CN108949637A - 分解甲醛用自然循环微生物菌剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种分解甲醛用自然循环微生物菌剂,采用乳清蛋白提取物、生物酶、溶杆菌C8‑1、分枝杆菌YC‑RL4、柠檬酸杆菌、屎肠球菌和布拉迪酵母菌为原料,乳清蛋白通过酶解得到乳清蛋白提取物,微生物通过独立培养后再与乳清蛋白提取物及生物酶进行混合,制成成品。本发明的有益效果为:本发明的分解甲醛用自然循环微生物菌剂适用于对我们的生活环境空间内进行除甲醛,具有除甲醛、杀菌、除臭、清晰空气的作用,甲醛去除率最高为94.0%。本发明的分解甲醛用自然循环微生物菌剂中的微生物长时间在环境中存活,发挥作用,效果持久,对人体没有任何伤害作用。
Description
技术领域
本发明属于环境保护技术领域,具体涉及一种分解甲醛用自然循环微生物菌剂及其制备方法。
背景技术
甲醛是一种常见的空气污染物室内甲醛污染主要来源于四种,包括用甲醛做防腐剂的涂料、化纤地毯、化妆品等产品;室内吸烟,装修材料及新的组合家具是造成甲醛、苯、氨和TVOC污染的主要来源;以及UF泡沫作房屋防热、御寒的绝缘材料,在光和热的作用下泡沫老化,释放甲醛、苯、氨和TVOC等。
长期接触低剂量甲醛可引起慢性呼吸道疾病,引起鼻咽癌、结肠癌、脑瘤、月经紊乱、细胞核的基因突变,DNA单链内交连和DNA与蛋白质交连及抑制DNA损伤的修复、妊娠综合症、引起新生儿染色体异常、白血病,引起青少年记忆力和智力下降。在所有接触者中,儿童和孕妇对甲醛尤为敏感,危害也就更大。据相关资料统计显示:人类有69%的病症与室内环境有关,我国每年有13万人死于室内污染,90%以上的幼儿白血病患者都是住进新装修房一年内患病的。
对于甲醛污染,目前市面上最普遍的防治方法是使用活性炭、光触媒技术、植物净化剂和生物降解等。
活性炭净化空气随着温度、风速升高到一定程度的时候,所吸附的污染物有可能游离出来,再次进入呼吸空间中;而且活性炭吸附很容易达到吸附饱和,需要经过活化处理才能二次使用。
光触媒一种以纳米级二氧化钛为代表的具有光催化功能的光半导体材料的总称,二氧化钛是无毒的,但是纳米级二氧化钛可以直接通过肺进入血液循环,而且光触媒不能长久除甲醛,容易脱落,脱落后就不能再除甲醛了。
植物净化剂是通用萃取植物中的有效成分配置成植物源消毒液,喷入空气中起到除甲醛的作用,但其原料往往需要很多种,需要较大的生产车间存放原料,萃取效率低,若萃取条件不当还会导致提取的产物不能发挥除甲醛作用。
发明内容
为了解决现有技术存在的上述问题,本发明提供了一种分解甲醛用自然循环微生物菌剂及其制备方法。本发明的分解甲醛用自然循环微生物菌剂适用于对我们的生活环境空间内进行除甲醛,具有降解甲醛效果好、费用低、占地面积小等的特点。
本发明所采用的技术方案为:一种分解甲醛用自然循环微生物菌剂,由以下组分制成,所述组分包括:
乳清蛋白提取物、生物酶、溶杆菌C8-1、分枝杆菌YC-RL4、柠檬酸杆菌、屎肠球菌和布拉迪酵母菌。
进一步的,所述原料按重量份包括:
乳清蛋白提取物2-4份、生物酶0.1-0.3份、溶杆菌C8-1、分枝杆菌YC-RL4和柠檬酸杆菌各3-7份、屎肠球菌1-2份和布拉迪酵母菌2-4份。
进一步的,所述溶杆菌C8-1,选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏号:CGMCCNo.116271;分枝杆菌YC-RL4,选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,其保藏编号为CGMCC No.10993;柠檬酸杆菌,选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,菌种保藏号为CGMCC No.15120;屎肠球菌选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏号:CGMCCNo.12334;布拉迪酵母菌选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏号:CGMCCNo.10381。
一种制备所述的分解甲醛用自然循环微生物菌剂的方法,该方法包括以下步骤:
(1)乳清蛋白提取物的制备:将乳清蛋白粉加入其重量的10-15倍的水溶解后,经85℃预热10min,然后冷却到45-50℃,pH值调至8.3-8.7,保温10-15min后加入胰蛋白酶进行酶解,所述酶解过程中保持pH值为8.3-8.7,所述酶解的时间为2.5-3.5小时,然后沸水浴灭酶10-15min,得到乳清蛋白酶解物;将所述乳清蛋白酶解物冷却至室温,调pH至7.0,离心取上清液,用超滤膜进行超滤,冷冻干燥得到乳清提取物;
(2)菌的活化:先将溶杆菌C8-1、分枝杆菌YC-RL4、柠檬酸杆菌、屎肠球菌和布拉迪酵母菌分别使用LB培养基在37℃进行活化,得到溶杆菌C8-1活化液、分枝杆菌YC-RL4活化液、柠檬酸杆菌活化液、屎肠球菌活化液和布拉迪酵母菌活化液;
(3)菌的培养:将步骤(2)得到的溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌种子液分别接种到液体培养基中,分别独立培养,接种量为液体培养基体积的1-3%,培养24小时,摇床转速为100rpm,得到溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌;
(4)混合:将步骤(3)得到的溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌与步骤(1)得到的乳清蛋白提取物按比例混合,混合液离心、超滤后和生物酶混合,混合均匀即得所述分解甲醛用自然循环微生物菌剂。
进一步的,步骤(1)中,采用分子量为20000Da的超滤膜进行超滤,取滤过液。
进一步的,步骤(2)中,得到的溶杆菌C8-1活化液、分枝杆菌YC-RL4活化液、柠檬酸杆菌活化液、屎肠球菌活化液和布拉迪酵母菌活化液的浓度均为3×106CFU/mL-8×106CFU/mL。
进一步的,步骤(3)中,液体培养基为:葡萄糖15g/l,大豆蛋白胨4.8g/l,酵母浸膏2.5g/l,柠檬酸铵1.8g/l,乙酸钠5g/l,K2HPO4 2g/l,吐温80 1ml/l,MgSO4·7H2O 0.6g/l,MnSO4·4H2O:0.3g/l,水定容到1L。
进一步的,步骤(4)中,采用分子量为10000Da和20000Da的超滤膜进行超滤,截留后的最小分子量为10000Da,截留后的最大分子量为20000Da。
一种分解甲醛用自然循环微生物菌剂的使用方法,将所述分解甲醛用自然循环微生物菌剂以喷洒的形式施入空气中。
进一步的,用制备好的所述分解甲醛用自然循环微生物菌剂,以1:300-450的比例加无菌水稀释,罐装成瓶装产品。
本发明的分解甲醛用自然循环微生物菌剂需现用现配,即溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌与乳清蛋白提取物按比例混合,混合液离心、超滤后单独存放,生物酶单独存放,使用前混合,再稀释,尽量将混合和稀释的总时间控制在10-20分钟内,装瓶喷入空气中。
溶杆菌C8-1具有抗菌性,而且具有产生特殊香气的功能;
分枝杆菌YC-RL4可以在高盐高碱的环境下存活,常用于生物降解邻苯二甲酸脂类,与生物酶合用,经酶解后得到的产物对甲醛有很好的还原性;
柠檬酸杆菌属肠细菌科,可以高效去除硫化氢和氨气;
屎肠球菌是乳酸菌中抗逆性较强的一类,具有很好的抗逆性,抗高温、酸碱、高盐、氧气;
布拉迪酵母菌,耐高温耐高湿,可以在高温高湿的环境下与生物酶合用,具有还原性,可高效除甲醛;
甲醛是一种能与蛋白质、核酸和脂类产生非特异性反应的活泼化合物,对所有的生物来说都具有很高的毒性。
通过向污染环境中投放有益菌种和生物酶,使其适应生存,达到一定的菌群浓度,在短时间内形成一个微生态系统(自然系统)。依靠菌种和酶的生物氧化作用,将环境中的甲醛、苯、氨等有害物快速解转化为无害的CO2和水等简单物质。微生物长时间在环境中存活,发挥作用,效果持久,对人体没有任何伤害作用,不是简单的味道掩盖和封闭性治理,很适合在各种民用建筑中普及使用;微生物除甲醛为当今最先进的,最环保的,最有效的方法。
甲醛在微生物中的代谢途径,主要分为同化作用途径和异化作用途径两大类同化作用包括丝氨酸途径和核酮糖单磷酸途径,丝氨酸途径是将甲醛的碳分子转移到四氢叶酸上形成亚甲基四氢叶酸,然后与甘氨酸结合形成丝氨酸;同化的另一条途径是甲醛和5-磷酸核酮糖(RuMP)的缩合反应,最终生成磷酸二氢丙酮(DHAP)。甲醛的异化作用一般指甲醛的氧化途径,最简单的甲醛氧化途径为通过甲醛脱氢酶将甲醛转化为甲酸,而后反应生成CO2和水;另一种甲醛氧化途径为环化氧化途径,甲醛与C5受体分子结合形成C6化合物进入代谢循环。
本发明的分解甲醛用自然循环微生物菌剂,通过喷嘴喷洒成雾状,液滴的表面不仅能有效地吸附空气中的异味分子,同时也促使吸附的异味分子的立体结构发生变化。分解甲醛用自然循环微生物菌剂的反应可以从以下几个方面来看:
A、酸碱反应:分解甲醛用自然循环微生物菌剂,它可以与硫化氢等酸性臭气分子反应。分解甲醛用自然循环微生物菌剂可以进行生物降解,并且不会产生有毒物质。比如柠檬酸杆菌可以高效去除硫化氢和氨气。
B、催化氧化反应:如硫化氢在一般情况下,不能与空气中的氧进行反应。但在自然循环微生物菌剂的催化作用下,可以与空气中的氧气发生反应。以硫化氢的反应为例:
R-NH2+H2S→R-NH3+SH-
R-NH2+SH-+O2+H2O→R-NH3+SO4 2-+OH-
R-NH3++OH-→R-NH2+H2O
C、氧化还原反应:例如,甲醛具有氧化性,在分解甲醛用自然循环微生物菌剂中的部分有效分子具有还原性,他们可以直接进行反应。例如甲醛和氨的反应:
HR-NH2+HCHO→R-HN2+H-C=CO2+H2O
R-NH2+NH3→R-NH2+N2+H2O
本发明的有益效果为:本发明的分解甲醛用自然循环微生物菌剂适用于对我们的生活环境空间内进行除甲醛,具有除甲醛、杀菌、除臭、清晰空气的作用,甲醛去除率最高为94.0%。
本发明的分解甲醛用自然循环微生物菌剂采用多种微生物以不同的反应原理除甲醛,乳清蛋白提取物可以为微生物提供维持生命所需的营养,而且其中含有的抗菌肽本身也具有抑菌功能,生物酶与微生物合用,达到一定的菌群浓度,在短时间内形成一个微生态系统,依靠菌种和酶的生物氧化作用,将环境中的甲醛、苯、氨等有害物快速解转化为无害的CO2和水等简单物质。
本发明的分解甲醛用自然循环微生物菌剂中的微生物长时间在环境中存活,发挥作用,效果持久,对人体没有任何伤害作用。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步详细说明。
实施例中使用的溶杆菌C8-1,选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏号:CGMCCNo.116271;分枝杆菌YC-RL4,选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,其保藏编号为CGMCC No.10993;柠檬酸杆菌,选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,菌种保藏号为CGMCC No.15120;屎肠球菌选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏号:CGMCCNo.12334;布拉迪酵母菌选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏号:CGMCCNo.10381。
实施例1
本实施例提供了一种分解甲醛用自然循环微生物菌剂,由以下组分制成,
乳清蛋白提取物2g、生物酶0.3g、溶杆菌C8-1、分枝杆菌YC-RL4和柠檬酸杆菌各3g、屎肠球菌2g和布拉迪酵母菌2g。
制备方法包括以下步骤:
(1)乳清蛋白提取物的制备:将乳清蛋白粉加入其重量的15倍的水溶解后,经85℃预热10min,然后冷却到45℃,pH值调至8.3,保温15min后加入胰蛋白酶进行酶解,所述酶解过程中保持pH值为8.3,所述酶解的时间为2.5小时,然后沸水浴灭酶15min,得到乳清蛋白酶解物;将所述乳清蛋白酶解物冷却至室温,调pH至7.0,离心取上清液,用20000Da超滤膜进行超滤,冷冻干燥得到乳清提取物;
(2)菌的活化:先将溶杆菌C8-1、分枝杆菌YC-RL4、柠檬酸杆菌、屎肠球菌和布拉迪酵母菌分别使用LB培养基在37℃进行活化,得到浓度均为8×106CFU/mL的溶杆菌C8-1活化液、分枝杆菌YC-RL4活化液、柠檬酸杆菌活化液、屎肠球菌活化液和布拉迪酵母菌活化液;
(3)菌的培养:先制备液体培养基:葡萄糖15g/l,大豆蛋白胨4.8g/l,酵母浸膏2.5g/l,柠檬酸铵1.8g/l,乙酸钠5g/l,K2HPO4 2g/l,吐温80 1ml/l,MgSO4·7H2O 0.6g/l,MnSO4·4H2O:0.3g/l,水定容到1L;将步骤(2)得到的溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌种子液分别接种到液体培养基中,分别独立培养,接种量为液体培养基体积的3%,培养24小时,摇床转速为100rpm,得到溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌;
(4)混合:将步骤(3)得到的溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌与步骤(1)得到的乳清蛋白提取物按比例混合,混合液离心、采用分子量为10000Da和20000Da的超滤膜进行超滤,截留后的最小分子量为10000Da,截留后的最大分子量为20000Da,然后和生物酶混合,混合均匀即得所述分解甲醛用自然循环微生物菌剂。
使用方法,将所述分解甲醛用自然循环微生物菌剂稀释300倍,分三次喷洒到10m3空间中,用分解甲醛用自然循环微生物菌剂前后的空气中的菌落数对比,杀菌率为81.25%;
采用本实施例中制得的分解甲醛用自然循环微生物菌剂以1:300的比例加水稀释后,经国家室内车内环境及环保产品质量监督检验中心监测证明本发明的分解甲醛用自然循环微生物菌剂具有较强的去除甲醛的作用。检测方法采用《室内空气净化产品净化效果测定方法》,检测结果如表1:
表1室内车内环境及环保产品质量监督检验中心的检验报告
分解甲醛用自然
样品名称:循环微生物菌剂 样品数量:330ml/瓶 2瓶
样品性状:无色透明液体 技术依据:QB/T2761-2006
实施例2
本实施例提供了一种分解甲醛用自然循环微生物菌剂,由以下组分制成,
乳清蛋白提取物4g、生物酶0.1g、溶杆菌C8-1、分枝杆菌YC-RL4和柠檬酸杆菌各7g、屎肠球菌1g和布拉迪酵母菌4g。
制备方法包括以下步骤:
(1)乳清蛋白提取物的制备:将乳清蛋白粉加入其重量的10倍的水溶解后,经85℃预热10min,然后冷却到50℃,pH值调至8.3,保温10min后加入胰蛋白酶进行酶解,所述酶解过程中保持pH值为8.7,所述酶解的时间为2.5-3.5小时,然后沸水浴灭酶10min,得到乳清蛋白酶解物;将所述乳清蛋白酶解物冷却至室温,调pH至7.0,离心取上清液,用20000Da超滤膜进行超滤,冷冻干燥得到乳清提取物;
(2)菌的活化:先将溶杆菌C8-1、分枝杆菌YC-RL4、柠檬酸杆菌、屎肠球菌和布拉迪酵母菌分别使用LB培养基在37℃进行活化,得到浓度均为3×106CFU/mL的溶杆菌C8-1活化液、分枝杆菌YC-RL4活化液、柠檬酸杆菌活化液、屎肠球菌活化液和布拉迪酵母菌活化液;
(3)菌的培养:先制备液体培养基:葡萄糖15g/l,大豆蛋白胨4.8g/l,酵母浸膏2.5g/l,柠檬酸铵1.8g/l,乙酸钠5g/l,K2HPO4 2g/l,吐温80 1ml/l,MgSO4·7H2O 0.6g/l,MnSO4·4H2O:0.3g/l,水定容到1L;将步骤(2)得到的溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌种子液分别接种到液体培养基中,分别独立培养,接种量为液体培养基体积的1%,培养24小时,摇床转速为100rpm,得到溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌;
(4)混合:将步骤(3)得到的溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌与步骤(1)得到的乳清蛋白提取物按比例混合,混合液离心、采用分子量为10000Da和20000Da的超滤膜进行超滤,截留后的最小分子量为10000Da,截留后的最大分子量为20000Da,然后和生物酶混合,混合均匀即得所述分解甲醛用自然循环微生物菌剂。
使用方法,将所述分解甲醛用自然循环微生物菌剂稀释450倍,分三次喷洒到10m3空间中,用分解甲醛用自然循环微生物菌剂前后的空气中的菌落数对比,杀菌率为73.95%;
采用本实施例中制得的分解甲醛用自然循环微生物菌剂以1:450的比例加水稀释后,经国家室内车内环境及环保产品质量监督检验中心监测证明本发明的分解甲醛用自然循环微生物菌剂具有较强的去除甲醛的作用。检测方法采用《室内空气净化产品净化效果测定方法》,检测结果如表2:
表2室内车内环境及环保产品质量监督检验中心的检验报告
分解甲醛用自然
样品名称:循环微生物菌剂 样品数量:330ml/瓶 2瓶
样品性状:无色透明液体 技术依据:QB/T2761-2006
实施例3
本实施例提供了一种分解甲醛用自然循环微生物菌剂,由以下组分制成,
乳清蛋白提取物3g、生物酶0.2g、溶杆菌C8-1、分枝杆菌YC-RL4和柠檬酸杆菌各5g、屎肠球菌1.5g和布拉迪酵母菌3g。
制备方法包括以下步骤:
(5)乳清蛋白提取物的制备:将乳清蛋白粉加入其重量的12倍的水溶解后,经85℃预热10min,然后冷却到48℃,pH值调至8.5,保温12min后加入胰蛋白酶进行酶解,所述酶解过程中保持pH值为8.5,所述酶解的时间为3小时,然后沸水浴灭酶12min,得到乳清蛋白酶解物;将所述乳清蛋白酶解物冷却至室温,调pH至7.0,离心取上清液,用20000Da超滤膜进行超滤,冷冻干燥得到乳清提取物;
(6)菌的活化:先将溶杆菌C8-1、分枝杆菌YC-RL4、柠檬酸杆菌、屎肠球菌和布拉迪酵母菌分别使用LB培养基在37℃进行活化,得到浓度均为5×106CFU/mL的溶杆菌C8-1活化液、分枝杆菌YC-RL4活化液、柠檬酸杆菌活化液、屎肠球菌活化液和布拉迪酵母菌活化液;
(7)菌的培养:先制备液体培养基:葡萄糖15g/l,大豆蛋白胨4.8g/l,酵母浸膏2.5g/l,柠檬酸铵1.8g/l,乙酸钠5g/l,K2HPO4 2g/l,吐温80 1ml/l,MgSO4·7H2O 0.6g/l,MnSO4·4H2O:0.3g/l,水定容到1L;将步骤(2)得到的溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌种子液分别接种到液体培养基中,分别独立培养,接种量为液体培养基体积的2%,培养24小时,摇床转速为100rpm,得到溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌;
(8)混合:将步骤(3)得到的溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌与步骤(1)得到的乳清蛋白提取物按比例混合,混合液离心、采用分子量为10000Da和20000Da的超滤膜进行超滤,截留后的最小分子量为10000Da,截留后的最大分子量为20000Da,然后和生物酶混合,混合均匀即得所述分解甲醛用自然循环微生物菌剂。
使用方法,将所述分解甲醛用自然循环微生物菌剂稀释100倍,分三次喷洒到10m3空间中,用分解甲醛用自然循环微生物菌剂前后的空气中的菌落数对比,杀菌率为88.54%;
采用本实施例中制得的分解甲醛用自然循环微生物菌剂以1:100的比例加水稀释后,经国家室内车内环境及环保产品质量监督检验中心监测证明本发明的分解甲醛用自然循环微生物菌剂具有较强的去除甲醛的作用。检测方法采用《室内空气净化产品净化效果测定方法》,检测结果如表3:
表3室内车内环境及环保产品质量监督检验中心的检验报告
分解甲醛用自然
样品名称:循环微生物菌剂 样品数量:330ml/瓶 2瓶
样品性状:无色透明液体 技术依据:QB/T2761-2006
采用本实施例中制得的分解甲醛用自然循环微生物菌剂直接喷入空气中,其杀菌率为94.0%。
本发明不局限于上述最佳实施方式,任何人在本发明的启示下都可得出其他各种形式的产品,但不论在其形状或结构上作任何变化,凡是具有与本申请相同或相近似的技术方案,均落在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种分解甲醛用自然循环微生物菌剂,其特征在于,由以下组分制成,所述组分包括:
乳清蛋白提取物、生物酶、溶杆菌C8-1、分枝杆菌YC-RL4、柠檬酸杆菌、屎肠球菌和布拉迪酵母菌。
2.根据权利要求1所述的分解甲醛用自然循环微生物菌剂,其特征在于,所述原料按重量份包括:
乳清蛋白提取物2-4份、生物酶0.1-0.3份、溶杆菌C8-1、分枝杆菌YC-RL4和柠檬酸杆菌各3-7份、屎肠球菌1-2份和布拉迪酵母菌2-4份。
3.根据权利要求1或2所述的分解甲醛用自然循环微生物菌剂,其特征在于,所述溶杆菌C8-1,选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏号:CGMCCNo.116271;分枝杆菌YC-RL4,选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,其保藏编号为CGMCC No.10993;柠檬酸杆菌,选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,菌种保藏号为CGMCC No.15120;屎肠球菌选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏号:CGMCCNo.12334;布拉迪酵母菌选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏号:CGMCCNo.10381。
4.一种制备如权利要求1至3任一所述的分解甲醛用自然循环微生物菌剂的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
(1)乳清蛋白提取物的制备:将乳清蛋白粉加入其重量的10-15倍的水溶解后,经85℃预热10min,然后冷却到45-50℃,pH值调至8.3-8.7,保温10-15min后加入胰蛋白酶进行酶解,所述酶解过程中保持pH值为8.3-8.7,所述酶解的时间为2.5-3.5小时,然后沸水浴灭酶10-15min,得到乳清蛋白酶解物;将所述乳清蛋白酶解物冷却至室温,调pH至7.0,离心取上清液,用超滤膜进行超滤,冷冻干燥得到乳清提取物;
(2)菌的活化:先将溶杆菌C8-1、分枝杆菌YC-RL4、柠檬酸杆菌、屎肠球菌和布拉迪酵母菌分别使用LB培养基在37℃进行活化,得到溶杆菌C8-1活化液、分枝杆菌YC-RL4活化液、柠檬酸杆菌活化液、屎肠球菌活化液和布拉迪酵母菌活化液;
(3)菌的培养:将步骤(2)得到的溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌种子液分别接种到液体培养基中,分别独立培养,接种量为液体培养基体积的1-3%,培养24小时,摇床转速为100rpm,得到溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌;
(4)混合:将步骤(3)得到的溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌与步骤(1)得到的乳清蛋白提取物按比例混合,混合液离心、超滤后和生物酶混合,
混合均匀即得所述分解甲醛用自然循环微生物菌剂。
5.根据权利要求4所述的制备分解甲醛用自然循环微生物菌剂的方法,其特征在于,步骤(1)中,采用分子量为20000Da的超滤膜进行超滤,取滤过液。
6.根据权利要求4所述的制备分解甲醛用自然循环微生物菌剂的方法,其特征在于,步骤(2)中,得到的溶杆菌C8-1活化液、分枝杆菌YC-RL4活化液、柠檬酸杆菌活化液、屎肠球菌活化液和布拉迪酵母菌活化液的浓度均为3×106CFU/mL-8×106CFU/mL。
7.根据权利要求4所述的制备分解甲醛用自然循环微生物菌剂的方法,其特征在于,步骤(3)中,液体培养基为:葡萄糖15g/l,大豆蛋白胨4.8g/l,酵母浸膏2.5g/l,柠檬酸铵1.8g/l,乙酸钠5g/l,K2HPO4 2g/l,吐温80 1ml/l,MgSO4·7H2O 0.6g/l,MnSO4·4H2O:0.3g/l,水定容到1L。
8.根据权利要求4所述的制备分解甲醛用自然循环微生物菌剂的方法,其特征在于,步骤(4)中,采用分子量为10000Da和20000Da的超滤膜进行超滤,截留后的最小分子量为10000Da,截留后的最大分子量为20000Da。
9.一种分解甲醛用自然循环微生物菌剂的使用方法,其特征在于,将权利要求1至3任一项所述分解甲醛用自然循环微生物菌剂以喷洒的形式施入空气中。
10.根据权利要求9所述的制备分解甲醛用自然循环微生物菌剂的使用方法,其特征在于,用制备好的所述分解甲醛用自然循环微生物菌剂,以1:300-450的比例加无菌水稀释,罐装成瓶装产品。
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