CN105999369B - 一种吸附有益生菌的护垫及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种吸附有益生菌的护垫及其制备方法，该护垫，包括益生菌除臭层，所述的益生菌除臭层由吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒构成。本发明还涉及该护垫的制备方法与应用。本发明所述吸附有益生菌的护垫，采用枯草芽孢杆菌和短小芽孢杆菌以芽孢体状态吸附于载体颗粒中，再与活性干酵母混合，以休眠状态存在，一旦使用，借助于人体的体温、湿气进行萌发，遇到粪便等排泄物时可以大量繁殖，进行代谢，分解其中的NH3、H2S等臭味物质；酵母在生长繁殖过程中会产生香气成分，从而达到净化空气、消除异味的的作用。同时，上述混合菌在代谢过程中产生抗菌活性物质，可以显著预防卧床老人、瘫痪病人的二次感染。

Description

一种吸附有益生菌的护垫及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及一种吸附有益生菌的护垫及其制备方法，属于日用品技术领域。
背景技术
恶臭污染物在《恶臭污染物排放标准》(国家恶臭污染物排放标准，GB/T 14554-93)中，被定义为“一切刺激嗅觉器官引起人们不愉快及损害生活环境的气体物质”，氨、硫化氢和吲哚等是长期瘫痪病人房间容易产生的有害气体，它们主要来源于主食蛋白质的代谢终产物，或粪便中代谢产物和残留养分经细菌分解产生的恶臭物质，大肠杆菌与葡萄球菌是肠道中最常见的细菌，随着粪便排出体外后，二者在生长繁殖过程中促使粪便中未消化完全的蛋白质分解，蛋白质在分解过程中产生有机胺、硫化氢、硫醇、吲哚、粪臭素等，导致环境空气恶臭难闻。恶臭不仅给人带来嗅觉上的不适，对呼吸、消化、心血管、内分泌及神经系统都会造成影响，长期生活于恶臭污染的环境中会引起厌食、失眠、记忆力下降等功能性疾病，不仅影响着病人和家人的正常生活，而且降低了居住质量，危害病人和家人的身体健康，因此老人防护垫的成分就起到了关健作用。
枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌与酵母菌是自然界中广泛存在的一种非致病性细菌，枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌在生长代谢过程中能够产生多种抗菌物质，如枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质，这些活性物质对致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用。这些抗菌物质可以抑制细菌、真菌和酵母，同时，枯草芽孢杆菌在生理代谢过程中可以产生氨基氧化酶及分解硫化物的酶类，将臭源吲哚类等化合物氧化成无臭、无毒害、无污染的物质，减少空气中NH3、H2S浓度。樊杰等研究表明，枯草芽孢杆菌好氧发酵一段时间内，枯草芽孢杆菌对NH4+-N、NO2-N、NO3-N的总削减率达到了98.51％、84.90％、96.51％。而且具有温度、pH值、储藏稳定性好等特点。因此，其在食品、医药、化工和防病等方面有重要的应用价值。
中国专利文献CN102247611A(申请号201110189038.4)公开了一种微生物除臭剂及其制备方法，其菌种组成为：嗜酸乳杆菌106～109个/mL、短小芽孢杆菌106～109个/mL、枯草芽孢杆菌106～109个/mL、荧光假单胞菌105～107个/mL、沼泽红假单胞菌105～107个/mL、班图酒香酵母菌104～106个/mL、平常假丝酵母菌104～106个/mL、扩张青霉104～106个/mL、米根霉104～106个/mL、绿色木霉104～106个/mL、细黄链霉菌104～106个/mL和灰色链霉菌104～106个/mL。
中国专利文献CN104371959A(申请号201410657323.8)公开了生物除臭灭蝇复合菌剂包括酵母菌、乳酸菌、功能芽孢杆菌、光合细菌和白僵菌，按顺序各菌种的质量比为0.5～2﹕0.5～2.5﹕1.5～3.5﹕1.5～2.5﹕1；微生物活菌总数≥109CFU/g。所述功能芽孢杆菌为包括巨大芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌的混合菌剂。以及生物除臭灭蝇复合菌剂在垃圾回收过程中除臭与灭蝇的应用。
中国专利文献CN104126515A(申请号201410345580.8)公开了一种畜禽生物降解垫，由载体和混合菌剂混合后粉碎制成，所述混合菌剂由以下短小芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、乙酸钙不动杆菌、脱氮副球菌、粪球产碱菌混合后经发酵、干燥制成。
发明内容
本发明针对现有技术的不足，提供一种吸附有益生菌的护垫及其制备方法与应用。
术语说明
本发明所述的益生菌是枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌与酵母菌的统称。
为实现上述目的，本发明的技术方案如下：
一种吸附有益生菌的护垫，其特征在于，包括益生菌除臭层，所述的益生菌除臭层由吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒构成，所述枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌与酵母菌的数量之比为1：(0.5～1)：(1～2)，每克载体颗粒吸附的处于休眠状态的益生菌菌体总数为107～1011CFU。
根据本发明优选的，所述载体颗粒是将枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌芽孢悬浮于pH5.5～6.8的磷酸缓冲液后用活性炭吸附，干燥后与活性干酵母混合后制得。
根据本发明优选的，所述载体颗粒为活性炭或硅藻土。活性炭、硅藻土具有微孔发达、比表面积大、有超强吸附功能的材料，由于它的吸附性使其更容易与枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌芽孢及酵母菌融合在一起。
根据本发明优选的，所述枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌与酵母菌的活菌数之比为1：1：1。
根据本发明优选的，所述枯草芽孢杆菌为来源于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)的保藏编号为1.933的枯草芽孢杆菌。
根据本发明优选的，所述短小芽孢杆菌为来源于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)的保藏编号为1.937的短小芽孢杆菌。
根据本发明优选的，所述酵母菌为来源于中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)的保藏编号为2.0559的酵母菌。
根据本发明优选的，所述吸附有益生菌的护垫还包括设置有包覆益生菌除臭层的透气层；进一步优选的，透气层材质为棉布。
上述吸附有益生菌的护垫的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)取枯草芽孢杆菌，经活化培养、发酵培养，制得活菌浓度为100～150亿/毫升、芽孢形成率达95％以上的枯草芽孢杆菌发酵液，固液分离，制得枯草芽孢杆菌；
(2)取短小芽孢杆菌，经活化培养、发酵培养，制得活菌浓度为25～35亿/毫升、芽孢形成率达95％以上的短小芽孢杆菌发酵液，固液分离，制得短小芽孢杆菌；
(3)取酵母菌，经活化培养、发酵培养，制得活菌浓度为40～50亿/毫升的酵母菌发酵液，固液分离，取固体制得菌体，向菌体中按质量比1：(1～3)的比例添加辅料，混匀，干燥，制得活性干酵母；
(4)将步骤(1)制得的枯草芽孢杆菌、步骤(2)制得的短小芽孢杆菌按比例悬浮于pH5.5～6.8的磷酸缓冲液后用活性炭吸附，在30～60度条件下恒温干燥后，与步骤(3)制得的活性干酵母按比例混合，制得吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒，每克吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒吸附的处于休眠状态的益生菌菌体总数为107～1011CFU；
(5)将步骤(4)制得的吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒包覆透气层，制得吸附有益生菌的护垫。
根据本发明优选的，所述步骤(1)中的活化培养为将枯草芽孢杆菌接种于活化培养基中，在36～38℃活化培养16～20h；
上述枯草芽孢杆菌活化培养基，组分如下，均为质量百分比：
葡萄糖0.5～2.0％，蛋白胨0.5～1.0％，酵母粉0.3～0.8％，牛肉膏0.1～0.3％，余量水，pH6.7～7.2；
根据本发明优选的，所述步骤(1)中的发酵培养，步骤如下：
将活化后的枯草芽孢杆菌接种于枯草芽孢杆菌发酵培养基中，在36～38℃发酵培养28～32h，制得枯草芽孢杆菌发酵液；
上述枯草芽孢杆菌发酵培养基，组分如下，均为质量百分比：
玉米粉0.5％～2.5％，玉米浆0.5％～1.0％，蛋白胨0.1％～0.4％，糊精0.1％～0.6％，磷酸二氢钾0.1％～0.3％，硫酸镁0.01％～0.05％，豆粕粉0.5～1.5％，氯化钠0.1％～0.3％，硫酸锰0.01％～0.03％，余量水，pH6.8～7.2。
根据本发明优选的，所述步骤(2)中的短小芽孢杆菌活化培养为将菌株接种于活化培养基中，在36～38℃活化培养16～22h；
上述短小芽孢杆菌活化培养基，组分如下，均为质量百分比：
葡萄糖0.5～1.5，硫酸铵0.3～1.0％，酵母粉0.3～1.0％，磷酸氢二钾0.1～0.5％，余量水，pH6.5～7.3。
根据本发明优选的，所述步骤(2)中的发酵培养，步骤如下：
将活化后的短小芽孢杆菌接种于短小芽孢杆菌发酵培养基，在36～38℃发酵培养26～30h，制得短小芽孢杆菌发酵液；
上述短小芽孢杆菌发酵培养基，组分如下，均为质量百分比：
葡萄糖0.5～2％、玉米淀粉1～2％、蛋白胨0.5～1.5％、硫酸铵0.3～0.7％、玉米浆0.1～1％、KH2PO4 0.1～0.5％、MgSO4·7H2O 0.1～0.2％，余量水，pH6.7～7.0。
根据本发明优选的，所述步骤(3)中的活化培养为将酵母菌株接种于活化培养基中，在28～32℃活化培养15～22h；
上述酵母菌活化培养基，组分如下，均为质量百分比：
葡萄糖0.5～2.0％，酵母粉0.1～0.8％，蛋白胨0.5～1.0％，氯化钠0.1-0.5％，余量水，pH5.5～7.0。
根据本发明优选的，所述步骤(3)中的发酵培养，步骤如下：
将活化后的酵母菌接种于酵母菌发酵培养基，在28～32℃发酵培养26～30h，制得酵母菌发酵液；
葡萄糖0.5～2.0％，麦芽糖0.5～2.0％，酵母粉0.1～0.8％，蛋白胨0.5～1.0％，硫酸铵0.5～1.5％，余量水，pH5.5～7.0。
根据本发明优选的，所述步骤(3)中的辅料组分如下，均为重量份：
淀粉20～50份、甘油0.5～2.5份、维生素C 0.5～3份、吐温-80 0.4～2.0份。
上述吸附有益生菌的护垫在制备卧床老人、瘫痪病人、婴儿床上护理用品中的应用。
有益效果
1、本发明所述吸附有益生菌的护垫，采用枯草芽孢杆菌和短小芽孢杆菌以芽孢体状态吸附于载体颗粒中，再与活性干酵母混合，在运输、货架等干燥的环境中以休眠状态存在，一旦使用，借助于人体的体温、湿气进行萌发，遇到粪便等排泄物时可以大量繁殖，进行代谢，分解其中的NH3、H2S等臭味物质；酵母在生长繁殖过程中会产生香气成分，从而达到净化空气、消除异味的的作用。同时，上述混合菌在代谢过程中产生抗菌活性物质，对致病菌如金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌及大肠杆菌等的生长繁殖也有抑制作用，可以显著预防卧床老人、瘫痪病人的二次感染；
2、本发明所采用的枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌及酵母菌以休眠形式存在于产品中，其中芽孢具有对不良环境有很强的抵抗能力,一旦遇到合适的环境,又会重新萌发成菌体，发挥作用的功效；从而解决了产品在运输、贮存及使用中益生菌菌体失去活性，降低效果的问题，并且使用方便、效果理想。弥补了以往微生态制剂在菌种存活时间短和储藏难的缺陷和不足，延长了该类产品的有效期及存放问题；
3、本发明所述的一种吸附有益生菌的护垫及其制备方法，本发明所采用的吸附剂如活性炭、硅藻土等，因具有微孔发达、比表面积大、有超强吸附功能，可以起到吸附臭味、致病菌及尿液，对除臭抗菌起到辅助作用。
附图说明
图1为本发明所述的吸附有益生菌的防臭抗菌垫的结构示意图；
图中：1、益生菌除臭层，2、载体颗粒，3、透气层。
具体实施方式
下面结合实施例及说明书附图对本发明的技术方案作进一步的详细说明，但本发明所保护范围不限于此。
实施例1～2中所述枯草芽孢杆菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，保藏编号为1.933；
实施例1～2中所述短小芽孢杆菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，保藏编号为1.937；
实施例1～2中所述酵母菌购自中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，保藏编号为2.0559。
实施例1
一种吸附有益生菌的护垫及其制备方法，采用如下方法制备：
(1)取枯草芽孢杆菌，在37℃活化培养16h，然后在37℃发酵培养27h，制得活菌浓度为102亿/毫升，芽孢形成率达95％以上的枯草芽孢杆菌发酵液，5000rpm离心20min，取沉淀，制得枯草芽孢杆菌；
上述枯草芽孢杆菌活化培养基，组分如下，均为质量百分比：
葡萄糖0.8％，蛋白胨0.5％，酵母粉0.3％，牛肉膏0.1％，余量水，pH6.7～7.2；
上述枯草芽孢杆菌发酵培养基，组分如下，均为质量百分比：
玉米粉2.0％，玉米浆0.5％，蛋白胨0.2％，糊精0.6％，磷酸二氢钾0.1％，硫酸镁0.05％，豆粕粉0.5％，氯化钠0.3％，硫酸锰0.01％，余量水，pH6.8～7.2。
(2)取短小芽孢杆菌，在37℃活化培养17h，然后在37℃发酵培养31h，制得活菌浓度为29亿/毫升的短小芽孢杆菌发酵液，5000rpm离心20min，取沉淀，制得短小芽孢杆菌；
上述短小芽孢杆菌活化培养基，组分如下，均为质量百分比：
葡萄糖1.5％，硫酸铵0.3％，蛋白胨0.8％，磷酸氢二钾0.1％，余量水，pH6.5～7.3。
上述短小芽孢杆菌发酵培养基，组分如下，均为质量百分比：
葡萄糖2％、酵母粉0.5％、硫酸铵0.3％、玉米浆0.3％、KH2PO4 0.2％、MgSO4·7H2O0.2％，余量水，pH6.7～7.0。
(3)取酵母菌接种于活化培养基中，在30℃活化培养15h，然后在30发酵培养22h，制得活菌浓度为41亿/毫升的酵母菌发酵液，5000rpm离心20min，取固体制得菌体，向菌体中按质量比1：3的比例添加辅料，干燥，制得活性干酵母菌；
根据本发明优选的，所述步骤(3)中的辅料组分如下，均为重量份：
淀粉30份、甘油2份、维生素C 1.5份、吐温-80 2份。
上述酵母菌活化培养基，组分如下，均为质量百分比：
葡萄糖1.5％，酵母粉0.3％，蛋白胨0.5％，氯化钠0.1％，余量水，pH6.5。
上述酵母菌发酵培养基，组分如下，均为质量百分比：
葡萄糖2.0％，麦芽糖0.5％，酵母粉0.1％，蛋白胨0.5％，硫酸铵0.5％，余量水，pH7.0。
(4)将步骤(1)制得的枯草芽孢杆菌、步骤(2)制得的短小芽孢杆菌按比例悬浮于pH6.7的磷酸缓冲液后用活性炭吸附，在45度条件下恒温干燥后，与步骤(3)制得的活性干酵母按比例混合，制得吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒；
(5)将步骤(4)制得的吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒包覆透气层，制得吸附有益生菌的护垫。
上述制得的吸附有益生菌的护垫，如图1所示，包括益生菌除臭层1，所述的益生菌除臭层1由吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒2构成；所述载体颗粒2为活性炭。益生菌除臭层1包覆有透气层3；透气层3材质为棉布。
经检测，每克吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒吸附的处于休眠状态的益生菌菌体总数为1010CFU；枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的活菌数之比为1：1：1。
实施例2
一种吸附有益生菌的护垫及其制备方法，采用如下方法制备：
(1)取枯草芽孢杆菌，在37℃活化培养18h，然后在37℃发酵培养31h，制得活菌浓度为113亿/毫升，芽孢形成率达95％以上的枯草芽孢杆菌发酵液，5000rpm离心20min，取沉淀，制得枯草芽孢杆菌；
上述枯草芽孢杆菌活化培养基，组分如下，均为质量百分比：
葡萄糖1.2％，蛋白胨0.5％，酵母粉0.3％，牛肉膏0.3％，余量水，pH6.7；
上述枯草芽孢杆菌发酵培养基，组分如下，均为质量百分比：
玉米粉2.5％，蛋白胨0.1％，糊精0.2％，磷酸二氢钾0.3％，硫酸镁0.03％，豆粕粉1.5％，氯化钠0.1％，硫酸锰0.01％，余量水，pH7.2。
(2)取短小芽孢杆菌，在37℃活化培养16h，然后在37℃发酵培养30h，制得活菌浓度为29亿/毫升的短小芽孢杆菌发酵液，5000rpm离心20min，取沉淀，制得短小芽孢杆菌；
上述短小芽孢杆菌活化培养基，组分如下，均为质量百分比：
葡萄糖1.5％，硫酸铵0.5％，酵母粉0.35％，磷酸氢二钾0.2％，余量水，pH6.5。
上述短小芽孢杆菌发酵培养基，组分如下，均为质量百分比：
葡萄糖2％、蛋白胨0.5％、硫酸铵0.3％、玉米浆0.5％、KH2PO4 0.3％、MgSO4·7H2O0.1％，余量水，pH6.8。
(3)取酵母菌接种于活化培养基中，在30℃活化培养16h，然后在30发酵培养24h，制得活菌浓度为48亿/毫升的酵母菌发酵液，5000rpm离心20min，取固体制得菌体，向菌体中按质量比1：1的比例添加辅料，干燥，制得活性干酵母菌；
根据本发明优选的，所述步骤(3)中的辅料组分如下，均为重量份：
淀粉50份、甘油1.5份、维生素C 2份、吐温-80 1.4份。
上述酵母菌活化培养基，组分如下，均为质量百分比：
葡萄糖1.2％，酵母粉0.5％，蛋白胨0.5％，氯化钠0.2％，余量水，pH5.5～7.0。
上述酵母菌发酵培养基，组分如下，均为质量百分比：
麦芽糖2.0％，酵母粉0.8％，蛋白胨0.5％，硫酸铵0.5％，玉米浆1.0％，余量水，pH7.0。
(4)将步骤(1)制得的枯草芽孢杆菌、步骤(2)制得的短小芽孢杆菌按比例悬浮于pH6.0的磷酸缓冲液后用活性炭吸附，在40度条件下恒温干燥后，与步骤(3)制得的活性干酵母按比例混合，制得吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒；
(5)将步骤(4)制得的吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒包覆透气层，制得吸附有益生菌的护垫。
上述制得的吸附有益生菌的护垫，包括益生菌除臭层1，所述的益生菌除臭层1由吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒2构成；所述载体颗粒2为硅藻土。益生菌除臭层1包覆有透气层3；透气层3材质为棉布。
经检测，每克吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒吸附的处于休眠状态的益生菌菌体总数为1011CFU；枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的活菌数之比为1：0.5：2。
对比例1
按实施例2所述制备方法制得的吸附有益生菌的护垫，不同之处在于，步骤(4)采用将步骤(1)制得的枯草芽孢杆菌、步骤(2)制得的短小芽孢杆菌芽孢及步骤(3)制得的酵母菌悬浮于pH7.0的磷酸缓冲液中，用硅藻土按比例比吸附。
对比例2
按实施例1所述制备方法制得的吸附有益生菌的护垫，不同之处在于，步骤(3)中将枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌与酵母菌按数量比1:2：5的比例混合。
实验例1
菌体成活率试验：
将实施例2和对比例1制得的吸附有益生菌的护垫在室温干燥条件下放置一段时间，然后取出吸附有益生菌的硅藻土进行无菌操作，在质量百分比浓度为1％的葡萄糖溶液中进行萌发试验，用稀释平板法计数总菌数，结果如表1所示：
表1
对比例1 实施例2
3.2×10<sup>8</sup> 7.6×10<sup>10</sup>
由表1中可以看出，枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌先与硅藻土吸附，干燥后再与活性干酵母混合制得的护垫，菌体成活率显著高于对比例1，对比例1中，三种菌一起混合吸附，因菌体的特性不同，在操作过程中酵母菌的死亡率会很高，影响了整个菌数的含量，从而影响了作用效果。
实验例2
抑菌试验：
将实施例1与对比例2制得的护垫在室温干燥条件下放置三个月，然后取出吸附有益生菌的活性炭无菌操作进行下列抑菌试验：
将质量相同的吸附活性炭无菌操作分别加入盛有100毫升LB培养基的液体发酵培养液中，然后分别按体积百分比3％接种量接种大肠杆菌和葡萄球菌(浓度108个/毫升)，以没有放吸附益生菌的活性炭作为空白对照，培养16小时，分别平板计数，计算抑菌率，结果如表2所示：
表2
Figure BDA0000998275040000071
由表2中可以看出，实施例1的抑菌效果要显著优于对比例2，从而说明三种菌的抑菌性能不同，枯草芽孢杆菌的抑菌性较高，酵母菌较低，在样品存放过程中，芽孢菌的耐受性比较高，因此存活率及作用效果也高，因而三种菌体的比例不同会对抑菌性能有影响，三种菌的混合比例会直接影响抑菌效果。

Claims (15)

1.一种吸附有益生菌的护垫，其特征在于，包括益生菌除臭层，所述的益生菌除臭层由吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒构成，所述枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌与酵母菌的数量之比为1：（0.5～1）：（1～2），每克吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒吸附的处于休眠状态的益生菌菌体总数为107～1011CFU；
所述吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒是将枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌芽孢悬浮于pH5.5～6.8的磷酸缓冲液后用载体颗粒吸附，干燥后与活性干酵母混合后制得；
所述载体颗粒为活性炭或硅藻土。
2.如权利要求1所述的护垫，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌与酵母菌的活菌数之比为1：1：1。
3.如权利要求1所述的护垫，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌为来源于中国普通微生物菌种保藏管理中心的保藏编号为1.933的枯草芽孢杆菌。
4.如权利要求1所述的护垫，其特征在于，所述酵母菌为来源于中国普通微生物菌种保藏管理中心的保藏编号为2.0559 的酵母菌。
5.如权利要求1所述的护垫，其特征在于，所述吸附有益生菌的护垫还包括设置有包覆益生菌除臭层的透气层。
6.如权利要求5所述的护垫，其特征在于，透气层材质为棉布。
7.权利要求1所述吸附有益生菌的护垫的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）取枯草芽孢杆菌，经活化培养、发酵培养，制得活菌浓度为100～150亿/毫升、芽孢形成率达95%以上的枯草芽孢杆菌发酵液，固液分离，制得枯草芽孢杆菌；
（2）取短小芽孢杆菌，经活化培养、发酵培养，制得活菌浓度为25～35亿/毫升、芽孢形成率达95%以上的短小芽孢杆菌发酵液，固液分离，制得短小芽孢杆菌；
（3）取酵母菌，经活化培养、发酵培养，制得活菌浓度为40～50亿/毫升的酵母菌发酵液，固液分离，取固体制得菌体，向菌体中按质量比1：（1～3）的比例添加辅料，混匀，干燥，制得活性干酵母；
（4）将步骤（1）制得的枯草芽孢杆菌、步骤（2）制得的短小芽孢杆菌按比例悬浮于pH5.5～6.8的磷酸缓冲液后用载体颗粒吸附，在30～60度条件下恒温干燥后，与步骤（3）制得的活性干酵母按比例混合，制得吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒，每克吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒吸附的处于休眠状态的益生菌菌体总数为107～1011CFU；
（5）将步骤（4）制得的吸附有枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、酵母菌的载体颗粒包覆透气层，制得吸附有益生菌的护垫。
8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中的活化培养为将枯草芽孢杆菌接种于活化培养基中，在36～38℃活化培养16～20h；
上述枯草芽孢杆菌活化培养基，组分如下，均为质量百分比：
葡萄糖0.5～2.0%，蛋白胨0.5～1.0%， 酵母粉0.3～0.8%，牛肉膏0.1～0.3%，余量水，pH6.7～7.2。
9.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中的发酵培养，步骤如下：
将活化后的枯草芽孢杆菌接种于枯草芽孢杆菌发酵培养基中，在36～38℃发酵培养28～32h，制得枯草芽孢杆菌发酵液；
上述枯草芽孢杆菌发酵培养基，组分如下，均为质量百分比：
玉米粉0.5%～2.5%，玉米浆0.5%～1.0%，蛋白胨0.1%～0.4%，糊精0.1%～0.6%，磷酸二氢钾0.1%～0.3%，硫酸镁0.01%～0.05%，豆粕粉0.5～1.5%，氯化钠0.1%～0.3%，硫酸锰0.01%～0.03%，余量水，pH6.8～7.2。
10.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中的短小芽孢杆菌活化培养为将菌株接种于活化培养基中，在36～38℃活化培养16～22h；
上述短小芽孢杆菌活化培养基，组分如下，均为质量百分比：
葡萄糖0.5～1.5，硫酸铵0.3～1.0%，酵母粉0.3～1.0%，磷酸氢二钾0. 1～0. 5%，余量水，pH6.5～7.3。
11.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中的发酵培养，步骤如下：
将活化后的短小芽孢杆菌接种于短小芽孢杆菌发酵培养基，在36～38℃发酵培养26～30h，制得短小芽孢杆菌发酵液；
上述短小芽孢杆菌发酵培养基，组分如下，均为质量百分比：
葡萄糖0. 5～2%、玉米淀粉1～2%、蛋白胨0.5～1.5%、硫酸铵0.3～0.7%、玉米浆0.1～1%、KH2PO4 0.1～0.5%、MgSO4•7H2O 0.1～0.2%，余量水，pH6.7～7.0。
12.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中的活化培养为将酵母菌株接种于活化培养基中，在28～32℃活化培养15～22h；
上述酵母菌活化培养基，组分如下，均为质量百分比：
葡萄糖0.5～2.0%，酵母粉0.1～0.8%，蛋白胨0.5～1.0%，氯化钠0.1～0.5%，余量水，pH5.5～7.0。
13.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中的发酵培养，步骤如下：
将活化后的酵母菌接种于酵母菌发酵培养基，在28～32℃发酵培养26～30h，制得酵母菌发酵液；
葡萄糖0.5～2.0%，麦芽糖0.5～2.0%，酵母粉0.1～0.8%，蛋白胨0.5～1.0%，硫酸铵0.5～1.5%，余量水，pH5.5～7.0。
14.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中的辅料组分如下，均为重量份：
淀粉 20～50份、甘油 0.5～2.5份、维生素C 0.5～3份、吐温-80 0.4～2.0份。
15.权利要求1所述吸附有益生菌的护垫在制备卧床老人、瘫痪病人、婴儿床上护理用品中的应用。
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