:将S1中的中药材混合,加入5~8倍药材重量的水浸泡0.5~1小时,煎煮2次,1~1.5小时,过滤两次水煎液,药渣弃去,药液备用;S3:将步骤二步骤的药液加热浓缩成浸膏,然后将浸膏真空干燥得到干膏,将干膏粉碎得到干膏粉末;S4:将S3步骤得到的干膏粉末加入药学上可接受的辅料制备成药学上常用的药物制剂。
实施例13
称取大血藤80g、半枝莲80g、赤芍80g、川红花80g、合欢皮60g、松节60g、香附60g、威灵仙50g、生南星50g、土茯苓50g、三棱50g、川芎40g、王不留行40g、泽兰40g、木鳖子40g、川木香40g、海桐皮40g、鸡血藤40g、莪术40g、木瓜40g、三七40g、生川乌30g、生草乌30g、水蛭30g。具体制备方法包括:S1:按重量比称取大血藤、半枝莲、赤芍、川红花、合欢皮、松节、香附、威灵仙、生南星、土茯苓、三棱、川芎、王不留行、泽兰、木鳖子、川木香、海桐皮、鸡血藤、莪术、木瓜、三七、生川乌、生草乌和水蛭,备用;S2:将S1中的中药材混合,加入5~8倍药材重量的水浸泡0.5~1小时,煎煮2次,1~1.5小时,过滤两次水煎液,药渣弃去,药液备用;S3:将步骤二步骤的药液加热浓缩成浸膏,然后将浸膏真空干燥得到干膏,将干膏粉碎得到干膏粉末;S4:将S3步骤得到的干膏粉末加入药学上可接受的辅料制备成药学上常用的药物制剂。
实施例14
称取大血藤20g、半枝莲20g、赤芍20g、川红花20g、合欢皮15g、松节15g、香附15g、威灵仙10g、生南星10g、土茯苓10g、三棱10g、川芎8g、王不留行8g、泽兰8g、木鳖子8g、川木香8g、海桐皮8g、鸡血藤8g、莪术8g、木瓜8g、三七8g、生川乌5g、生草乌5g、水蛭5g。具体制备方法包括:S1:按重量比称取大血藤、半枝莲、赤芍、川红花、合欢皮、松节、香附、威灵仙、生南星、土茯苓、三棱、川芎、王不留行、泽兰、木鳖子、川木香、海桐皮、鸡血藤、莪术、木瓜、三七、生川乌、生草乌和水蛭,备用;S2:将S1中的中药材混合,加入5~8倍药材重量的水浸泡0.5~1小时,煎煮2次,1~1.5小时,过滤两次水煎液,药渣弃去,药液备用;S3:将步骤二步骤的药液加热浓缩成浸膏,然后将浸膏真空干燥得到干膏,将干膏粉碎得到干膏粉末;S4:将S3步骤得到的干膏粉末加入药学上可接受的辅料制备成药学上常用的药物制剂。
实施例15
称取大血藤60g、半枝莲60g、赤芍60g、川红花60g、合欢皮50g、松节50g、香附50g、威灵仙40g、生南星40g、土茯苓40g、三棱40g、川芎30g、王不留行30g、泽兰30g、木鳖子30g、川木香30g、海桐皮30g、鸡血藤30g、莪术30g、木瓜30g、三七30g、生川乌20g、生草乌20g、水蛭20g。具体制备方法包括:S1:按重量比称取大血藤、半枝莲、赤芍、川红花、合欢皮、松节、香附、威灵仙、生南星、土茯苓、三棱、川芎、王不留行、泽兰、木鳖子、川木香、海桐皮、鸡血藤、莪术、木瓜、三七、生川乌、生草乌和水蛭,备用;S2:将S1中的中药材混合,加入5~8倍药材重量的水浸泡0.5~1小时,煎煮2次,1~1.5小时,过滤两次水煎液,药渣弃去,药液备用;S3:将步骤二步骤的药液加热浓缩成浸膏,然后将浸膏真空干燥得到干膏,将干膏粉碎得到干膏粉末;S4:将S3步骤得到的干膏粉末加入药学上可接受的辅料制备成药学上常用的药物制剂。
实施例16
称取大血藤30g、半枝莲30g、赤芍30g、川红花30g、合欢皮20g、松节20g、香附20g、威灵仙15g、生南星15g、土茯苓15g、三棱15g、川芎10g、王不留行10g、泽兰10g、木鳖子10g、川木香10g、海桐皮10g、鸡血藤10g、莪术10g、木瓜10g、三七10g、生川乌8g、生草乌8g、水蛭8g。具体制备方法包括:S1:按重量比称取大血藤、半枝莲、赤芍、川红花、合欢皮、松节、香附、威灵仙、生南星、土茯苓、三棱、川芎、王不留行、泽兰、木鳖子、川木香、海桐皮、鸡血藤、莪术、木瓜、三七、生川乌、生草乌和水蛭,备用;S2:将S1中的中药材混合,加入5~8倍药材重量的水浸泡0.5~1小时,煎煮2次,1~1.5小时,过滤两次水煎液,药渣弃去,药液备用;S3:将步骤二步骤的药液加热浓缩成浸膏,然后将浸膏真空干燥得到干膏,将干膏粉碎得到干膏粉末;S4:将S3步骤得到的干膏粉末加入药学上可接受的辅料制备成药学上常用的药物制剂。
实施例17
称取大血藤50g、半枝莲50g、赤芍50g、川红花50g、合欢皮40g、松节40g、香附40g、威灵仙30g、生南星30g、土茯苓30g、三棱30g、川芎20g、王不留行20g、泽兰20g、木鳖子20g、川木香20g、海桐皮20g、鸡血藤20g、莪术20g、木瓜20g、三七20g、生川乌15g、生草乌15g、水蛭15g。具体制备方法包括:S1:按重量比称取大血藤、半枝莲、赤芍、川红花、合欢皮、松节、香附、威灵仙、生南星、土茯苓、三棱、川芎、王不留行、泽兰、木鳖子、川木香、海桐皮、鸡血藤、莪术、木瓜、三七、生川乌、生草乌和水蛭,备用;S2:将S1中的中药材混合,加入5~8倍药材重量的水浸泡0.5~1小时,煎煮2次,1~1.5小时,过滤两次水煎液,药渣弃去,药液备用;S3:将步骤二步骤的药液加热浓缩成浸膏,然后将浸膏真空干燥得到干膏,将干膏粉碎得到干膏粉末;S4:将S3步骤得到的干膏粉末加入药学上可接受的辅料制备成药学上常用的药物制剂。
实施例18
称取大血藤9g、半枝莲9g、赤芍9g、川红花9g、合欢皮6g、松节6g、香附6g、威灵仙5.5g、生南星5g、土茯苓4g、三棱4g、川芎3.5g、王不留行3.5g、泽兰3.5g、木鳖子3.5g、川木香3.5g、海桐皮3.5g、鸡血藤3.5g、莪术3.5g、木瓜3g、三七3g、生川乌2g、生草乌2g、水蛭2g。具体制备方法包括:S1:按重量比称取大血藤、半枝莲、赤芍、川红花、合欢皮、松节、香附、威灵仙、生南星、土茯苓、三棱、川芎、王不留行、泽兰、木鳖子、川木香、海桐皮、鸡血藤、莪术、木瓜、三七、生川乌、生草乌和水蛭,备用;S2:将S1中的中药材混合,加入5~8倍药材重量的水浸泡0.5~1小时,煎煮2次,1~1.5小时,过滤两次水煎液,药渣弃去,药液备用;S3:将步骤二步骤的药液加热浓缩成浸膏,然后将浸膏真空干燥得到干膏,将干膏粉碎得到干膏粉末;S4:将S3步骤得到的干膏粉末加入药学上可接受的辅料制备成药学上常用的药物制剂。
下面通过具体的药学试验来证明本发明的有益效果:
一、本发明组合物的对二甲苯致小鼠耳肿胀试验
1.研究目的
考察本发明药物(暂定商品名:郑氏祛湿通络洗药)对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响,评价其抗炎作用。
2.实验材料
2.1实验药物
按实施例9的剂量制备的中药洗剂,成都体育学院附属体育医院标准化制剂室提供;双氯芬酸二乙胺乳胶剂,北京诺华制药有限公司,批号:VP1076;二甲苯,由成都科龙化工试剂厂生产,批号:20101225。
2.2实验动物 KM小鼠,SPF级,全♂,体重(20±2)g,由成都达硕实验动物有限公司提供,实验动物合格证号为:SCXK(川)2013-24。
3.实验方法
取健康雄性KM小鼠50只,适应性喂养3天后,按体重随机分为5组,即空白对照组、双氯芬酸二乙胺乳胶剂对照组(阳性对照组)、蒸馏水作为阴性对照组、郑氏祛湿通络洗药高剂量组(按实施例9的剂量制备的中药洗剂浓缩9倍所得)、郑氏祛湿通络洗药中剂量组(按实施例9的剂量制备的中药洗剂),每组10只。在小鼠右耳的前后两面涂布100%二甲苯液致炎,每只0.02mL。30min后,分别在各组小鼠右耳炎症部位给予药(空白组给予生理盐水),给药剂量为5g·kg-1·2h-1,左耳不作任何处理。4h后,用棉球擦掉药物,将小鼠处死,随即沿耳廓基线剪下双耳,去毛,叠加完整后用直径6mm打孔器取相同部位的耳片,在万分之一的自动分析天平上精确称重,计算肿胀度及肿胀度抑制率。肿胀度=右耳重量-左耳的重量;耳肿胀抑制率(%)﹦[(阴性对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度)/阴性对照组平均肿胀度]×100%。结果见表1。
4.实验结果
注:与空白对照组比较*P<0.05,**P<0.01
从表1可知,与空白组比较,郑氏祛湿通络洗药各剂量组耳肿胀度均较空白对照组显著降低,具有显著统计学意义(P<0.01),高、中两个剂量组抑制率分别为36.67%和39.71%。
5.实验结论
在本实验条件下,郑氏祛湿通络洗药对二甲苯致小鼠耳肿胀有良好的抑制作用,提示郑氏祛湿通络洗药对二甲苯所致的急性炎症有良好的拮抗作用。
二、本发明组合物的对对小鼠腹腔毛细血管通透性亢进试验
1.研究目的
考察(暂定商品名:郑氏祛湿通络洗药)对小鼠腹腔毛细血管通透性亢进的影响,评价其抗炎作用。
2.实验材料
2.1实验药物
按实施例9的剂量比例制备的洗剂,成都体育学院附属体育医院标准化制剂室提供;双氯芬酸二乙胺乳胶剂,北京诺华制药有限公司,批号:VP1076;冰醋酸,由成都化学试剂厂生产,批号:110912。
2.2实验动物
KM小鼠,SPF级,全♂,体重(20±2)g,由成都达硕实验动物有限公司提供,实验动物合格证号为:SCXK(川)2013-24。
3.实验方法
取健康雄性KM小鼠50只,适应性喂养3天,按体重随机分为5组,即即空白对照组、双氯芬酸二乙胺乳胶剂对照组(阳性对照组)、蒸馏水作为阴性对照组、郑氏祛湿通络洗药高剂量组(按实施例9的剂量制备的中药洗剂浓缩9倍所得)、郑氏祛湿通络洗药中剂量组(按实施例9的剂量制备的中药洗剂),每组10只。将小鼠腹部备皮,在小鼠腹部分别给药,每日3次,给药量5g/kg,连续给药7d。末次给药后1h后,小鼠尾静脉注射1%伊文思蓝生理盐水溶液0.1mL/10g,随即腹腔注射0.6%冰醋酸溶液0.1mL/10g致炎。20min后,将小鼠处死,剖开腹腔,用6mL生理盐水冲洗腹腔,轻柔腹部数分钟,用一次性吸管吸取冲洗液,合并冲洗液于10mL试管中,3000r/min离心15min,取上清液,测定590nm处吸光度值(ABS),表示腹腔液中依文思蓝的含量。结果见表2。
4.实验结果
注:与空白对照组比较*P<0.05,**P<0.01
由表2可知,与空白对照组比较,郑氏祛湿通络洗药高剂量组OD值较空白对照组显著降低,具有显著地统计学意义(P<0.01),提示郑氏祛湿通络洗药高剂量冰醋酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性亢进具有较好的抑制作用。
5.实验结论
在本实验条件下,郑氏祛湿通络洗药对冰醋酸所致的小鼠腹腔毛细血管通透性亢进具有一定的抑制作用,提示郑氏祛湿通络洗药对冰醋酸所致的急性炎症具有一定的拮抗作用。
三、本发明组合物的对蛋清性大鼠足肿胀的试验
1.研究目的
考察本发明(暂定商品名:郑氏祛湿通络洗药)对大鼠蛋清性足肿胀的影响,评价其抗炎作用。
2.实验材料
2.1实验药物 按实施例9的剂量比例制备的洗剂,成都体育学院附属体育医院标准化制剂室提供;双氯芬酸二乙胺乳胶剂,北京诺华制药有限公司,批号:VP1076。所有药物临用前新鲜配制。
2.2实验动物 SD大鼠,SPF级,全♂,体重(200±20)g,由成都达硕实验动物有限公司提供,实验动物合格证号为:SCXK(川)2013-24。
2.4实验仪器 TM025大鼠足肿测定仪,成都泰盟科技有限公司生产。
3.实验方法
取健康雄性SD大鼠50只,体重180~220g。适应性喂养3天后,随机分为5组,即即空白对照组、模型组、双氯芬酸二乙胺乳胶剂对照组(阳性对照组)蒸馏水作为阴性对照组、郑氏祛湿通络洗药高剂量组(按实施例9的剂量制备的中药洗剂浓缩9倍所得)、郑氏祛湿通络洗药中剂量组(按实施例9的剂量制备的中药洗剂),每组10只。分别踝关节涂抹给药,给药量5g/kg,每日用纱布包裹12h,连续给药3d,空白组、模型对照组给予等体积的生理盐水,分组及给药剂量见表3。实验前在各鼠右后足踝关节处作标记,用大鼠足容积测定仪测定各鼠足容积两次,取平均值作为正常足容积。末次给药后30min,每只大鼠右后足跖部皮下进针至踝关节附近皮下,注射10%新鲜蛋清溶液0.1ml致炎,分别于致炎后30min、60min、120min、240min、360min测定致炎足容积,计算各大鼠致炎前后右后足跖容积变化值,以足肿胀度表示药物的抗炎效应。结果见表3。
4.实验结果
注:与空白对照组比较,*P<0.05;**P<0.01;***P<0.001
由表3可知,与空白对照组比较,郑氏祛湿通络洗药高、中剂量组在多个时间点大鼠足容积增加值均较空白对照在显著降低,有显著的统计学意义(P<0.05),尤以致炎后240min和360min最为明显,提示郑氏祛湿通络洗药对大鼠蛋清性足肿胀具有良好的拮抗作用。
5.实验结论
在本实验条件下,郑氏祛湿通络洗药具有拮抗蛋清致大鼠足肿胀的作用,提示其对蛋清所致的急性炎症具有拮抗作用。
四、本发明药物的镇痛作用
1.研究目的
考察本发明药物(暂定商品名:郑氏祛湿通络洗药)对热刺激致痛反应的影响,评价其对镇痛作用。
2.实验材料
2.1实验药物 按实施例9的剂量比例制备的洗剂,成都体育学院附属体育医院标准化制剂室提供;双氯芬酸二乙胺乳胶剂,北京诺华制药有限公司,批号:VP1076。
2.2实验动物 KM小鼠,SPF级,全♀,体重(20±2)g,由成都达硕实验动物有限公司提供,实验动物合格证号为:SCXK(川)2013-24。
2.3实验仪器 YLS-6A智能热板仪,山东省医学科学院设备站生产。
3.实验方法
取健康雌性筛选合格KM小鼠50只,适应性喂养3天,按体重随机分为5组,即空白对照组、双氯芬酸二乙胺乳胶剂对照组(阳性对照组)、蒸馏水作为阴性对照组、郑氏祛湿通络洗药高剂量组(按实施例9的剂量制备的中药洗剂浓缩9倍所得)、郑氏祛湿通络洗药中剂量组(按实施例9的剂量制备的中药洗剂),每组10只。分别测定每组每只小鼠的痛阈值2次,每次间隔5min,取平均值作为给药前的正常痛阈值。以5g/kg的给药量平均涂抹小鼠四足,每隔60min给药1次,共给药3次,分组及剂量见表4。末次给药后30min、60min、1200min、240min、360min各测定小鼠痛阈值一次,痛阈值大于60s者以60s计。结果见表4。
4.实验结果
注:与空白对照组比较,*P<0.05;**P<0.01,***P<0.001
由表4可知,与空白对照组比较,郑氏祛湿通络洗药高剂量组在给药后120min和240min痛阈值较空白对照组显著增高(P<0.05),郑氏祛湿通络洗药中剂量组仅给药后30min痛阈值较空白对照组显著增高(P<0.05)。
5.实验结论
在本实验条件下,郑氏祛湿通络洗药对热刺激所致的小鼠痛阈值有一定的提高作用,提示郑氏祛湿通络洗药具有一定的镇痛作用。
五、本发明药物对皮肤刺激性实验
1.研究目的
考察本发明物(暂定商品名:郑氏祛湿通络洗药)对家兔皮肤刺激性的影响,评价其有无皮肤刺激性反应及其严重程度。
2.实验材料
2.1实验药物与试剂
按实施例9的剂量比例制备的洗剂,由成都体育学院附属体育医院药剂科提供;硫化钠,由成都市科伦化工试剂厂提供。
2.2实验动物
家兔,SPF级,体重(2±0.5)kg,由成都达硕实验动物有限公司提供,实验动物合格证号为:SCXK(川)2013-24。
3.实验方法
取家兔12只,雌雄各半,试验前24小时对给药区(通常在背部)进行脱毛处理(可剪、剃或用适宜的脱毛剂),随机分为空白对照组、郑氏祛湿通络洗药高剂量组(按实施例9的剂量制备的中药洗剂浓缩9倍所得)、郑氏祛湿通络洗药中剂量组(按实施例9的剂量制备的中药洗剂),每组4只。去毛范围左、右各150cm2。给药前应检查去毛皮肤是否因去毛而受损伤,有损伤的皮肤不宜进行试验。取郑氏祛湿通络洗药0.5ml直接涂布于一侧已去毛的皮肤上,然后用二层纱布和一层玻璃纸或类似物覆盖,再用无刺激性胶布和绷带加以固定;另一侧涂布生理盐水作对照。贴敷时间至少4小时。贴敷结束后,除去受试物并用温水或无刺激性溶剂清洁给药部位。连续在同一部位给药,每次给药时间相同,连续给药7天。在自然光线或全光谱灯光下观察皮肤反应。按表5给出的评分标准对皮肤红斑和水肿进行评分。
每次去除药物后1小时以及再次贴敷前,观察及记录红斑及水肿、涂敷部位是否有色素沉着、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲薄情况及其发生时间及消退时间,并对红斑及水肿进行评分。末次贴敷后,在去除药物后24、48和72小时肉眼观察并记录涂敷部位有无红斑和水肿等情况。如存在持久性损伤,有必要延长观察期限以评价上述变化的恢复情况和时间。但延长期一般不超过14天。对出现中度及以上皮肤刺激性的动物应在观察期结束时对给药局部进行组织病理学检查。计算每一观察时间点各组积分均值,然后计算观察期限内每天每只动物积分均值,按表6进行刺激强度评价。
表5皮肤刺激反应评分标准
表6皮肤刺激强度评价标准
4.实验结果
每次给药后,各组家兔皮肤均无红斑及水肿、涂敷部位无色素沉着和出血点以及无皮肤粗糙或皮肤菲薄等情况,结果见表7。
表7郑氏祛湿通络洗药皮肤刺激性实验
5.实验结论
郑氏祛湿通络洗药无皮肤刺激性。
六、本发明药物对皮肤过敏性实验
1.研究目的
考察本发明物(暂定商品名:郑氏祛湿通络洗药)对豚鼠皮肤过敏的影响,评价其有无皮肤过敏性反应及其严重程度。
2.实验材料
2.1实验药物与试剂
按实施例9的剂量比例制备的洗剂,由成都体育学院附属体育医院药剂科提供;2,4-二硝基氯代苯(DNCB)、丙酮、硫化钠,由成都市科伦化工试剂厂提供。
2.2实验动物
豚鼠,SPF级,雌雄各半,体重(350±50)g,由成都达硕实验动物有限公司提供,实验动物合格证号为:SCXK(川)2013-24。
3.实验方法
3.1分组
取健康豚鼠20只,雌雄各半,体重300~400g。适应性喂养3天后,随机分为2组,即阳性对照组、郑氏祛湿通络洗药组。
3.2致敏
对实验动物的两侧皮肤进行脱毛,面积5cm×2cm,不干预保持24小时,然后现在豚鼠左侧涂郑氏祛湿通络洗药药液0.2ml、阳性对照组涂1%DNCB(采用丙酮作为有机溶剂,激发溶液0.1%)0.2ml,接触6h后洗除受试物,初次致敏试验后第7天再分别用同法对实验动物脱毛区涂抹药物,洗除方法同对照组,第14天同第7天。
3.3激发及观察
3次致敏试验后,间隔14天后,实验动物右侧测试区涂郑氏祛湿通络洗药药液0.2ml,阳性对照组涂0.1%DNCB 0.2ml,于接触6小时后用温水洗除受试物,开始激发解除实验。分别于0、24、48、72小时,对皮肤稳定、颜色、性质及有无皮损情况进行观察,记录过敏反应等(表8)。统计两组实验动物过敏例数,按过敏率(%)=[过敏反应例数/样本数]×100%公式计算各组过敏率,评估过敏反应情况。
表8过敏反应症状
0正常 | 7呼吸急促 | 14步态不稳 |
1躁动 | 8排尿 | 15跳跃 |
2竖毛 | 9排粪 | 16喘息 |
3颤抖 | 10流泪 | 17痉挛 |
4搔鼻 | 11呼吸困难 | 18旋转 |
5喷嚏 | 12哮鸣音 | 19潮式呼吸 |
6咳嗽 | 13紫癜 | 20死亡 |
3.5结果评价
按文献判断过敏反应发生程度。计算过敏反应发生率。根据过敏反应发生率和发生程度进行综合判断。
4.实验结果
激发后72小时内,郑氏祛湿通络洗药组未见任何皮肤异常、生理活动异常、行为异常动物,无致敏动物,致敏率为0%。阳性对照组激发后,2只实验动物15分钟内出现皮肤水肿、皮疹等皮损表现;同时在给药后2-6小时,阳性对照组动物出现了6只较为严重过敏反应,阳性对照组实验动物过敏反应在24小时后显著好转,48小时基本消退,评分显著下降,72小时后总评分为9分。
表9郑氏祛湿通络洗药豚鼠皮肤过敏性实验(n=10)
5.实验结论
郑氏祛湿通络洗药无皮肤刺激性。
七、本发明药物对家兔慢性软组织损伤实验
1.研究目的
考察本发明物(暂定商品名:郑氏祛湿通络洗药)对家兔慢性软组织损伤的疗效,初步探讨其作用机理。
2.实验材料
2.1实验药物与试剂 按实施例9的剂量比例制备的洗剂,成都体育学院附属体育医院标准化制剂室提供;青鹏软膏,青海省通天河藏药制药有限责任公司,批号:170802。
2.2实验动物 家兔,雌性各半,体重2-2.5kg,由成都达硕实验动物有限公司提供,实验动物合格证号为:SCXK(川)2013-24。
3.实验方法
3.1造模 将家兔固定于实验台上,在双侧小腿三头肌部位剃毛后垫以楔形木块,用重量为200g的砝码,通过一条内径为10cm,长为30cm的直管,让砝码在管内自由坠落,打击同一个部位,每只动物打击20次。造成动物急性软组织损伤的病理模型,并证实无骨折后即可进行试验治疗。造模成功的动物,造膜部位局部肿胀,皮肤苍白,皮温下降,肢体活动障碍。
3.2分组及给药 取造模成功的家兔60只,雌雄各半,随机分为5组,每组12只,依次为模型对照组、阴性对照组、阳性对照组、郑氏祛湿通络洗药高剂量组(按实施例9的剂量制备的中药洗剂浓缩9倍所得)、郑氏祛湿通络洗药中剂量组(按实施例9的剂量制备的中药洗剂)。模型对照组给予布胶固定,阴性对照组给予蒸馏水外擦(5g/kg)后用布胶固定,阳性对照组给予青鹏软膏(5g/kg)后用布胶固定,郑氏祛湿通络洗药高剂量组给予郑氏祛湿通络洗药(5g/kg)后用布胶固定,郑氏祛湿通络洗药中剂量组给予郑氏祛湿通络洗药(5g/kg)后用布胶固定.每天换药1次。
3.3指标观察 兔子造模后分笼饲养并做好标记,自由进食饮水。在造模后6h、1d、2d、3d、5d、7d、14d、21d分别进行测量,记录兔子下肢胫骨下周径。于第3d、7d、14d分别取两只,第21d全部动物按照外表观察评分标准(表10)进行评分,然后分别全部处死,取打击部位肌肉组织做病理切片组织学评分标准(表11)进行评分。第21d,将兔子全部麻醉,腹腔主动脉取血10mL,离心(1500r/min)30min,取血清,检测血清中的IL-1β、VEGF、TNF-α(放免法)。
表10外表观察评分标准
分值 | 标准 |
0 | 完全恢复,同正常软组织 |
1 | 表面无出血灶,切开软组织偶见点状出血或瘀血灶,无水肿 |
2 | 表面见0.5-1cm<sup>2</sup>出血或瘀血灶,水肿的面积小于1cm<sup>2</sup> |
3 | 表面见大于1cm<sup>2</sup>的出血、瘀血、水肿 |
表11组织学观察评分标准
4.实验结果
造模后家兔胫骨结节明显肿大,且1天后达到最大肿胀状态,然后逐渐恢复。给药后第7天,少数家兔肿胀完全恢复;空白组胫骨结节下周径肿胀值在造模后第5天与造模后第1天比较,明显降低,其差异有统计学意义(表12)。与模型组比较,郑氏祛湿通络洗药高剂量组胫骨结节肿胀值分别在造模后6h、1d、2d、3d明显降低(P<0.05);郑氏祛湿通络洗药中剂量组分别在造模后1d、2d、3d明显降低(P<0.05),见表13。
注:与模型组比较,*P<0.05
外表评分显示,模型组显著高于阳性组、郑氏祛湿通络洗药高、中剂量组,提示郑氏祛湿通络洗药具有明显的治疗效果。(见表14)
表14郑氏祛湿通络洗药对慢性软组织损伤家兔治疗评分
与模型组比较,郑氏祛湿通络洗药高、中剂量组IL-1β、VEGF、TNF-α均显著下降,具有统计学意义(P<0.05),见表15。
注:与模型对照组比较*P<0.05。
5.实验结论
郑氏祛湿通络洗药对慢性软组织损伤家兔具有良好的治疗效果,提示郑氏祛湿通络洗药具有治疗慢性软组织损伤等慢性、陈旧性损伤的功效。
另外,在实验过程中发现,本发明药物组合物与现有上市品种相比,本发明药物组合物的作用持续时间更长。另外,本发明药物组合物在外用时对皮肤的刺激性更小,对慢性及陈旧性损伤导致的关节疼痛具有明显的止痛效果,而且对急性损伤导致的疼痛也有明显的止痛效果。以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种用于治疗风湿性关节炎的中药组合物,其特征在于:该中药组合物的原料药由如下组成:大血藤8-90份、半枝莲8-90份、赤芍8-90份、川红花8-90份、合欢皮6-80份、松节6-80份、香附6-80份、威灵仙5-60份、生南星5-60份、土茯苓4-60份、三棱4-60份、川芎3-50份、王不留行3-50份、泽兰3-50份、木鳖子3-50份、川木香3-50份、海桐皮3-50份、鸡血藤3-50份、莪术3-50份、木瓜3-50份、三七3-50份、生川乌2-40份、生草乌2-40份、水蛭2-40份。
2.如权利要求1所述的一种用于治疗风湿性关节炎的中药组合物,其特征在于:该中药组合物的原料药由如下组成:大血藤10-80份、半枝莲10-80份、赤芍10-80份、川红花10-80份、合欢皮8-60份、松节8-60份、香附8-60份、威灵仙6-50份、生南星6-50份、土茯苓6-50份、三棱6-50份、川芎5-40份、王不留行5-40份、泽兰5-40份、木鳖子5-40份、川木香5-40份、海桐皮5-40份、鸡血藤5-40份、莪术5-40份、木瓜5-40份、三七5-40份、生川乌3-30份、生草乌3-30份、水蛭3-30份。
3.如权利要求1所述的一种用于治疗风湿性关节炎的中药组合物,其特征在于:该中药组合物的原料药由如下组成:大血藤20-60份、半枝莲20-60份、赤芍20-60份、川红花20-60份、合欢皮15-50份、松节15-50份、香附15-50份、威灵仙10-40份、生南星10-40份、土茯苓10-40份、三棱10-40份、川芎8-30份、王不留行8-30份、泽兰8-30份、木鳖子8-30份、川木香8-30份、海桐皮8-30份、鸡血藤8-30份、莪术8-30份、木瓜8-30份、三七8-30份、生川乌5-20份、生草乌5-20份、水蛭5-20份。
4.如权利要求1所述的一种用于治疗风湿性关节炎的中药组合物,其特征在于:该中药组合物的原料药由如下组成:大血藤30-50份、半枝莲30-50份、赤芍30-50份、川红花30-50份、合欢皮20-40份、松节20-40份、香附20-40份、威灵仙15-30份、生南星15-30份、土茯苓15-30份、三棱15-30份、川芎10-20份、王不留行10-20份、泽兰10-20份、木鳖子10-20份、川木香10-20份、海桐皮10-20份、鸡血藤10-20份、莪术10-20份、木瓜10-20份、三七10-20份、生川乌8-15份、生草乌8-15份、水蛭8-15份。
5.如权利要求1所述的一种用于治疗风湿性关节炎的中药组合物,其特征在于:该中药组合物的原料药由如下组成:大血藤9份、半枝莲9份、赤芍9份、川红花9份、合欢皮6份、松节6份、香附6份、威灵仙5.5份、生南星5份、土茯苓4份、三棱4份、川芎3.5份、王不留行3.5份、泽兰3.5份、木鳖子3.5份、川木香3.5份、海桐皮3.5份、鸡血藤3.5份、莪术3.5份、木瓜3份、三七3份、生川乌2份、生草乌2份、水蛭2份。
6.一种制备权利要求1-5任意一项权利要求所述中药组合物的方法,其特征在于:它包括如下步骤:
S1:按重量比称取大血藤、半枝莲、赤芍、川红花、合欢皮、松节、香附、威灵仙、生南星、土茯苓、三棱、川芎、王不留行、泽兰、木鳖子、川木香、海桐皮、鸡血藤、莪术、木瓜、三七、生川乌、生草乌和水蛭,备用;
S2:将S1步骤中的中药材混合,加入5~8倍药材重量的水浸泡0.5~1小时,煎煮2次,每次煎煮1~1.5小时,过滤两次水煎液,药渣弃去,药液备用;
S3:将S2步骤得到的药液加热浓缩成浸膏,然后将浸膏真空干燥得到干膏,将干膏粉碎得到干膏粉末;
S4:将S3步骤得到的干膏粉末加入药学上可接受的辅料制备成药学上常用的药物制剂。
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