CN109042761A - 一种防治旱蜗牛的生物菌液及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种防治旱蜗牛生物菌液，由以下份数原料制成：发酵生物蒸馏提取液15‑25份，复合菌剂5‑15份和适量水。发酵生物蒸馏提取液,由以下份重量份数原料制成：野连树叶4‑6份、褚桃树叶6‑8份、松针6‑8份、辣椒2‑4份、椿树叶6‑8份、陈皮2‑4份。复合菌剂由以下重量份数原料制成：乳酸菌2‑4份、氨基酸1‑3份、芽孢杆菌2‑4份。本发明还公开了一种防治旱蜗牛生物菌液的制备方法。采用本发明的发酵生物蒸馏提取液和复合菌剂制备的一种防治旱蜗牛生物菌液，散发出草香的味道，有效驱赶蜗牛，防止蜗牛破坏农作物，提高农作物的产量，而且绿色环保。

Description

一种防治旱蜗牛的生物菌液及其制备方法
技术领域
本发明涉及生物菌液领域，具体涉及的是一种防治旱蜗牛的生物菌液及其制备方法和应用。
背景技术
旱蜗牛一般指陆生的蜗牛，生活于灌木丛、低矮草丛、农田及住宅附近阴暗潮湿地区，有时也见于山坡草丛中。旱蜗牛觅食范围非常广泛，主食各种蔬菜、杂草和瓜果皮；农作物的叶、茎、芽、花、多汁的果实，是农业害虫之一，其寄主植物、林木幼苗、蔬菜和花卉等。旱蜗牛在田间轻则造成农作物叶片、茎秆破损，僵苗迟发，成活率下降；重则将农作物幼苗全部吃光，对农作物造成严重危害。目前对于旱蜗牛的防治主要是人工捕捉和药剂防治，这两种方法不能有效解决旱蜗牛同时用药剂防治可能会对农作物产生一些影响。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种防治旱蜗牛的生物菌液及其制备方法和应用，所述生物菌液产生的味道能够驱赶蜗牛，具有绿色环保、操作简单的特点。
本发明是通过以下技术方案实现的：一种防治旱蜗牛生物菌液，以重量份计，
由以下份数原料制成：发酵生物蒸馏提取液15-25份、复合菌剂5-15份和适量水，所述发酵生物蒸馏提取液，由以下份重量份数原料制成：野连树叶4-6份、褚桃树叶6-8份、松针6-8份、辣椒2-4份、椿树叶6-8份、陈皮3-4份；所述复合菌剂由以下重量份数原料制成：乳酸菌2-4份、氨基酸1-3份、芽孢杆菌2-4份。
本发明还公开了一种防治旱蜗牛生物菌液，以重量份计，由以下份数原料制成：发酵生物蒸馏提取液15-25份，复合菌剂5-15份和适量水。所述发酵生物蒸馏提取液由以下份重量份数原料制成：野连树叶5份、褚桃树叶7份、松针7份、辣椒3份、椿树叶7份、陈皮3份。本发明还公开了一种防治旱蜗牛生物菌液，以重量份计，由以下份数原料制成：发酵生物蒸馏提取液15-25份，复合菌剂5-15份和适量水。所述复合菌剂由以下重量份数原料制成：乳酸菌3、氨基酸2、芽孢杆菌3。
作为上述方案的进一步优化，发酵生物蒸馏提取液18份，复合菌剂10份和适量水。
作为上述方案的进一步优化，所述发酵生物蒸馏提取液的制备方法如下：
(11)将野连树叶、褚桃树叶、松针、辣椒、椿树叶、陈皮清洗干净，粉碎加适量水，搅拌均匀，过滤1小时去除杂质，收集滤液；
(12)将步骤(11)收集的滤液放入壶式蒸馏器进行蒸馏，70-80℃蒸馏1小时，取得发酵生物蒸馏提取液；
作为上述方案的进一步优化，所述复合菌剂中乳酸菌的制备方法如下：
(21)将低温保藏的乳酸菌在温度为37℃的灭菌MRS液体培养基中进行多次活化，同时每24小时检测一次纯度和活菌数，待检测达标后将菌液转至10L发酵罐中进行扩大培养36-48小时。
(22)将步骤(21)产生的发酵液加入灭菌的生理盐水中进行不同程度的稀释，分别吸取少量的稀释液注入不同的无菌培养皿中，无菌培养皿中加入计数培养基，放入37℃恒温培养箱中培养48小时，选取菌落数达标的稀释菌液。
(23)利用离心机对步骤(22)选取的菌液进行高速离心旋转，离心10-15分钟后去除上清液得到乳酸菌。
本发明中的MRS液体培养基、计数培养基均为市面上存在的培养基，在此不再赘述。
作为上述方案的进一步优化，所述复合菌剂中氨基酸的制备方法如下：
氨基酸的制备步骤：
(31)选择蛋白含量高的黄豆为主要原料，将上述原料浸泡于氢氧化钾水溶液中1小时，使黄豆中含有的氨基酸及营养成分进行充分的水解，制成氨基酸原液；
(32)待氨基酸原液中的黄豆溶解成碎屑后，过滤去除杂质再用适量的磷酸调节pH值在6-8内，提取氨基酸原液。
(33)将步骤(32)提取的氨基酸原液加入发酵容器中，调节含水量至45％-60％，发酵温度控制在40-65℃，并加入适量的的生物酶，进行搅拌使其混合均匀，进行发酵5-10天，即得氨基酸；
作为上述方案的进一步优化，所述复合菌剂中芽孢杆菌的制备方法如下：
芽孢杆菌的制备步骤；
(41)取出芽孢杆菌保藏管，用营养肉汁固体培养基分别划平板进行复苏，30℃培养48小时，在平板下挑取单个菌落接种至有营养肉汁固体培养基的茄子瓶中，在30℃培养箱中培养48小时。
(42)用3000ml无菌水将茄子瓶中的菌苔洗脱，接种至装有300L液体种子培养基的发酵罐中，培养16-24小时。
(43)将步骤(42)液以总接种量的10％-20％的接种量加至芽孢杆菌固体发酵培养基中，混匀，控制发酵温度为30-40℃，发酵36-48小时，即得芽孢杆菌。
本发明中的营养肉汁固体培养基、液体种子培养基均为市面上存在的培养基，在此不再赘述。
本发明还公开了一种防治旱蜗牛生物菌液在防治旱蜗牛的应用。
本发明还公开了一种防治旱蜗牛生物菌液的制备方法，将发酵生物蒸馏提取液、复合菌剂和水搅拌混合均匀后发酵7-10天，得到本发明的一种防治旱蜗牛生物菌液。
作为上述方案的进一步优化，所述复合菌剂由以下原料制成：乳酸菌、氨基酸、芽孢杆菌；
所述复合菌剂中乳酸菌的制备方法如下：
(21)将低温保藏的乳酸菌在温度为37℃的灭菌MRS液体培养基中进行多次活化，同时每24小时检测一次纯度和活菌数，待检测达标后将菌液转至10L发酵罐中进行扩大培养36-48小时。
(22)将步骤(21)产生的发酵液加入灭菌的生理盐水中进行不同程度的稀释，分别吸取少量的稀释液注入不同的无菌培养皿中，无菌培养皿中加入计数培养基，放入37℃恒温培养箱中培养48小时，选取菌落数达标的稀释菌液。
(23)利用离心机对步骤(22)选取的菌液进行高速离心旋转，离心10-15分钟后去除上清液得到乳酸菌；
所述复合菌剂中氨基酸的制备方法如下：
(31)选择蛋白含量高的黄豆为主要原料，将上述原料浸泡于氢氧化钾水溶液中1小时，使黄豆中含有的氨基酸及营养成分进行充分的水解，制成氨基酸原液；
(32)待氨基酸原液中的黄豆溶解成碎屑后，过滤去除杂质再用适量的磷酸调节pH值在6-8内，提取氨基酸原液；
(33)将步骤(32)提取的氨基酸原液加入发酵容器中，调节含水量至45％-60％，发酵温度控制在40-65℃，并加入适量的的生物酶，进行搅拌使其混合均匀，进行发酵5-10天，即得氨基酸；
所述复合菌剂中芽孢杆菌制备方法如下：
(41)取出保藏的芽孢杆菌，在温度为30℃的营养肉汁固体培养基培养48小时进行复苏，复苏后的芽孢杆菌在平板培养基上进行划平板稀释分离，24小时后挑取单个菌落移接至有营养肉汁固体培养基的瓶中，在30℃培养箱中培养48小时；
(42)用2000ml无菌水将步骤(41)瓶中产生的的菌苔洗脱下来移接至装有30L液体种子培养基的发酵罐中，培养16-24小时；
(43)将步骤(42)所得的发酵液加至芽孢杆菌固体发酵培养基中，控制发酵温度为30-40℃，发酵36-48小时，即得芽孢杆菌。
本发明还公开了一种防治旱蜗牛生物菌液的使用方法，每亩用生物菌液2000-3000ml兑适量水搅拌均匀，用喷雾器于傍晚时分将所述生物菌液均匀喷洒在农作物上，对旱蜗牛重发生田块，隔5-10天，进行第二次防治。
本发明的一种防治旱蜗牛的生物菌肥及其制备方法和应用具有以下有益效果：
1.本发明一种防治旱蜗牛的生物菌液均匀喷洒在农作物上，该生物菌肥散发出草香的味道能够驱赶蜗牛防止蜗牛破坏农作物，效果显著、操作简单。
2、本发明一种防治旱蜗牛的生物菌液，采用的复合菌剂是一种有益菌群，有益菌群与土壤中放线菌等共生共殖，形成良好的作物生长环境，提高土壤肥质，彻底改良土壤性质有利于促进土壤固粒结构的形成，能增加土壤保水、保湿、透气、保肥的能力。
3、本发明一种防治旱蜗牛的生物菌液具有固氮、解磷、解钾的作用，防止养分被土壤固定或随水流失，能够改善土壤结构、保持土壤水分、促进生物生长。同时本发明一种防治旱蜗牛的生物菌液内含多种微量元素，能够解决农作物缺素症状产生抗菌物质，在较强的分泌生长激素和抗生素类物质的作用下，可适当减少化肥使用量，具有提高化肥利用率的功效，为农业增收发挥其应有的作用，具有非常广阔的前景。
4、本发明一种防治旱蜗牛的生物菌液，采用的发酵生物蒸馏提取液，通过将将野连树叶、褚桃树叶、松针、辣椒、椿树叶、陈皮提取后发酵而成。其中，野连树叶，辛、温、无毒，具有清热解毒的作用；褚桃树叶叶甘、凉，具有清热、凉血、利湿、杀虫的功能；松针苦、涩。温，具有祛风活血、明目、安神、解毒、止痒、除口臭、去口干舌燥、治便秘的功效；椿树叶，具有浓郁的香味，味苦、性平、无毒，有开胃爽神、祛风除湿、止血利气、消火解毒的功效；陈皮性温、味辛、味苦，具有理气健脾、调中、燥湿、化痰的作用。采用发酵生物蒸馏提取液制备的本发明一种防治旱蜗牛的生物菌液，散发出草香的味道，有效驱赶蜗牛，防止蜗牛破坏农作物，绿色环保。
具体实施方式
下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。实施例中涉及的组分原料若无特殊说明，均为市面上能够购买的常用商品。
实施例1
一种防治旱蜗牛生物菌液，以重量份计，由以下份数原料制成：发酵生物蒸馏提取液15，复合菌剂5份和适量水。所述发酵生物蒸馏提取液由以下份重量份数原料制成：野连树叶4、褚桃树叶6、松针6、辣椒2、椿树叶6、陈皮3。所述复合菌剂由以下重量份数原料制成：乳酸菌2、氨基酸1、芽孢杆菌2。
本优选实施例1的一种防治旱蜗牛生物菌液的制备方法，
制备：发酵生物蒸馏提取液：
(11)将野连树叶、褚桃树叶、松针、辣椒、椿树叶、陈皮清洗干净，粉碎加适量水，搅拌均匀，过滤1小时去除杂质，收集滤液；
(12)将步骤(11)收集的滤液放入壶式蒸馏器进行蒸馏，70-80℃蒸馏1小时，取得发酵生物蒸馏提取液；
制备复合菌剂：
乳酸菌的制备方法如下：
(21)将低温保藏的乳酸菌在温度为37℃的灭菌MRS液体培养基中进行多次活化，同时每24小时检测一次纯度和活菌数，待检测达标后将菌液转至10L发酵罐中进行扩大培养36-48小时。
(22)将步骤(21)产生的发酵液加入灭菌的生理盐水中进行不同程度的稀释，分别吸取少量的稀释液注入不同的无菌培养皿中，无菌培养皿中加入计数培养基，放入37℃恒温培养箱中培养48小时，选取菌落数达标的稀释菌液。
(23)利用离心机对步骤(22)选取的菌液进行高速离心旋转，离心10-15分钟后去除上清液得到乳酸菌。
本发明中的MRS液体培养基、计数培养基均为市面上存在的培养基，在此不再赘述。
氨基酸的制备方法如下：
(31)选择蛋白含量高的黄豆为主要原料，将上述原料浸泡于氢氧化钾水溶液中1小时，使黄豆中含有的氨基酸及营养成分进行充分的水解，制成氨基酸原液；
(32)待氨基酸原液中的黄豆溶解成碎屑后，过滤去除杂质再用适量的磷酸调节pH值在6-8内，提取氨基酸原液。
(33)将步骤(32)提取的氨基酸原液加入发酵容器中，调节含水量至45％-60％，发酵温度控制在40-65℃，并加入适量的的生物酶，进行搅拌使其混合均匀，进行发酵5-10天，即得氨基酸；
芽孢杆菌的制备方法如下：
(41)取出保藏的芽孢杆菌，在温度为30℃的营养肉汁固体培养基培养48小时进行复苏，复苏后的芽孢杆菌在平板培养基上进行划平板稀释分离，24小时后挑取单个菌落移接至有营养肉汁固体培养基的瓶中，在30℃培养箱中培养48小时。
(42)用2000ml无菌水将步骤(41)瓶中产生的的菌苔洗脱下来移接至装有30L液体种子培养基的发酵罐中，培养16-24小时。
(43)将步骤(42)所得的发酵液加至芽孢杆菌固体发酵培养基中，控制发酵温度为30-40℃，发酵36-48小时，即得芽孢杆菌。
本发明中的营养肉汁固体培养基、液体种子培养基均为市面上存在的培养基，在此不再赘述。
实施例2
一种防治旱蜗牛生物菌液，以重量份计，由以下份数原料制成：发酵生物蒸馏提取液25，复合菌剂15份和适量水。所述发酵生物蒸馏提取液由以下份重量份数原料制成：野连树叶6、褚桃树叶8、松针8、辣椒4、椿树叶8、陈皮4。所述复合菌剂由以下重量份数原料制成：乳酸菌4、氨基酸3、芽孢杆菌4。
本优选实施例2的一种防治旱蜗牛生物菌液的制备方法与实施例1制备方法一样。
实施例3
一种防治旱蜗牛生物菌液，以重量份计，由以下份数原料制成：发酵生物蒸馏提取液18份，复合菌剂10份和适量水。所述发酵生物蒸馏提取液由以下份重量份数原料制成：野连树叶5、褚桃树叶7、松针7、辣椒3、椿树叶7、陈皮3。所述复合菌剂由以下重量份数原料制成：乳酸菌3、氨基酸2、芽孢杆菌3。
本优选实施例3的一种防治旱蜗牛生物菌液的制备方法与实施例1制备方法一样。
本优选实施例3的一种防治旱蜗牛生物菌液的使用方法：每亩用生物菌液2000-3000ml兑适量水搅拌均匀，用喷雾器于傍晚时分将所述生物菌液均匀喷洒在农作物上，对旱蜗牛重发生田块，隔5-10天，进行第二次防治。
将本发明实施例1-3获得的生物菌液分别应用于玉米地的实验组中，相对于空白对照组，尤其是施用实施例3本发明生物菌液的田块，旱蜗牛危害明显减轻，且每亩产量提升15％以上，相较于人工捕捉，比较费时费力，浪费资源；在农作物周围撒石灰可能会影响光合作用，使用药剂防治喷洒在农作物上可能会对农作物造成伤害，由此可以对比看出施用本发明生物菌液，能够有效防治旱蜗牛破坏玉米，从而提高了产量。本发明一种防治旱蜗牛生物菌液不仅合理利用资源减少了支出，而且对构建绿色农产品基地大有裨益。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同组分的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (10)

1.一种防治旱蜗牛生物菌液，其特征在于，以重量份计，由以下份数原料制成：发酵生物蒸馏提取液15-25份、复合菌剂5-15份和适量水，所述发酵生物蒸馏提取液，由以下份重量份数原料制成：野连树叶4-6份、褚桃树叶6-8份、松针6-8份、辣椒2-4份、椿树叶6-8份、陈皮3-4份；所述复合菌剂由以下重量份数原料制成：乳酸菌2-4份、氨基酸1-3份、芽孢杆菌2-4份。
2.一种防治旱蜗牛生物菌液，其特征在于，以重量份计，由以下份数原料制成：发酵生物蒸馏提取液15-25份、复合菌剂5-15份和适量水，所述发酵生物蒸馏提取液，由以下份重量份数原料制成：野连树叶5份、褚桃树叶7份、松针7份、辣椒3份、椿树叶7份、陈皮3份。
3.一种防治旱蜗牛生物菌液，其特征在于，以重量份计，由以下份数原料制成：发酵生物蒸馏提取液15-25份、复合菌剂5-15份和适量水，所述复合菌剂由以下重量份数原料制成：乳酸菌3、氨基酸2、芽孢杆菌3。
4.根据权利要求1-3任一所述的一种防治旱蜗牛生物菌液，其特征在于，发酵生物蒸馏提取液18份，复合菌剂10份和适量水。
5.根据权利要求1-3任一所述的一种防治旱蜗牛生物菌液，其特征在于，所述发酵生物蒸馏提取液的制备方法如下：
(11)将野连树叶、褚桃树叶、松针、辣椒、椿树叶、陈皮清洗干净，粉碎加适量水，搅拌均匀，过滤1小时去除杂质，收集滤液；
(12)将步骤(11)收集的滤液放入蒸馏器内进行蒸馏，65-85℃蒸馏1小时，取得发酵生物蒸馏提取液。
6.根据权利要求1-3任一所述的一种防治旱蜗牛生物菌液，其特征在于，所述复合菌剂中乳酸菌的制备方法如下：
(21)将低温保藏的乳酸菌在温度为37℃的灭菌MRS液体培养基中进行多次活化，同时每24小时检测一次纯度和活菌数，待检测达标后将菌液转至10L发酵罐中进行扩大培养36-48小时；
(22)将步骤(21)产生的发酵液加入灭菌的生理盐水中进行不同程度的稀释，分别吸取少量的稀释液注入不同的无菌培养皿中，无菌培养皿中加入计数培养基，放入37℃恒温培养箱中培养48小时，选取菌落数达标的稀释菌液；
(23)利用离心机对步骤(22)选取的菌液进行高速离心旋转，离心10-15分钟后去除上清液得到乳酸菌。
7.根据权利要求1-3任一所述的一种防治旱蜗牛生物菌液，其特征在于，所述复合菌剂中氨基酸的制备方法如下：
(31)选择蛋白含量高的黄豆为主要原料，将上述原料浸泡于氢氧化钾水溶液中1小时，使黄豆中含有的氨基酸及营养成分进行充分的水解，制成氨基酸原液；
(32)待氨基酸原液中的黄豆溶解成碎屑后，过滤去除杂质再用适量的磷酸调节pH值在6-8内，提取氨基酸原液；
(33)将步骤(32)提取的氨基酸原液加入发酵容器中，调节含水量至45％-60％，发酵温度控制在40-65℃，并加入适量的的生物酶，进行搅拌使其混合均匀，进行发酵5-10天，即得氨基酸。
8.根据权利要求1-3任一所述的一种防治旱蜗牛生物菌液，其特征在于，所述复合菌剂中芽孢杆菌制备方法如下：
芽孢杆菌的制备步骤；
(41)取出保藏的芽孢杆菌，在温度为30℃的营养肉汁固体培养基培养48小时进行复苏，复苏后的芽孢杆菌在平板培养基上进行划平板稀释分离，24小时后挑取单个菌落移接至有营养肉汁固体培养基的瓶中，在30℃培养箱中培养48小时；
(42)用2000ml无菌水将步骤(41)瓶中产生的的菌苔洗脱下来移接至装有30L液体种子培养基的发酵罐中，培养16-24小时；
(43)将步骤(42)所得的发酵液加至芽孢杆菌固体发酵培养基中，控制发酵温度为30-40℃，发酵36-48小时，即得芽孢杆菌。
9.基于权利要求1-3所述的一种防治旱蜗牛生物菌液的制备方法，其特征在于:将发酵生物蒸馏提取液、复合菌剂和水搅拌混合均匀后发酵7-10天，得到本发明的一种防治旱蜗牛生物菌液。
10.根据权利要求9所述的一种防治旱蜗牛生物菌液的制备方法，其特征在于:所述复合菌剂由以下原料制成：乳酸菌、氨基酸、芽孢杆菌；
所述复合菌剂中乳酸菌的制备方法如下：
(21)将低温保藏的乳酸菌在温度为37℃的灭菌MRS液体培养基中进行多次活化，同时每24小时检测一次纯度和活菌数，待检测达标后将菌液转至10L发酵罐中进行扩大培养36-48小时；
(22)将步骤(21)产生的发酵液加入灭菌的生理盐水中进行不同程度的稀释，分别吸取少量的稀释液注入不同的无菌培养皿中，无菌培养皿中加入计数培养基，放入37℃恒温培养箱中培养48小时，选取菌落数达标的稀释菌液；
(23)利用离心机对步骤(22)选取的菌液进行高速离心旋转，离心10-15分钟后去除上清液得到乳酸菌；
所述复合菌剂中氨基酸的制备方法如下：
(31)选择蛋白含量高的黄豆为主要原料，将上述原料浸泡于氢氧化钾水溶液中1小时，使黄豆中含有的氨基酸及营养成分进行充分的水解，制成氨基酸原液；
(32)待氨基酸原液中的黄豆溶解成碎屑后，过滤去除杂质再用适量的磷酸调节pH值在6-8内，提取氨基酸原液；
(33)将步骤(32)提取的氨基酸原液加入发酵容器中，调节含水量至45％-60％，发酵温度控制在40-65℃，并加入适量的的生物酶，进行搅拌使其混合均匀，进行发酵5-10天，即得氨基酸；
所述复合菌剂中芽孢杆菌制备方法如下：
(41)取出保藏的芽孢杆菌，在温度为30℃的营养肉汁固体培养基培养48小时进行复苏，复苏后的芽孢杆菌在平板培养基上进行划平板稀释分离，24小时后挑取单个菌落移接至有营养肉汁固体培养基的瓶中，在30℃培养箱中培养48小时；
(42)用2000ml无菌水将步骤(41)瓶中产生的的菌苔洗脱下来移接至装有30L液体种子培养基的发酵罐中，培养16-24小时；
(43)将步骤(42)所得的发酵液加至芽孢杆菌固体发酵培养基中，控制发酵温度为30-40℃，发酵36-48小时，即得芽孢杆菌。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN104447085A (zh) * 2014-11-17 2015-03-25 柳州市天姿园艺有限公司 一种可防治木棉蜗牛虫害的无机有机复合肥
CN105123760A (zh) * 2015-08-25 2015-12-09 孙浠刚 一种本草驱虫液

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