CN104628881A

CN104628881A - 毛木耳多糖的提取方法

Info

Publication number: CN104628881A
Application number: CN201510097920.4A
Authority: CN
Inventors: 黄文丽; 陈祖琴
Original assignee: SAAS BIOTECHNOLOGY AND NUCLEAR TECHNOLOGY RESEARCH INSTITUTE
Current assignee: SAAS BIOTECHNOLOGY AND NUCLEAR TECHNOLOGY RESEARCH INSTITUTE
Priority date: 2015-03-05
Filing date: 2015-03-05
Publication date: 2015-05-20

Abstract

本发明属于真菌利用领域，涉及一种提高毛木耳多糖得率、高效的毛木耳多糖的提取方法。该方法包括如下步骤：(1)粉碎干燥毛木耳至粒径为60-300目，得毛木耳粉体；(2)取步骤(1)所得毛木耳粉体与水按质量比1∶20-100混合，搅拌均匀；(3)采用热压法，在密闭容器中于至少120℃、至少0.12MPa的条件下浸提至少20分钟，得毛木耳提取液；(4)离心毛木耳提取液，取上清液采用Sevage法除蛋白后即得毛木耳多糖。本发明方法提高了毛木耳多糖的提取率，大幅度缩短了提取时间，大大减低能耗及生产成本；其工艺路线简捷，易于工业化生产，是一种毛木耳综合加工利用的有效方法。

Description

毛木耳多糖的提取方法

技术领域

本发明属于真菌利用领域，涉及一种高效的毛木耳多糖的提取方法。

背景技术

毛木耳[Auricularia polytricha(Mont.)Sacc.]又称白背毛木耳、黄背木耳，隶属于担子菌门层菌纲木耳目木耳科、木耳属。毛木耳子实体背面富有绒毛层，营养丰富，蛋白质、脂肪、碳水化合物等与黑木耳近似，有些化学成分高于黑木耳，素有“黑色保健食品”和“树上海蜇皮”之美称，有补气血、降血液粘度、降血脂、清肺润燥、清涤胃肠、通便降压、化结石、抗血栓、预防动脉粥样硬化、中风和心肌梗死等功效。赵爽等在专利“一种毛木耳提取物及其制备方法与应用”中，提出一种具有降血脂的毛木耳提取物，用无水乙醇沉淀毛木耳子实体水体液，收集沉淀，得到具有降血脂的功能的毛木耳提取物。

从毛木耳子实体中提取到的多糖是酸性杂多糖，由五种单糖和葡萄糖醛酸组成，分子量约12万，其单糖组成为：L-岩藻糖，L-阿拉伯糖，D-木糖，D-甘露糖和D-葡萄糖。大量的医学和药理学研究表明，毛木耳多糖具有止血、抗血小板聚集、降血脂、抗肿瘤、改善心脏功能、调节免疫功能等功效，是一种良好的保健食品原料。岳凤丽等运用毛木耳发明了一种毛木耳营养饼干、毛木耳营养酥饼以及一种毛木耳复合营养含片；林朝森发明一种木耳荞麦保健面食产品，包括面条、面包等类似食品，面食的干基组成包含了毛木耳，具有明显的降低机体血糖粘度、抗血栓、降血脂、降血糖和辅助治疗高血脂症和糖尿病引起的心血管疾病功效；另外还有杨加金发明了一种毛木耳饮料，将其制成一种风味独特、营养丰富、食用方便，具有很好保健作用的功能饮料。毛木耳多糖具有制成药品和保健品的潜能且深受人们喜爱，具有广阔的开发前景。

目前关于毛木耳多糖的研究较少，毛木耳多糖含有较多的胶质成分，给毛木耳多糖的提取增加困难。毛木耳多糖的提取方法主要有热水浸提法、酸浸提法、碱浸提法、微波法等。热水浸提法是利用细胞吸水膨胀，改变细胞壁内外渗透压，从而使毛木耳多糖从细胞中溶出对毛木耳。曹蕊等通过正交实验，考察浸提时间、浸提温度、浸提次数和固液比4个因素多糖提取的影响，结果浸提温度为80℃.浸提时间为l h，固液比为1：30(g/mL)，反复浸提3次。所得毛木耳水溶性粗多糖最多，其得率可达0.755％。许晓燕等通过正交试验及其验证试验确定的毛木耳多糖的最佳提取条件为料水比1∶40，浸提次数2次，浸提时间4h，浸提温度100℃，在此条件下，毛木耳多糖得率可达5.90％。这种提取方法提取的次数多、得率低、时间长、并且浪费时间和原料。酸浸法和碱浸法容易使部分多糖发生水解，破坏多糖的成分和活性结构，减少多糖的得率，不适用于大规模的提取应用。

在此应用背景下，本发明的发明人欲提供一种全新的提取方法提取毛木耳多糖。

发明内容

本发明所解决的技术问题是提供一种提高毛木耳多糖得率的高效提取方法。

本发明毛木耳多糖的提取方法，包括如下步骤：

(1)取干燥毛木耳粉碎得到毛木耳粉体；

(2)取毛木耳粉体与水按一定质量比混合；

(3)采用热压法浸提得毛木耳提取液；

(4)离心毛木耳提取液，取上清液采用Sevage法除蛋白后即得毛木耳多糖。

本发明提取方法克服了现有提取方法提取率低、提取工艺繁琐的技术问题；大幅度提高了毛木耳多糖的提取率，缩短提取时间，大大减低能耗及生产成本；其工艺路线简捷，易于工业化生产，是一种毛木耳综合加工利用的有效方法。

为实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

本发明的毛木耳多糖的提取方法，该方法包括如下步骤：

(1)粉碎干燥毛木耳至粒径为60-300目，得毛木耳粉体；

(2)取步骤(1)所得毛木耳粉体与水按质量比1∶20-100混合，搅拌均匀；

(3)采用热压法，在密闭容器中于至少120℃、至少0.12MPa的条件下浸提至少20分钟，得毛木耳提取液；

上述技术方案中，优选所述步骤(1)毛木耳粉体粒径为160-300目。亦可优选毛木耳粉体粒径为100-160目。

上述技术方案中，优选所述步骤(2)毛木耳粉体与水按质量比1∶40-100混合；进一步优选，所述步骤(2)毛木耳粉体与水按质量比1∶40混合。

上述技术方案中，所述步骤(3)采用热压法，优选在密闭容器中于120℃、0.12MPa的条件下浸提至少40分钟；进一步优选，所述步骤(3)采用热压法，在密闭容器中于120℃、0.12MPa的条件下浸提80分钟。

上述技术方案中，所述步骤(3)密闭容器优选为压力蒸汽锅。

上述技术方案中，所述步骤(3)浸提次数优选至少提取一次。

上述技术方案中，所述步骤(4)Sevage法除蛋白是按氯仿∶正丁醇按体积比4∶1比例配制Sevage试剂，毛木耳提取液与Sevage试剂按体积比4∶1混合，充分震荡摇匀除蛋白。

本发明提取方法的优点在于：

针对毛木耳子实体中提取毛木耳多糖传统方法提取率低、耗时长、能耗大等问题，本发明方法采用密闭容器进行提取，在高温高压条件下，胞内多糖充分释放，可获得13％以上、甚至高达28％的多糖提取率。本发明提取方法大幅度不仅提高了毛木耳多糖的提取率，有效提高原料利用率，大大缩短提取时间，降低能耗和降低生产成本，同时其提取工艺路线简捷，易于工业化生产，是一种毛木耳综合加工利用的有效方法。

具体实施方式

以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。

传统的毛木耳多糖提取采用热水浸提，多糖难以从胞内扩散出来；而酸、碱法容易破坏多糖的结构，降低其生物利用率。本发明提取方法用压力蒸汽锅提取毛木耳多糖的新技术更适用于工厂化生产运用，在高温高压条件下，使得毛木耳细胞壁破裂，促进多糖的溶出，提高多糖的提取率。与传统的热水浸提技术相比可以大大缩短提取时间、降低能耗、减少杂质成分的溶出，提高有效成分的收率。本发明采用高温高压提取毛木耳多糖，大幅度提高了毛木耳多糖的提取率，有效提高了原料利用率，并节约能源，降低生产成本，其工艺路线简捷，易于工业化生产，使提取率大为提高，且工业生产可行，对于毛木耳的综合开发及提高其经济价值具有实际意义。

以下为传统提取毛木耳多糖的方法：选取2g毛木耳细粉，通过不同提取方法得到上清液后，通过3倍体积70％乙醇沉淀，Savage法去除蛋白，获得毛木耳多糖，经苯酚-硫酸法测定其得率。

一、热水浸提

通过不同粒径、料液比、提取温度、PH值以及浸提时间进行正交实验，获得毛木耳多糖的得率如表1。

结论显示：多糖得率较高(最高达到15.6)，最佳参数为：100-160目、料液比1:20、100℃、PH值5、浸提4h；主要影响因素是温度、粒径，粒径不易过细亦不易太粗，温度越高得率越高；此法耗时长，能耗高。

表1热水浸提法正交实验

二、超声波提取

通过不同粒径、超声波功率、超声时间及料液比进行正交实验，获得毛木耳多糖的得率如表2。

结论显示：多糖得率低(最高只达11.95％；)；最佳参数为：(160-300目)、400W、50min、料液比1:40；主要影响因素是粒径和超声时间，粒径越细、超声时间越长得率越高；此法多糖得率低，不适用于高效提取，可用于辅助提取。

表2超声波提取正交实验

三、微波法

通过不同粒径、微波功率、时间及料液比进行正交实验，获得毛木耳多糖的得率如表3。

结论显示：多糖得率不高(最高达13.03％)；最佳参数为：160-300目、700W、50min、料液比1:20；主要影响因素为粒径与微波时间，粒径约细、微波时间越长、时间越长得率越高；此法处理量小，成本高，不适于大规模提取。

表3微波法正交实验

以上三个方法均见文献报道，此外还有酶解法，有机萃取法，酸(碱)提法，超高压提取。这些方法能在多糖的得率上有一定的优势，但是不同的粒径、液料比、时间、温度对于提取得率影响较大，而且在大规模应用中受到很大的限制，例如添加额外的成分或者是对设备有着更高的要求，操作繁琐，成本高。

本发明毛木耳多糖的提取方法提取条件考察试验。

采用单因素实验对热压法的最佳参数进行确定，具体过程如下：

控制粒径、浸提时间、料液比，确定最优的温度，结果见表4：

表4

实验结果为120℃(0.12Mpa)条件下，毛木耳多糖得率最高，进行下一步实验设计。

控制浸提温度(120℃)，粒径和料液比，筛选浸提时间见表5：

表5

实验结果为：在该条件下，80min处理毛木耳多糖得率最高，接下来以120℃(0.12Mpa)浸提温度，80min处理时间，筛选粒径对多糖得率的影响。

控制浸提温度(120℃)、浸提时间(80min)以及料液比，对粒径进行筛选，结果见表6：

表6

由实验结果可以看出，在浸提温度120℃(0.12Mpa)，80min浸提时间，1:60料液比情况下，毛木耳多糖得率整体较高，且随着粒径的增大，毛木耳多糖得率有所提高，但是变化幅度不大。考虑到毛木耳粉越细，过筛难度越大，工作量越大，因此在下一步实验选用100-160目、120℃、80min进行料液比的筛选。

控制粒径(100-160目)、浸提温度(120℃)、浸提时间(80min)对料液比进行筛选，结果见表7：

表7

结论：经过单因素实验，确定热压法提取毛木耳多糖的参数为：粒径60-300目、浸提温度至少120℃、浸提时间至少20min、料液比1:20-100，毛木耳多糖的得率大于18％；优选当粒径100-160目、浸提温度120℃、浸提时间80min、料液比1:40，毛木耳多糖的得率可达到27.27％，较其他提取方法有极大的提升。

以下为制备实例：

实施例1

(1)取毛木耳子实体干燥后粉碎得毛木耳粉末，毛木耳粉末粒度为160～300目；

(2)将上述得到的毛木耳粉末与蒸馏水按质量比1∶60混合，搅拌均匀；

(3)将步骤(2)中的混合液，用用压力蒸汽锅，在120℃、0.12MP条件下，浸提20分钟；

(4)将步骤(3)中的毛木耳提取液，离心后分离上清液与沉淀物，取上清液；

(5)将步骤(4)上清液经Sevage法除蛋白后，得到毛木耳多糖。毛木耳多糖的提取率为13.35％。

实施例2

(3)将步骤(2)中的混合液，用用压力蒸汽锅，在120℃、0.12MP条件下，浸提80分钟；

(5)将步骤(4)上清液经Sevage法除蛋白后，得到毛木耳多糖。毛木耳多糖的提取率为19.67％。

实施例3

(1)取毛木耳子实体干燥后粉碎得毛木耳粉末，毛木耳粉末粒度为100～160目；

(2)将上述得到的毛木耳粉末与蒸馏水按质量比1∶40混合，搅拌均匀；

(3)将步骤(2)中的混合液，用压力蒸汽锅在120℃、0.12MP的条件下浸提80分钟；

(5)将步骤(4)上清液经Sevage法除蛋白后，得到毛木耳多糖。毛木耳多糖的提取率为27.27％。

Claims

1.毛木耳多糖的提取方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)粉碎干燥毛木耳至粒径为60-300目，得毛木耳粉体；

2.根据权利要求1所述的毛木耳多糖的提取方法，其特征在于：所述步骤(1)毛木耳粉体粒径为160-300目。

3.根据权利要求1所述的毛木耳多糖的提取方法，其特征在于：所述步骤(1)毛木耳粉体粒径为100-160目。

4.根据权利要求1所述的毛木耳多糖的提取方法，其特征在于：所述步骤(2)毛木耳粉体与水按质量比1∶40-100混合；

优选，所述步骤(2)毛木耳粉体与水按质量比1∶40混合。

5.根据权利要求1所述的毛木耳多糖的提取方法，其特征在于：所述步骤(3)采用热压法，在密闭容器中于120℃、0.12MPa的条件下浸提至少40分钟；

优选，所述步骤(3)采用热压法，在密闭容器中于120℃、0.12MPa的条件下浸提80分钟。

6.根据权利要求1所述的毛木耳多糖的提取方法，其特征在于：所述步骤(3)密闭容器为压力蒸汽锅。

7.根据权利要求1所述的毛木耳多糖的提取方法，其特征在于：所述步骤(3)浸提次数至少提取一次。

8.根据权利要求1所述的毛木耳多糖的提取方法，其特征在于：所述步骤(4)Sevage法除蛋白是按氯仿∶正丁醇按体积比4∶1配制Sevage试剂，毛木耳提取液与Sevage试剂按体积比4∶1混合，充分震荡摇匀除蛋白。