CN109077066B

CN109077066B - 一种AHLs淬灭菌及其在防治依赖AHLs致病的病原菌中的应用

Info

Publication number: CN109077066B
Application number: CN201811014616.9A
Authority: CN
Inventors: 陈少华; 张译尹; 郭云帆; 范兴辉; 叶田; 单雯艳; 张炼辉
Original assignee: South China Agricultural University
Current assignee: South China Agricultural University
Priority date: 2018-08-31
Filing date: 2018-08-31
Publication date: 2020-10-23
Anticipated expiration: 2038-08-31
Also published as: CN109077066A

Abstract

本发明公开了一种AHLs淬灭菌及其在防治依赖AHLs致病的病原菌中的应用。本发明研究发现，嗜吡啶红球菌针对群体感应信号分子AHLs具有较好的降解活性，且降解效果稳定并显著，为AHLs介导致病的致病菌的生物防治提供了一种新的途径和方法。同时，本发明提供了一株对群体感应信号分子AHLs具有显著降解活性的嗜吡啶红球菌菌株XN‑36，于2018年8月16日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCC NO：60435。该菌株活性稳定，在群体淬灭、防治依赖AHLs介导致病的致病菌以及植物病害方面，有巨大的应用潜力。本发明不仅可以缓解化学农药的残留污染，还为以生物防治逐渐替代化学防治提供了新的途径。

Description

一种AHLs淬灭菌及其在防治依赖AHLs致病的病原菌中的应用

技术领域

本发明属于病害生物防治技术领域。更具体地，涉及一种AHLs淬灭菌及其在防治依赖AHLs致病的病原菌中的应用。

背景技术

细菌在繁殖过程中不断分泌信号分子至胞外，同时监测信号分子的浓度来感知群体密度的变化。当细菌群体密度到达一定水平时，环境中的信号分子也达到了一定的浓度，细菌监测到这一变化后，某些基因开始表达，群体水平的行为开始出现。这种现象被称为群体感应(Quorum sensing,QS)(Fuqua WC,SC Winans,EP Greenberg et al.Quorumsensing in bacteria:the LuxR-LuxI family of cell density-responsivetranscriptional regulators[J].J Bacteriol,1994,176:269.)。研究表明，QS系统参与调控多种重要的生物功能，如：在病原菌的毒性基因表达、抗生素的产生，色素的产生等。以N-酰基高丝氨酸内酯(N-acylhomoserine lactones,AHLs)为信号分子的群体感应系统由以下几部分组成：信号分子AHLs、AHLs合成酶和AHLs受体蛋白。

在AHLs介导致病的致病菌中，致病菌不断合成并向胞外分泌AHLs，当致病菌群体密度不断增大时，环境中的AHLs浓度也随之增加。致病菌监测到环境中的AHLs到达一定的浓度后，某些与致病因子相关的基因开始表达，如果胶杆菌(Pectobacterium)水解酶的合成基因、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)绿脓毒素的合成基因等。由此可知，通过干扰群体感应系统是可以阻碍毒力因子的表达，减轻致病菌的致病性的。因此QS体系是一个潜在的药物作用靶点。干扰群体感应系统的方式有如下6种:(1)抑制信号分子的生物合成；(2)拮抗信号分子受体以及通路中的相关受体靶点；(3)使用与信号分子竞争性结合受体的分子；(4)酶催化信号分子降解；(5)信号分子胞内外运输与分泌抑制；(6)使用阻断信号分子受体的抗体，其中后两种研究较少(Suga H,Smith KM.Molecular mechanisms ofbacterial quorumsensing as a new drug target[J].Curr Opin Chem Biol,2003,7(5):586-591.)。这种通过抑制信号分子的合成、积累、监测，或对信号分子进行酶降解或修饰的机制来干扰群体感应系统的方式被称为群体感应淬灭(Quorum quenching,QQ)。

利用群体淬灭来防治病原菌具有避免病原菌抗药性的产生，操作简便，对环境友好，效率高，经济实用且持续周期长等优点。群体淬灭是一种新的病害防治策略，为今后发展新型绿色安全病害防控措施开辟了新思路。在当今国际上微生物病害防治技术研究中，寻找稳定高效的淬灭菌是国际的前沿和热点。

发明内容

本发明要解决的技术问题是补充现有的生物防治技术和方法的不足，提供一种可以高效降解群体感应信号分子AHLs的群体淬灭菌，即嗜吡啶红球菌，对群体感应信号分子AHLs有显著的降解作用，具有防治依赖AHLs致病的病原菌的巨大潜力，对解决农药或抗生素滥用及耐药性问题具有重大现实意义。

本发明的目的是提供嗜吡啶红球菌在降解群体感应信号分子AHLs或防治AHLs介导致病的致病菌中的应用。

本发明另一目的是提供一株可降解群体感应信号分子AHLs的嗜吡啶红球菌菌株XN-36及其在AHLs介导致病的致病菌防治中的应用。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

本发明从采自广州华南农业大学校农场蔬菜地的土壤中，经人工筛选分离纯化鉴定获得一株可降解群体感应信号分子AHLs的嗜吡啶红球菌菌株XN-36，并于2018年8月16日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCC NO：60435，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。

该菌的菌落浅橘黄色，凸起，不透明，边缘整齐。菌体呈杆状，有分枝状细丝，细胞生长初期为杆状，后期培养物变为短杆状或近球形，无芽孢。该菌为革兰氏阳性菌，好氧，接触酶试验、硝酸盐还原试验、脲酶实验和柠檬酸盐利用实验反应阳性，氧化酶试验、V-P测定、淀粉水解、酪素水解、果糖发酵等实验反应阴性。最适生长温度为30℃，最适pH为7.0。

该菌株XN-36对氨苄青霉素和庆大霉素的抗性达到400μg/mL以上，对卡那霉素的抗性达到350μg/mL，对硫酸新霉素和羧苄青霉素抗性达到250μg/mL，对氯霉素的抗性达到50μg/mL，对链霉素、庆大霉素和四环素的抗性均为5μg/mL以下。

本发明提供的嗜吡啶红球菌菌株XN-36可以有效降解群体感应信号分子OHHL。该菌株可在以OHHL为唯一碳源的培养基中正常生长，在96h内对初始浓度为0.5mM的群体感应信号分子OHHL降解率达到72％以上，因此，菌株XN-36在防治AHLs介导、特别是迪卡氏菌(Dickeya)所造成的危害方面有巨大的推广应用潜力。

因此，以下应用均应在本发明的保护范围之内：

嗜吡啶红球菌在降解群体感应信号分子AHLs、防治AHLs介导致病的致病菌、或防治依赖AHLs介导致病的植物病害中的应用。

嗜吡啶红球菌在制备降解群体感应信号分子AHLs、防治AHLs介导致病的致病菌、或防治依赖AHLs介导致病的植物病害的制剂产品中的应用。

嗜吡啶红球菌菌株XN-36在降解群体感应信号分子AHLs、防治AHLs介导致病的致病菌、或防治依赖AHLs介导致病的植物病害中的应用。

嗜吡啶红球菌菌株XN-36在制备降解群体感应信号分子AHLs、防治AHLs介导致病的致病菌、或防治依赖AHLs介导致病的植物病害的制剂产品中的应用。

其中，所述AHLs不仅包括传统的AHLs，如：N-(3-氧代己酰)-L-高丝氨酸内酯(N-(3-oxohexanoyl)-L-homoserine lactone，OHHL)、N-(3-氧代辛酰)-L-高丝氨酸内酯(N-(3-oxooctanoyl)-L-homoserine lactone，OOHL)和N-(3-氧代癸酰)-L-高丝氨酸内酯(N-(3-oxododecanoyl)-L-homoserine lactone，OdDHL)，还包括一些新的特殊的AHLs，如：异戊酰基-高丝氨酸内酯(Isovaleryl-homoserine lactone)、羧化酰基-高丝氨酸内酯(carboxyl-AHLs)、芳基-高丝氨酸内酯(Aryl-homoserine lactone)和香豆酰基-高丝氨酸内酯(p-coumaroyl-HSL)。

另外，一种防治依赖AHLs致病的致病菌病害的方法，用嗜吡啶红球菌的菌液对作物进行处理。优选地，是用嗜吡啶红球菌的菌液对作物进行接种/喷雾处理。

并且，含有嗜吡啶红球菌或其菌液的可降解群体感应信号分子AHLs的降解菌剂，以及依赖AHLs致病的致病菌或其引起的植物病害的生防菌剂，也应在本发明的保护范围之内。

优选地，所述嗜吡啶红球菌为所述嗜吡啶红球菌菌株XN-36。

优选地，所述依赖AHLs致病的致病菌包括迪卡氏菌(Dickeya)、果胶杆菌(Pectobacterium)和/或绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)。

另外，制备菌株XN-36菌液的最适培养基为Luria-Bertani(LB)培养基，其配方为：胰蛋白胨10.0g/L，酵母提取物5.0g/L，氯化钠10.0g/L，pH 6.8～7.2，121℃灭菌15～25min。

本发明具有以下有益效果：

本发明研究发现，嗜吡啶红球菌针对群体感应信号分子AHLs具有较好的降解活性，且降解效果稳定并显著，为AHLs介导致病的致病菌的生物防治提供了一种新的途径和方法。

同时，本发明提供了一株对群体感应信号分子AHLs具有显著降解活性的嗜吡啶红球菌菌株XN-36，是一株环境友好菌株，可利用AHLs作为唯一碳源进行生长，且菌株活性稳定，在群体淬灭、防治依赖AHLs介导致病的致病菌以及植物病害方面，有巨大的应用潜力。本发明不仅可以减少化学农药的使用，为以生物防治逐渐替代化学防治提供了新的途径。

附图说明

图1为本发明的菌株XN-36在LB培养基上的菌落形态图。

图2为本发明的菌株XN-36的扫描电镜图。

图3为本发明的菌株XN-36的系统进化树分析图。

图4为本发明的菌株XN-36在不同抗生素中的生长情况图。

图5为本发明的菌株XN-36对OHHL降解活性测定图。(CK为未添加淬灭菌的空白对照)

图6为本发明的菌株XN-36对OHHL降解的HPLC图(图A为未接种菌株XN-36的对照图，图B、C、D、E、F分别为菌株XN-36对OHHL降解0d，1d，2d，3d和4d的降解高效液相色谱图)。

图7为本发明的菌株XN-36以OHHL为唯一碳源的生长曲线和降解曲线图。

图8为本发明的菌株XN-36、E.coli、B23分别与Z3-3共同接种于马铃薯块茎24h后的发病情况。

图9为本发明的菌株XN-36、E.coli、B23分别与Z3-3共同接种于白菜梗24h后的发病情况。

图10为本发明的菌株XN-36、E.coli、B23分别与Z3-3共同接种于胡萝卜24h后的发病情况。

具体实施方式

以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。

除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。

以下实施例中所用到的培养基及试剂如下：

Luria-Bertani(LB)培养基：胰蛋白胨10.0g/L，酵母提取物5.0g/L，氯化钠10.0g/L，pH 6.8～7.2，121℃灭菌20min。LB固体培养基配方是在液体培养基中加入1.5％(w/v)的琼脂。

基础盐培养基(MSM)：(NH₄)₂SO₄，2.0g/L；CaCl₂·2H₂O，0.01g/L；Na₂HPO₄·12H₂O，1.5g/L；KH₂PO₄，1.5g/L；MgSO₄·7H₂O，0.2g/L；FeSO₄·7H₂O，0.001g/L；pH 6.5。

基础培养基(MM)：K₂HPO₄，10.5g/L；KH₂PO₄，4.5g/L；(NH₄)₂SO₄，2.0g/L；Mannitol，2.0g/L；Glycerol，2.0g/L；MgSO₄·7H₂O，0.2g/L；CaCl₂，0.01g/L；FeSO₄，0.005g/L；MnCl₂，0.002g/L；pH 6.5。

X-gal、培养基所需试剂均采购自广州齐湘、华奇盛等公司，OHHL采购自上海有德化工科技有限公司。

实施例1嗜吡啶红球菌株XN-36的分离、筛选

1、土样采集：

采集自华南农业大学校农场的土壤样本作为微生物源。

土样于2017年7月30日采集自广东省广州市华南农业大学校农场蔬菜地，在此地进行5点取样、装袋。作为微生物源带回实验室进行菌株的分离与筛选。

2、菌株的富集培养：

制备基础盐培养基(MSM)，在250mL三角瓶内装入50mL的MSM培养基，121℃灭菌20min，冷却后在无菌条件下加入的OHHL母液(浓度为100mm/L，溶剂为乙腈)，使OHHL最终浓度为5μmol/L，除此之外加入土样5g，放置于30℃、200rpm摇床培养7d后，按10％的接种量转接到OHHL浓度为10μmol/L的MSM培养基中。相同条件培养7d后，再按10％的接种量转接到OHHL浓度为20μmol/L的MSM培养基中，再以相同条件培养7d。以此类推，不断增加OHHL的浓度至80μmol/L。

3、菌株的分离与纯化：

采用稀释、平板涂布法和平板划线法进行菌株的分离和纯化。

取1mL终MSM培养液，用无菌水将其稀释成浓度分别为10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5、10^-6、10^-7、10^-8的培养液，然后分别吸取各个浓度的培养液100μL，在LB固体平板上涂布均匀、晾干，30℃培养24h。挑取平板上长出的形态、大小、颜色不同的单菌落，分别在LB固体平板反复划线进行纯化，直至分离出单菌落。用甘油保种法将分离纯化后的菌株保存于-80℃冰箱，待进一步实验检测降解活性。

4、菌株筛选：

利用报告菌株CF11(Agrobacterium tumefaciens)进行降解菌的筛选。

将待筛选的菌株从-80℃冰箱取出，划线于LB固体培养基平板上进行活化，在30℃培养箱培养24h。挑取单菌落，接种至LB液体培养基，在30℃，200rpm的条件下过夜培养，得到菌液。取1个OD₆₀₀值的菌体，在含有OHHL(浓度为20μmol/L)的1mLMSM培养基中重悬，得到1mL的待培养液。将待培养液转移至2mL离心管中，以30℃，200rpm的条件培养24h。24h后，取5μL反应混合物点样至1cm宽的MM琼脂条顶端，晾干，之后在下方点一排(约13-18个点)报告菌株的菌液。其中，报告菌株以28℃，200rpm的条件过夜培养，得到菌液。MM琼脂条由含有X-gal(40μg/mL)的MM板切条所得。将已经点有样本及报告菌株的琼脂条放置于28℃培养箱，并避光处理，放置24h后观察实验结果。

结果分析，当报告菌株检测到环境中含有AHLs之后，其β-半乳糖苷酶的基因开始表达，并向环境中释放β-半乳糖苷酶。β-半乳糖苷酶可以将MM琼脂条中的无色化合物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)酶解为半乳糖和深蓝色物质5-溴-4-靛蓝，5-溴-4-靛蓝可使整个报告菌株的菌落变成蓝色。AHLs属于小分子物质，可以在琼脂条内进行扩散，且扩散距离与浓度成正比。

结果表明，当MM琼脂条顶端的反应混合物中含有AHLs时，下方的报告菌株会变蓝，反应混合物含量越多，报告菌株变蓝的长度就越长，反之，反应混合物中不含有AHLs，则下方报告菌株不会变蓝。根据这一原理，筛选获得一株对OHHL稳定高效降解的菌株，并命名为XN-36。

实施例2嗜吡啶红球菌株XN-36的鉴定

本实施例针对淬灭菌XN-36进行了形态学鉴定、16S rDNA系统发育分析和生理生化鉴定，鉴定该菌株为嗜吡啶红球菌(Rhodococcus pyridinivorans)。具体如下：

(1)菌落形态特征：在营养琼脂平板上培养48h，菌落浅橘黄色，凸起，不透明，边缘整齐，如图1所示；在LB液体培养基中呈扩散性混浊，好氧，30℃下生长良好。

(2)菌体形态特征：如图2所示，菌体呈杆状，有分枝状细丝，细胞生长初期为杆状，后期培养物变为短杆状或近球形，无芽孢。

(3)16S rDNA序列及系统进化分析：菌株XN-36的16S rDNA基因序列长度为1349bp，与NCBI数据库(http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/)进行比对后发现，菌株XN-36与Rhodococcus pyridinivorans具有较高的同源性，相似度达到99％以上，其系统进化树如图3所示。

(4)生理生化特性：如表1所示，菌株XN-36为革兰氏阳性菌，好氧，接触酶试验、硝酸盐还原试验、脲酶实验和柠檬酸盐利用实验反应阳性，氧化酶试验、V-P测定、淀粉水解、酪素水解、果糖发酵等实验反应阴性；最适生长温度为30℃，最适pH为7.0。

表1菌株XN-36生理生化鉴定结果

注：-：阴性反应；+：阳性反应。

综上结果，菌株XN-36鉴定为嗜吡啶红球菌(Rhodococcus pyridinivorans)，并于2018年8月16日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCC NO：60435，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。

实施例3嗜吡啶红球菌株XN-36的抗生素敏感性分析

为了能够更好地研究菌株XN-36，本实施例对菌株XN-36进行了多种抗生素敏感性检测。

实验结果分析：如图4所示，该菌株XN-36对氨苄青霉素和庆大霉素的抗性达到400μg/mL以上，对氯霉素的抗性达到50μg/mL，对卡那霉素的抗性达到350μg/mL，对硫酸新霉素和羧苄青霉素抗性达到250μg/mL，对链霉素，庆大霉素和四环素的抗性均为5μg/mL以下。这一结果利于后续研究中选取合适的抗生素作为参考。

实施例4嗜吡啶红球菌株XN-36对OHHL的降解活性检测

本实施例利用报告菌株(Agrobacterium tumefaciens)检测菌株XN-36对OHHL的降解效果。

用LB固体培养基平板活化菌株XN-36，将平板置于30℃培养箱，培养24h。挑取单菌落接种至液体LB培养基中，以30℃，200rpm的条件过夜培养得到菌液。取1个OD₆₀₀值的菌体与1mL以OHHL(浓度分别为5μmol/L、10μmol/L、15μmol/L、20μmol/L)作为唯一碳源的MSM培养基均匀混合后，转移至2mL离心管中，得到待培养液，以30℃，200rpm的条件培养24h。24h后，取5μL反应混合物点至琼脂条顶端，然后在下方依次点报告菌株(Agrobacteriumtumefaciens)菌液，每个菌液点之间距离约为0.2cm。然后将已经点好反应混合物和报告菌株的琼脂条放置于28℃培养箱并用锡纸包住进行避光处理，培养24h后观察实验结果。其中，报告菌株在28℃，200rpm条件下培养过夜后得到。琼脂条为含有X-gal(40μg/mL)的MM板切条所得。CK为不含XN-36的空白对照。

实验结果如图5所示，CK实验组的报告菌株自上往下2/3均为蓝色，说明样本中含有OHHL。在OHHL浓度为5μmol/L和10μmol/L实验组中，琼脂条上的报告菌株均未变蓝，说明相应的反应混合物中不含有OHHL，OHHL已经完全被降解。在OHHL的浓度上升至15μmol/L时，琼脂条上端的1/6的报告菌株变蓝，自上往下1/6处略微有点蓝，在OHHL的浓度为20μmol/L时，琼脂条自上往下1/2处变蓝，这两组实验组说明在OHHL浓度为20μmol/L时该淬灭菌对OHHL依然保持较好降解效果。

实施例5利用HPLC检测嗜吡啶红球菌株XN-36对OHHL的降解效果

将冻存于-80℃的菌株XN-36用LB固体板活化，30℃培养24h后挑取平板上的单菌落接种于液体LB培养基中，以30℃，200rpm的条件过夜培养得到菌液。取1个OD₆₀₀值的菌体，菌体用1mL的MSM培养基重悬，将重悬液加入19mL MSM基础培养基中，并添加OHHL，使其最终浓度为0.2mmol/L。在30℃，200rpm的条件下培养，分别于0d，1d，2d，3d和4d五个时间点取样，并将样品中残余的OHHL提取出来。利用HPLC测定OHHL的残留量表示菌株XN-36对OHHL的降解情况。

OHHL的提取方法：取7mL样品至15mL离心管中，以4000rpm的速度离心10min后，取5mL上清液至50mL分液漏斗中，并向分液漏斗中加入等体积的乙酸乙酯，剧烈震荡3min后，静置，分层，将下层溶液转移至10mL刻度试管中，上层萃取液液经铺有滤纸的漏斗过滤到50mL圆底烧瓶中。下层溶液按上述方法再进行1次萃取。2次滤液在圆底烧瓶中旋转蒸发至干燥，再用色谱乙腈分2次进行洗涤，定容至2mL。最后经0.45μm有机滤膜过滤至进样瓶，待使用HPLC法测定其残余量。

OHHL的HPLC检测条件：HPLC仪器型号：Waters 2695。色谱柱：C₁₈反相色谱柱(250μm×4.6mm×5μm)。流速为0.5mL/min。柱温为30℃。流动相：乙腈：水＝70；30(v：v)。检测波长为210nm。进样量为20μL。

OHHL降解率计算方法：降解率(％)＝(1-A₁/A₀)×100，A₁为降解菌处理后OHHL残留浓度，A₀为对照处理后的OHHL残留浓度。

HPLC检测结果如图6所示，图A为未接种菌株XN-36的对照图，图B、C、D、E、F分别为0d，1d，2d，3d和4d时OHHL残余量的HPLC图，对应时间降解率分别达到0％，20％，28％，60％和72％，对应时间菌株XN-36的OD₆₀₀值分别为0.001，0.458，0.590，0.634和0.607。实验表明，在OHHL以唯一碳源存在的条件下，菌株能够降解OHHL并利用其生长。由图7可知，OHHL的降解与菌株生长呈正相关，在OHHL的存在下，菌株生长没有滞留期，迅速进入生长对数期，1d内为菌株生长的对数期，此时该菌株对OHHL的降解速率也最快。

实施例6菌株XN-36对依赖AHLs致病的植物软腐病的生防效果研究

本实施例以植物致病菌胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacteriumcarotovorum subsp.carotovora,Pcc)Z3-3为例，研究菌株XN-36对依赖AHLs致病的致病菌的生防效果。

用LB固体培养基平板活化菌株XN-36，Z3-3，E.coli和B23，30℃条件下培养。24h后分别挑取平板上的单菌落，接种至液体LB培养基中，以30℃，200rpm的条件过夜培养至OD₆₀₀约为2.0。其中，苏云金芽孢杆菌以色列亚种(Bacillus thuringiensissubsp.Israelensis)B23为已知对OHHL具有降解效果的菌株(Dong Y,Xu J,Li X,etal.AiiA,an enzyme that inactivates the acylhomoserinelactone quorum-sensingsignal and attenuates the virulence of Erwinia carotovora[J].Proceedings ofthe National Academy of Sciences,2000,97(7):3526-3531.)，E.coli为已知不具备降解OHHL的菌株。在生防实验中，将设置四个实验组：Z3-3+LB，Z3-3+E.coli，Z3-3+B23和Z3-3+XN-42。其中，实验组Z3-3+LB为空白对照组；Z3-3+E.coli为阴性对照组，Z3-3+B23为阳性对照组。

选取新鲜的马铃薯、白菜和胡萝卜分别作为实验材料，将材料用蒸馏水洗净。将马铃薯和胡萝卜切成厚度约为0.3cm的薄片，白菜梗切成约为6cm×4cm的小长方形块。将Z3-3菌液分别与B23、E.coli、XN-36的菌液和液体LB培养基以一定比例混合。每个实验组的混合菌液取2μL分别接种至处理好的实验材料中央。加入无菌湿水棉花保湿并用保鲜膜密封放置28℃培养箱培养，24h后观察结果。

如图8、图9和图10所示，在马铃薯、白菜和胡萝卜生防实验中，实验组Z3-3+LB和Z3-3+E.coli的马铃薯、白菜和胡萝卜发病程度严重，其病斑较实验组Z3-3+B23和Z3-3+XN-42的病斑面积大。即淬灭菌XN-42与致病菌共同接种较单独接种致病菌时软腐病病害症状明显减轻。

实验结果表明，XN-36对胡萝卜软腐果胶杆菌胡萝卜亚种(Pectobacteriumcarotovorum subsp.carotovora,Pcc)Z3-3引起的马铃薯软腐病、白菜软腐病和胡萝卜软腐病具有有效且明显的生防效果。

上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一株可降解群体感应信号分子OHHL的嗜吡啶红球菌(Rhodococcuspyridinivorans)菌株XN-36，其特征在于，该菌株于2018年8月16日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCC NO：60435，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼，所述OHHL为N-(3-氧代己酰)-L-高丝氨酸内酯。

2.权利要求1所述菌株XN-36在降解群体感应信号分子OHHL、防治OHHL介导致病的致病菌、或防治依赖OHHL介导致病的植物病害中的应用。

3.权利要求1所述菌株XN-36在制备降解群体感应信号分子OHHL、防治OHHL介导致病的致病菌、或防治依赖OHHL介导致病的植物病害的制剂产品中的应用。

4.一种防治依赖OHHL介导致病的植物病害的方法，其特征在于，用权利要求1所述嗜吡啶红球菌的菌液对作物进行处理。

5.一种可降解群体感应信号分子OHHL的降解菌剂，其特征在于，含有权利要求1所述嗜吡啶红球菌或其菌液。

6.一种依赖OHHL致病的致病菌或所述致病菌引起的植物病害的生防菌剂，其特征在于，含有权利要求1所述嗜吡啶红球菌或其菌液。