CN109010630B - 一种制备六神曲的前处理工艺 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种制备六神曲的前处理工艺，包括以下步骤：(1)取原料面粉、麦麸、赤小豆、苦杏仁、青篙、苍耳、辣蓼；(2)将苦杏仁、赤小豆混合，粉碎，与面粉、麦麸混匀；(3)辣蓼、青蒿、苍耳草加水煎煮，过滤，浓缩，与步骤(2)所得药粉拌匀，即可。本发明还公开了一种六神曲的制备方法。本发明方法制备得到的六神曲的有效成分含量高，优于现有方法制备得到的六神曲，应用前景优良。

Description

一种制备六神曲的前处理工艺
技术领域
本发明属于一种制备六神曲的前处理工艺。
背景技术
六神曲又名六曲、神曲，最早收载于《药性论》，现在多由面粉、麦鼓、赤小豆、苦杏仁、青篙、苍耳、辣寥按一定比例发酵制成。现今报道六神曲的主要成分有麦角固醇、挥发油、普类、维生素复合体，以及富含酵母菌和酶类。
六神曲是传统发酵类中药中应用最广泛的一种。具有健脾和胃，消食调中，兼发表的功效。临床主要用于因饮食失节，食积停滞所引起的脱腹满胀，呕吐泻痢等消化不良症状。神曲一名，首见于《金匾要略》，其异名六神曲则始载于《本草便读》。《本草纲目》中记述了神曲得名的由来，“盖取诸神聚会之日造之，故得神名”。我国制造神曲始于北魏，贾思舰在《齐民要术》中叙述了神曲的制法。但元代以前神曲均系造酒之曲，至明代以后才有加入青篙等药制成神曲的方法。《神农本草经疏》记载“用五月五日，或六月六日，以白面百斤，青篙自然汁三升，以配白虎、青龙、朱雀、玄武、勾陈、腾蛇六神，用面和汁，豆、杏仁作饼，麻叶或褚叶包，如造黄酱法、待生黄衣、晒干收之”。
在制备六神曲时，需要先对原料药进行前处理，具体地，取面粉、麦鼓、赤小豆、苦杏仁、青篙、苍耳、辣寥七味，苦杏仁、赤小豆粉碎成粗粉，与面粉、麦麸混匀，另取辣蓼、青蒿、苍耳草加水煎煮1小时，滤过，滤液浓缩成清膏，趁热与上述药粉拌匀。
但是，该种前处理方式制备得到的六神曲质量不佳，有待改进。
发明内容
为了解决前述问题，本发明提供了一种制备六神曲的前处理工艺。
本发明提供了一种制备六神曲的前处理工艺，包括以下步骤：
(1)取原料面粉、麦鼓、赤小豆、苦杏仁、青篙、苍耳、辣寥；
(2)将苦杏仁、赤小豆混合，粉碎，与面粉、麦麸混匀；
(3)辣蓼、青蒿、苍耳草加水煎煮，过滤，浓缩，与步骤(2)所得药粉拌匀，即可。
步骤(2)中，将苦杏仁、赤小豆混合过2号筛粉碎成粗粉。
步骤(3)中，辣蓼、青蒿、苍耳草加水煎煮的工艺是：辣蓼、青蒿、苍耳草加入10～12倍量的水，浸泡30～60min，加热至沸腾后煎煮1h，煎煮一次。
步骤(3)中，辣蓼、青蒿、苍耳草加水煎煮的工艺是：辣蓼、青蒿、苍耳草加入12倍量的水，浸泡30min，加热至沸腾后煎煮1h，煎煮一次。
步骤(3)中，过滤的方法是用200目滤布板框滤过。
步骤(3)中，浓缩的方式是：浓缩至药材量的6.5倍。
本发明还提供了一种六神曲的制备方法，步骤如下：取前述方法得到的待发酵药粉，发酵，干燥，即可。其中，所述发酵的方法是：自然发酵3～4天至表面遍生黄白色或灰白色霉衣。
本发明还提供了前述方法制备得到的六神曲。
本发明方法制备得到的六神曲前的有效成分含量高，优于现有方法制备得到的六神曲，应用前景优良。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
附图说明
图1槲皮素标准曲线
图2绿原酸标准曲线
图3不同药液量制备软材情况
具体实施方式
实施例1：一种制备六神曲的前处理工艺
一、实验目的
在《卫生部药品标准中药成方制剂第十九册》六神曲标准(WS3-B-3555-98)规定的基础上，对六神曲发酵前的制备工艺过程，进行最优工艺参数优选。
二、实验材料
1.原料：苦杏仁、赤小豆、青蒿、辣廖、苍耳草，上述饮片均由四川辅正药业有限责任公司提供。
2.试剂试药：槲皮素对照品(批号150302)、绿原酸对照品(批号140601)，均由成都普菲德生物技术有限公司提供；亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、甲醇、乙醇等有机试剂均为分析纯。
3.实验仪器：FW135型中草药粉碎机(上海隆拓仪器设备有限公司)、UV-6100型紫外可见分光光度计(上海美谱达仪器有限公司)、ZDHW型电热套(北京中兴伟业仪器有限公司)、FA1204C型万分之一电子天平(上海越平科学仪器有限公司)、DHG-9240型电热恒温鼓风干燥箱(上海将任实验设备有限公司)、HHS-8S型电子恒温不锈钢水浴锅(上海宜昌仪器纱筛厂)、RE-2000B型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)。
三、苦杏仁、赤小豆粉碎工艺研究
1.实验方法
按照六神曲标准，需将苦杏仁、赤小豆粉碎成粗粉。《中国药典》对于粗粉的定义为：全部通过二号筛但混有通过四号筛不超过40％的粉末，故粉碎中过粗或者过细均不适合。
采用单因素试验法，对苦杏仁、赤小豆采用单独粉碎和混合粉碎的方法进行考察，以粉碎成恰当合格率为指标，设计试验如下：
(1)取苦杏仁、赤小豆各100g，置杯式粉碎机中，分别粉碎1min、2min、3min……直至粉末合格率达标。
(2)取苦杏仁、赤小豆各50g，混合，置杯式粉碎机中，粉碎1min、2min、3min……直至粉末合格率达标。
2.实验结果
结果见表1。
表1苦杏仁、赤小豆粉碎工艺研究
Figure BDA0001316838330000031
从表1可见，单独粉碎时，苦杏仁较难粉碎过筛，所需时间长且回收率较低；而赤小豆较易粉碎，但是容易细粉过多，不符合粗粉要求。混合粉碎时，不至于过快粉碎导致细粉过多，较好控制粉碎程度，且粉末收得率高。
3.结论
在高速杯式粉碎机中，每100g样品(苦杏仁、赤小豆各50g混合均匀)，粉碎1min即可。工业大生产中，一般采用万能粉碎机，将苦杏仁、赤小豆适量，等分混合均匀，采用2号筛网，粉碎通过即可。
四、辣蓼、青蒿、苍耳草煎煮工艺研究
1.实验方法
1.1煎煮工艺设计
参照《中国药典》和部颁药品标准中药成方制剂品种、卫生部和国家中医药管理局《医疗机构中药煎药室管理规范》中对于需要煎煮制备的要求，设计相应的实验方案。试验以出膏率及成分提取率为指标，影响因素有加水量、浸泡时间、煎煮时间、煎煮次数等，设计4因素3水平的试验。
按照六神曲标准的要求，制法中已经规定了煎煮时间为1小时，煎煮次数为1次，故不再作为筛选考察指标。取青蒿、辣廖、苍耳草各约33.3g(合计100g)，混合均匀，按照表2和表3进行处理。
表2煎煮工艺因素水平表
Figure BDA0001316838330000041
表3试验设计表
Figure BDA0001316838330000042
煎煮药液用200目纱布滤过，滤液均加蒸馏水定容到1000ml，备用。
1.2出膏率测定
精密量取25ml上述煎煮药液，置于已恒重的蒸发皿中，水浴加热挥干，于105℃烘箱干燥至恒重,称定重量，计算出膏率，每组平行2份，计算平均值。
干膏率＝(干膏重*1000ml/25ml)/原药材重100g*100％
1.3含量测定
采用紫外-可见分光光度法测定槲皮素、绿原酸的含量。
1.3.1槲皮素含量测定
(1)对照品溶液的制备
精密称取槲皮素对照品10mg(0.00997g)，用95％乙醇溶解并定容到10ml，超声充分溶解即得1mg/ml的槲皮素对照品溶液，备用。
(2)供试品溶液的制备
取0.5ml原煎煮药液，加无水乙醇定容到10ml，摇匀后超声10min，过滤，取滤液作为供试品溶液备用。
(3)标准曲线的制定
分别吸取对照品溶液0、0.5、1、1.5、2、2.5ml于6个25ml容量瓶中，用95％乙醇定容到25ml；以加入0ml对照品的溶液作为空白溶液，在370nm处测定吸光度，并以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标作标准曲线，得回归方程。
(4)含量测定
以加入0ml对照品的溶液作为空白溶液，直接将供试品溶液在370nm处测定吸光度，计算各供试品槲皮素含量。
原药液中槲皮素含量＝所测得槲皮素含量*1000ml/0.5ml
1.3.2绿原酸含量测定
(1)对照品溶液的制备
精密称取绿原酸对照品1mg(0.00098g)，用95％甲醇溶解并定容到10ml，超声充分溶解即得0.1mg/ml的绿原酸对照品溶液，备用。
(2)供试品溶液的制备
取0.5ml原煎煮药液，加无水甲醇定容到10ml，摇匀后超声10min，过滤，取滤液作为供试品溶液备用。
(3)标准曲线的制定
分别吸取对照品溶液0、0.5、1、1.5、2、2.5ml于6个10ml容量瓶中，用95％甲醇定容到10ml；以加入0ml对照品的溶液作为空白溶液，在327nm处测定吸光度，并以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标作标准曲线，得回归方程。
(4)含量测定
以加入0ml对照品的溶液作为空白溶液，直接将供试品溶液在327nm处测定吸光度，计算各供试品槲皮素含量。
原药液中绿原酸含量＝所测得绿原酸含量*1000ml/0.5ml
2.实验结果
2.1出膏率结果见表4。
表4煎煮试验出膏率
Figure BDA0001316838330000061
2.2含量测定
2.2.1槲皮素含量测定
(1)标准曲线的制定
以槲皮素对照品浓度(μg/ml)为横坐标[X]，以吸光度值为纵坐标[Y]绘制标准曲线，得线性回归方程：Y＝0.0297X-0.0701，相关系数γ＝0.9999，结果见图1，槲皮素在0～100μg/ml范围内线性关系良好。
(2)样品含量测定结果见表5。
表5样品槲皮素含量测定结果
Figure BDA0001316838330000071
2.2.2绿原酸含量测定
(1)标准曲线的制定
以绿原酸对照品浓度(μg/ml)为横坐标[X]，以吸光度值为纵坐标[Y]绘制标准曲线，得线性回归方程：Y＝0.0459X-0.0094，相关系数γ＝0.9977，结果见图2，绿原酸在0～100μg/ml范围内线性关系良好。
(2)样品含量测定结果见表6。
表6样品绿原酸含量测定结果
Figure BDA0001316838330000072
2.3最佳煎煮工艺确定
综合评分：出膏率(权重20％)、槲皮素含量(权重40％)、绿原酸含量(权重40％)。结果见表7。
表7综合评分表
Figure BDA0001316838330000081
备注：出膏率以9次的平均值9.77％为最大分值，超过即为满分，不足计算相对分。其余含量均以最高值为满分，其余计算相对分。
实验结果证明，试验号5、7、8的效果比较优，最优选试验号8的方式。
因此，本发明方法的方法为：取青蒿、辣廖、苍耳草各约33.3g(合计100g)，混合均匀，连续取样3份，分别均加入10～12倍水量，浸泡30～60min，加热至沸腾后煎煮1h，煎煮一次，将煎液用200目滤布滤过；最优选的方法为：取青蒿、辣廖、苍耳草各约33.3g(合计100g)，混合均匀，连续取样3份，分别均加入12倍水量，浸泡30min，加热至沸腾后煎煮1h，煎煮一次。将煎液用200目滤布滤过。
五、滤过工艺研究
1.方法
取青蒿、辣廖、苍耳草各33.3g(合计100g)，按加水12倍浸泡30min后煎煮1h提取，平行4份，分别按照抽滤(单层滤纸易破，故将滤纸用榨汁机粉碎后抽滤，制成厚薄均匀的滤纸饼，压缩后烘干备用)、200目纱布滤过两种方式滤过，每种方式两份，以回收率和操作可行性为评价指标进行评价。
2.结果 见表8。
表8滤过工艺研究
Figure BDA0001316838330000091
从表8可见，纱布滤过时时间较快且回收率较高。在操作过程中，抽滤时滤纸饼较易堵塞导致抽滤时间较长，且滤纸饼堵塞后吸附药液较难滤过导致药液损失较多；而纱布滤过不存在堵塞问题所以时间较短，损失仅为药渣吸附部分，不存在仪器吸附故损失较小。综上纱布滤过较抽滤好。
结论：结合大生产实际，可用类似纱布的滤网(200目)作为滤过介质，采用板框加压方式，进行多层滤过。
六、浓缩工艺研究
1.方法
1.1浓缩终点的判断
按部颁六神曲标准规定，取六神曲发酵其他固体成分处方量，逐渐加入提取药液，每次加入100ml，直至制成符合“揉之成团，触之即散”标准的软材。确定符合条件所需药液的范围。
1.2浓缩工艺研究
称取处方量药材，按确定的提取工艺进行提取，平行提取两份，提取后加水补足损失，等分成两份。其中各取一份采用水蒸气加热法常压浓缩；另外两份采用减压法(温度60℃，真空度0.08～0.09MPa)浓缩。记录浓缩到标准范围时所需要的时间，并采用紫外法测定绿原酸的含量进行比较确定。
2.结果
2.1浓缩终点的判断见图3。
从图3可见，在药液500～800ml范围内，制备的软材情况较好。故标准处方量下制备软材所需液体量范围为500～800ml，平均值为650ml。按12倍加水量记(不考虑药材吸附和煎煮损失)，药液需浓缩33.3％～58.3％。
2.2浓缩工艺结果
每份药液600ml，药液需浓缩33.3％～58.3％，即浓缩到167ml和356ml的时间，结果见表9。
表9浓缩工艺研究结果
Figure BDA0001316838330000101
从表9可见，两种方式浓缩后，达到规定范围体积所需时间相差很大，而浓缩后所含绿原酸成分差异较小。
结论：参考现大生产，现多为常压浓缩方式。故按照标准处方，制备软材液体按照650ml计算合适，即浓缩至药材量的6.5倍。
七、最终优化工艺
原工艺：以上七味，苦杏仁、赤小豆粉碎成粗粉，与面粉、麦麸混匀，另取辣蓼、青蒿、苍耳草加8倍量水煎煮1小时，滤过，滤液浓缩成清膏，趁热与上述药粉拌匀。
优化工艺：以上七味，苦杏仁、赤小豆混合，过2号筛粉碎成粗粉，与面粉、麦麸混匀，另取辣蓼、青蒿、苍耳草加12倍量水，浸泡30分钟，煎煮1小时，用200目滤布板框滤过，滤液浓缩成清膏(原生药6.5倍量水)，趁热与上述药粉拌匀。
将得到的药粉，自然发酵3～4天至表面遍生黄白色或灰白色霉衣，取出，干燥，即得。
将优化工艺与原工艺处理，分别各制备六神曲样品3批，每批1000g，结果见表10。
表10优化工艺与原工艺样品对比表
Figure BDA0001316838330000102
从表10可见，原工艺3批样品的槲皮素含量为0.28～0.35mg/g，平均为0.32mg/g，而优化工艺3批样品的槲皮素含量为0.44～0.51mg/g，平均为0.48mg/g，优化工艺增加50.0％；原工艺3批样品的绿原酸含量为0.22～0.27mg/g，平均为0.24mg/g，而优化工艺3批样品的槲皮素含量为0.37～0.41mg/g，平均为0.39mg/g，优化工艺增加62.5％。因此，优化工艺与原工艺比较，充分说明了其优越性和稳定性。
实验结果说明，本发明方法制备得到的六神曲前的有效成分含量高，优于现有方法制备得到的六神曲，应用前景优良。

Claims (5)

1.一种制备六神曲的前处理工艺，其特征在于：其是由如下步骤组成：
（1）取原料面粉、麦麸、赤小豆、苦杏仁、青篙、苍耳草、辣寥；
（2）将苦杏仁、赤小豆等份混合均匀，采用2号筛网，粉碎通过，再与面粉、麦麸混匀；
（3）辣蓼、青蒿、苍耳草等份混合均匀，加入12倍量的水，浸泡30min，加热至沸腾后煎煮1h，煎煮一次，过滤，浓缩至药材量的6.5倍，与步骤（2）所得药粉拌匀，得待发酵药粉即可。
2.根据权利要求1所述的处理工艺，其特征在于：包括以下步骤：步骤（3）中，过滤的方法是用200目滤布板框滤过。
3.一种六神曲的制备方法，其特征在于：步骤如下：取权利要求1~2任意一项所述方法得到的待发酵药粉，发酵，干燥，即可。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述发酵的方法是：自然发酵3~4天至表面遍生黄白色或灰白色霉衣。
5.权利要求3或4所述方法制备得到的六神曲。
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