CN109078069A - 阴道黏膜抗菌凝胶剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

阴道黏膜抗菌凝胶剂及其制备方法，它涉及一种妇科用凝胶剂及其制备方法。本发明是为了解决现有妇科凝胶在治疗炎症的同时，破坏阴道内的酸碱平衡和菌群平衡的技术问题。本发明抗菌凝胶剂中含有槐角提取物、月季花提取物、卡波姆、吐温80、甘油、泊洛沙姆188和尼泊金甲酯。制备方法：一、称取原料；二、将甘油、吐温80和纯化水混合搅匀，将泊洛沙姆188和槐角提取物及月季花提取物加入；三、称取卡波姆0.3g，加入20g纯化水至完全溶胀，得溶胀液；四、将混悬液加至溶胀液中，再加入尼泊金甲酯，即得。本发明的凝胶在治疗女性阴道炎症的同时，保持阴道内的酸碱平衡，不会破坏阴道内的菌群平衡，本发明凝胶在治疗的同时不破坏阴道的微生态。

Description

阴道黏膜抗菌凝胶剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种妇科用凝胶剂及其制备方法。

背景技术

阴道炎即阴道炎症，是导致外阴阴道症状如瘙痒、灼痛、刺激和异常流液的一组病症。正常健康妇女阴道由于解剖组织的特点对病原体的侵入有自然防御功能。如阴道口的闭合，阴道前后壁紧贴，阴道上皮细胞在雌激素的影响下的增生和表层细胞角化，阴道酸碱度保持平衡，使适应碱性的病原体的繁殖受到抑制，而颈管黏液呈碱性，当阴道的自然防御功能受到破坏时，病原体易于侵入，导致阴道炎症。正常情况下有需氧菌及厌氧菌寄居在阴道内，形成正常的阴道菌群。任何原因将阴道与菌群之间的生态平衡打破，也可形成条件致病菌。临床上常见有：细菌性阴道病(占有症状女性22％～50％)、念珠菌性阴道炎(17％～39％)、滴虫性阴道炎(4％～35％)、老年性阴道炎、幼女性阴道炎。感染阴道的提取物中大约90％的真菌是白色念珠菌，而大肠杆菌，金黄色葡萄球菌和乙型链球菌则是细菌性阴道炎的常见致病菌。

妇科凝胶是一种妇科药品，凝胶剂，用于各种妇科阴道炎、宫颈炎的治疗，包括：细菌性阴道炎、滴虫性阴道炎、混合性阴道炎、淋球菌感染、慢性宫颈炎、宫颈糜烂。具有消炎、杀菌、止痒作用。对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、淋球菌、白色念珠球菌、真菌、酵母菌等病原体微生物的生长有明显抑制作用。但是现有的妇科凝胶在治疗炎症的同时，导致阴道无法存留应有的分泌物与有益细菌，破坏阴道内的酸碱平衡，破坏阴道内的菌群平衡，结果出现阴道干涩，继发性的影响女性生殖健康。乳酸杆菌是健康妇女阴道内存在的正常微生物群落，是优势菌，占阴道微生物95％以上。但常用妇科用药由于抑菌治疗可能会出现菌群失衡及pH值失调的问题。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有妇科凝胶在治疗炎症的同时，破坏阴道内的酸碱平衡和菌群平衡的技术问题，提供了一种阴道黏膜抗菌凝胶剂的制备方法。

每单位(5g)阴道黏膜抗菌凝胶剂中含有槐角提取物0.1g、月季花提取物0.2g、卡波姆0.03g、吐温80 0.5g、甘油1g、泊洛沙姆188 0.1g和添加量为阴道黏膜抗菌凝胶剂总质量0.1％的尼泊金甲酯。

阴道黏膜抗菌凝胶剂的制备方法按照以下步骤进行：

一、称取1g槐角提取物、2g月季花提取物、0.3g卡波姆、吐温80 5g、甘油10g、泊洛沙姆188.1g；

二、将泊洛沙姆188 1g和槐角提取物1g进行充分研磨得研磨混合物，将甘油10g、吐温80 5g和纯化水20ml混合搅匀，将研磨混合物及月季花提取物2g加入其中，搅拌均匀得混悬液；

三、称取卡波姆0.3g，加入20g纯化水至完全溶胀，得溶胀液；

四、将混悬液加至溶胀液中，再加入添加量为阴道黏膜抗菌凝胶剂总质量0.1％尼泊金甲酯，即得阴道黏膜抗菌凝胶剂。

本发明具有如下优点：

1、本发明的凝胶能够起到较好的抑菌效果对白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌都有较好的抑菌作用，对比洁尔阴洗液(洁尔阴洗液的蛇床子、艾叶、独活、石菖蒲)，最低抑菌浓度和最低杀菌浓度均低于洁尔阴洗液。临床治疗中也表现为良好的治疗效果。

2、本发明的凝胶在治疗女性阴道炎症的同时，保持阴道内的酸碱平衡，不会破坏阴道内的菌群平衡，并且具有雌激素样作用，保持不会因抑菌效果产生干涩。本发明凝胶在治疗的同时不破坏阴道的微生态。

3、槐角提取物-月季花提取组合能够有明显的抑菌效果。本发明对大肠杆菌。金黄色葡萄球菌、白色念珠菌等具有杀菌作用。并且能够长时间的对阴道提供保湿效果，润滑内部阴道粘膜，另外还可以对阴道的异味进行去异味处理，降低致病菌数目，维持阴道微生态平衡、改善阴道清洁度、提高阴道粘膜免疫力。

具体实施方式

本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

具体实施方式一：本实施方式每单位阴道黏膜抗菌凝胶剂中含有槐角提取物0.1g、月季花提取物0.2g、卡波姆0.03g、吐温80 0.5g、甘油1g、泊洛沙姆188 0.1g和添加量为阴道黏膜抗菌凝胶剂总质量0.1％的尼泊金甲酯。

具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是阴道黏膜抗菌凝胶剂的制备方法按照以下步骤进行：

一、称取1g槐角提取物、2g月季花提取物、0.3g卡波姆、吐温80 5g、甘油10g、泊洛沙姆188.1g；

二、将泊洛沙姆188 1g和槐角提取物1g进行充分研磨得研磨混合物，将甘油10g、吐温80 5g和纯化水20ml混合搅匀，将研磨混合物及月季花提取物2g加入其中，搅拌均匀得混悬液；

三、称取卡波姆0.3g，加入20g纯化水至完全溶胀，得溶胀液；

四、将混悬液加至溶胀液中，再加入添加量为阴道黏膜抗菌凝胶剂总质量0.1％尼泊金甲酯，即得阴道黏膜抗菌凝胶剂。其它与具体实施方式一相同。

采用下述试验验证本发明效果：

试验一：

实施例1：采用单纯槐角提取物(其他成分不变)制成凝胶剂:

一、称取1g槐角提取物、0.3g卡波姆、吐温80 5g、甘油10g、泊洛沙姆188 0.1g和尼泊金甲酯0.1％。

二、将泊洛沙姆188 1g和槐角提取物1g进行充分研磨备用，将甘油10g、吐温80 5g和纯化水20ml混合搅匀，将研磨混合物加入其中，搅拌均匀得混悬液；

三、称取卡波姆0.3g，加入20g纯化水至完全溶胀，得溶胀液；

四、将混悬液加至溶胀液中，再加入0.1％尼泊金甲酯，即得。

实施例2：采用单纯月季提取物(其他成分不变)制成凝胶剂:

一、称取2g月季花提取物、0.3g卡波姆、吐温80 5g、甘油10g、泊洛沙姆188.1g和尼泊金甲酯0.1％。；

二、将甘油10g、吐温80 5g和纯化水20ml混合搅匀，备用；

三、称取卡波姆0.3g，加入20g纯化水至完全溶胀，得溶胀液；

四、将甘油吐温混合液加至溶胀液中，再加入0.1％尼泊金甲酯，即得。

实施例3：采用槐角-月季花组合进行抑菌试验。

实施例4：无菌生理盐水组。

一、体外抑菌试验：

(1)抑菌剂筛选：采用滤纸片法。选择易引起阴道炎的白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌3种致病菌，以抑菌圈的大小为指标。

(2)菌种悬浮液制备：将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌菌种接种于斜面营养培养基上，30℃培养24h；白色念珠菌菌种接种于斜面沙氏培养基上，30℃培养48h。分别用无菌PBS将菌苔冲洗下来，调整浓度为3×10⁸CFU/mL，备用。

(3)含药滤纸片制备：取无菌干燥滤纸，用打孔器打孔6mm，分别放入实施例1、实施例2实施例3于无菌生理盐水50mL中浸泡15min，备用。

抑菌活性测定：

在3个灭菌培养皿中分别加入上述制备好的菌株悬浮液100μL，再倒入40℃的灭菌培养基混合均匀。凝固后，用无菌镊子夹取各含药滤纸片，放置于距培养皿边缘15mm处，轻轻按压，使滤纸片紧贴培养基。每个重复进行3次。将培养皿倒置于30℃恒温培养箱中，分别培养24、48h，然后观察含药滤纸片周围有无抑菌圈，以十字交叉法测定其抑菌直径(包括纸片直径)。每个重复测量3次，取平均值。

试验结果如下：

不同抑菌剂抑菌圈直径的比较(mm)

二、阴道凝胶对多种阴道致病菌的最低抑茵浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)的测定：

试验操作：阴道凝胶为固体剂型，试验时用40℃的纯化水使其溶化，按所含有效药物量计算其药物含量，加至50℃已熔化的MH琼脂培养基内混匀，并调整其终浓度约为200mg/ml，依次二倍稀释法制成含有100mg/mL、50mg/mL、25mg/mL、12.5mg/mL、6.25mg/mL、3.125mg/mL、1.5625mg/mL、……0.0125mg/mL、0.006mg/mL、0.003mg/mL、0.0015mg/mL药物的一系列含药平皿，待冷凝后备用。洁尔阴洗液用灭菌蒸馏水及培养基溶解混匀配制成终浓度同上的含药琼脂平皿。另相应各接种一套不含药的培养基作为对照。试验时将含有一系列受试药物的平皿表面用多点接种仪定量接种细菌，菌液终浓度为105CFU/ml，置入孵箱内培养，大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌，在37℃培养24h读取结果，白色念珠菌于28℃培养24h读取结果，厌氧菌在厌氧培养箱内培养48h后读取结果，未见细菌生长的平皿内所含药物最低浓度为该菌的最低抑菌浓度(MIC)。

先用肉汤二倍稀释法测定MIC值后，再取未见细菌生长平皿培养液0.1ml于无药琼脂平皿表面，用无菌玻棒推匀，培养(条件同MIC测定)，仍无细菌生长的最低药物浓度为其最低杀菌浓度(MBC)。

试验结果：

三、本发明应用于临床试验

(1)本发明妇科凝胶用于临床的情况

(一)一般资料：阴道炎患者100例，其中细菌性阴道炎33例，霉菌性阴道31炎，滴虫性阴道炎36例。

(二)诊断标准：

症状：白带增多，有味，外阴瘙痒，可伴有烧灼感、疼痛和性交痛、阴道干涩，滴虫或细菌性阴道炎患者阴道分泌物镜检时分别可见滴虫或细菌，霉菌性阴道阴道分泌物镜检时(+)，细菌性阴道炎BV检查阳性。

(三)治疗方法：

患者阴道给予凝胶抑菌剂，每天换药一次，每次一支，每支5g，连续7天。

(四)疗效评定标准：

治愈：自觉症状消失，阴道清洁度(Ⅰ)，阴道拭子培养转阴；

好转：自觉症状减轻，阴道清洁度(Ⅱ)，阴道拭子培养只有少数细菌生长，最多不超过10个；

无效：自觉症状无改善，阴道清洁度无变化，阴道拭子培养无变化。

阴道干涩改善程度：自觉在抑菌的同时，阴道内不会出现干涩的情况

(五)治疗结果：

四、与醋酸氯己定栓剂的对比试验

临床选择阴道炎患者共60例，分为对照组和实验组，实验组30例给予阴道黏膜抗菌凝胶，对照组给予醋酸氯己定栓剂，每天换药一次，每次一支，连续7天，进行疗效比较。

治疗结果：

五、阴道菌群微生态

为了考察在抑制有害菌的同时不破坏阴道菌群的微生态，对应用治疗的人群进行阴道菌群微生态的检验

选取阴道炎患者160例(有外因瘙痒症状)分为治疗组80例和对照组80例(对照组给予洁尔阴洗液)治疗组每天换药一次，每次一支，每支5g，连续7天。对照组给予洗液治疗(即取本品10毫升加温开水至100毫升混匀)擦洗外阴，用冲洗器将10％的洁尔阴洗液送至阴道深部冲洗阴道，一日1次，七天为一疗程，进行对比研究。经治疗后进行微生态检验：

检测步骤如下：①取样：用无菌刮板和长棉签从研究对象的阴道侧壁上1/3处取得阴道分泌物；②盐水湿片：直接光镜检查清洁度及有无滴虫真菌菌丝；③涂片后革兰染色法染色，显微镜下检测阴道微生态；④用pH为3.8～5.4精密试纸测定阴道pH。

检测指标及意义：阴道微生态检测内容及意义革兰染色后显微镜下检测：①菌群密集度：根据油镜下每视野平均细菌数分为1～4级，1级：1～10个/每油镜，2级：10～100个/每油镜，3级：100～1000个/每油镜，4级：1000个以上/每油镜；②菌群多样性：根据油镜下每视野能辨别的细菌数分为1～4级，1级：1～3种/每油镜，2级：4～6种/每油镜，3级7～9种/每油镜，4级：10种以上/每油镜；③阴道pH值≤4.5为正常，＞4.5为异常

检测结果：

治疗组阴道菌落密集度

对照组阴道菌落密集度

连续3天的给药情况：选择的试验是当天对阴道炎患者给药，给药后3小时、8小时、12小时及24小时进行阴道细菌检查，选择的对照组是洁尔阴洗液。

治疗组阴道pH值情况

对照组阴道培训pH值情况

	n	pH＜4.5	pH≥4.5
				正常菌群	35	10(28.6％)	25(71.4％)
异常菌群	45
				菌群失调	31	20(64.5％)	7(22.6％)
菌群抑制	9	4(44.4％)	5(55.6％)
				菌群增殖过度	5	1(20％)	4(80％)

Claims (2)

1.阴道黏膜抗菌凝胶剂，其特征在于所述每单位阴道黏膜抗菌凝胶剂中含有槐角提取物0.1g、月季花提取物0.2g、卡波姆0.03g、吐温80 0.5g、甘油1g、泊洛沙姆188 0.1g和添加量为阴道黏膜抗菌凝胶剂总质量0.1％的尼泊金甲酯。

2.根据权利要求1所述阴道黏膜抗菌凝胶剂的制备方法，其特征在于阴道黏膜抗菌凝胶剂的制备方法按照以下步骤进行：

一、称取1g槐角提取物、2g月季花提取物、0.3g卡波姆、吐温80 5g、甘油10g、泊洛沙姆188.1g；

二、将泊洛沙姆188 1g和槐角提取物1g进行充分研磨得研磨混合物，将甘油10g、吐温80 5g和纯化水20ml混合搅匀，将研磨混合物及月季花提取物2g加入其中，搅拌均匀得混悬液；

三、称取卡波姆0.3g，加入20g纯化水至完全溶胀，得溶胀液；

四、将混悬液加至溶胀液中，再加入添加量为阴道黏膜抗菌凝胶剂总质量0.1％尼泊金甲酯，即得阴道黏膜抗菌凝胶剂。