CN108936677A - 一种用喷雾干燥制备益生菌微胶囊的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用喷雾干燥制备益生菌微胶囊的方法，包括以下步骤：一、培养基的制备；二、菌体的活化；三、菌体的增值与热激：将活化的菌体以1％的接种量接种，置于37℃的恒温箱中培养，培养11‑13小时后将培养皿放入60℃‑80℃的恒温水浴锅内，水浴4‑6分钟；四、菌体的浓集：将热激后的培养液倒入灭菌的管内，放入离心机内，离心机设定为转速6000r/min,温度为4℃，离心时间为10分钟；五、制备混合悬液；六、喷雾干燥；七、包装。本发明涉及微生物技术领域。该种用喷雾干燥制备益生菌微胶囊的方法，解决了由于干燥机内温度较高造成菌体死亡率高的问题，保证了菌粉活菌数。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，具体为一种用喷雾干燥制备益生菌微胶囊的方法。
背景技术
益生菌又称为益生素、促生素、活性菌、微生态制剂，是指那些具有维持人体菌群平衡、并对人体健康产生有益作用的活菌制品或含有菌体组分及代谢产物的死菌制品。目前应用于人类的益生菌种类主要有乳杆菌、双歧杆菌、肠球菌、乳球菌、枯草杆菌、大肠杆菌、蜡样芽抱杆菌、地衣芽抱杆菌、嗜热链球菌、丁酸梭菌和酵母菌等，但传统上人们所应用主要是双歧杆菌和乳杆菌两个属。但益生菌制剂存在的最为关键的问题是产品活菌数下降较快，据报道，在含乳酸菌的食品制品中只有当乳酸菌活菌数达到1×106cfu/mL以上，才能发挥正常的生理保健功能。喷雾干燥的生产效率高、生产量大、成本低，在喷雾干燥制备益生菌的过程中，喷雾干燥机内温度较高，造成菌体死亡率高，会使得获得的菌粉活菌数的数量大打折扣，有些甚至很低于1×106cfu/mL。
发明内容
(一)解决的技术问题
针对现有技术的不足，本发明提供了一种用喷雾干燥制备益生菌微胶囊的方法，解决了由于干燥机内温度较高造成菌体死亡率高的问题，保证了菌粉活菌数。
(二)技术方案
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：一种用喷雾干燥制备益生菌微胶囊的方法，包括以下步骤：
一、培养基的制备：培养基由以下重量份组分制成：酵母粉5份、蛋白胨10份、葡萄糖20份、三水乙酸钠5份、七水硫酸镁0.5份、磷酸氢二钾2份、柠檬酸二铵2份、肉浸膏10份、四水硫酸锰0.05份、吐温-801份、纯净水1000份；将酵母粉、蛋白胨、葡萄糖、三水乙酸钠、七水硫酸镁、磷酸氢二钾、柠檬酸二铵、肉浸膏10、四水硫酸锰、吐温-80按照配比倒入纯净水中加热溶解，溶解后分装，置于灭菌锅内，在121℃条件下灭菌20分钟，备用；
二、菌体的活化：在无菌环境中，将菌体从保藏状态恢复到室温状态，随后将菌体接种到培养基中培养，放入37℃的恒温箱中培养，7小时后挑选培养基茁壮的菌落，挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养，重复此步骤2-3次，从而得到生长良好的菌落；
三、菌体的增值与热激：将活化的菌体以1％的接种量接种，置于37℃的恒温箱中培养，培养11-13小时后将培养皿放入60℃-80℃的恒温水浴锅内，水浴4-6分钟；
四、菌体的浓集：将热激后的培养液倒入灭菌的管内，放入离心机内，离心机设定为转速6000r/min,温度为4℃，离心时间为10分钟；
五、制备混合悬液：用牛乳倒入离心管中，放入漩涡震荡仪进行震荡，震动时间为2分钟，将震动后的菌体与脱脂浓缩乳进行混合，随后放入均质机进行均质，随后放入37℃培养箱内培养90分钟；
六、喷雾干燥：将步骤五中培养后的牛乳放入喷雾干燥机的进料口，开始喷雾，出口温度设置为80℃，进料温度设置为100℃，进料流量为13ml/min；
七、包装：将获得的微胶囊益生菌进行包装。
优选的，所述步骤五中牛乳的用量为步骤四中培养液体积的十分之一。
优选的，所述步骤五脱脂浓缩乳所需用量为震荡后离心管内液体体积的十分之一。
优选的，所述步骤五中脱脂浓缩乳的制备步骤如下：将新鲜牛乳倒入蒸发瓶内，将蒸发瓶放入旋转蒸发仪内，将温度设置为40℃，抽真空值0.09MPa；工作半小时后，温度设置为44℃，直到新鲜牛乳为倒入时的一半；将浓缩后的牛乳装入离心管内，在6000r/min、4℃条件下离心15分钟，去除上层脂肪层，获得下层脱脂浓缩乳。
优选的，所述步骤五中先将均质机进行灭菌，随后将均质压力调节为30MPa，进行均质，并进行两次均质。
优选的，所述步骤六中喷雾干燥机使用前通入清水洗涤，将设备中残留物洗出，随后通入200℃的高温空气20分钟，待设备冷却后使用。
(三)有益效果
本发明提供了一种用喷雾干燥制备益生菌微胶囊的方法。具备以下有益效果：
该一种用喷雾干燥制备益生菌微胶囊的方法，通过在菌种的培育过程中将活化的菌体以1％的接种量接种，置于37℃的恒温箱中培养，培养11-13小时后将培养皿放入60℃-80℃的恒温水浴锅内，水浴4-6分钟，将菌体置于高于其最适生长温度的环境下，菌体会在环境的诱导下产生很多伴侣蛋白和蛋白酶，可以修复损伤的细胞，增加了菌种对高温环境的耐受能力，从而保证了在喷雾干燥过程中造成菌体死亡率高的问题，保证了菌粉活菌数。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明提供一种技术方案：
实施例一：
一种用喷雾干燥制备益生菌微胶囊的方法，包括以下步骤：
一、培养基的制备：培养基由以下重量份组分制成：酵母粉5份、蛋白胨10份、葡萄糖20份、三水乙酸钠5份、七水硫酸镁0.5份、磷酸氢二钾2份、柠檬酸二铵2份、肉浸膏10份、四水硫酸锰0.05份、吐温-801份、纯净水1000份；将酵母粉、蛋白胨、葡萄糖、三水乙酸钠、七水硫酸镁、磷酸氢二钾、柠檬酸二铵、肉浸膏10、四水硫酸锰、吐温-80按照配比倒入纯净水中加热溶解，溶解后分装，置于灭菌锅内，在121℃条件下灭菌20分钟，备用；
二、菌体的活化：在无菌环境中，将菌体从保藏状态恢复到室温状态，随后将菌体接种到培养基中培养，放入37℃的恒温箱中培养，7小时后挑选培养基茁壮的菌落，挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养，重复此步骤2-3次，从而得到生长良好的菌落；
三、菌体的增值与热激：将活化的菌体以1％的接种量接种，置于37℃的恒温箱中培养，培养11小时后将培养皿放入60℃的恒温水浴锅内，水浴4分钟；
四、菌体的浓集：将热激后的培养液倒入灭菌的管内，放入离心机内，离心机设定为转速6000r/min,温度为4℃，离心时间为10分钟；
五、制备混合悬液：用牛乳倒入离心管中，放入漩涡震荡仪进行震荡，震动时间为2分钟，将震动后的菌体与脱脂浓缩乳进行混合，随后放入均质机进行均质，随后放入37℃培养箱内培养90分钟；
六、喷雾干燥：将步骤五中培养后的牛乳放入喷雾干燥机的进料口，开始喷雾，出口温度设置为80℃，进料温度设置为100℃，进料流量为13ml/min；
七、包装：将获得的微胶囊益生菌进行包装。
步骤五中牛乳的用量为步骤四中培养液体积的十分之一。
步骤五脱脂浓缩乳所需用量为震荡后离心管内液体体积的十分之一。
步骤五中脱脂浓缩乳的制备步骤如下：将新鲜牛乳倒入蒸发瓶内，将蒸发瓶放入旋转蒸发仪内，将温度设置为40℃，抽真空值0.09MPa；工作半小时后，温度设置为44℃，直到新鲜牛乳为倒入时的一半；将浓缩后的牛乳装入离心管内，在6000r/min、4℃条件下离心15分钟，去除上层脂肪层，获得下层脱脂浓缩乳。
步骤五中先将均质机进行灭菌，随后将均质压力调节为30MPa，进行均质，并进行两次均质。
步骤六中喷雾干燥机使用前通入清水洗涤，将设备中残留物洗出，随后通入200℃的高温空气20分钟，待设备冷却后使用。
实施例二：
本实施例的基本步骤同实施例一，不同之处在于：步骤三中置于37℃的恒温箱中培养，培养12小时后将培养皿放入70℃的恒温水浴锅内，水浴5分钟。
实施例三：
本实施例的基本步骤同实施例一，不同之处在于：步骤三中置于37℃的恒温箱中培养，培养13小时后将培养皿放入80℃的恒温水浴锅内，水浴6分钟。
本发明实施例与现有制备方法在同等实验条件下对照表：
从上述表格可以看出，在现有制备方法相比，本发明产品能有效的提高菌粉活菌数的数量。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下。由语句“包括一个......限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素”。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (6)
1.一种用喷雾干燥制备益生菌微胶囊的方法，其特征在于：包括以下步骤：
一、培养基的制备：培养基由以下重量份组分制成：酵母粉5份、蛋白胨10份、葡萄糖20份、三水乙酸钠5份、七水硫酸镁0.5份、磷酸氢二钾2份、柠檬酸二铵2份、肉浸膏10份、四水硫酸锰0.05份、吐温-801份、纯净水1000份；将酵母粉、蛋白胨、葡萄糖、三水乙酸钠、七水硫酸镁、磷酸氢二钾、柠檬酸二铵、肉浸膏10、四水硫酸锰、吐温-80按照配比倒入纯净水中加热溶解，溶解后分装，置于灭菌锅内，在121℃条件下灭菌20分钟，备用；
二、菌体的活化：在无菌环境中，将菌体从保藏状态恢复到室温状态，随后将菌体接种到培养基中培养，放入37℃的恒温箱中培养，7小时后挑选培养基茁壮的菌落，挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养，重复此步骤2-3次，从而得到生长良好的菌落；
三、菌体的增值与热激：将活化的菌体以1％的接种量接种，置于37℃的恒温箱中培养，培养11-13小时后将培养皿放入60℃-80℃的恒温水浴锅内，水浴4-6分钟；
四、菌体的浓集：将热激后的培养液倒入灭菌的管内，放入离心机内，离心机设定为转速6000r/min,温度为4℃，离心时间为10分钟；
五、制备混合悬液：用牛乳倒入离心管中，放入漩涡震荡仪进行震荡，震动时间为2分钟，将震动后的菌体与脱脂浓缩乳进行混合，随后放入均质机进行均质，随后放入37℃培养箱内培养90分钟；
六、喷雾干燥：将步骤五中培养后的牛乳放入喷雾干燥机的进料口，开始喷雾，出口温度设置为80℃，进料温度设置为100℃，进料流量为13ml/min；
七、包装：将获得的微胶囊益生菌进行包装。
2.根据权利要求1所述的一种用喷雾干燥制备益生菌微胶囊的方法，其特征在于：所述步骤五中牛乳的用量为步骤四中培养液体积的十分之一。
3.根据权利要求1所述的一种用喷雾干燥制备益生菌微胶囊的方法，其特征在于：所述步骤五脱脂浓缩乳所需用量为震荡后离心管内液体体积的十分之一。
4.根据权利要求1所述的一种用喷雾干燥制备益生菌微胶囊的方法，其特征在于：所述步骤五中脱脂浓缩乳的制备步骤如下：将新鲜牛乳倒入蒸发瓶内，将蒸发瓶放入旋转蒸发仪内，将温度设置为40℃，抽真空值0.09MPa；工作半小时后，温度设置为44℃，直到新鲜牛乳为倒入时的一半；将浓缩后的牛乳装入离心管内，在6000r/min、4℃条件下离心15分钟，去除上层脂肪层，获得下层脱脂浓缩乳。
5.根据权利要求1所述的一种用喷雾干燥制备益生菌微胶囊的方法，其特征在于：所述步骤五中先将均质机进行灭菌，随后将均质压力调节为30MPa，进行均质，并进行两次均质。
6.根据权利要求1所述的一种用喷雾干燥制备益生菌微胶囊的方法，其特征在于：所述步骤六中喷雾干燥机使用前通入清水洗涤，将设备中残留物洗出，随后通入200℃的高温空气20分钟，待设备冷却后使用。
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