CN109021138A - 一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法 - Google Patents
一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法,首先以金针菇的废弃物菇柄为原料,采用烘干物理破碎法和热水浸提法提取金针菇多糖,通过合理的控制以及优化热水浸提的工艺条件,使得金针菇多糖在废弃菇根中的提取率大大提高;本发明将金针菇废弃菇柄中提取的金针菇多糖作为主要原料,通过化学合成的方式,科学合理地控制反应条件以及原料的添加量,制备出含铁率高的多糖铁复合物,作为补铁剂不仅具有合适的配合稳定性,对胃肠道无或甚少刺激作用,而且当其释放铁之后,配体金针菇多糖具有多方面的生物活性,是对机体有益的成分,可被吸收利用,不会产生毒副作用。
Description
技术领域
本发明涉及食用菌技术领域,尤其涉及一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法。
背景技术
金针菇学名毛柄金钱菌,又称毛柄小火菇、构菌、朴菇、冬菇、冻菌、 金菇、智力菇等。金针菇富含蛋白质、糖类、氨基酸、维生素和铁锌硒等微量元素,适合气血不足、营养不良的老人、儿童、癌症患者、肝脏病及胃、肠道溃疡、 心脑血管疾病患者食用,是一种很好的保健食品。金针菇多糖是金针菇中一种具有生物活性的物质, 它对小鼠肉瘤 S-180有明显的抑制作用。此外金针菇多糖在抗炎、抗疲劳、耐缺氧及提高巨噬细胞吞噬功能方面均有显著作用。若直接食用金针菇,金针菇多糖的含量低,功效不能完全发挥。将金针菇多糖从金针菇中提取富集,制成口服液、胶囊等产品,既实现了金针菇的深加工,其提高附加值, 又可以充分发挥金针菇多糖的功效。金针菇采收时,紧邻培养基的菇柄部分会被切除,产生大量的废弃物,约占原料20%-30%。虽然菇柄废弃物可以作为培养基再次利用,但其中含有木质素、纤维素、蛋白质、多糖、矿质元素等营养物质没有得到充分利用。从菇柄中提取金针菇多糖可以降低生产成本,还可以减少金针菇加工过程的废弃物,促进食用菌产业的健康快速发展。
金针菇多糖提取方法一般为热水浸提法, 经常用酶解、 微波、 超声波等辅助措施,以提高多糖提取率。金针菇多糖热水浸提法的工艺简单,但是提取率比较低。超声辅助热水浸提法,该工艺提高了多糖提取率,但设备复杂,不适于工业化规模化生产。酶解辅助热水浸提法对提取率有较大提高,但对提取条件要求严格。微波协同酶法对多糖提取率的影响,优化的工艺条件下多糖提取率高达21.76%,但所需设备繁琐,工艺复杂,对提取条件要求严格,不适合工业化生产。因此,在中国现有的技术装备和经济情况下,酶解、超声波等辅助热水浸提法均不适合工业化生产,必须进一步研究热水浸提法,提高提取率。
铁是动物体必需的微量元素之一,是维持各种正常生理过程不可或缺的物质, 能够在一定程度上影响机体的免疫功能。缺铁性贫血是当前发病率最高的营养素缺乏病之一,根据人体与动物实验证实,缺铁会导致中性白血球吞噬细菌能力和 T 淋巴细胞对抗原的反应能力降低。当前使用较为广泛的两种补铁剂有无机铁补铁剂和有机铁补铁剂。硫酸亚铁作为无机铁补铁剂的代表,容易刺激胃肠道, 产生口腔异味及铁中毒等毒副作用。以多糖铁为代表的有机铁化合物,具有副作用小、配合性稳定、溶解度好,含铁量高、对胃肠道刺激小、生物利用度高等优点。国内文献报道了当归多糖铁和白芍多糖铁等的制备,但生产成本较高。因此,探究一种生物质资源丰富且低成本的有机补铁剂逐渐成为研究热点。
发明内容
本发明目的就是为了弥补已有技术的缺陷,提供一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法。
本发明是通过以下技术方案实现的:
一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法,包括以下具体步骤:
(1)将金针菇菇根下脚料除去栽培基质等杂质,在60-65℃下干燥至少24小时,放入搅拌机中磨碎过60目筛,备用;称取适量的干燥粉末浸泡在适量的清水中30-40分钟,使粉末成分膨胀,然后继续加入适量蒸馏水,控制合适的料液比,放入90-95℃的水浴锅中浸提;
(2)将水浴锅中的混合料每隔15-20分钟摇晃一次,浸提90-100分钟后冷却至室温,以4000-4500转/分的速度离心15-20分钟,取上清,然后将沉淀洗涤后继续按照料液比加入蒸馏水再次浸提1次,离心取上清液,将两次的上清液混合,加热浓缩;
(3)将浓缩后的混合液进行脱色,然后将脱色后的混合液与氯仿和正丁醇混合物按照一定的比例混合,振荡萃取,取上层液,反复萃取2-3次直至游离蛋白质完全去除,再将萃取液与95%的乙醇按照一定质量混合直至乙醇浓度降至80%,静置10-12小时,以3000-3500转/分离心15-20分钟,取沉淀用丙酮漂洗2-3次,最后将沉淀放入70-75℃的烘箱中干燥12-15小时得到金针菇多糖;
(4)按照配方将步骤(3)得到的金针菇多糖与柠檬酸三钠混合,加入适量的水,加热至50-60℃,同时缓缓滴加2mol/L的三氯化铁溶液以及适量10%的氢氧化钠溶液,控制溶液的pH在7-7.5,当反应液中产生的红棕色不溶性沉淀时,停止滴加三氯化铁和氢氧化钠溶液,然后继续搅拌反应60-80分钟,待反应液冷却后,离心分离,取上层红棕色离心液,加3-4倍体积的95%乙醇,溶液中出现红棕色沉淀物质,收集沉淀,将沉淀用适量无水乙醇洗涤2-3次,最后放入烘箱中以80-90℃干燥即得。
所述的一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法,步骤(1)所述的控制合适的料液比,是指控制料液比为1:20。
所述的一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法,步骤(2)所述的加热浓缩,具体标准为加热浓缩至液体体积为原料混合液的1/4-1/5。
所述的一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法,步骤(3)所述的然后将脱色后的混合液与氯仿和正丁醇混合物按照一定的比例混合,是指按照2:1的比例混合,其中氯仿与正丁醇混合物为氯仿与正丁醇按照5:2的体积比混合的产物。
所述的一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法,步骤(4)所述的配方,具体为:金针菇多糖100g、柠檬酸三钠75g、水2500ml、2mol/L的三氯化铁溶液300ml。
所述的一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法,步骤(4)所述的离心分离,是指按照3500-4000转/分的速度离心15分钟进行分离。
本发明的优点是:本发明首先以金针菇的废弃物菇柄为原料,采用烘干物理破碎法和热水浸提法提取金针菇多糖,通过合理的控制以及优化热水浸提的工艺条件,使得金针菇多糖在废弃菇根中的提取率大大提高;本发明将金针菇废弃菇柄中提取的金针菇多糖作为主要原料,通过化学合成的方式,科学合理地控制反应条件以及原料的添加量,制备出含铁率高的多糖铁复合物,作为补铁剂不仅具有合适的配合稳定性,对胃肠道无或甚少刺激作用,而且当其释放铁之后,配体金针菇多糖具有多方面的生物活性,是对机体有益的成分,可被吸收利用,不会产生毒副作用。本发明不仅得到的产品为开发新型补铁剂提供了借鉴,而且具有工艺过程简单、成本低廉、设备要求低、提取率高的特点,适合工厂化生产,有较高的推广价值。
具体实施方式
一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法,包括以下具体步骤:
(1)将金针菇菇根下脚料除去栽培基质等杂质,在60℃下干燥至少24小时,放入搅拌机中磨碎过60目筛,备用;称取适量的干燥粉末浸泡在适量的清水中30分钟,使粉末成分膨胀,然后继续加入适量蒸馏水,控制料液比为1:20,放入90℃的水浴锅中浸提;
(2)将水浴锅中的混合料每隔15分钟摇晃一次,浸提90分钟后冷却至室温,以4000转/分的速度离心15分钟,取上清,然后将沉淀洗涤后继续按照料液比加入蒸馏水再次浸提1次,离心取上清液,将两次的上清液混合,加热浓缩至液体体积为原料混合液的1/4;
(3)将浓缩后的混合液进行脱色,然后将脱色后的混合液与氯仿和正丁醇混合物按照2:1的比例混合,其中氯仿与正丁醇混合物为氯仿与正丁醇按照5:2的体积比混合的产物,振荡萃取,取上层液,反复萃取2次直至游离蛋白质完全去除,再将萃取液与95%的乙醇按照一定质量混合直至乙醇浓度降至80%,静置10小时,以3000转/分离心15分钟,取沉淀用丙酮漂洗2次,最后将沉淀放入70℃的烘箱中干燥12小时得到金针菇多糖;
(4)按照配方将步骤(3)得到的金针菇多糖与柠檬酸三钠混合,加入适量的水,加热至50℃,同时缓缓滴加2mol/L的三氯化铁溶液以及适量10%的氢氧化钠溶液,控制溶液的pH在7,当反应液中产生的红棕色不溶性沉淀时,停止滴加三氯化铁和氢氧化钠溶液,然后继续搅拌反应60分钟,待反应液冷却后,按照3500转/分的速度离心15分钟进行分离,取上层红棕色离心液,加3倍体积的95%乙醇,溶液中出现红棕色沉淀物质,收集沉淀,将沉淀用适量无水乙醇洗涤2次,最后放入烘箱中以80℃干燥即得。
一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法,步骤(4)所述的配方,具体为:金针菇多糖100g、柠檬酸三钠75g、水2500ml、2mol/L的三氯化铁溶液300ml。
Claims (6)
1.一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法,其特征在于,包括以下具体步骤:
(1)将金针菇菇根下脚料除去栽培基质等杂质,在60-65℃下干燥至少24小时,放入搅拌机中磨碎过60目筛,备用;称取适量的干燥粉末浸泡在适量的清水中30-40分钟,使粉末成分膨胀,然后继续加入适量蒸馏水,控制合适的料液比,放入90-95℃的水浴锅中浸提;
(2)将水浴锅中的混合料每隔15-20分钟摇晃一次,浸提90-100分钟后冷却至室温,以4000-4500转/分的速度离心15-20分钟,取上清,然后将沉淀洗涤后继续按照料液比加入蒸馏水再次浸提1次,离心取上清液,将两次的上清液混合,加热浓缩;
(3)将浓缩后的混合液进行脱色,然后将脱色后的混合液与氯仿和正丁醇混合物按照一定的比例混合,振荡萃取,取上层液,反复萃取2-3次直至游离蛋白质完全去除,再将萃取液与95%的乙醇按照一定质量混合直至乙醇浓度降至80%,静置10-12小时,以3000-3500转/分离心15-20分钟,取沉淀用丙酮漂洗2-3次,最后将沉淀放入70-75℃的烘箱中干燥12-15小时得到金针菇多糖;
(4)按照配方将步骤(3)得到的金针菇多糖与柠檬酸三钠混合,加入适量的水,加热至50-60℃,同时缓缓滴加2mol/L的三氯化铁溶液以及适量10%的氢氧化钠溶液,控制溶液的pH在7-7.5,当反应液中产生的红棕色不溶性沉淀时,停止滴加三氯化铁和氢氧化钠溶液,然后继续搅拌反应60-80分钟,待反应液冷却后,离心分离,取上层红棕色离心液,加3-4倍体积的95%乙醇,溶液中出现红棕色沉淀物质,收集沉淀,将沉淀用适量无水乙醇洗涤2-3次,最后放入烘箱中以80-90℃干燥即得。
2.根据权利要求1所述的一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法,其特征在于,步骤(1)所述的控制合适的料液比,是指控制料液比为1:20。
3.根据权利要求1所述的一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法,其特征在于,步骤(2)所述的加热浓缩,具体标准为加热浓缩至液体体积为原料混合液的1/4-1/5。
4.根据权利要求1所述的一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法,其特征在于,步骤(3)所述的然后将脱色后的混合液与氯仿和正丁醇混合物按照一定的比例混合,是指按照2:1的比例混合,其中氯仿与正丁醇混合物为氯仿与正丁醇按照5:2的体积比混合的产物。
5.根据权利要求1所述的一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法,其特征在于,步骤(4)所述的配方,具体为:金针菇多糖100g、柠檬酸三钠75g、水2500ml、2mol/L的三氯化铁溶液300ml。
6.根据权利要求1所述的一种从金针菇菇根废弃物的多糖提取物制备多糖铁的方法,其特征在于,步骤(4)所述的离心分离,是指按照3500-4000转/分的速度离心15分钟进行分离。
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