CN108929856A - 高羊茅叶片中内生真菌的提取方法 - Google Patents
高羊茅叶片中内生真菌的提取方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108929856A CN108929856A CN201710362355.9A CN201710362355A CN108929856A CN 108929856 A CN108929856 A CN 108929856A CN 201710362355 A CN201710362355 A CN 201710362355A CN 108929856 A CN108929856 A CN 108929856A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- blade
- endogenetic fungus
- glass dish
- extracting method
- festuca arundinacea
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/02—Separating microorganisms from their culture media
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Botany (AREA)
- Mycology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种高羊茅叶片中内生真菌的提取方法,将高羊茅植株的叶片取下,在无菌操作台中放置15至20小时;将叶片放入75%酒精溶液中清洗30至45秒,然后放入0.5%次氯酸钠溶液中清洗10至15秒,使用清水清洗2至3次后放在无菌纸上干燥待用;将叶片利用打孔器进行打孔,并将获得的圆形叶片放置在玻璃皿的培养基上;将玻璃皿进行密封,并通过酒精灯将密封条进行融合;将玻璃皿放置在暗室25摄氏度的环境下培养10至15天,获得内生真菌菌落;利用接种针将菌落挑出进行单独培养,获得内生真菌菌株。相比现有技术,本发明具有真菌提取效率高、提取存活率高、成本低的特点。
Description
技术领域
本发明涉及真菌提取领域,尤其涉及一种高羊茅叶片中内生真菌的提取方法。
背景技术
高羊茅学名:Festuca elata Keng ex E.Alexeev,又名:羊茅,属禾本目,禾本科多年生地被植物。按功能用途分类:分草坪型(观赏)、牧草型(作为牧草饲养牲畜)。性喜寒冷潮湿、温暖的气候,在肥沃、潮湿、富含有机质、pH值为4.7~8.6的细壤土中生长良好。大量应用于运动场草坪和防护草坪。作为牧草饲养牲畜。
目前,已经在高羊茅中发现内生真菌,但还没有对其进行提取的成熟方法。
发明内容
发明目的:针对现有技术的不足与缺陷,本发明提供一种真菌提取效率高、提取存活率高、成本低的高羊茅叶片中内生真菌的提取方法。
技术方案:本发明所述的高羊茅叶片中内生真菌的提取方法,包括下述步骤,
(1)将高羊茅植株的叶片取下,在无菌操作台中放置15至20小时;
(2)将叶片放入75%酒精溶液中清洗30至45秒,然后放入0.5%次氯酸钠溶液中清洗10至15秒,使用清水清洗2至3次后放在无菌纸上干燥待用;
(3)将步骤(2)获得的叶片利用打孔器进行打孔,并将获得的圆形叶片放置在玻璃皿的培养基上;
(4)将玻璃皿进行密封,并通过酒精灯将密封条进行融合;
(5)将玻璃皿放置在暗室25摄氏度的环境下培养10至15天,获得内生真菌菌落;
(6)利用接种针将菌落挑出进行单独培养,获得内生真菌菌株。
其中,所述的步骤(3)的打孔器通过预先的高温高压灭菌操作。
其中,所述的步骤(3)的玻璃皿为直径9厘米的透明玻璃皿。
其中,所述的步骤(4)中采用保鲜膜进行玻璃皿的密封。
其中,所述的步骤(6)的接种针通过预先的高温高压灭菌操作。
有益效果:与现有技术相比,本发明具有以下显著优点:本发明高羊茅叶片中内生真菌的提取方法的真菌提取效率高、提取存活率高、成本低。
具体实施方式
实施例1:
本实施例的高羊茅叶片中内生真菌的提取方法,包括下述步骤,
(1)将高羊茅植株的叶片取下,在无菌操作台中放置15小时;
(2)将叶片放入75%酒精溶液中清洗30秒,然后放入0.5%次氯酸钠溶液中清洗10秒,使用清水清洗2次后放在无菌纸上干燥待用;
(3)将步骤(2)获得的叶片利用预先经过高温高压灭菌操作的打孔器进行打孔,并将获得的圆形叶片放置在直径9厘米玻璃皿的培养基上;
(4)采用保鲜膜对玻璃皿进行密封,并通过酒精灯将密封条进行融合;
(5)将玻璃皿放置在暗室25摄氏度的环境下培养10天,获得内生真菌菌落;
(6)利用预先经过高温高压灭菌操作的接种针将菌落挑出进行单独培养,获得内生真菌菌株。
实施例2:
本实施例的高羊茅叶片中内生真菌的提取方法,包括下述步骤,
(1)将高羊茅植株的叶片取下,在无菌操作台中放置20小时;
(2)将叶片放入75%酒精溶液中清洗45秒,然后放入0.5%次氯酸钠溶液中清洗15秒,使用清水清洗3次后放在无菌纸上干燥待用;
(3)将步骤(2)获得的叶片利用预先经过高温高压灭菌操作的打孔器进行打孔,并将获得的圆形叶片放置在直径9厘米玻璃皿的培养基上;
(4)采用保鲜膜对玻璃皿进行密封,并通过酒精灯将密封条进行融合;
(5)将玻璃皿放置在暗室25摄氏度的环境下培养15天,获得内生真菌菌落;
(6)利用预先经过高温高压灭菌操作的接种针将菌落挑出进行单独培养,获得内生真菌菌株。
实施例3:
本实施例的高羊茅叶片中内生真菌的提取方法,包括下述步骤,
(1)将高羊茅植株的叶片取下,在无菌操作台中放置18小时;
(2)将叶片放入75%酒精溶液中清洗40秒,然后放入0.5%次氯酸钠溶液中清洗12秒,使用清水清洗3次后放在无菌纸上干燥待用;
(3)将步骤(2)获得的叶片利用预先经过高温高压灭菌操作的打孔器进行打孔,并将获得的圆形叶片放置在直径9厘米玻璃皿的培养基上;
(4)采用保鲜膜对玻璃皿进行密封,并通过酒精灯将密封条进行融合;
(5)将玻璃皿放置在暗室25摄氏度的环境下培养12天,获得内生真菌菌落;
(6)利用预先经过高温高压灭菌操作的接种针将菌落挑出进行单独培养,获得内生真菌菌株。
Claims (5)
1.高羊茅叶片中内生真菌的提取方法,其特征在于:包括下述步骤,
(1)将高羊茅植株的叶片取下,在无菌操作台中放置15至20小时;
(2)将叶片放入75%酒精溶液中清洗30至45秒,然后放入0.5%次氯酸钠溶液中清洗10至15秒,使用清水清洗2至3次后放在无菌纸上干燥待用;
(3)将步骤(2)获得的叶片利用打孔器进行打孔,并将获得的圆形叶片放置在玻璃皿的培养基上;
(4)将玻璃皿进行密封,并通过酒精灯将密封条进行融合;
(5)将玻璃皿放置在暗室25摄氏度的环境下培养10至15天,获得内生真菌菌落;
(6)利用接种针将菌落挑出进行单独培养,获得内生真菌菌株。
2.根据权利要求1所述的高羊茅叶片中内生真菌的提取方法,其特征在于:所述的步骤(3)的打孔器通过预先的高温高压灭菌操作。
3.根据权利要求1所述的高羊茅叶片中内生真菌的提取方法,其特征在于:所述的步骤(3)的玻璃皿为直径9厘米的透明玻璃皿。
4.根据权利要求1所述的高羊茅叶片中内生真菌的提取方法,其特征在于:所述的步骤(4)中采用保鲜膜进行玻璃皿的密封。
5.根据权利要求1所述的高羊茅叶片中内生真菌的提取方法,其特征在于:所述的步骤(6)的接种针通过预先的高温高压灭菌操作。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710362355.9A CN108929856A (zh) | 2017-05-22 | 2017-05-22 | 高羊茅叶片中内生真菌的提取方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710362355.9A CN108929856A (zh) | 2017-05-22 | 2017-05-22 | 高羊茅叶片中内生真菌的提取方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN108929856A true CN108929856A (zh) | 2018-12-04 |
Family
ID=64450775
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201710362355.9A Pending CN108929856A (zh) | 2017-05-22 | 2017-05-22 | 高羊茅叶片中内生真菌的提取方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN108929856A (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111607501A (zh) * | 2020-06-05 | 2020-09-01 | 重庆工商大学 | 一种蔬菜叶片微生物采集装置 |
CN113099959A (zh) * | 2021-04-14 | 2021-07-13 | 贵州省草业研究所 | 一种提高高羊茅干旱抵抗下种子发芽率的方法 |
-
2017
- 2017-05-22 CN CN201710362355.9A patent/CN108929856A/zh active Pending
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN111607501A (zh) * | 2020-06-05 | 2020-09-01 | 重庆工商大学 | 一种蔬菜叶片微生物采集装置 |
CN113099959A (zh) * | 2021-04-14 | 2021-07-13 | 贵州省草业研究所 | 一种提高高羊茅干旱抵抗下种子发芽率的方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN103120096A (zh) | 一种猪苓的人工种植方法 | |
CN101899358A (zh) | 一种油茶籽干燥方法 | |
CN108929856A (zh) | 高羊茅叶片中内生真菌的提取方法 | |
CN101099440A (zh) | 麦司衣陶芬无花果树防冻害方法 | |
CN104067860A (zh) | 一种国槐嫁接金枝槐的方法 | |
CN103004604B (zh) | 一种万代兰品种的繁育方法 | |
CN110760201B (zh) | 板蓝根植物染料高效液下发酵提取与综合利用方法 | |
CN105409774A (zh) | 一种罗汉果愈伤组织的诱导方法 | |
CN113604363B (zh) | 一种茄链格孢菌及其应用 | |
CN103931412B (zh) | 一种韭黄栽培方法 | |
CN103392837A (zh) | 翠芽的制备方法 | |
CN106977307A (zh) | 一种菊花专用肥料 | |
CN104737906A (zh) | 一种迷迭香组培体系的建立方法 | |
CN115005290B (zh) | 一种利用群体品种茶鲜叶高效快速加工优质红条茶的方法 | |
CN103254049A (zh) | 一种从鱼腥草中提取癸酰乙醛的方法 | |
CN104322279A (zh) | 一种椴木培养牛樟芝的方法 | |
CN107504763B (zh) | 一种竹子高品质干燥处理方法 | |
CN109220781A (zh) | 一种黄瓜褐斑病抗性育种方法 | |
CN104823629A (zh) | 南方松高温季节插穗促愈伤的方法 | |
CN107674764A (zh) | 大蒜精油的二氧化碳萃取方法 | |
CN107258143A (zh) | 一种茶树种子种植方法 | |
CN103773593B (zh) | 一种从杜仲果仁中提取杜仲果油的方法 | |
CN103013798A (zh) | 一种虫草雄蛾酒的制备方法 | |
CN107439083B (zh) | 一种华山松种子快速萌发的方法 | |
CN105482895A (zh) | 一种茉莉花瓣精油的提取方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20181204 |